全 文 ：从供试品溶液中精密移取 0.2 ml于具塞试管
中 ,自 “于冰浴中加入 5%苯酚 0.8 ml”起按 2.3项
下操作 ,于 483 nm处测定吸光度值 ,结果见表 4。
　表 4 　制剂中多糖含量测定结果(n=3)
批号 吸光度 制剂中含多糖量(%)
X±S(%) RSD(%)
060917 0.584 1.09
0.589 1.10 1.008±0.023 2.14
0.576 1.05
060918 0.572 1.06
0.581 1.08 1.063±0.012 1.17
0.569 1.05
060919 0.575 1.06
0.536 0.99 1.02±0.040 3.96
0.541 1.00
　　结果表明 XKC温敏凝胶中多糖含量基本稳定 。
3 　讨论
泊洛沙姆为聚氧乙烯(PEO)和聚氧丙烯(PPO)
组成的 ABA型嵌段共聚物 ,其高浓度水溶液具有受
热反向胶凝的性质 ,即冷藏温度下是自由流动的液
体而室温或体温时形成澄明的凝胶 〔3〕。泊洛沙姆
在多糖含量测定中的干扰 ,可能是由于其在硫酸作
用下脱水形成的化合物可与苯酚反应生成有色化合
物 ,该物质与多糖经显色所得化合物颜色相近 ,因而
造成严重干扰 。经预实验发现泊洛沙姆在室温下易
溶于乙酸乙酯 ,而 XKC多糖则不溶 ,据此采用乙酸
乙酯为萃取溶剂对多糖及基质进行分离 。但因制剂
本身为温敏凝胶 ,在温度达 29 ～ 30℃时即可发生转
变而成凝胶 ,以乙酸乙酯进行液液萃取时属于放热
过程 ,凝胶的胶凝阻碍了乙酸乙酯的萃取 ,故液液萃
取的方式并不适合温敏凝胶中基质与多糖的分离 ,
因此采用先将制剂进行冷冻干燥后 ,再用乙酸乙酯
萃取的方法分离基质与多糖 ,较符合温敏凝胶的特
性 ,多糖保留率为 100.11%,是较为理想的样品前
处理方法 ,为以泊洛沙姆为主要基质的多糖制剂中
多糖的含量测定提供参考。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 .北京:化学工
业出版社 , 2005:197-198.
[ 2] XuHX, SpencerH.S.Lee, SongF.Lee, etal.Isola-
tionandcharacterizationofananti-HSV polysaccharide
fromPrunellavulgaris.AntiviralResearch, 1999, 44(1):
43-54.
[ 3] WeiG, XuH, DingPT, etal.Thermosetinggelswith
modulatedgelationtemperatureforophthalmicuserheologi-
calandgammascintigraphicstudies.ControlRelease,
2002, 83(1):65-74.
(2007-04-19收稿)
基金项目:山东省自然科学基金项目(Y2003C01)作者简介:林慧彬(1962-),女,博士 ,研究员 ,主要从事中药材品种 、质量及栽培研究;Tel:0531-82949822。＊通讯作者:林建群 , Tel:0531-88364429, E-mail:jianqunlin@sdu.edu.cn。
菟丝子及南方菟丝子的质量控制研究
林慧彬1 ,林建群 2＊ ,路　宁 3 ,林建强2
(1.山东省中医药研究院 ,山东济南 250014;2.山东大学生命科学院微生物技术国家重点实验室 ,山东济
南 250100;3.青岛双鲸药业股份有限公司 ,山东青岛 266108)
　　摘要　目的:研究菟丝子及南方菟丝子的质量评价方法。方法:采用高效液相色谱法 ,考查菟丝子种间及不同
寄主植物对四种黄酮化合物含量的影响。结果:不同寄主植物上的菟丝子及南方菟丝子中均含有槲皮素 、山柰酚 、
异鼠李素 、金丝桃苷等 4种黄酮化合物。金丝桃苷含量较高 , 为 2.790 ～ 6.502 mg/g;槲皮素 、山柰酚 、异鼠李素的
含量范围分别是 0.025 ～ 0.176mg/g、0.001 ～ 0.213mg/g及 0.001 ～ 0.077mg/g。结论:菟丝子中槲皮素及金丝桃
苷的含量高于南方菟丝子;而南方菟丝子中 , 山柰酚及异鼠李素的含量高于菟丝子。四种黄酮化合物的含量与寄
主植物有关。
关键词　菟丝子;南方菟丝子;金丝桃苷;槲皮素;山柰酚;异鼠李素
中图分类号:R286.02　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)11-1446-04
1446 中 药 材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 11期 2007年 11月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2007.11.034
