全 文 ：［收稿日期］ 20111031(017)
［基金项目］ 重庆市卫生局科研项目(2010-1-146) ;重庆市渝
中区科技创新项目(20100208)
［第一作者］ 张丹，硕士，讲师，从事药用植物资源开发与利用，
Tel:13452905093，E-mail:danzhang2001@ sina． com
［通讯作者］ * 曹纬国，硕士，副教授，从事中药与天然药物研
究与开发，Tel:13389679838，E-mail:cwgzd2001 @
sohu． com
正交试验优选盐炙续断炮制工艺
张丹1，颜学伟1，王刚1，许秋霞1，曹纬国1，2，3* ，聂娟1，谢智深1
(1. 重庆医科大学中医药学院，重庆 401331;2. 重庆医科大学中医药研究室，重庆 400016;
3. 重庆医科大学中医药实验教学中心，重庆 401331)
［摘要］ 目的:研究盐炙工艺对川续断皂苷Ⅵ含量的影响，优选盐炙续断炮制工艺。方法:以 HPLC 测定川续断皂苷Ⅵ
含量为评价指标，采用正交试验法筛选盐炙续断炮制工艺参数。结果:优选的盐炙续断炮制工艺为每 500 g 续断药材用 10 g
盐浸润 45 min，150 ℃炒制 8 min。结论:优选的盐炙续断炮制工艺可明显提高续断有效成分的溶出率，且工艺稳定、质量可
控，为续断炮制规范的研究提供参考。
［关键词］ 盐炙续断;川续断皂苷Ⅵ;高效液相色谱法;正交试验
［中图分类号］ R283. 6 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)07-0027-03
Optimization of Processing Technology of
Salt Fried Dipsacus asperoids by Orthogonal Experiment
ZHANG Dan1，YAN Xue-wei1，WANG Gang1，XU Qiu-xia1，CAO Wei-guo1，2，3* ，NIE Juan1，XIE Zhi-shen1
(1. Traditional Chinese Medicine (TCM)College，Chongqing University of Medical Sciences，Chongqing
401331，China;2. Lab of TCM，Chongqing University of Medical Sciences，Chongqing 400016，China;
3. TCM Experimental Teaching Center，Chongqing University of Medical Sciences，Chongqing 401331，China)
［Abstract］ Objective:To optimize processing technology of salt fried Dipsacus asperoids，study on effect
of salt fried technology on the content of asperosaponin Ⅵ ． Method:Orthogonal experiment was used to select
processing technology parameters of salt fried D． asperoids with asperosaponin Ⅵ as evaluation index． Result:
Optimal processing technology was:D． asperoids 500 g was soaked with 10 g salt for 45 min，roasted 8 min at
150 ℃ ． Conclusion:Optimized processing technology of salt fried D． asperoids could significantly enhance
dissolution rate of effective constituent，this process was stable and quality was easy to be controlled，this research
could refer to processing standards of D． asperoids．
［Key words］ salt fried Dipsacus asperoids;asperosaponin Ⅵ;HPLC;orthogonal experiment
续断又名川断，广泛分布于重庆、四川、湖北、湖
南、云南、贵州等地，具有补肝肾、强筋骨、续折伤、止
崩漏等功效，主要用于肝肾不足、腰膝酸软、风湿痹
痛、跌打损伤、筋伤骨折、崩漏和胎漏等症［1］。临床
上续断多使用炮制品，现行有酒炙、盐炙、清炒和米
麸炒等炮制品，2010 年版《中国药典》和《全国中药
炮制规范》均收载了酒续断和盐续断 2 种饮片。目
前酒炙续断研究较为深入，而盐炙续断的研究较少，
