全 文 ：第 1 2卷 第 3期
19 9 0年 5月
海 洋 学 报 N O。
A C A TO C E AN O O LG IC A SIN I C A
V o l
.
1 2
,
M a y
,
19 90
p
一蜕皮激素和水龙骨素 B 的混合物
对促进对虾蜕皮生长的作用
罗 日祥 王 玉 英
(中国科学院海洋研究所 , 青岛 :
摘 要
本义采 用了对虾尸。 , a el ` : ol : e ln t,l i、 人 工配合饵 料中添加蜕皮激素混合 物 的
方法 , 试验 睁 蜕皮激素和水龙骨素 B ( 2 : l ) 的混合物促进对虾蜕皮生长 的
作 用 . 经实脸证 明 : 饵料 甲添 加蜕皮 :教素 1 . 33 一 30卜tg/ g , 均可不 同程度
地促进蜕皮生长 , 然而以每克饵料添 加 5 . 3 3一 1() . 6孙 g 较为显著 . 相反 , 若含量达
到 60林g /咭就会抑制对虾蜕皮 生 一长 , 乃 至 甲 毒 . 食 阁添 加蜕 皮 激 素 混 合 物
(1 0
.
6 7卜g 治 ) 的饵料促进蜕皮生 长 的虾 , 其水分 、 灰分及蛋 白含 量 , 经 测足 无
明显差异 .
甲壳动物的蜕皮激素是一种具有特异性生理功能的活性物质 , 该物质在动物体 内含量
极微 . 关于它的研究 , 自B e c k e r 及 lP a g g e 〔 1 二从红头丽蝇的成龄幼虫和蛹 的浸 出液中测
到活性开始 , 至今 已有 4() 多年历史 , 在此期间 , 许多学者从生理学和生物化学 〔 ’ 一 3 〕 及
分泌腺体 的组织学 “ 一 ” 〕等方面做 了大量 的基础性研究 , 但关于应用方面的研究除有些
家蚕的资料外 , 报道甚少 .
中国对虾是 以动物性饵料为主的 , 而这些动物性饵料 ( 如小虾 、 蟹 、 蛤 ) 中含有较丰
富 的胆 幽醇 , 易被动物吸收利用 L乐 l川 , 根据 G : 9 05 , a 等人在美洲大鳌龙虾 ( H o m ar “ :
a o el i川。 ; ) 用’ 4 C 标记的胆 街醇试验 , 证明鳌龙虾是可以吸收胆 街醇 , 并利用它为原料
合成蜕皮酮 〔’ l 〕 . 随着我国对虾人工养殖业 的发展 , 由于天然饵料不足 , 势必大量采用 以
各种植物性蛋 白为主的人工配合饵料 , 而植物 角醇不能 为动物吸收利用 〔 10j . 这样就有可
能由于饵料中缺少胆 街醇之类化合物 , 而影响对虾的蜕皮生 长 . 为了使对虾较好地生长发
育 , 在配合饵料中加点街体激素或胆 街醇之类化合物可能是必要的 . 因此本文对人工配合
饵料添加街体激素— 日蜕皮 激素和水龙骨素B 可否促进对虾蜕皮生 长进行 了探讨 .
一 、 材料与方法
1
. 蜕皮激素母液的配制
本文于 19 87 年论月 30 日收到 , 修改稿 于 19 8 8年 8 月巧 日收 到 .
海 洋 学 报 2 1卷
称取 p一蜕皮激素和水龙骨素 B ( 2 : l) 的混合物 0 1mg , 用50 m l无水乙醇溶解 , 然后
加蒸馏水到 25 0 m l , 使该溶液中蜕皮激素的浓度 为 4 0林g / m l .
2
. 人工配合 饵料的配制
称取已混合好的配合饵料粉状原料 (含粗蛋 白 50 一 60 % ) 4 09 为 l 份 , 共 6 份 , 分别
放入玻璃皿内 . 另一方面取蜕皮激素母液 0 . 67 m l , 1 . 3 m l , 2 . 67 m l和 5 . 3 m l , 分别用蒸馏
水冲稀到 10 m l , 混匀后分 别掺到第 1 一 6 份粉状 原料中 , 第 6 份粉状原料直接拌入 10 . 67
m l 蜕 皮 激素母液 , ·第 1份原料拌进 20 % 乙醇溶液 10 m l作 为对照 . 各份原料分别拌匀 后 ,
用搅肉机加工成颗粒状饵料 , 放入冰冻干燥器干燥 10小时 .
为了减 少蜕皮激素的损失 , 把冰冻 干燥后的饵料表 面再喷 一层 5 % 的琼脂保护层 , 用
吹风机吹干 , 置于干燥 器中备用 .