StudyofQualityControlonCuscutachinensisandC.australia
LINHui-bin1 , LINJian-qun2 , LUNing3 , LINJian-qiang2
(1.ShandongInstituteofTCM, Jinan250014, China;2.SchoolofLifeSciences, StateKeyLabofMicrobialTechnology, Shandong
University, Jinan250100, China;3.QingdaoDoubleWhalePharmaceuticalCo., Ltd., Qingdao266108, China)
Abstract　Objective:TostudytheestimatemethodofC.chinensisandC.australia.Method:HPLCwasusedtodeterminethe
contentsoffourkindsofflavonesofC.chinensisandC.australiagrowingondifferenthosts.Result:C.chinensisandC.australia
growingondifferenthostsbothhadhyperoside, quercetin, kaempferolandisorhamnetin.Thecontentrangeofhyperosidewas2.790 ～
6.502mg/gandwashigherthanotherflavones.Thecontentrangesofquercetin, kaempferolandisorhamnetinwere0.025 ～ 0.176 mg/
g, 0.001 ～ 0.213 mg/gand0.001 ～ 0.077mg/g, respectively.Conclusion:ThecontentsofhyperosideandquercetinarehigherinC.
chinensisthaninC.australia.ThecontentsofkaempferolandisorhamnetinarelowerinC.chinensisthaninC.australia.Thehosts
influenceflavonescontentofC.chinensisandC.australia.
Keywords　Cuscutachinensis;Cuscutaaustralia;Hyperoside;Quercetin;Kaempferol;Isorhamnetin
　　菟丝子是旋花科植物菟丝子(Cuscutachinensis
Lam.)的种子 〔1〕。目前 ,菟丝子药材商品主要是菟
丝子及同亚属的南方菟丝子(C.australiaR.Br.)的
种子 ,并以南方菟丝子较多〔2〕。它们具有补肾益
精 ,养肝明目 ,安胎等功效 ,主治腰膝酸痛 ,阳痿 ,早
泄 ,尿频余沥 ,视力减退 ,先兆流产 ,胎动不安等症 ,
是常用的补肾壮阳药 。我们研究证实 ,菟丝子中的
黄酮成分是其补肾壮阳的有效部位 〔3〕。由于菟丝
子的寄生性 ,寄主植物对其质量及药效均有影响 ,同
时对其质量的评价也带来较多难题 ,历版药典对其
质量控制仅限于药材性状及显微鉴别 ,很有必要对
菟丝子的评价标准进一步完善 。目前从菟丝子中已
分离鉴定出了多种黄酮化合物 ,如金丝桃苷(Hyper-
oside)、槲皮素(Quercetin)、山柰酚(Kaempferol)、异
鼠李素(Isorhamnetin)等 。为进一步考察寄主植物
对菟丝子黄酮化合物的影响 ,我们采用 HPLC测定
了菟丝子及南方菟丝子中 4种黄酮化合物的含量 ,
为菟丝子药材质量控制提供实验依据 。
1 　仪器与材料
1.1 　仪器与试剂　Waters-2695高效液相色谱仪 ,
2996二极管阵列检测器 (美国 Waters公司);KQ-
2200E超声波清洗仪(江苏昆山超声仪器有限公
司)。
甲醇 、磷酸均为色谱纯 ,水为重蒸水。
金丝桃苷 、槲皮素 、山柰酚 、异鼠李素对照品购
于中国药品生物制品检定所 ,供含量测定用 ,批号分
别为:111521-200303、 0081-9304、 110860-200406、
0861-9901。
1.2 　药材　菟丝子及南方菟丝子药材均采于济
南 、蒙阴等种植基地或野外 ,并经笔者鉴定 。
2 　方法和结果
2.1 　色谱条件　色谱柱:DiamonsilC18(5 μm, 150
mm×4.6 mm);柱温:35℃;检测波长:360 nm;流动
相:甲醇-0.4%H3PO4溶液(30∶70)※甲醇 -0.4%
H3PO4溶液 (70∶30);进样量:20 μl;流速:1 ml/
min;洗脱时间:30 min。
2.2　标准曲线的制备
2.2.1 　金丝桃苷标准曲线的制备:精确称取金丝
