全 文 ：收稿日期:2013-06-25 接受日期:2013-11-21
基金项目:国家自然科学基金项目(31172182，31201788);安徽省
高校自然基金项目(KJ2012Z315，KJ2013A206)
* 通讯作者 E-mail:qucq518@ 163． com
天然产物研究与开发 Nat Prod Ｒes Dev 2014，26:932-934
文章编号:1001-6880(2014)6-0932-03
疏毛罗勒提取物抗氧化活性分析
姬云涛1，季雅静1，王新鲁1，吴启中2，屈长青1，2*
1阜阳师范学院生命科学学院;2 抗衰老中草药安徽省工程技术研究中心，阜阳 236037
摘 要:本文研究了疏毛罗勒抗氧化活性。实验中用 7 种不同溶剂提取疏毛罗勒活性成份，以维生素 C(Vc)为
对照，通过 FＲAP法对比不同提取液总抗氧化能力、采用改良的邻苯三酚自氧化法检测了水提物对超氧阴离子
的清除作用。结果表明，7 种不同溶剂提取的疏毛罗勒活性成分中，以水提物的总抗氧化效果最好，但随着提取
浓度的增加总抗氧化能力反而减弱，疏毛罗勒水提物对超氧阴离子的清除率接近 Vc的作用。
关键词:疏毛罗勒;抗氧化;超氧阴离子
中图分类号:TS201． 1 文献标识码:A
Antioxidant Activity of Bioactive Components of
Ocimum basiliam Linn var． ppilosum (wild．)Benth
JI Yun-tao1，JI Ya-jing1，WANG Xin-lu1，WU Qi-zhong2，QU Chang-qing1，2*
1School of Life Science，Fuyang Normal College;2 China Engineering Technology Ｒesearch Center of
Anti-aging Chinese Herbal Medicine，Fuyang 236037，China
Abstract:The extraction method and antioxidant activities of bioactive components of Ocimum basiliam Linn var． ppilo-
sum (wild．)Benth were investigated． O． basiliam were extracted with 7 different solvents． The total antioxidant activities
of different extracts of O． basiliam were tested by FＲAP method and the superoxide scavenging effects were measured by
modified pyrogallol autoxidation assay． The results showed that the aqueous extract of O． basiliam had the best total an-
tioxidant activity，but with the increasing concentration of extracts，the total antioxidant capacity decreased，the scaven-
ging rate of O． basiliam aqueous extract against superoxide anion was similar to that of Vc．
Key words:Ocimum basiliam;antioxidant activity;superoxide anion
疏毛罗勒［Ocimum basiliam Linn var． ppilosum
(wild．)Benth］，一年生草本植物，为唇形科植物，
是一种药食两用植物，可广泛应用于食用、食品工
业、日用化工和医药保健等方面。兰瑞芳等［1］研究
表明，罗勒全草用药，有驱风、健胃和发汗等作用，可
治疗肠胃病、风湿性关节炎等。罗勒的茎、叶富含芳
香油，是重要的调香原料，杨洪霞等［2］分析发现，疏
