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宁夏栽培南方菟丝子适宜采收期研究



全 文 :cancer cells by the downregulation of nitric oxide produced by Inducible
nitric oxide synthase[J]. Nutr Cancer,2013,65(2) :305.
[7] 张芳芳,沈汉明,朱心强,等.木犀草素抗肿瘤作用的研究进展[J].
浙江大学学报(医学版) ,2006,35(5) :573.
[8] 王海娣,刘艾林,杜冠华.芹菜素药理作用的研究进展[J]. 中国新
药杂志,2008,17(18) :1561.
[9] 蔡 熠,郁颖佳,归 靓,等.微波辅助萃取 -高效液相色谱法测定
金银花药材中槲皮素和木樨草素的含量[J]. 中国临床药学杂志,
2010,19(4) :236.
[10] 戴 一,曹殿洁,张兴法.不同采收期女贞子中总黄酮与多糖的动
态变化[J].食品与发酵工业,2013,39(9) :87.
[11] 戚志华,王庆伟,王四旺,等. HPLC 法测定不同生长期女贞子中红
景天苷的含量[J].中国药房,2010,21(11) :996.
[12] 戚志华,王四旺,王剑波,等.不同生长期女贞子中齐墩果酸和熊果
酸的含量变化[J].中国中药杂志,2007,32(15) :1583.
收稿日期:2014-04-24; 修订日期:2014-08-25
基金项目:宁夏回族自治区固原市科技攻关项目(固科技发[2012]43 号)
作者简介:王旭鹏(1974-) ,女(汉族) ,宁夏固原人,固原市药品检验所主
管中药师,学士学位,主要从事药品检验及宁夏六盘山地产药材质量分析
研究工作.
宁夏栽培南方菟丝子适宜采收期研究
王旭鹏,党维霞,张文懿
(固原市药品检验所,宁夏 固原 756000)
摘要:目的 确定宁夏栽培南方菟丝子的适宜采收期。方法 通过 HPLC法比较成熟度不同南方菟丝子中的金丝桃苷的
含量,同时比较氨基酸的含量及其产量。结果 栽培南方菟丝子中金丝桃苷在 10 月份含量最高,氨基酸的含量在 10 月份
最高,南方菟丝子的产量在 10 月份也是最高。结论 综合分析栽培南方菟丝子中金丝桃苷的含量,氨基酸含量及其产
量,栽培南方菟丝子适宜的采收期为每年的 10 月份。
关键词:宁夏栽培南方菟丝子; 适宜采收期; 金丝桃苷; 氨基酸
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 02. 084
中图分类号:R282. 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)02-0463-02
南方菟丝子为旋花科植物南方菟丝子 Cuscuta australis R.
Br.干燥成熟种子,具有补益肝肾,固精缩尿,安胎,明目,止泻之
功效[1]。近年来由于自然环境的改变,野生资源的菟丝子产量
锐减,使菟丝子成为紧缺的中药材之一。为了保障药用的需要,
近年来宁夏地区开始栽培南方菟丝子以替代菟丝子的药用需
求[2],宁夏现有种植面积已达 10000 亩,每年提供的南方菟丝子
药材 200 ~ 400 t,主成分金丝桃苷含量均高于药典标准。为保证
栽培南方菟丝子的采收质量,笔者对宁夏红寺堡南方菟丝子栽培
基地不同生长期中金丝桃苷含量、氨基酸的含量及其产量进行比
对研究。
1 材料和仪器
1. 1 栽培南方菟丝子药材 采自宁夏南方菟丝子栽培基地,经固
原市药品检验所张文懿副主任药师鉴定为旋花科植物南方菟丝
子 Cuscuta australis R. Br.干燥成熟种子。
1. 2 仪器与试药 Agilent 1260 高效液相色谱仪,Agilent 自动进
样器,AgilentVWD检测器;Kromasil C18(4. 6mm × 250mm,5 μm)
色谱柱;金丝桃苷对照品购自中国食品药品检定研究院 (批号
111521 - 200303) ;乙腈、甲醇、磷酸均为色谱纯;水为超纯水;其
他试剂均为分析纯。
2 方法
2. 1 含量测定
2. 1. 1 样品处理 分别从 8 月份至 11 月份,在宁夏红寺堡南方
菟丝子栽培基地定期采样,采下植株,晒干,打下种子,除去杂质,
用粉碎机粉碎,过 65 目筛后置干燥器中备用。
2. 1. 2 对照品溶液的制备 精密称取金丝桃苷对照品 50mg 至
100ml量瓶中,加入甲醇溶解定容至刻度摇匀制成质量浓度为
0. 5 g·L -1对照品储备溶液,精密量取对照品储备液 1ml至 10ml
量瓶中,加甲醇定容至刻度摇匀制成 0. 05 g·L -1对照品溶液。
2. 1. 3 供试品溶液的制备 精密称取样品粉末 1g,置 50ml 的量
瓶中,加 80%甲醇 40ml,超声处理(功率 500W,频率 40kHz)1 h,
放冷,加 80%甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2. 1. 4 色谱条件及系统适应性实验 色谱柱:Kromasil C18(4. 6