3
. 实 验用动物
取 自黄 岛工作站 的人工 养殖对虾 , 平均体长为 5 . 2c7 m , 体重 1 . 9 59 及平均体 长 6 . 3c4 m ,
体重 3 . 30 9 . 取来的对虾立 即放入连续通气 的暂养池内 , 早晚 用过滤新鲜海水各换水一次 ,
每次换 出三分之二的水量 , 待数 日后 , 开始实验 .
4
. 实验步 骤
向清洗干净和已消毒 的 6 个直径为 30 c m , 高为 3c0 m 的圆玻璃缸 , 各放入过滤 的海水
25 升 , 连续通气 , 然后向每缸放入 10 条大小均匀的对虾 , 分别测量 其体长和总重量 . 每天
下午 5 点 30 分 , 分别投喂含蜕皮激素的饵料 一次 , 翌 日 8 点 30 分吸 出残饵烘干衡重计算摄
食量 , 连续观察对虾蜕皮个体数及生态变化等情况 . 每 日换水两次 , 换水量约三分之三二.
换水时间在上午取残饵之后和下午投饵之前 . 另外为了看出蜕皮激素含量的上限 , 用 10 0
c m x 80 c m 的方玻璃缸 4 个 , 补 了两次实验 . 实验期间的海水温度 为2 一 26 ℃ .
一次实验连续 30 天 . 结束时 , 取出各缸 的实验虾分 别测量体长和总体重 , 以求出虾体
净增体重及体 重增长率 . 然后用重量法测定对虾的水分 和灰分 , 用凯 氏定氮法测定对虾整
体的粗蛋白含量 〔 12 〕 . 于 19 84 年 7 月 、 9 月和 1 9 85 年 7 月共进行 了 3 次实验 .
二 、 实 验 结 果
表 1 M H 辛含且与蜕皮次数的关系
实验组 号 对照 2 3 4 冲 6
含M H量” g / g 0 0 。 67 l 。 33 2 。 6 7 5 . 33 10 , 6 7
蜕皮次数二 3 2 33 3 6 3 7 4 ] 48
。
M H一一系蜕皮激素的缩写 .
二 指 10 条虾 30 夭的蜕皮总数 (平均值 ) .
表 2 蜕皮增长率与体重增长率的关系
11 2
.
2
10 5
。
8
4
3 7
1 1 5
,
6
10 9
。
0
5
4 l
1 2 8
。
1
1 1 8
。
0
48
巧 0
12 3
。
O
2一竺.103ǔ10实验组号蜕皮次数
蜕皮增长率 (% )
体重增长率 ( % )
对照
3 2
10 0
10 0
3期 罗 日祥等 : p一蜕皮激素和水龙骨素B 的混合物对促进对虾蜕皮生长的作用 357
表 3食用含 MH ( 6 0” g / g )的饵料 出现畸形的情况
食用 MH 的天数
出现畸形数
畸 形累计数
(议à恰琳井侧长
3 0一 2
一ù !川一一一一兴一 1 6一 18 } 1 0
MH 含 t ( m留 g)
图 1 MH 含量与对虾体重增长率的关系
平均体 长为 5. 7 2, 6 . 34 c m 的中国对虾 , 食 用M H 含量 0 . 67 林g /g 一 10 . 6 7林g g/ 饵料的各
组 , 蜕皮次数均有不同程度的增加 (表 1 ) 。 摄食含M H S . 33陀 ;g/ 的饵料组 , 在 30 天内约
可增加一次蜕皮 , 在增加M H 含量为一倍 的实验组 , 平均增加 了两次蜕皮 . 图 1 表明 , 在
对虾体重增长率方面 , 饵料中M H 含量在。 . 13 3一 10 . 6 7卜g / g 范围内 , 各组体重增长率大致
随M H含量的加大而增大 . 经 l 检验 , 计算出含M H S . 33尽g / g , 10 . 6 7似g / g 的 , 值分 别为
3
·
5 8
,
4
·
44
, 它们均大于 1 0 , 0 5 ( 3 ) 二 3 · 1 8 2 , 即 p 一 0 · 0 5 , 所 以用 5 . 3 3 0 9 / g , 10 . 6 7 0 9 / g M H
处理的与对照组有显著差异 . 但用更高的浓度 ` 60 p g / g) 补充两次实验时 , 体重增长率反
而下降 , 而且 比对照组还要低 3(j . 6 % . 蜕皮 次数 与增重率的结果见表 2 . 为找 出M H 含量
表 4 虾体水分 、 灰分及粗蛋白含量的比较夸
项日 ! 干 重 r `场 )
卫 11犯书上卜竺一 -一M H 处理 } 2 1 . 1 5 !