桃苷对照品 25.03 mg,置 25ml量瓶中 ,用甲醇稀释
至刻度。精密量取 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml置 50
ml量瓶中 ,加甲醇至刻度。用 0.45μm微孔滤膜滤
过后 ,分别进样 20 μl,记录相应的峰面积值。回归
方程为:Y=152520X+5240.7 , r=0.9999, 线性范
围为 0.0200 ～ 0.1001 mg/ml。
2.2.2 　槲皮素标准曲线的制备:精确称取槲皮素
对照品 5.67 mg,置 50 ml量瓶中 ,用甲醇稀释至刻
度。精密量取 1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 ml置 100 ml
量瓶中 ,加甲醇至刻度 。用 0.45 μm微孔滤膜滤过
后 ,分别进样 20 μl,记录相应的峰面积值。回归方
程为:Y=41812X-4693.1, r=0.9999,线性范围为
0.0011 ～ 0.0102 mg/ml。
2.2.3 　山柰酚标准曲线的制备:精确称取山柰酚
对照品 5.78 mg,置 50 ml量瓶中 ,用甲醇稀释至刻
度。精密量取 1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 ml置 100 ml
量瓶中 ,加甲醇至刻度 。用 0.45 μm微孔滤膜滤过
后 ,分别进样 20 μl,记录相应的峰面积值。回归方
程为:Y=73771X-7912.6, r=0.9999,线性范围为
0.0012 ～ 0.0104 mg/ml。
2.2.4 　异鼠李素标准曲线的制备:精确称取异鼠
李素对照品 5.28 mg,置 50 ml量瓶中 ,用甲醇稀释
至刻度。精密量取 1.0、3.0、5.0、7.0、9.0ml置 100
ml量瓶中 , 加甲醇至刻度。 0.45 μm微孔滤膜滤
过 ,分别进样 20 μl,记录相应的峰面积值。回归方
程为:Y=54184X-6339.2, r=0.9999。线性范围
为 0.0011 ～ 0.0099 mg/ml。
2.3　稳定性实验　取供试品溶液 ,按选定的色谱
1447中 药 材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 11期 2007年 11月
条件 ,于 0、3、6、9、12、15 h测定金丝桃苷 、槲皮素 、
山柰酚 、异鼠李素的峰面积值 , RSD分别为 2.08%、
1.33%、1.38%和 1.27%,表明供试液在 15 h内稳
定 。
2.4 　精密度实验　取金丝桃苷 、槲皮素 、山柰酚 、
异鼠李素四种对照品溶液 ,按选定的色谱条件连续
进样 5次 , 测定峰面积值 , RSD分别为 0.95%、
0.56%、0.82%和 1.01%。
2.5 　重现性实验　称取 20508号样品 0.5 g5份 ,
精密称定 ,按供试液制备方法处理 ,测定金丝桃苷 、
槲皮素 、山柰酚 、异鼠李素含量 , RSD分别是
2.02%、1.91%、2.17%和 2.39%。
2.6 　加样回收率实验　取 20508号样品 0.5 g5
份 ,精密称定 ,分别加入金丝桃苷 、槲皮素 、山柰酚 、
异鼠李素对照品一定量 ,按供试液制备方法处理 ,测
定含量。平均回收率分别为 98.80%、 97.28%、
99.01%和 98.71%, RSD分别为 2.31%、 2.18%、
2.46%和 2.05%。
2.7　样品测定　称取过 40目筛的菟丝子粗粉约
0.5 g,精密称定 ,加甲醇 50 ml,于 60℃超声提取 60
min,过滤 。残渣加甲醇 40 ml, 继续超声提取 30
min,过滤 ,用少量甲醇洗涤残渣 ,提取液水浴回收甲
醇 ,定容至 10ml, 0.45 μm滤膜滤过。取续滤液 ,分
别进样 20 μl,测定四种化合物的峰面积值 ,计算含
量。结果见表 1。
　　表 1 　不同寄主植物对菟丝子及南方菟丝子中四种黄酮化合物的影响
编号 品种 寄主植物 槲皮素(mg/g)山柰酚(mg/g)异鼠李素(mg/g) 金丝桃苷(mg/g)
20302 菟丝子 C.chinensisLam. 达呼里胡枝子 Lespedezadavurica(Laxm.)Schindl. 0.080 0.004 0.004 4.836
20508 菟丝子 C.chinensisLam. 黄芩(栽)ScuteliariabaicalensisGeorgi 0.087 0.011 0.008 4.779
20307 菟丝子 C.chinensisLam. 徐长卿(栽)Cynanchumpaniculatum(Bge.)Kitag 0.100 0.003 0.011 5.066
20411 菟丝子 C.chinensisLam. 大豆(栽)Glycinemax(L.)Merr. 0.125 0.001 0.002 6.502
