全 文 ：食用首 I B L E E DFUN G 2 0 7(3 )
蜜环菌对硒的耐受能力及硒对其
多糖产率的影响 ’
唐巧玉 ’ 周毅峰 2 杨 林 2 秦恩华 2
( 1湖北省生物资颐保护与利用重点实脸室 ;
2 湖北民族学院生物科学与技术学院 . 湖北思施 4 5仪K) )
1
.
2. 3
.
1 胞外多搪含量的测定 取 1 . 2. 2 中禽心所得 上清液
Z m L
,加人 s m L 无水乙醇 , 冰箱中沉淀 30 m i n , 10 0以) lr m in
离心 10 m in 。 沉淀用 75 % 乙醇洗涤 3一5 次 , 并将沉淀冷冻干
燥 ,再用热水溶解 ,用苯酚一硫酸法 ”铡定多搪含量 。
L .2 32 胞内多糖含量的测定 将所得菌丝粉碎 . 经热水浸
提 、 离心 、 醇沉 、冷冻干操得粗多糖 , 再用热水溶解 , 用苯酚一
硫酸法卜铡定多糖含量 。
摘 要 采用不同的硒浓度对蜜环菌进行了补硒培养 ,
研究了硒对蜜环菌生长 、 蜜环菌胞外多糖和胞内多糖产
率的影响 。菇果表明 :在硒处理浓度为 20 m必 以下时 ,能
够促进蜜环菌菌丝体的生长 , 超过该依度之后 ,硒对蜜环
菌菌丝体的生长产生阻碍 ;对于蜜环菌多糖来说 ,在试验
所涉及的浓度范围内 ,硒能够促进胞外多箱的分泌 ,但对
胞内多糖合成的影响不如胞外多据明显 。
关扭切 蜜环菌 硒 耐受力 多精
文 . 幼号 l X( 幻~ 8 3 57 ( 2叨 7 )03 减冶4D刁 2
2 结果与分析
2
.
1 蜜环菌对硒的耐受能力 硒对多种植物和徽生物生长
发育影响情况的研究表明 : 硒能够在一定的浓度范围内促进
植物份和微生物间的生长发育。 笔者通过在蜜环菌液体培养基
中加人不同浓度的微量元素硒 , 经过 Z O d 的振荡培养 ,研究
了硒对蜜环菌生长发育的重要指标一生物量的影响 。 从图 l
蜜环菌 (A 朋边巨勿 , 公 a) 属 于担子菌纲 、 伞菌 目 、 口蘑
科 、 蜜环菌属川 ,别名蜜环草 、苞谷草 、 青冈策 。蜜环菌是一种药
食兼用菌 ,美味可 口 ,且子实体 、菌丝 、 菌索都可以人药 。 由于
中药天麻及猪菩必须依靠蜜环菌侵染提供营养才能生长繁殖气
因此 ,引起国内外学者对该菌研究的极大兴趣 。对于天麻共生
蜜环菌的研究主要集中在与天麻共生关系及其蜜环菌化学成
分上 。近年来其作为一种新兴的药用真菌逐渐被人们所关注 ,
大多数的研究集中在蜜环菌发醉产物中活性成分 、 功能以及
在功能食品中的开发应用 , 而对于蜜环菌富硒方面的研究 , 尚
未见报道 。湖北恩施家有 “ 世界硒都 ” 和 “ 华中药库 ”美誉 ,为充
分开发利用本地区的特色资源 。 笔者结合丰富硒资源和名贵
的药材资源 , 研究了硒对蜜环菌菌丝生长和胞内外多糖产率
的影响 ,对于提高蜜环菌的营养及药用价值的探讨 .提供一定
的理论依据 。
1 材料与方法
1
.
1 宜环蔺种 购自华中农业大学菌种库 , P D A 培养基斜面
转种培养 。
,
.
2 试脸方法
1
.
.21 蜜环 蔺的补硒培养 ①培养基 :蔗糖 20 9 , 葡萄搪 10 9 ,
蛋白陈 10 9 ,醉母膏 10 9 , M g S.O · 7 H 2 0 0 . 7 5 9 , K H Zp o 月1. 5 9 ,水
1以x , mL
,
p H 自然 。②补硒浓度 :设置 s m叭 、 10 m叭 、 20 m叭、
30 m叭 、 40 m叭 、 50 m叭 , 共 6 个补硒浓度及对照 。 ③补硒方
法 :将亚硒酸钠配置成硒含 t 为 l m砂礼 的溶液 , 和培养基分
别灭菌之后 , 再按照所设计的补硒培养浓度加人不同体积的
硒溶液 ,并使培养基的最终体积为 15 0 m L o
1
.
