全 文 ：海南青牛胆非生物碱成分的分离与鉴定 (Ⅱ )
符小文　郭幼莹　林连波
(海南医学院化学教研室 )　海口　 570102
　　摘要　从防己科植物的一个新种—— 海南青牛胆 ( Tinospo ra Hainanesis H. S. Lo et Z. X. Li)的藤
茎中又分得 2个非生物碱化合物 ,经光谱解析 ,鉴定为丁香甙 ( sy ringin)和 20-羟基蜕皮素 ( 20-hy-
droxyecdysone)。丁香甙为首次从青牛胆属植物中获得。
关键词　海南青牛胆 ;光谱分析 ;丁香酚 ;蜕皮激素
分类号　 Q503
SEPARATION AND IDENTIFICATION OF NON-ALKALOID
COMPOUNDS FROM TINOSPORA HAINANESIS
Fu Xiaowen, Guo Youying , Lin Lianbo
( Dept. of Chemistry , Hainan M edical Co lleg e)　 Haikou　 570102
　　 ABSTRACT　 2 mo re non-alkaloid compounds w ere sepa ra ted f rom the vine stalk of Tinospo ra
Hainanesis, a new species of Menispermaceae plants. The compounds w ere identified a s syringin and
20-hydroxyecdy sone by way of spectral analysis. It i s the fi rst time tha t Sy ringin is separated f rom the
plants o f Tinospora Miers.
Key words　 Tino spo ra Hainanesis; spectral analy sis; eugenol; ecdysone
　　海南青牛胆 ( Tinospo ra Hainanesis H. S. Lo
et Z. X. Li)系防己科青牛胆属植物 ,民间将其与中
华青牛胆 ( Tinospora sinensis( Lour) M err. )同称
松筋藤 ,用以治疗关节疼痛和筋骨损伤。在对其藤
茎化学成分进行的研究中 ,已先后分离鉴定了 5种
成分 ( 2种为季胺生物碱 , 3种为非生物碱化合物 ):
罗汉松甾酮 A ( makisterone A) , 海南青牛胆
碱 ( hai tinospo rine) , 巴马汀 ( palmatine ) , β -香
树脂醇 ( β -amy rin)和阿魏酸二十二酯 ( doco syl
ferula te) [1, 2 ]。 现又从其正丁醇提取部分分得 2个
非生物碱化合物 ,经光谱解析 ,鉴定为丁香甙 sy-
ringin ( Ⅰ ) 和 20-羟 基 蜕 皮 素 20-
hydroxyecdysone(Ⅱ )。其中 ,丁香甙为首次 从 青
牛胆属植物中得到。
11　 1期 海南医学院学报　 1999, 5( 1): 11～ 13Journal of Hainan Medical College
DOI : 10. 13210 /j . cnki . jhmu. 1999. 01. 006
1　实验部分
1. 1　仪器和材料
Ko fler显微熔点测定仪 ,温度未校正。 JEO L
JNM-A500核磁共振仪 ,柱色谱用硅胶 ( 300～ 400
目 ) ,薄层色谱用硅胶 H( 10～ 40 U ) ,均为青岛海