20301 菟丝子 C.chinensisLam. 黄芩(栽)ScuteliariabaicalensisGeorgi 0.090 0.011 0.003 4.334
20303 菟丝子 C.chinensisLam. 甘野菊 Dendranthemalavandulifolium(Fisch.exTrautv.)LingetShin 0.098 0.002 0.002 3.615
20305 菟丝子 C.chinensisLam. 猪毛菜 SalsolacollinaPall. 0.096 0.009 0.001 3.609
20209 菟丝子 C.chinensisLam. 蓬子菜 GaliumverumL. 0.112 0.003 0.006 5.797
20008 菟丝子 C.chinensisLam. 葎草 Humulusscandens(lour.)Merr. 0.072 0.008 0.003 3.673
20309 菟丝子 C.chinensisLam. 绿豆(栽)PhaseolusradiatusL. 0.063 0.035 0.013 5.339
20308 菟丝子 C.chinensisLam. 黄芩(栽)ScuteliariabaicalensisGeorgi 0.176 0.002 0.002 4.902
20513 南方菟丝子 C.australisR.Br. 醴肠 Ecliptaprostrata(L.)L.Mant. 0.026 0.046 0.026 4.508
20501 南方菟丝子 C.australisR.Br. 酸枣 ZiziphusjujubaMill. 0.081 0.213 0.077 3.595
20516 南方菟丝子 C.australisR.Br. 秋苦荬菜 Ixerisdenticulata(Houtt.)Stebb. 0.061 0.197 0.031 3.831
20530 南方菟丝子 C.australisR.Br. 小花山桃草 GauraparvifloraDouglas 0.063 0.150 0.058 5.189
20512 南方菟丝子 C.australisR.Br. 牛膝(栽)AchyrnthesbidentataBl. 0.019 0.004 0.004 5.094
20502 南方菟丝子 C.australisR.Br. 山绿豆 PhaseolusminimusRoxb. 0.061 0.163 0.076 3.616
20507 南方菟丝子 C.australisR.Br. 葎草 Humulusscandens(lour.)Merr. 0.025 0.066 0.033 2.790
97013 南方菟丝子 C.australisR.Br. 大豆(栽)Glycinemax(L.)Merr. 0.083 0.229 0.051 5.043
3 　讨论
3.1 　实验结果显示 ,菟丝子及南方菟丝子均含有
槲皮素 、山柰酚 、异鼠李素 、金丝桃苷 4种黄酮化合
物 。测定的 19个样品中 ,槲皮素含量在 0.025 ～
0.176 mg/g;山柰酚在 0.001 ～ 0.213 mg/g;异鼠李
素在 0.001 ～ 0.077 mg/g;金丝桃苷在 2.790 ～
6.502 mg/g。除金丝桃苷外 ,其他 3种黄酮化合物
的含量均较低。
3.2 　测定的 4种黄酮化合物 ,菟丝子与南方菟丝
子种间具有明显差异。菟丝子中槲皮素及金丝桃苷
的含量高于南方菟丝子;而南方菟丝子中 ,山柰酚及
异鼠李素的含量高于菟丝子 。菟丝子中四种黄酮化
合物的含量比值(槲皮素 ∶山柰酚 ∶异鼠李素∶金丝
桃苷)约为 10 ～ 80∶1∶1∶300 ～ 600;在南方菟丝子中
该比值约为 1∶2∶1∶60 ～ 260。
3.3　寄主植物对黄酮化合物的含量有影响 。寄生
于黄芩 、蓬子菜 、大豆上的菟丝子 ,其金丝桃苷及槲
皮素的含量较高;寄生于酸枣 、秋苦荬菜 、山绿豆 、大
1448 中 药 材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 11期 2007年 11月
豆上的南方菟丝子山柰酚及异鼠李素的含量较高 。
但寄主植物对黄酮化合物的影响小于菟丝子种间的
差异。
3.4 　2005年版药典对菟丝子药材的鉴别仅有性
状及显微鉴别 〔1〕。鉴于黄酮化合物是菟丝子的有
效部位之一 ,其中以金丝桃苷的含量较高 ,它与总黄
酮的含量成正相关(另文报道),不同寄主植物上的
菟丝子及南方菟丝子金丝桃苷的含量范围在 2.790
～ 6.502 mg/g之间 ,建议将金丝桃苷的含量作为评
价菟丝子药材质量的依据之一。
参 考 文 献
[ 1] 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 .一部 .北京:
化学工业出版社 , 2005:217.
