全 文 ：收稿日期:2004-08-02原稿;2004-10-18修改稿
作者简介:肖　波(1972-),男 , 2002年毕业于佳木斯大学基础医学院 ,硕士,讲师 ,主要从事分子生物学的教学与研究
以及电镜分析等工作 ,发表主笔论文 4篇。
　食用菌学报　2004.11(4):8～ 12
　Acta Edulis Fungi
文章编号:1005-9873(2004)04-0008-05
六个姬松茸菌株菌丝超微结构的观察
肖　波 , 杨立红 , 王艳华
(烟台师范学院生命科学学院 , 山东烟台 264025)
摘　要:姬松茸是一种食药兼用真菌。通过电镜观察了华 1 、华 2、华 3、姬 1 、姬宋 、姬 4 等 6
个姬松茸菌株菌丝的超微结构 ,以确定姬松茸菌丝的亚细胞结构特征 , 为进一步研究姬松茸菌丝
在子实体生长过程中的作用提供一定的参考。
关键词:姬松茸;菌丝体;超微结构
中图分类号:S646.110.1　　　　文献标识码:A
姬松茸(Agaricus blazei Murill.)又称巴西蘑菇 ,别名小松菇 ,是一种食药兼用真菌。姬松
茸子实体含多糖 6.55%, 蛋白质 28.70%, 粗脂肪 2.881%。每 100g 蛋白质含氨基酸
19.22mg ,其中人体必需氨基酸 9.10mg ,占氨基酸总量的 47.33%[ 1] 。姬松茸子实体香气浓
郁 ,含多种具抗癌和保健功能的活性多糖 、核酸 、甾醇类物质及人体必需的多种氨基酸 、脂肪
酸 、矿物质和微量元素 ,可防癌 、抗癌 、降血糖及改善动脉硬化状况[ 2] 。1992年 ,我们从日本引
进了姬松茸菌种 ,近年来 ,姬松茸已成为我国出口创汇的菇类新品种 ,具有巨大的开发潜力 。
本文通过电镜观察了 6个姬松茸菌株菌丝的超微结构 ,为进一步研究姬松茸菌丝在子实体生
长过程中的作用提供一定的参考。
1　材料及方法
1.1　姬松茸菌株
华 1 、华 2 、华 3 、姬 1 、姬宋和姬 4均由烟台师范学院食用菌研究所提供 。
1.2　菌丝培养
挑取姬松茸菌丝体 ,于 23℃,采用 PDA 培养基(去皮马铃薯 200g ,葡萄糖 20g ,琼脂 20g ,
麸皮 50g ,MgSO4 3g , VB1 110mg , KH2PO4 3g ,蛋白胨 5g ,水 1000mL)试管斜面培养。
1.3　主要仪器
隔水式培养箱为上海精宏实验设备有限公司产品 ,修块机和超薄切片机为澳大利亚 Leica
公司产品 , JEM-1230型透射电子显微镜为日本电子公司产品 。
1.4　主要试剂
DOI:10.16488/j.cnki.1005-9873.2004.04.002
戊二醛为武汉市鸿兴化学试剂厂美国进口分装产品 ,锇酸为北京中瑞科技有限公司美国
进口分装产品 ,无水乙醇为山东化工研究院产品 ,环氧丙烷为上海凌峰化学试剂有限公司产
品 ,环氧树脂为美国纽约 Heidelberg 公司产品 ,醋酸双氧铀为中国兰州国营 404厂产品 ,枸橼
酸铅为上海三浦化工有限公司产品 。
1.5　透射电镜样品的制备及观察
从试管中挑取培养 7d的菌丝 ,于 4℃下用 4%戊二醛固定 6h ,1.8M 的蔗糖缓冲液冲洗三
次 ,每次 10min;用 1%锇酸固定 2h ,1.8M 蔗糖缓冲液冲洗三次 ,每次 10min;再分别用 30%、
50%和 70%酒精进行梯度脱水。随后于室温下用 80%、90%、95%和 100%酒精进行梯度脱
水 ,每次 10min。用环氧丙烷浸透两次 ,每次 15min。以环氧丙烷和环氧树脂为浸透剂按 1∶1
混合后浸透样品1h ,再用纯环氧树脂包埋 ,置 37℃24h 后 ,转入 45℃聚合 24h 。最后转入 60℃
温箱过夜。待样品块凝固后取出 ,用修块机修块 ,半薄切片定位后做超薄切片 ,并选取 500 ～
700 厚度的切片捞片 。经铀 、铅双染后 ,于 JEM-1230型透射电镜下观察各个样品 。
2　结果与分析
6个姬松茸菌株菌丝培养 7d后 ,华 2菌丝长势最强 ,菌丝粗壮 ,有气生菌丝;其次为姬 4 ,
菌丝粗壮 ,有气生菌丝;华 3菌丝粗壮 ,但无气生菌丝 ,菌丝致密;姬宋菌丝粗壮 ,无气生菌丝 ,
菌丝白色 ,稀疏;长势最差的为华 1和姬 1 ,无气生菌丝 ,菌丝微黄 ,稀疏 。
电镜下观察 6个姬松茸菌株菌丝细胞亚显微结构 ,发现华 1菌丝细胞存在多核现象 ,细胞
表面不光滑 ,有凹陷 。推测细胞正处于快速分裂阶段 ,细胞膜能够发挥正常的生理功能 ,调节
和维持细胞内部环境的相对稳定并进行细胞内外物质的交换 。细胞壁形成结构存在 ,细胞内
部结构较均一 ,说明细胞的生活状态良好(图 1 ,2)。
　　华 2菌丝细胞内存在多核现象 ,细胞亦处于快速分裂阶段 ,细胞内线粒体含量丰富 ,代谢
旺盛 ,可见大液泡 、溶酶体等亚细胞结构存在 ,细胞的生活状态良好(图 3 ,4)。