洋化工厂产品 ;植物材料采自海南省文昌市。
1. 2　提取与分离
藤茎粗粉 20 kg,用 92% EtO H(含 HOAc3% )
渗漉 ,接收 12倍渗漉液 ,减压浓缩至 1800 m L,加
5倍量 H2O稀释后 ,依次用 Et2O, EtO Ac, CHC13
( pH8) , n-BuOH萃取 ,萃取液分别浓缩成稠膏 [1 ]。
n-BuOH萃取所得稠膏 126 g ,取 85 g上硅胶
柱 , CHC13-MeOH梯度洗脱 ,每流分约 300 mL。
收集 CHCl3-M eOH( 95∶ 5)洗脱液 ( Fr. 75～
100)浓缩 ,挥干得 5 g浸膏 ,再上硅胶 H柱。 收集
CHCl3-MeOH( 10∶ 1)部分洗脱液浓缩 ,沉淀用
MeOH重结晶得化合物Ⅰ 0. 3 g。
收集 CHCl3 -MeOH( 95∶ 5)洗脱液 ( Fr. 130～
218)浓缩 ,挥干得 14 g浸膏 ,再上硅胶 H柱。收集
CHCl3-MeOH( 95∶ 5)部分洗脱液浓缩 ,沉淀用
MeOH重结晶得化合物Ⅱ 0. 55 g。
2　结构鉴定
化合物Ⅰ白色颗粒状晶体 , m. p. 190～ 191℃ ,
Ehrlich试剂呈阳性反应。根据其 DEPT谱可见 4
个 C、 8个 CH、 2个 CH2和 2个 CH3的信号及相应
的碳化学位移值。 4个季碳均为芳香碳 ,其中 2个
季碳谱线重叠 ,为对称结构 ; 8个 CH中 , 2个芳香
的 CH碳谱线也重叠 ,为对称结构 ;在 1 HNMR中
可见 2个芳香质子单峰 ,δ均为 6. 89 ppm。以上信
息 , 提示可能存在 1, 3, 4, 5四取代苯环。 HMBC
谱表明 2个甲氧基分别取代在 C3、 C5上 , 结构对
称 , 2个季碳的谱线重叠 , 且化学位移移向低场
(δ153. 92ppm)。 HMQC和 1H- 1HCOSY归属并找
到 2个片段结构: CH= CH- CH2和 CH- CH-
CH- CH- CH- CH2。 HMBC谱中提供了苯环上 4
位季碳 ( 135. 84ppm )与六碳片段端基质子的远程
偶合相关信号 , 且端基质子的化学位移 ( 5.
80ppm, d, J= 7. 02Hz)和端基碳的化学位移
( 104. 97ppm) ,以及 2′、 3′、 4′、 5′、 6′- C的化学位
移均移向低场 ,表明该片段为葡萄糖以 β甙键连在
苯环 4位的季碳上。 HMBC还显示丙烯基片段烯
质子 7- H与苯环上 C1相关 , 2, 6- H与 C7相关 ,
表明 C7连于苯环 C1上。HMQC谱上未见 - OH与
C9相关 , 但 C9接 - OH后 , 化学位移明显移向低
场 (δ62. 82ppm )。 NO ESY谱中 , 观察到 8- H、 9
- H与 6- H间相关峰 , 2- H与 7- H间相关峰 ,
且 7- H与 8- H的偶合常数达 15. 87Hz, 故烯基
质子为反式结构。质谱采用 EI电离源 , 所得碎片
离子峰 210与甙键裂解所得丁香甙甙元分子式 C11
H14O4相符。综上分析 ,化合物 I为丁香甙 (反式 )。
据 NMR与 1H- 1H COSY、 HMQC、 HMBC将
C、 H归属如下: 1HNMR( 500 M Hz, C5D5N )δppm:
6. 89( 2H, s, 2, 6- H) , 6. 89( 1H, d, J= 15. 87Hz, 7
- H与 2, 6- H重叠 ) , 6. 63( 1H, dt, J= 15. 87, 5.
19Hz, 8- H) , 4. 60( 2H, d, J= 4. 28Hz, 9- H) , 5.