mm × 250 mm,5 μm) ;流动相:乙腈 - 0. 1%磷酸溶液(17∶ 83) ;
流速:1. 0 ml·min -1;检测波长:360 nm;柱温:30 ℃;进样量:分
别吸取“2. 1. 2”项下和“2. 1. 3”项下的溶液 10 μl 注入 HPLC 色
谱仪进行色谱分析,理论塔板数按金丝桃苷计不低于 5 000。结
果见图 1。
A.金丝桃苷对照品;B.供试品;1.金丝桃苷
图 1 金丝桃苷高效液相色谱图
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 2 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 2 期
2. 1. 5 样品含量测定 取“2. 1. 2”方法制备对照品溶液和
“2. 1. 3”项下供试品溶液各 10μl在上述色谱条件下进行分析,测
定峰面积,用外标法计算宁夏栽培南方菟丝子不同采收季节中金
丝桃苷的含量。结果见表 1。
表 1 不同生长期栽培南方菟丝子中金丝桃苷的含量(珋x ± s)
采收日期 金丝桃苷 /% 采收日期 金丝桃苷 /% 采收日期 金丝桃苷 /% 采收日期 金丝桃苷 /%
2013 - 08 - 02 0. 25 ± 0. 3 2013 - 09 - 02 0. 45 ± 0. 1 2013 - 10 - 02 0. 55 ± 0. 3 2013 - 11 - 02 0. 53 ± 0. 2
2013 - 08 - 07 0. 24 ± 0. 2 2013 - 09 - 07 0. 31 ± 0. 1 2013 - 10 - 07 0. 45 ± 0. 1 2013 - 11 - 07 0. 42 ± 0. 3
2013 - 08 - 11 0. 25 ± 0. 2 2013 - 09 - 11 0. 40 ± 0. 2 2013 - 10 - 11 0. 44 ± 0. 2 2013 - 11 - 11 0. 43 ± 0. 3
2013 - 08 - 18 0. 22 ± 0. 2 2013 - 09 - 18 0. 30 ± 0. 3 2013 - 10 - 18 0. 38 ± 0. 3 2013 - 11 - 18 0. 36 ± 0. 2
2013 - 08 - 23 0. 29 ± 0. 1 2013 - 09 - 23 0. 38 ± 0. 2 2013 - 10 - 23 0. 40 ± 0. 2 2013 - 11 - 23 0. 38 ± 0. 3
2013 - 08 - 25 0. 25 ± 0. 2 2013 - 09 - 25 0. 45 ± 0. 3 2013 - 10 - 25 0. 50 ± 0. 3 2013 - 11 - 25 0. 48 ± 0. 2
从表 1 中可以看出 8、9 月份采集的栽培南方菟丝子中金丝
桃苷的含量明显低于 10 月份采集样品中的金丝桃苷含量,11 月
份采集的样品中的金丝桃苷含量略有下降,所以采集季节应以
10 月份为宜。
2. 2 薄层鉴别 取本品粉末 0. 5g,加甲醇 40ml,加热回流 30min,
滤过,滤液浓缩至 5ml,作为供试品溶液;取南方菟丝子对照药材
0. 5g(中国药品生物制品检定所 121232 - 201102)同上法制成对
照药材溶液;取金丝桃苷对照品(中国药品生物制品检定所
111521 - 200303)5. 2mg置 5ml的量瓶中加甲醇溶解并定容至刻
度制成每毫升含 1. 04mg的溶液,作为对照品溶液。薄层色谱法
(《中国药典》2010 年版一部附录Ⅵ B)试验,吸取上述三种溶液,
分别点于同一聚酰胺薄膜预制板 80mm ×80mm(浙江省台州市路
桥四甲生化塑料厂出品,批号:2012 年 7 月 11 日)上,以甲醇 -
冰醋酸 -水(4∶ 1∶ 5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以三氯化
铝试液,置紫外光灯(365nm)下检视。结果供试品色谱中,在与
对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑
点。见图 2。
S:对照品 金丝桃苷 点样量:1μl,2μl
供试品:1、3 点样量:2μl,4μl
对照药材:2、4 点样量:2μl,4μl
图 2 莬丝子薄层色谱图
2. 3 氨基酸的测定 采用常规酸水解法测定表 1 中采收季节为
2013 - 08 - 23、2013 - 09 - 25 、2013 - 10 - 02、2013 - 11 - 02 的金
丝桃苷含量较高的供试品中氨基酸的含量,在 110 ℃,浓度为6. 0
mol·L -1的盐酸作用下水解,再经离子交换色谱法分离并以茚三
酮做柱后衍生测定。结果见表 2。
由表 2 数据可以看出,从供试品中共检出 16 种氨基酸,其中
谷氨酸、异亮氨酸的含量都较高,氨基酸总的含量采收季节 2013