2
.
2 生物童的浏定 将培养液 14 《XX) lr m in , 离心 15 m in ,
所得菌丝沉淀且于鼓风干燥箱中 60 ℃干燥至恒重 ,称重 。
12 .3 多粉含全的浏定
. 基金项目 : 湖北民族学院青年基金项 目 ( 2加 5比加7 ) ;湖北省
教育厅宜点项目 ( 2加2 A 02 X() 3 ) 。
一 4 一
可以看出 , 硒对蜜环菌的影响具有两面性 。硒也能在一定的浓
度范围内促进微生物的生长 , 表现为生物量积累的增加 : 在硒
处理浓度为 10 m叭 以下时 , 蜜环菌菌丝的生物蚤与硒处理
浓度呈 正相关 ( r 二 .0 9 2) , 其菌丝体生物盘比对照分别高
21
.
76% 和 25 . 巧% 。 在硒处理浓度为 20 m叭 , 生物童的增加盘
虽有下降趋势 ,但仍比对照高出 20 . 22% 。 另一 方面 , 当硒处理
浓度继续升高 , 硒则表现出毒性 , 对菌丝的生长产生抑制作
用 , 生物量与硒浓度呈负相关 (=r 刁.9 8 ) 。 硒对蜜环菌生长产
生促进作用和抑制作用的临界浓度比硒对猴头和灵芝菌丝的
都要低网 ,但是其作用的趋势基本一致 。
.2 2 硒对蜜环蔺胞外多粉分泌的影响 蜜环菌能与天麻共
生并提供营养的另一个重要的因素是它能够分泌大贵的多
糖 。因此 , 笔者也从硒对蜜环菌分泌胞外多糖能力的角度探讨
了硒对蜜环菌生长发育的影响 。从图 2 可以观察到 ,蜜环菌分
0
.
2 5 -
0
.
1
0 0 5
0 1 . . 曰 . . ~ J ~ ~ . ~ . . J .
0 5 10 20 30 叨 0S
硒处理浓度(I吨 ·口 )
圈 2 硒对奋环 , 胞外多抽 , 的影晌
泌胞外多糖的总量随着加硒浓度的变化呈现出先上升后下降
的趋势 ,在 s m叭 时达到最大 ,但是超过 10 m叭后 下降趋势
并不是很明显 。而对于菌丝的多糖产率来说 ,却表现出与多糖
总量不同的变化曲线 。 在 O一s m匹浓度范围内时 , 两者变化
趋势基本相同 , 而在超过 10 m叭 的硒处理之后却出现上升
食用曹 E DBI L E F UN GI 20 , (3 )
硒对两种灵芝菌生长的影响
王 蓉 师俊玲 樊明涛 ’
(西北农林科技大学食品科学与工程学院 ,陕西杨凌 7 12 10 )
摘 要 研究了硒对两种灵芝蔺的生长和富硒过程的影
响 , 考察了两种灵芝菌在琼脂固态堵养中对 eS 的耐受能
力 , 以及两种菌在液态培养过程中生物t 、 发醉掖中的
pH
、残糖以及 se 富集率的动态变化 。 结果表明 , 灵芝的耐
硒能力与 eS 富集率并无显著关系 , eS 富集能力与培养时
间 、生物童和 p H 有关 。 两种灵芝在固态培养的耐硒能力
显著高于液态培养 。液态培养时 N a森仇浓度为 l o m泌 ,
甜芝 9 6 h 时 , 生物t 达到最大 .0 63 5 9 , 120 一 14 h ,富集 eS
元素最多 , eS 富集率升高了 .0 95 % 。 而日本灵芝更适宜液
态加硒培养 , 192 h获得最高生物盆达 .1 2 9 , 12卜 14 卜, 富
集 se 元素最多 , eS 富集率升高了 3 .5 2% 。
关妞词 硒 生长曲线 耐硒性 灵芝
文 t 幼号 l X( 扣~ 8357 (以犯7 ) 0 3刊艾X) 5刁3
* 通讯作者 。
硒是人体必需的微量元素 ,缺硒会导致多种疾病川。 硒具
有多方面的功能 ,突出的作用是清除体内过多的活性氧 自由
基 , 在预防肿瘤 、 杭衰老和预防心血管等疾病方面有非常重
要的作用冈。 人体主要依赖食物获得硒 , 我国 70% 的县市处于
低硒水平 3I] 。 由于无机硒毒性很强且吸收率低 , 因此目前认为
生物源有机硒是安全有效的补硒手段 。
灵芝是一种营养价值很高的食 、 药用真菌 ,含有丰富的
氨基酸 、 多糖 、 维生素 、 矿质元素及其他的活性物质 , 而且有
提高人体免疫力 、杭肿瘤 、 防衰老的保健功能。 更重要的是其
具有很强的富硒能力间 。 利用灵芝的富硒能力将无机硒转化
为有机硒 ,并使其富集较高含量的有机硒 , 融灵芝和有机硒
之长 ,其药用价值更高 。 试验对灵芝加硒培养作了多方面的
研究 , 包括两种灵芝在不同浓度 N a多e 0 3 的固态培养基上的
生长情况 , 以及液态培养过程中生物量 、 发醉液中还原糖 、 p H
以及灵芝菌丝体内硒含量的动态变化 。
1 材料与方法
1
.