80( 1H, d, J= 7. 02Hz, 1′- H) , 4. 33( 3H, m, 2′, 4′,
5′- H) , 3. 95( 1H, m, 3′- H) , 4. 42( 6′- H) , 4. 40
( 6′- H) , 3. 77 ( 6H, s, 3, 5 - OCH3 ) . 13 CNMR
( 125. 65MHz, DEPT, C5D5N ) δppm: 133. 98
( 1- C) , 153. 92( 3, 5- C) , 135. 84( 4- C) , 105. 26
( 2, 6- C) , 129. 41( 7- C) , 131. 19( 8- C) , 62. 82
( 9- C) , 56. 58 ( 3, 5- OCH3 ) , 104. 97 ( 1′- C) ,
76. 10( 2′- C) , 78. 77 ( 3′- C) , 71. 66 ( 4′- C) ,
78. 43( 5′- C) , 62. 68( 6′- C)。以上数据与文献 [3, 4 ]
报道的丁香甙一致 ,故化合物 I鉴定为丁香甙。
化合物Ⅱ白色晶体 , m. p. 234～ 235℃ ,文献:
237. 5～ 239. 5℃ [5 ] , 242～ 243℃ [ 6] , Eh rlich试剂
呈阳性反应。 FAB- M S m /z: 481( M+ 1) ,分子式
C27H44O7。据 NM R与 1 H- 1 HCO SY、 HMQC、 HM-
BC将 C、 H归属如表 1。
12 海南医学院学报 5卷
表 1　化合物Ⅱ的氢谱、碳谱数据和碳氢远程相关及文献 [6 ]值 (δppm )
C 1H 1H-Li t. 13C 　 13C-Li t. HM BC
1 1. 95( d) 38. 01 37. 8
2. 17( d)
2 4. 24( t ) 68. 08 67. 9 4-H
3 4. 24( t ) 68. 17 67. 9 1-H
4 1. 81( d) 32. 46 32. 2
2. 03( t )
5 3. 03( t ) 51. 42 51. 2 19-CH3 , 1-H, 7-H
6 …… 203. 50 203. 3 5-H
7 6. 27( d, J= 2. 45Hz) 121. 69 121. 5
8 …… 166. 12 165. 9 1-H
9 3. 61( t ) 34. 43 34. 4 19-CH3 , 7-H, 12-H, 5-H, 1-H
10 …… 38. 68 38. 5 19-CH3 , 1-H, 11-H
11 1. 75( m) 21. 13 21. 0
1. 91( t , J= 3. 66, 2. 14Hz)
12 1. 90( t , J= 3. 66, 2. 14Hz) 31. 78 31. 6
2. 18( t , J= 7. 63, 7. 71Hz)
13 …… 48. 13 48. 0 18-CH3 , 12-H, 17-H, 15-H
14 …… 84. 21 84. 1 18-CH3 , 12-H, 7-H, 16-H
15 2. 59( dt , J= 8. 24, 4. 58Hz) 32. 03 31. 9
2. 06( t )
16 2. 47( m) , 2. 11( m ) 21. 50 21. 5
17 3. 01( t , J= 6. 10, 2. 44Hz) 50. 13 50. 0 18-CH3 , 21-CH3
18 1. 23( s ) 1. 18(s ) 17. 91 17. 7 17-H, 15-H
19 1. 09( s ) 1. 04(s ) 24. 49 24. 3 1-H, 9-H
20 …… 76. 89 76. 7 21-CH3 , 16-H
21 1. 61( s ) 1. 56(s ) 21. 71 21. 5
22 3. 90( d, J= 6. 10Hz) 77. 58 77. 4
23 1. 88( m) , 2. 15( m ) 27. 49 27. 3
24 1. 83( t , J= 3. 66, 8. 24Hz) 42. 66 42. 4 26-CH3 , 27-CH3
2. 30( m)
25 …… 69. 58 69. 5 24-H, 26-CH3 , 27-CH3
26 1. 39( s ) 1. 34(s ) 30. 02 29. 9 24-H
27 1. 39( S) 1. 34(s ) 30. 13 29. 9 24-H
　　以上碳谱数据和 5个甲基质子的氢谱数据与
文献 [ 6 ]报道的 20-羟基蜕皮素一致 ,化合物Ⅱ鉴定
为 20-羟基蜕皮素 ,且本文对 1HNM R中全部质子
做了归属。
参 考 文献
1　郭幼莹 .海南青牛胆化学成分的研究 .药学学报 , 1998,
33( 5): 350～ 354
2　林连波 .海南青牛胆非生物碱成分的分离与鉴定 .中国
医学化学进展 .上海:百家出版社出版 , 1996. 47～ 49
3　刘金平 .东北刺人参根化学成分的研究 .中国中药杂志 ,
1992, 17( 9): 546～ 547
4　何卫华 .光洁荛花化学成分的研究 (Ⅱ ) .中草药 , 1990,
21( 9): 2～ 4
5　 Hikino, H. , Hikino, Y. Fir tschr. Chem. O rg. Natur st.
1970, 28: 256～ 312
6　 Miller RW , Cla rdy J, Ko zlow ski J, et al. Phy-
to ecdy steroids o f Diplo clisia g laucescens Seed. Planta
M edica, 1985, 51: 40
( 1999-01-14收稿 )
13　 1期 符小文等 .海南青牛胆非生物碱成分的分离与鉴定 (Ⅱ )