华 3菌丝细胞内未见多核现象 ,细胞表面光滑 ,细胞亚显微结构清晰可见 ,菌丝细胞壁形
成且壁质间有缝隙 ,可能有壁旁小体存在。推测该菌丝细胞未发育成熟或已进入衰老阶段(图
5 ～ 8)。
94 期　　　　　　　　　　　肖　波等:六个姬松茸菌株菌丝超微结构的观察
姬 1菌丝细胞亚显微结构致密 、区域化 ,菌丝细胞间有锁状联合 ,菌丝细胞中存在高尔基
体 ,推测细胞内各组成物质 ,尤其是糖类和脂类的包装和运输及蛋白质的进一步加工都能很好
进行 ,细胞分泌活动旺盛(图 9 ,10)。
姬宋菌丝细胞壁存在多处凹陷现象 ,细胞内未见较多的细胞器存在 ,但膜组分丰富(图
11 ～ 13)。
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姬 4细胞边缘不整齐 ,不光滑 ,内部结构不均一 ,可能与样品制备有关(图 14 ,15)。
虽然 6个样品中姬 4的生长状态较好 ,但电镜下其超微结构不清晰 ,可见除了客观因素
外 ,菌丝长势与电镜下超微结构观察并不一定对应 。
114 期　　　　　　　　　　　肖　波等:六个姬松茸菌株菌丝超微结构的观察
3　讨论
优良食用菌菌株的选育是育种工作者
的工作重心之一 ,所选菌株的好坏直接影
响产量和质量。传统的菌株选育方法多通
过直观方法判定菌株的好坏 ,这不能完全
真实地反映菌株的品质 。因此 ,在优良菌
株选育过程中 ,人们除了对菌株的外观表
现进行观察记录外 ,还测定其生理生化指
标。随着分子生物学技术的发展 ,人们对
所选育优良菌株的遗传组成进行分析 ,以
期获得遗传成分稳定 、品质优良的菌株 。
图 15　细胞内部结构不均一
Fig.15　Non-homogeneous inner structure of the cel l
但根据菌丝亚细胞成分分析评判菌株品质还未见报道 。本文通过电镜观察外观生长状态不同
的菌株菌丝细胞的超微结构 ,发现外观长势存在差异的菌株 ,其菌丝亚细胞结构也存在差异 ,
但这种结构上的差异与长势并不完全一致。如华 1与华 2二者长势相差较大 ,但二者菌丝亚
显微结构的差异却不能解释这种长势的差异 。有的菌株虽然外观长势较好 ,但其菌丝亚细胞
成分并不丰富 ,甚至存在缺陷 ,由此可推测其将来的长势会趋弱;而有的菌株虽然目前的长势
并不理想 ,但从其所含的亚细胞成分分析 ,可以预见其将来的长势趋强 ,因此 ,不同菌株的菌丝
亚细胞结构的观察或许可成为优良菌株选育的一个辅助手段。
参　考　文　献
[ 1] 黄大滨 , 李开本 ,陈体强.姬松茸生物学特征研究初报[ J] .中国食用菌 , 1994 , 13(2):121 ～ 125.
[ 2] Guterrez ZR , Mantovani MS , Eira AF , et al.Variation of the antimutagenicity effects of w ater ex tracts of
Agaricus blazei Murrill in vitro [ J] .Toxicol In Vitro , 2004 , 18(3):301～ 309.
The Mycelial Supermicrostructure of Six Agaricus blazei
Strains under Electron Microscope
XIAO Bo , YANG Li-hong , WANG Yan-hua
(The Life Science Colleg e, Yantai Normal University , Yantai , Shandong 264025 , China)
Abstract:Agaricus blazei Murill.is a kind of edible and medicinal fungus.The mycelial supermicrostructures
of six Agaricus blazei strains w ere observed under the electron micro scope to determine the characteristics of subcel-
lular structure and give an advice fo r further studying the function of mycelia in the g row th of Agaricus blazei fruit-
body.
Key words:Agaricus blazei Murill.;Mycelium;Supermicrostructure
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