毛罗勒油的主要成分是萜烯及其含氧衍生物。本实
验室前期研究发现［3］，罗勒多糖与维生素 C(Vc)一
样，对酪氨酸酶具有明显抑制作用，证明罗勒是一种
非常有潜力的酪氨酸酶抑制产品。本文通过 7 种提
取剂分别提取疏毛罗勒有效成分并进行抗氧化活性
分析，以期为疏毛罗勒的产业化开发打下基础。
1 材料与方法
1． 1 材料、试剂与仪器
疏毛罗勒均购于阜阳市农贸市场，4 月份采摘，
经阜阳师范学院生命科学学院董金廷教授鉴定，洗
净晾干。
三吡啶三吖嗪(TPTZ)和 Vc购于南京奥多福尼
生物科技有限公司;KH2PO4、盐酸、三氯化铁、冰乙
酸、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、邻苯
三酚等均为国产分析纯。
JP300G超声波提取仪(武汉嘉鹏电子有限公
司);ＲE-6000A 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器
厂);DU730 分光光度计(美国 BECKMAN 公司);
ELX800 型酶标仪(美国宝特公司);恒温水浴锅(金
坛市荣华仪器制造有限公司);AＲ224CN 电子天平
(奥豪斯仪器有限公司);LK-600 中药粉碎机(上海
隆拓仪器设备有限公司)。
1． 2 实验方法
DOI:10.16333/j.1001-6880.2014.06.026
1． 2． 1 活性成分提取
分别称取 5 g 罗勒样品 7 份，粉碎后分别置于
不同烧杯中，分别加入水、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚、
乙酸乙酯、丙酮 50 mL，封口膜封口后超声波提取 1．
5 h。过滤除去残渣，旋转蒸发仪浓缩并蒸馏水定容
至 10 mL，4 ℃冰箱保存备用。
1． 2． 2 FＲAP法总抗氧化能力测定
采用 Wijngaard 等［4］报道方法，略有修改。分
别取上述提取液 10 μL，蒸馏水定容至 10 mL，然后
加入 1． 8 mL FＲAP 工作液，37 ℃恒温水浴反应 10
min，分光光度计波长 593 nm处检测吸光值。FＲAP
工作液由 0． 3 mol /L 的磷酸盐缓冲液 25 mL、10
mmol /L TPTZ溶液 2． 5 mL、20 mmol /L 三氯化铁溶
液 2． 5 mL 配制而成。以 1． 0 mmol /L FeSO4 为标
准，样品总抗氧化能力(Total Antioxidant Capacity，
TAC)计算公式为:TAC = 118 c /m。式中:TAC
(mmol /g)表示样品总抗氧化能力;c(mmol /L)表示
达到同样吸光度所需 FeSO4 的浓度;m(g)表示试样
质量(干样)。
1． 2． 3 超氧阴离子清除率测定
采用改良的邻苯三酚自氧化法产生 O-·2
［5］。取
4 支试管标号 1 至 4，分别加入浓度为 0． 5、0． 75、1、
1． 5 mg /mL 的罗勒水提物，然后向各试管分别加入
4． 5 mL磷酸盐缓冲液(pH 8． 34、50 mmol /L)和 3． 2
mL水，25 ℃恒温水浴保温 20 min，加入 25 ℃预热
的 0． 2 mmol /L邻苯三酚 0． 3 mL 迅速摇匀，酶标仪
波长 325 nm处每隔 30 s 进行检测，每分钟吸光度
增加值为 ΔA1。ΔA0 为蒸馏水替代提取液每分钟
变化值。O-·2 清除率 Sp 计算公式为:Sp = (ΔA0-
ΔA1)/ΔA0 ×100%
2 结果与分析
2． 1 提取优化
抗氧化剂是抑制氧化及提高机体清除活性氧酶
系统活性和数量的物质，通过自身的还原给电子作
用而清除自由基，其还原力越强，抗氧化活性就越
强［6］。采用 FＲAP 法测定的 TAC 能够反映抗氧化
剂的还原能力，从而反映抗氧化活性的大小。本试
验以 TAC为评价指标，比较不同溶剂对罗勒提取
效果的影响，结果由图 1 可知，水提效果最好，甲醇
次之，乙醚最差。
2． 2 不同浓度下罗勒总抗氧化能力
分别检测 10、15、20 μg /mL罗勒的水、乙醇、甲
乙醇 甲醇 水 石油醚 乙醚 丙酮 乙酸
乙酯
提取剂
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
