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遮荫对掌叶半夏化学成分含量的影响



全 文 :[收稿日期] 20101213(005)
[第一作者] 徐立军,博士,助理研究员,研究方向:中药资源的
开 发 与 应 用, Tel: 010-84738334, E-mail:
xukaixk11@ 163. com
[通讯作者] * 王文全,教授,博士生导师,Tel:010-84738334,
E-mail:wwq57@ 126. com
遮荫对掌叶半夏化学成分含量的影响
徐立军1,3,魏胜利1,2,王文全1,2* ,王俊英4,李琳4
(1. 北京中医药大学中药学院,北京 100102;2. 中药材规范化生产教育部工程研究中心,北京 100102;
3. 石家庄市农林科学研究院,石家庄 050041;4. 北京市农业技术推广站,北京 100102)
[摘要] 目的:探讨不同光照强度下掌叶半夏化学成分的变化,为栽培生产和林药间作提供理论依据。方法:利用 HPLC
测定不同遮荫处理(遮荫率分别为 0%,40%,60%,80%)下掌叶半夏 4 种含氮化合物含量。结果:随着遮荫程度的增加,4
种含氮化合物含量指标是呈低-高-低的变化趋势,但不同含氮化合物变化程度不同。与全光对比,A,B,C 处理的葫芦巴碱和
胸腺嘧啶含量增加,A,B 处理的腺嘌呤和 6-氧嘌呤含量也增加,而 C 处理的腺嘌呤和 6-氧嘌呤含量减少。结论:中度遮荫下,
能够提高 4 种含氮化合物的含量,适宜在一定遮荫条件下栽培,适宜林(果)间作。
[关键词] 掌叶半夏;遮荫;含氮化合物
[中图分类号] R282 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2011)08-0145-04
Effects of Shading on Chemical Constituents of Pinellia peda-tisecta
XU Li-jun1,3,WEI Sheng-li1,2,WANG Wen-quan1,2* ,WANG Jun-ying4,LI Lin4
(1. Chinese Medicine College,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100102,China;
2. Engineering Research Center of Good Agricultural Practice for Chinese Crude Drugs,
Ministry of Education in China,Beijing 100102,China;
3. Shijiazhuang Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Shijiazhuang 050041,China;
4. Beijing Agricultural Technology Extension Station,Beijing 100102,China)
[Abstract] Objective:To study the effects of shading on chemical constituents of Pinellia peda-tisecta.
Method:Four nitrogenous compounds contents of them were measured under different treatments(0%,40%,
60%,and 80% of shade rate)by a HPLC. Result:The results showed that four nitrogenous compounds contents of
P. peda-tisecta increase then decrease with the increase of shade rate. Compared with full light,the contents of
trigonelline and thymine increse under A,B,C treatment,the contents of amidopurine and hypoxanthine increase
under A,B treatment and decrese under C treatments. Conculusion:Under moderate shade,which will help
increasing four nitrogenous compounds contents,it is suitable for cultivation under moderate shade,it is suitable for
cultivation forest(fruit)intercropping.