本课题组前期研究发现盐炙能提高续断总皂苷和川
续断皂苷Ⅵ的溶出率［2］，故设计正交试验，以川续
断皂苷Ⅵ为评价指标优选盐炙续断炮制工艺，为续
断饮片炮制规范和炮制机制的研究提供参考。
1 材料
LC-2010A 型高效液相色谱仪(CLASS-VP 色谱
工作 站，日 本 岛 津) ，溶 剂 过 滤 系 统 (美 国
Millipore) ，TOLEDO AG204 型 1 /万电子分析天平
·72·
第 18 卷第 7 期
2012 年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 7
Apr．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.07.020
(瑞 士 METIER) ，MT4 型 红 外 测 温 仪 (美 国
Raytek)。
川续断皂苷Ⅵ对照品(中国药品生物制品检定
所，批号 111685-200401) ，乙腈为色谱纯，水为超纯
水，其余试剂均为分析纯。
续断样品采自重庆武隆，样品经本校中药教研
室王刚副教授鉴定为川续断 Dipsacus asperoids C． Y．
cheng et． T． M． Ai 的干燥根。
2 方法和结果
2. 1 川续断皂苷Ⅵ含量测定
2. 1. 1 色谱条件［3-4］ Inertsil ODS-SP 色谱柱(4. 6
mm × 250 mm，5 μm) ，流动相乙腈-水(35∶ 65) ，流速
1. 0 mL·min － 1，检测波长 212 nm，柱温室温，进样量
20 μL，理论塔板数按川续断皂苷Ⅵ计不低于 4 000，
在此条件下样品组分得到较好分离，色谱图见图 1。
A．对照品;B．样品;1. 川续断皂苷Ⅵ
图 1 续断 HPLC
2. 1. 2 对照品溶液的制备 精密称取续断皂苷Ⅵ
12. 72 mg，置 50 mL 量瓶中，加 80% 乙醇溶解并定
容，摇匀，即得。
2. 1. 3 供试品溶液的制备 取续断炮制品适量，粉
碎成细粉，精密称定，每份约 0. 5 g，置 100 mL 具塞
锥形瓶中，精密加入 80%乙醇 50 mL，密塞，称定质
量，浸泡 30 min，超声提取 40 min，放冷再称定质量，
用 80% 乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤
液，即得。
2. 1. 4 线性关系考察 分别精密量取川续断皂苷
Ⅵ对照品溶液 1，2，4，6，8，10 mL，置 10 mL 量瓶中，
加 80%乙醇定容至刻度，制成系列不同质量浓度的
对照品溶液，按 2. 1. 1 项下方法测定。以色谱峰面
积(A)为纵坐标，对照品质量浓度(C)为横坐标计
算线性关系，结果表明川续断皂苷Ⅵ在 0. 025 4 ～
0. 254 4 g·L － 1 线性关系良好，回归 方 程 A =
7 395 740C － 104 23(r = 0. 999 9)。
2. 1. 5 精密度试验 精密吸取川续断皂苷Ⅵ对照
品溶液 20 μL 进样，重复 6 次，按 2. 1. 1 项下方法测
定，得峰面积 RSD 1. 31%，表明精密度良好。
2. 1. 6 重复性试验 对同一批续断药材按供试品
溶液的制备方法平行制备 6 份，分别进样 20 μL，按
2. 1. 1 项下方法测定，计算测得峰面积 RSD 1. 84%。
2. 1. 7 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 6
份，在室温下于 0，2，4，6，8，10 h 进样，进样量为 20
μL，按 2. 1. 1 项下方法测定，计算 RSD 2. 06%，表明
样品溶液在 10 h 内稳定。
2. 1. 8 加样回收率试验 取已知川续断皂苷Ⅵ含
量的续断药材 6 份，每份约 0. 2 g，精密称定，分别加
入川续断皂苷Ⅵ对照品适量，按照 2. 1. 3 项下方法
制备样品溶液，按 2. 1. 1 项下方法测定，计算平均加
样回收率，结果见表 1。
表 1 川续断皂苷Ⅵ加样回收率
取样量
/ g
含有量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
0. 201 1 6. 282 6. 1 12. 369 99. 78 98. 87 1. 28
0. 199 8 6. 242 6. 1 12. 270 98. 82
0. 199 3 6. 226 6. 1 12. 128 96. 75
0. 200 7 6. 270 6. 1 12. 394 100. 40
0. 198 8 6. 211 6. 1 12. 256 99. 11
0. 199 5 6. 232 6. 1 12. 233 98. 37
2. 1. 9 样品的含量测定 分别精密吸取对照品溶
液和供试品溶液各 20 μL，按 2. 1. 1 项下方法进样
分析，外标法计算样品中川续断皂苷Ⅵ的含量。
2. 2 炮制工艺研究［5-6］