TA
C
图 1 不同溶剂提取后疏毛罗勒总抗氧化能力的对比
Fig. 1 Total antioxidant capacities of different extracts of O．
basiliam
醇提取物总抗氧化能力，由图 2 可知随着罗勒提取
物浓度增加，三种提取剂所提取抗氧化物质 TAC 值
均呈下降趋势，二者存在一定的剂量相关。
TA
C
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0
水
95%乙醇
甲醇
10% 15% 20
浓度（μg/mL）
图 2 三种溶剂提取物在不同浓度下的总抗氧化能力对比
Fig. 2 Total antioxidant capacities of aqueous，95% ethanol
and methanol extracts of O． basiliam with different
concentrations
2． 3 对超氧阴离子的清除作用
由下图 3 可知罗勒对超氧阴离子有较强清除能
力，并呈现明显剂量效应。当罗勒浓度为 1． 5 mg /
mL时抑制率为 73． 64%，其半抑制率为 0． 75 mg /
mL，而维生素 C在 1 mg /mL时达到百分之百。
清
除
率
浓度（mg/mL）
120
100
80
60
40
20
0 0.5 0.75 1 1.5
Vc
罗勒
图 3 不同浓度罗勒水提物对超氧阴离子的清除作用
Fig. 3 Scavenging effects of different concentrations’aque-
ous extract of O． basiliam and Vc against superoxide
anion
3 讨论
氧化作用不但在生产生活中给人们带来了巨大
损失，而且对人们的身体健康带来了一定的危害。
如铁钉的生锈，暴露在空气中的食物的氧化腐败，过
氧化的脂质还容易引起动脉硬化、糖尿病、高血压、
皮肤病等［7］。自由基理论是 21 世纪重大发现之一，
人体在新陈代谢过程中会产生自由基，其产生过多
339Vol. 26 姬云涛等:疏毛罗勒提取物抗氧化活性分析
或清除过慢就会攻击生命大分子物质和各种细胞
器，造成机体损伤，加速机体衰老进程并诱发多种疾
病。因此，抗氧化研究越来越受到人们的重视［8，9］。
现有的抗氧化剂主要有丁基羟基茴香醚、二丁基羟
基甲苯、没食子酸丙酯及维生素 C 等，其绝大多数
为合成产品。在天然、营养、回归大自然的热潮中，
人们越来越趋向于在食品、化妆品中尽可能的使用
天然抗氧化剂。药食两用植物在我国有着悠久的历
史，从中筛选出高效低毒经济的抗氧化活性物质为
天然抗氧化剂的开发提供了一个重要途径。
疏毛罗勒的茎、叶富含芳香油，是重要的调香原
料，但其在抗氧化和超氧阴离子清除方面的研究报
道较少。本研究使用 7 种提取剂提取疏毛罗勒抗氧
化活性成分，FＲAP法测定总抗氧化能力发现，水提
效果最佳，甲醇次之，乙醚提取效果最差。检测不同
浓度罗勒提取物总抗氧化能力，结果显示随着提取
浓度的升高，总抗氧化能力反而逐渐下降，而且在
水、甲醇、乙醇中都表现出这种趋势。
维生素 C(Vc)又称抗坏血酸(ascorbic acid)，在
蔬菜和水果中大量存在。具有较为广泛的生物学功
能，作为抗氧化剂能够较好的防止自由基对人体的
伤害。本实验以 Vc 为阳性对照，从图 3 可以看出
Vc对超氧阴离子的清除作用随浓度升高变化较为
平稳。Vc的浓度在 0． 5 mg /mL到 1 mg /mL 的梯度
范围内时，对超氧阴离子的清除率呈上升趋势，Vc
浓度达到 1 mg /mL 时清除率为 100%，之后就不再
变化。通过与 Vc 的对比可知，罗勒水提物总体对
对超氧阴离子的清除效果略弱于 Vc，半清除率浓度
为 0． 75 mg /mL，在浓度为 1． 5 mg /mL 时清除率达
到了 73． 64%。
综上所述，罗勒水提物相比其它提取剂提取物
具有更好的总抗氧化能力，而且具有较好的超氧阴
离子的清除作用，这为以后罗勒纯天然化妆品的开
发提供了理论支持。
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