[Key words] Pinellia peda-tisecta;shading;nitrogenous compounds
掌叶半夏 Pinellia peda-tisecta Schoot 是天南星
科植物,又名虎掌南星,以干燥的球状块茎入药,具
有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结之功效[1]。掌叶半
夏块茎内主要含有生物碱类化合物,如掌叶半夏碱
甲 、乙 、丙 、丁、戊 、己、庚,腺苷,葫芦巴碱[2-6];苷
类化合物,如羟基苯甲酰獐牙菜苷、獐牙菜苦苷等;
二肽类化合物,如主要有 3-乙酰基-2-哌啶酮、L-脯
氨酰-L-丙氨酸酐、L-苯丙氨酰-L-丝氨酸酐等;还有
多种氨基酸类、甾醇类以及微量元素等成分[7]。有
关掌叶半夏的研究多集中在本草考证、化学成分[2-7]
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及药理[8-16]研究等方面,同时掌叶半夏作为耐荫植
物,在实际生产中,药农发现长于林下的掌叶半夏块
茎要好,但是,关于半夏不同光照条件下葫芦巴碱块
茎的化学成分含变化,即遮荫对对其块茎化学成分
含量的影响还未见报道,在掌叶半夏化学成分中葫
芦巴碱、胸腺嘧啶、腺嘌呤、6-氧嘌呤等 4 种含氮化
合物具有重要的药理活性[15-16],可以作为评价其内
在质量的标准之一,而这方面也鲜见报道,因此本实
验采用人工遮荫的方法,旨在探讨遮荫对掌叶半夏
4 种含氮化合物含量的影响,摸索出对掌叶半夏生
长发育较为有利的光照条件,为掌叶半夏优化栽培
和林(果)药间作栽培提供理论依据。
1 材料
供试掌叶半夏种球于 2009 年 2 月购于河北安
国药材市场,经北京中医药大学刘春生教授鉴定,为
掌叶半夏 Pinellia peda-tisecta Schott 种球。于 3 月份
在北京中医药大学中药学院药植园内进行盆栽。选
择质量一致的种球栽植于装有沙壤土的花盆中。然
后搭不同遮荫度的遮荫网对其进行遮荫处理,分别
是相对光强为全光照 100% (CK)、60% (A)、40%
(B)和 20%(C)4 个处理(光强采用 LI-6400 型便携
式光合作用测定系统的光量子探头测定)。每处理
20 盆,每盆 5 株,在半夏整个生长季节,采用同样的
管理措施,10 月下旬一并挖出种球,剥净外皮及须
根,将去皮块茎于,60 ℃下烘干至恒重,粉碎过 60
目筛,放置于干燥器中,作为样品备用。
葫芦巴碱对照品(购于中国药品生物制品检定
所,批号 110883-200502);胸腺嘧啶、腺嘌呤、6-氧嘌
呤对照品(购于天津一方生物科技公司)。Agilent
1100 高效液相色谱系统,KQ-250DB 数控超声波清
洗仪(昆山市超声仪器有限公司),Sartorious BT 25S
型 1 /10 万电子分析天平(北京赛多利斯仪器有限公
司)。
2 方法
2. 1 色谱条件 Agilent 1100 高效液相色谱系统,
Diamonsil-C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm,5 μm);梯
度洗脱,在 0 ~ 10 min,流动相乙腈 5% ~ 10%,水
95% ~ 90%;在 10 ~ 25 min,流动相乙腈 10% ~
25%,水 90% ~ 75%,流速 1. 0 mL·min - 1,柱温 25
℃,检测波长 254 nm。
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取 4 种对照品(葫
芦巴碱、胸腺嘧啶、腺嘌呤和 6-氧嘌呤)适量,用流动
相配置成质量浓度分别为 0. 04,0. 52,0. 11,0. 13 g·
L - 1的对照品溶液,备用。
2. 3 线性关系考察 取葫芦巴碱、胸腺嘧啶、腺嘌
呤和 6-氧嘌呤对照品溶液,质量浓度分别为 0. 04,
0. 52,0. 11,0. 13 g·L - 1,在 2. 1 项的色谱条件下,分
别精密吸取 5,10,15,20,25 μL,注入液相色谱仪,测
定各色谱峰峰面积。以对照品量(μg)为横坐标,色
谱峰峰面积为纵坐标进行线性回归,胡芦巴碱回归
方程Y = 27 985X - 2 073. 0(R2 = 0. 999 6);胸腺嘧
啶的 回 归 方 程 Y = 18 315 X - 2 163. 4 (R2 =
0. 999 8);腺嘌的回归方程 Y = 27 416 X - 3 387. 1
(R2 = 0. 999 9);6-氧嘌呤回归方程 Y = 22 916X -
3 166. 7(R2 = 0. 999 8)。