水 分
}一偿一会-
灰 分 粗蛋白 ( % )
一— 于— — 一 -一一一 一— 一 一 6 1 , 8 6
6 1
。
5 5
,
M H 的含量 为工0 . 6 7 , g治 .
上限 , 用 0 , 巧 , 30 , 60 协g g/ 的浓度补充 了两次试验 , 其体重增长率分别为 10 0 % (对照 ) ,
1 1 9
.
65 %
,
12 2
.
28 %
,
69
.
4 0 %
. 连续食用M H 含量 6 0林g / g 的饵料 16 天后 , 对虾不断出现畸
形 (表 3 ) . 连续食用该饵料的天数越 多 , 畸形数就越 多 . 经观察 , 有些外皮加厚的虾 ,
由于蜕不下皮来 , 而慢慢感染一些霉菌 , 有的甚至变成黑褐色 .
三 、 讨论 与结语
悔~ 望
1
· 蜕皮激素混合物诱导对虾蜕皮 的结果与K r i s h a k u m a r a n 和 s e h n e i d e : m a 。 〔 13 〕 ;
L o w e
,
H 。 r n 和 o a l b r a i t h 〔菠〕 ; R a o , F i n g e r m a n 和 iF n g e r m a n 〔` 一` 〕 在美洲鳌龙虾、 小龙虾
及其他节肢动物的实验结果相类似 , 但他们均采用注射的方法 , 用蜕皮激素急性处理 . 而
我们考虑到在养殖中应用的可能性 , 采用了饵料 中添加蜕皮激素的办法 . 实验表明这种办
法是可行的 .
2
.
p
一蜕皮激素和水龙骨素 B 的混合物 ( 矛叭 /砰 : = 2 : 1) 在促进蜕皮时 , 还 可 以稍 促
进生 长 , 但用量要适宜 , 太低不起作用 , 过量则使动物中毒 , 适得其反 . 据我们的实验 ,
平均体重 1 . 95 9 , 3 . 39 的对虾 , 用含M H S . 3 3一 10 . 6 7林g /g 的饵料喂 养较好 .
3
.
GI lg
a n 和 z i n c k 〔15 〕用鳌龙虾注射价蜕皮激素 、 2 0 一经基蜕皮酮或甲壳类蜕皮激
素 E 时每克活体重注射 0 . 5昭能加速动物蜕皮 , 而 0 . 7 5 “ g 则为临界致死量 , M c o n a u -
358 海 洋 学 报 12卷
h g
a
6 [1〕 在黄道蟹 的第 1期和第 2 期幼体处于临近蜕皮 时 , 向海水中添加 2 0 一经基 蜕皮酮 ,
当海水中的浓度达 到 2 0 一 40 0林g l/ 时 , 出现外皮加厚 . 而我们的实验是每 日摄取含 60林g / g
p
一蜕皮 激素和水龙骨素 ( 2 : 1 ) 棍合物 的饵料 , 连续 15 天后才观察到外壳加厚 的异常现
象 ,这可能是实验对虾从饵料中吃进 的蜕皮激素未被完全吸收或边吸收边代谢 , 待体内的蜕
皮激素累积到一定的数量时 , 才能表现出中毒症状 . 这些中毒的虾 , 由于外皮加厚 , 蜕不
下皮 来 , 慢慢感染一些霉菌 , 甚至有的外皮变成黑褐色 .
4
. 食 用蜕皮激素混合物促进蜕皮生长的对虾 , 其蛋白质 的质量因未测定氨基酸 , 不
能作出评价 .
参
〔 1 〕 B e e k e r , E . , E . P l a g g , U be r d a s
考 文 献
d 1 e p u 详 飞i u 一竹 b飞1d u n g a u s l 6 s e n d e H o r m o ” d e r F I 一e g e n , B i o l Z 方1 .
1 9 39
,
5 9
: 3 2 6
-
〔 2 〕 C ha n g , E . s . e z a l . , T h e q ua l i t a t i v e a ,l d q u a n t i t a t i v e d e t e r : n i ,飞a t i o : u o f c e d y s o n e 、 一 n t l s s u e s
o f 飞h e e r a b , P 口 c h理 r a 那 u s e r a s s 护刀 e s , f o l 1o w i n s m o l t i n d u c t i o n , G e n . C o用刀 . 石 n d 口〔 、 2 . , 19 7 6 . 3( J
2 1一 33 .
〔 3 〕 C ha n g , E . 5 . a n d J . D . 0 ` C o n n o r , I n v i t r o s e e r e t , o n a n d h y d r o x y l a t 一 o n o f 0 e e d y s o n e a s a
f u n c t i o n o f t h e e r u s t a e e a n m o l t e y e l e
,
G e n
. 〔 o 阴 P . 石 r zd o ` r . , 1 9 78 , 3 6 : j 5 1一 16丈) .