1 供试材料 ①甜芝 ( C山 ID山~ 甲
.
)
、 日本灵芝 (G anD de 卜
am j甲 。硫 , ) 均为西北农林科技大学食品科学与工 程学
.州卜一叫卜 .州卜一卜 .叫卜一州卜 .叫卜 .叫卜 .叫卜 .州卜 .闷十 .叫卜一州卜 .州卜 . 闷卜 .州卜 .州卜 .州卜 .叫卜 .州卜 .叫卜 .州卜 .州卜 .州卜 . 叫卜· 州卜 .州卜 . 州卜 .州卜一叫卜 .州卜 .叫卜一卜 . .冲` .州卜 .州卜 .叫卜 .叫十 .叫卜 . 州卜一叫卜 . 问卜 .州卜 .冲 , ·神加 .
趋势 。 多糖产率综合 2 . 1 中的结果 , 可以得出这样的结论 : 高
硒浓度虽然阻碍蜜环茵菌丝的生长 , 但是却能促进蜜环菌分
泌更多的胞外多搪 。这种多糖是在高硒逆境条件下产生的 ,因
此 , 这种胞外多糖可能具有比蜜环菌普通多糖具有更强的生
理功效 。 关于硒为何会促进蜜环菌分泌胞外多糖以及促进机
制 , 还值得更进一步的研究。
.2 3 硒对蜜环菌胞内多抽含 , 和产 t 的影响 从图 3和图
4看 , 硒质量浓度低于 10 m叭 处理能够促进蜜环菌菌丝体中
1
.
4 ,
.2 2 中的结果 , 可以得出这样的结论 : 高硒浓度虽然阻碍蜜环
菌菌丝的生长 , 但是有可能对蜜环菌胞内多搪的合成影响不
大 ,或者也可能促进蜜环菌胞内多糖的合成 , 只不过所表现出
来的促进作用程度不如硒对胞外多糖分泌的影响 。 硒对这两
者的形响有如此差别的原因 ,还值得进一步研究 。
3 结 论
综上所述 ,硒对蜜环菌同样具有双重作用 ,适当浓度的硒
(20 m glL )能够促进蜜环菌生长 ,而高浓度的硒对蜜环菌的生
长产生不良影响 。但从蜜环菌胞外多糖来看 ,硒能促进胞外多
格的分泌 。 所以 ,在应用到实际生产过程中时 ,应该根据不同
的目的来选择适宜的硒处理浓度 。同时 , 通过对蜜环菌的加硒
培养 , 不仅能够促进胞外多糖的分泌 , 而且还可得到含硒多
糖 .这对提高其产品的附加值具有较大的意义 。
,`确口O月.八ō
0ē“ō八口
水、喇如称摘
0 5 10 20 30 40
硒质 t 浓度l( 毗 · -lL )
圈 3 硒对宜环 , 百丝体胞内多粉含 t 的形晌
12 r
今 考 文 献
0 5 10 20 30 40 印
硒质 t 浓度 l( gm · -L , )
圈 4 峨对宜环 , 胞内多抽产 t 的影晌
6[】
多掂的合成 ,这种趋势与生物量和胞外多糖的变化荃本一致 。
与胞内多糖不同的是 , 比较图 3 和图 4 , 可 以看出 ,硒对蜜环 口l
菌胞内多糖含量和总 t 的影响变化曲线基本重合 。 综合 2 . 1 、
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( 3 )
二2 6( 卜 264 .
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旨、喇恢犯喃