2. 2. 1 正交试验设计 根据预试验结果，确定了闷
润时间、盐用量、炒制温度和炒制时间 4 个主要因素
和各因素的 3 个水平进行试验(表 2)。
表 2 续断盐炙工艺正交试验因素水平
水平
A 闷润时间
/min
B 盐用量
/%
C 炒制温度
/ ℃
D 炒制时间
/min
1 30 1 120 6
2 45 2 150 8
3 60 3 180 10
2. 2. 2 炮制样品的制备 川续断炮制方法参考
《中国药典》2010 年版一部“炮制通则”与《全国中
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第 18 卷第 7 期
2012 年 4 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 7
Apr．，2012
药炮制规范》。采集道地药材川续断，每组取续断
药材 300 g，除去杂质，洗净，切斜片，干燥后，按照相
应试验设计，取续断片用盐水拌匀，闷润，置锅内，炒
干，取出放凉，50 ℃干燥，粉碎过 20 目筛备用。以
川续断皂苷Ⅵ为评价指标，筛选盐炙续断的最佳炮
制工艺，川续断皂苷Ⅵ含量测定按 2. 1. 1 项下方法。
试验安排及结果见表 3，方差分析见表 4。
表 3 续断盐炙工艺正交试验安排
No． A B C D 皂苷Ⅵ /%
1 1 1 1 1 2. 43
2 1 2 2 2 2. 98
3 1 3 3 3 1. 04
4 2 1 2 3 2. 83
5 2 2 3 1 1. 31
6 2 3 1 2 2. 47
7 3 1 3 2 1. 20
8 3 2 1 3 2. 61
9 3 3 2 1 1. 85
K1 6. 45 6. 459 7. 509 5. 589
K2 6. 609 6. 9 7. 659 6. 651
K3 5. 661 5. 361 3. 549 6. 48
R 0. 316 0. 513 1. 370 0. 354
表 4 续断盐炙工艺方差分析
方差来源 SS f MS F P
A(误差) 0. 172 2 1. 012 1. 00
B 0. 419 2 2. 465 2. 44 ＜ 0. 05
C 3. 622 2 21. 306 21. 05
D 0. 216 2 1. 271 1. 26
注:F0. 05(2，2)= 19. 00。
由结果可知，各因素的主次顺序为 C ＞ B ＞ D ＞
A，以 R 值最小的 A 因素为误差项进行的方差分析
表明 C 因素 3 水平间有显著性差异，B，D 因素作用
不 显 著。最 终 确 定 盐 炙 续 断 的 较 优 工 艺 为
C1B2D2A2，即 2% 盐用量，浸润 45 min，150 ℃炒制
8 min。
2. 2. 3 工艺验证试验 取续断药材 400 g，以优选
出的工艺进行炮制加工，平行试验 6 组，含量测定按
2. 1. 1 项下方法测定，结果川续断皂苷Ⅵ的平均质
量分数 3. 15%，RSD 2. 73%，说明该工艺稳定可行。
3 讨论
中药炮制理论认为续断炒制可缓和其辛散之
性，而补力较强，盐炙则可增强入肾补之功，从而达
到炮制增效的目的。本试验结果表明，按照较优的
续断盐炙条件炮制，有效成分川续断皂苷Ⅵ的质量
分数可达 3. 15%，与续断生品相比略高［7］。本实验
通过正交法优选出续断的盐炙工艺，该工艺稳定可
行，为盐炙续断的深入研究及炮制机理的探讨奠定
了基础。
续断主要含有三萜及其皂苷类化合物、环烯醚
萜苷类化合物、生物碱类化合物等多种成分，已知皂
苷类成分为其主要有效成分。药效学试验表明川续
断皂苷Ⅵ具有增加骨密度的作用，与中医临床应用
续断“补肝肾，强筋骨，续折断”的主治相吻合［8］。
2010 年版《中国药典》也采用川续断皂苷Ⅵ作为续
断药材的质量评价标准，因此本实验采用川续断皂
苷Ⅵ作为正交试验的评价指标。
［参考文献］
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和川续断皂苷Ⅵ含量的影响［J］． 重庆医科大学学报，
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［J］．华西药学杂志，2010，25(2) :173．
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国实验方剂学杂志，2011，17(12) :50．
［6］ 许冬瑾，刘再强，陈华师 ． 盐制山茱萸炮制工艺研究
［J］．中国实验方剂学杂志，2011，17(13) :46．
［7］ 曹纬国，张丹，王刚 ． 重庆产区不同居群续断中总皂苷
与川续断皂苷Ⅵ的含量分析［J］． 时珍国医国药，
2011，22(2) :332．
［8］ 李天庆 ． 中药炮制对制剂药化成分的影响［J］．亚太传
统医药，2009，5(23) :55．
［责任编辑 仝燕］
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张丹，等:正交试验优选盐炙续断炮制工艺