〔 4 〕 L o w e , M . E . e l a l . , T h e r o l e o f e r u s t e e d y s o n e i n t h e n l o t卫l t i g c l书 y f 【 s h , 打工挥 · ,了 e 刀 , i ` , , , 19 f 8 、
24
: 5 18一 5 19 -
〔 5 〕 M e C a r t h y , J . F . a n d D . M . S k l ! I n e r , M e t a b o l l s n 飞 。 , 1 以 e e d y s o ll e z n 一 Il t e r n l o l t I a n d e r a d s ( G `· `
a r c i 刀 u s l a , e r a l i s s ) , G e n
.
C o l n刀 . 石 n d o 〔 r . , 19 79 , 37 : 25 0一 26 3 .
〔 6 〕 A n d r e w , R . D . e l a l . , S t r u e t u r a l r e e v a l u a t i `〕 n o f t h e n e 一盆r ( ) s e e ,一 e t 《 ) r y s y s t c j l l i r l r h e e r a y f i s h
e y e s . a l k
, ` ’ e l l T i s s u e R e s . , 19 7 8 , 19 0 : 2 3 5一 2 4 6 .
〔 7 〕 C a be , M . H i s t o l o g i e c o m 俘 r e ’ d e I a g玉a n d e d e : n u e 反。 ,一 g a n e y ) d e s e r u 、 t a e e ’ 5 m a l a e o s t r a e e ` 5 ,
加刀 . S e i . 八公 2 . , ( 2 0 0 1 . ) , 1 8 ( 19 5 6 ) , l盆5一 15 2 .
〔 8 〕 W e a t h e r b y , T . M . , A n u l t r a s t r u r a l s t u d y o f t ll e s l n 比 g l a n d o f t h e e r a b , ( 、 a r d z , 〔 , ma 〔二 r n i j ` 大 ,
C e l l T 一“ u e R e s . , 19 8 1 , 22 0 : 2 9 3一 3 1 2 .
〔 9 〕 中国医学科学院卫生研究所编著 , 食品成分表 , 人民卫生 出版社 , 19 8 1 , 17 5一 ! 7执
〔 10 〕 沈 同等 , 生物化学 . 人民教育出版社 , 1 9 8 0 , 5 4一 5 6 .
〔 1 1〕 aG g o s i a , K . B . e r a l . , 1 0 比 t e r m o ] r j n g h o r m o n e s : I s o l a t i o n a n d B i o s y ,l t h e s i s 〕` f e e d y s t e r o n e .
W o o d浑 H o l e O e e a n o g r o 刀h i e I n s z i r u r 泛。 刀 C o n z r i b u z i o n , 19 7 4 , 3 1 4 7 .
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9 一 37 。
〔13 〕 rK 1s h an k u m a r a n , A . a n d H . A . S e h n e i de r m a n , C h e n 飞 , e a l e o n t r o l o f m o u l 玄一、 g , n a r t h r o op 由 ,
N a l u r e
,
、 〔 14 〕 R a o ,
S t a g e
K
。
2 0 2
R
。
( 19 F8 )
, 9 : 6 0 1一 60 3 -
e r a l
. ,
E f f e e t s o f e x o g e n o u s e e d y s o n e s o n t h e m o 】t e y e l e s o f f ( ) u r t h a n d f i f t h
A m e r i e a n 月口 六爪通r “ s a 加 e r j e a n u s 〔 ’ o 切夕 . B声o e k e m , P h 少 5 2 0 1 . , 19 73 , 44 4 : 1 10 5一 1 1 20 .
〔 15 〕 G l g a n ,
g r a d e d
M
。
W
。
1 o bs t e r s
,
a n d M
.
E 2 1 n e k
,
R e s因 ns e o f t h e a d u l t I o bs t e r (从 ,切 a r u s a胡 e r i e a n “ s ) t 0
a n d 一n u l t 一p ,e d o s e s o f e c d y s t e r o n e , C o 用户. B i o e k e 沉 . p h声 1 0 1 . 19 75 , 5 2 A : 2 6 1一 2 6 4 .
〔16〕 M e C o n a u g ha , J . R . , T h e E r f e e t s o f 2 0 一 h yd r o x y e e d y s o n O n
t h i r d s t a g e C a n c e r a n t h o n iy l a r va
e
。 、
G e n
。
C o 阴 P 。 E 月 d o r
s u r v i v a l a n d d e v e l o p nr e n t o f f i r s r
。 ,
19 7 9
,
37
:
42 1一 42 7 -
a n d