[ 2] 林慧彬 , 林建强 ,林建群 , 等.山东菟丝子属的资源状况
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[ 3] 林慧彬 , 林建强 ,林建群 , 等.山东四种菟丝子补肾壮阳
作用的比较 .中成药 , 2002, 24(5):354-356.
(2007-02-08收稿)
基金项目:成都市科技攻关计划(OGGYB002NC-030)作者简介:李静威(1982-),女,硕士 ,主要从事生物化学与分子生物学研究;Tel:0835-2882455, E-mail:lijingwei@ 163.com。＊通讯作者:荣廷昭 , E-mail:rongtz@sicau.edu.cn。
雪莲果叶片多糖的微波提取技术改进
李静威 1 ,刘　坚 1 ,杨　永2 ,郑名敏 1 ,荣廷昭 1＊
(四川农业大学 1.玉米研究所;2.资源环境学院 ,四川雅安 625014)
　　摘要　本实验以雪莲果(Smalanthussonchifolius)叶片多糖的提取率为评价指标 , 比较了微波提取法与传统热
水提取法对雪莲果叶片多糖提取率的影响 , 并采用两因素三水平的实验设计对微波提取法进行了研究。 结果表
明:采用微波技术提取雪莲果叶中的多糖比采用传统的热水提取法更有效 , 并且根据方差分析和多重比较结果确
定了采用微波技术提取雪莲果叶片多糖工艺的优选方案为:280W微波功率进行 2次提取 ,每次 15 min。
关键词　雪莲果;叶片;多糖;微波提取
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)11-1449-04
ImprovementonMicrowaveTechnologyofExtractingPolysaccharidefromYaconLeaves
LIJing-wei1 , LIUJian1 , YANGYong2 , ZHENGMing-min1 , RONGTing-zhao1
(SichuanAgriculturalUniversity1.InstituteofMaizeResearch; 2.ColegeofResourcesandEnvironmentalSciences, Ya an
625014, China)
Abstract　Accordingtotheextractionratioofpolysaccharideinyaconleaves, thecomparisonbetweenmicrowaveextractionand
traditionalhotwaterextractionwasconducted, andthetwo-factorandthree-levelexperimentonthemicrowaveextractionofpolysaccha-
ridefromyaconleaveswasinvestigated.Theresultshowedthattheextractionratioofpolysaccharidebyusingmicrowaveextractionwas
beterthanthatbyusingtraditionalhotwaterextraction.Moreover, accordingtotheresultofvarianceanalysisandmultiplecompari-
son, theoptimumconditionsforextractionofpolysaccharidebyusingmicrowavetechnologyfromyaconleaveswereasfolows:280W
microwavepowerfor2timesand15minutesateverytime.
Keywords　Yacon;Leaves;Polysaccharide;Microwaveextraction
　　雪莲果(Smalanthussonchifolius)原产南美洲安
第斯山脉 ,在植物学分类上属菊科向日葵属双子叶
草本植物 〔1〕。雪莲果全身是宝 ,叶子富含多糖 、酚
酸类和黄酮类等成分 ,是一种潜在的预防慢性疾病
的保健药物;果实含有大量的果寡糖 ,具有降压降脂
功效;根茎含有高蛋白 ,具有开发成绿色动物饲料的
潜力。植物多糖的提取方法较多 〔2、3〕 ,如传统的热
水提取法 、超声波提取法和微波提取法等 ,而其中微
波提取法 〔4、 5〕方便 、省时 、能耗少 、有效成分得率高 ,
是目前广泛采用的方法 。但是 ,对于雪莲果叶片多
糖提取技术的研究较少 。本文以雪莲果叶片多糖的
提取率为评价指标 ,比较了微波提取法与传统热水
提取法对雪莲果叶片多糖提取率的影响。同时 ,采
用两因素三水平的实验设计对提取过程中的提取时
间和微波功率进行了深入研究 ,最后确定提取雪莲
果叶片中多糖的优选方案 ,从而改进了雪莲果叶片
1449中 药 材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 11期 2007年 11月