2. 4 样品测定 精密称取已经恒重掌叶半夏粉末
2 g,每个样平行测定 3 次,放于 50 mL 三角瓶中,加
入 50 mL 甲醇,超声振荡 30 min,取上清液过 0. 2
μm 滤膜,即得样品溶液取样品溶液 20 μL 进样,对
照品随行对照,根据回归方程计算含量。半夏样品
的 HPLC 图及对照品图见图 1。
图 1 半夏样品的 HPLC
A.样品;B.对照品;. 1. 葫芦巴碱;
2. 胸腺嘧啶;3. 腺嘌呤;4. 6-氧嘌呤
2. 5 统计分析 采用 Excel 2003 和 SPSS 16. 0。
3 结果与分析
图 2 显示的是不同遮荫处理下荫对掌叶半夏 4
种含 N 化合物含量变化。从图 2 中可知,随着遮荫
程度的增加,4 种含 N 化合物含量指标是呈低-高-低
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的变化趋势,但不同含 N 化合物变化程度不同。葫
芦巴碱在 B(60%遮荫)处理条件下含量最高,在 CK
(全光下)处理条件下最低,与对照相比,A,B,C 处
理下含量提高 4. 31%,5. 73%,0. 09%;胸腺嘧啶在
A(40%遮荫)处理条件下含量最高,在 CK(全光下)
处理条件下最低,与对照相比,A,B,C 处理下含量
提高 1. 41%,0. 59%,0. 33%;腺嘌呤在 A(40% 遮
荫)处理条件下含量最高,在 CK(全光下)处理条件
下最低,与对照相比,A,B 处理下含量提高 1. 65%,
0. 24%,C 处理下含量降低 0. 08%;6-氧嘌呤在 A
(40%遮荫)处理条件下含量最高,在 CK(全光下)
处理条件下最低,与对照相比,A,B 处理下含量提高
了 2. 83%,0. 67%,C 处理下含量降低 0. 42%。可
见不同遮荫处理对不同含氮化合物的影响不同。
对不同遮荫下掌叶半夏四种含 N 化合物做方差
分析,其结果见表 1。表 1 显示 A,B 处理葫芦巴碱
含量与对照达到极显著差异,C 处理与对照无显著
差异;A,B处理胸腺嘧啶含量与对照达到极显著差
图 2 不同遮荫下掌叶半夏 4 种含氮化合物含量变化
异,C 处理与对照为显著差异;A,B,C 3 种处理腺嘌
呤含量与对照差异都达到极显著差异水平;A 处理
6-氧嘌呤含量与对照达到极显著差异,B,C 处理与
对照无显著差异。表明在 60%以下遮荫范围内,能
提高掌叶半夏的 4 种含 N 化合物的含量;但遮荫强
度达到 80%后,胡芦巴碱和胸腺嘧啶含量还有较小
的增加,而腺嘌呤和 6-氧嘌呤含量减少。
表 1 遮荫对掌叶半夏 4 种含氮化合物含量的影响(珋x ± s,n = 10) %
处理 葫芦巴碱 胸腺嘧啶 腺嘌呤 6-氧嘌呤
CK 0. 019 873 ± 0. 000 90a 0. 030 36 ± 0. 000 44a 0. 031 33 ± 0. 000 06a 0. 035 13 ± 0. 000 03a
A 0. 020 73 ± 0. 000 029ba 0. 030 79 ± 0. 000 45ba 0. 031 85 ± 0. 000 06ba 0. 036 13 ± 0. 000 02ba
B 0. 020 119 ± 0. 000 04ca 0. 030 54 ± 0. 000 4ca 0. 031 41 ± 0. 000 05c 0. 035 37 ± 0. 000 04ca
C 0. 019 891 ± 0. 000 07d 0. 030 464 ± 0. 041da 0. 031 31 ± 0. 000 08d 0. 034 99 ± 0. 000 07da
注:差异显著性分析取 α = 0. 05 水平,同一列中含有不相同字母者为与对照差异显著。
4 结论
本实验中随遮荫程度的增加,掌叶半夏 4 种含
N 化合物含量指标是呈低-高-低的变化趋势,即适度
遮荫,能高提高 4 种含 N 化合物的含量,这也证明了
适宜的环境条件有利于植物的次生代谢产物的合
成[17-18],但是与“自然光下库拉索芦荟叶中蒽 醌类
物质含量高于遮荫条件下结论[19]与不一致。可能
是不同次生代谢物质代谢途径不同所致,其原理还
有待证明。
以上结果表明,掌叶半夏作为耐荫植物,能够适
应中度的遮荫环境,在遮荫 60% 的以下环境内,提
高了 4 种含氮化合物的含量,因此,从化学含量角度
而言,掌叶半夏适用于林(果)药间作,适用于在郁
闭度 0. 4 ~ 0. 6 遮荫条件下栽培生产。
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[责任编辑 邹晓翠
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