- 10 - 02 > 2013 - 11 - 02 > 2013 - 09 - 25 > 2013 - 08 - 23,数据
表明 10 月份产的南方菟丝子中氨基酸的含量最高。
2. 4 不同采收产量的考察 从 8 月中旬至 11 月中旬每月中旬采
样 1 次,平行 3 份,样品采集后,晒干,分别测定不同采收季节南
方菟丝子药材的鲜质量、干质量,折干率的测定,结果见表 3。
表 2 不同采收季节南方菟丝子中氨基酸的含量(珋x ± s)%
采收日期 2013 - 08 - 23 2013 - 09 - 25 2013 - 10 - 02 2013 - 11 - 02
精氨酸 0. 019 ± 0. 008 0. 021 ± 0. 014 0. 025 ± 0. 005 0. 023 ± 0. 002
丙氨酸 0. 035 ± 0. 018 0. 038 ± 0. 005 0. 040 ± 0. 014 0. 040 ± 0. 011
甘氨酸 0. 060 ± 0. 024 0. 063 ± 0. 020 0. 069 ± 0. 014 0. 067 ± 0. 005
脯氨酸 0. 052 ± 0. 005 0. 056 ± 0. 011 0. 060 ± 0. 023 0. 059 ± 0. 022
谷氨酸 0. 408 ± 0. 023 0. 428 ± 0. 025 0. 451 ± 0. 014 0. 450 ± 0. 010
丝氨酸 0. 089 ± 0. 020 0. 093 ± 0. 018 0. 098 ± 0. 017 0. 097 ± 0. 004
苏氨酸 0. 080 ± 0. 025 0. 085 ± 0. 028 0. 083 ± 0. 008 0. 081 ± 0. 001
天门冬氨酸 0. 018 ± 0. 003 0. 020 ± 0. 014 0. 021 ± 0. 001 0. 021 ± 0. 008
缬氨酸 0. 030 ± 0. 014 0. 033 ± 0. 027 0. 035 ± 0. 004 0. 033 ± 0. 008
赖氨酸 0. 024 ± 0. 028 0. 027 ± 0. 004 0. 028 ± 0. 014 0. 026 ± 0. 010
组氨酸 0. 006 ± 0. 024 0. 007 ± 0. 002 0. 005 ± 0. 005 0. 006 ± 0. 001
苯丙氨酸 0. 023 ± 0. 035 0. 025 ± 0. 008 0. 027 ± 0. 010 0. 025 ± 0. 009
酪氨酸 0. 018 ± 0. 037 0. 020 ± 0. 002 0. 025 ± 0. 003 0. 023 ± 0. 010
亮氨酸 0. 125 ± 0. 008 0. 214 ± 0. 018 0. 255 ± 0. 021 0. 250 ± 0. 014
异亮氨酸 0. 442 ± 0. 010 0. 508 ± 0. 027 0. 555 ± 0. 013 0. 550 ± 0. 010
蛋氨酸 0. 100 ± 0. 014 0. 150 ± 0. 014 0. 130 ± 0. 005 0. 128 ± 0. 005
总氨基酸(%) 1. 529 ± 0. 019 1. 788 ± 0. 014 1. 907 ± 0. 011 1. 879 ± 0. 008
n =3
表 3 不同采收季节南方菟丝子的产量
采收日期 鲜根质量 /kg 干根质量 /kg 折干率 /%
2013 - 08 - 15 0. 655 0. 292 44. 6
2013 - 09 - 14 0. 651 0. 297 45. 6
2013 - 10 - 15 0. 657 0. 303 46. 1
2013 - 11 - 15 0. 652 0. 300 46. 0
根据表 3 结果分析,栽培南方菟丝子应以 10 月份产收获为
宜。折干率从 8 月份至 10 月份呈逐渐增高趋势,11 月份稍有下
降,因此栽培南方菟丝子应以 10 月份采收产量最高。
3 讨论
中药材的产量与质量除了受环境条件影响外,采收季节也是
十分重要的因素之一。宁夏栽培南方菟丝子年产量大,但因药农
对采收季节把握的不好从而影响药材的质量,笔者通过对 8、9、
10、11 月四个月栽培南方菟丝子中金丝桃苷、氨基酸的含量及其
产量比较,宁夏栽培南方菟丝子适宜的采收季节应确定为 10 月
份,此时南方菟丝子的质量和产量能保持一个较高的水平。
参考文献:
[1] 国家药典委员会.中国药典.一部[S]. 北京:中国医药工业科技出
版社,2010:290.
[2] 林慧杉,林建群,路 宁,等. 菟丝子及南方菟丝子质量控制研究
[J].中药材,2007,30(11) :1446.
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时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 2 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 2