全 文 ：收稿日期:2008-06-05;　修订日期:2008-09-17
作者简介:刘　霞(1973-),女(汉族),湖北武汉人 ,现任武汉健民药业集
团股份有限公司工程师 , 博士学位 ,主要从事中药的品种 、质量及资源开
发研究工作.
＊通讯作者简介:陈科力(1947-), 男(汉族),湖北武汉人 , 现任湖北中医
学院教授 ,博士研究生导师 ,主要从事中药资源和质量研究工作.
大孔吸附树脂同步提取湖北麦冬总多糖和总皂苷
刘　霞1, 2 , 张琼光 1 , 向　阳1 , 詹亚华 2 , 陈科力2＊
(1.武汉健民药业集团股份有限公司 ,湖北 武汉　430052;　2.湖北中医学院药学院 ,湖北 武汉　430061)
摘要:目的 研究湖北麦冬中总多糖和总皂苷的提取 、分离方法。方法 应用大孔吸附树脂提取湖北麦冬中的总多糖和总
皂苷。结果 分别得到含量为 66.52%的总多糖及含量为 81.15%的总皂苷。结论 运用大孔吸附树脂可以同步提取湖北
麦冬中的总多糖和总皂苷 ,有利于湖北麦冬中总多糖和总皂苷的综合利用。
关键词:湖北麦冬;　总多糖;　总皂苷;　综合利用
中图分类号:R284.2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2009)05-1235-01
　　湖北麦冬 Liriopespicata(Thunb.)Lour.var.proliferaY.T.
Ma是中药山麦冬的主要来源之一 ,是湖北省的道地药材 , 具有养
阴生津 、润肺清心的功效 ,用于肺燥干咳 、虚劳咳嗽 、津伤口渴 、心
烦失眠 、肠燥便秘等症 [ 1] 。湖北麦冬含多糖及皂苷类成分 [ 2] ,两
者都是湖北麦冬的活性成分 , 其多糖有降血糖 、延缓衰老 、抗疲劳
辅助抑制肿瘤 、抗辐射等作用 [ 3];所含皂苷类成分在免疫系统 、
心血管系统等方面具有良好的活性 [ 4] 。
对于湖北麦冬中的总多糖及总皂苷 ,目前多为单独提取和纯
化 , 常造成了另一大类有效成分的浪费 , 不利于湖北麦冬的综合
利用。本文运用大孔吸附树脂法同步提取湖北麦冬中的总皂苷
和总多糖 , 有利于湖北麦冬中总多糖和总皂苷的综合利用。
1　材料与仪器
Agilent8453紫外 -可见分光光度仪 , R205星海旋转蒸发器
(无锡市星海王生化设备有限公司), DZF-2002真空干燥箱(上
海浦东荣丰科学仪器有限公司)。
湖北麦冬购自湖北省襄樊市欧庙镇 ,经湖北中医学院鉴定教
研室陈科力教授鉴定为湖北麦冬 Liriopespicata(Thunb.)Lour.
var.proliferaY.T.Ma。麦冬皂苷 D对照品由中药固体制造技
术国家工程研究中心提供 , 批号:1214-080228, 纯度≥98%。 D
-无水葡萄糖对照品由中国药品生物制品检定所提供 , 批号:
110833-200503。 D-101大孔吸附树脂(天津农药股份有限公
司),水为蒸馏水 , 其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　总多糖的含量测定方法 [ 5]
2.1.1　供试品溶液的制备 取总多糖 0.1g,精密称定 , 用蒸馏水
溶解并定容至 100 ml,精密吸取 0.2 ml分别置于干燥具塞试管
中 , 补加蒸馏水至 1.0ml, 摇匀 ,得供试液。
2.1.2　线性关系考察 精密称取 105℃干燥至恒重的 D-无水葡
萄糖对照品 10.40 mg,置 50ml量瓶中 ,加水溶解并稀释至刻度 ,
摇匀 , 精密吸取 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.2 ml, 分别置干燥具塞
试管中 , 补加蒸馏水至 1.0 ml,再各加苯酚试液 1.0 ml,摇匀 ,滴
加浓硫酸 5.0 ml,迅速摇匀 , 放置 5min, 置沸水浴中加热 15 min,
取出 , 冷水冷却至室温。另取蒸馏水 1.0 ml, 加苯酚试液同法操
作 , 作为空白对照。按分光光度法在 486nm波长处测定吸光度 ,
以浓度为横坐标(X)、吸光度为纵坐标(Y),绘制标准曲线 , 求得
回归方程:Y=9.105 1X+0.093 4, r=0.999 1。
2.1.3　总多糖的含量测定 供试品溶液按 “ 2.1.2”项下自 “加苯
酚试液 1.0 ml”起 , 同法操作 ,测定吸光度。
2.2　总皂苷的含量测定方法
2.2.1　供试品溶液的制备 取总皂苷 0.1 g,精密称定 , 置 100 ml
量瓶中 ,用甲醇溶解并定容至刻度 , 摇匀 , 精密量取 1ml,置 10ml
量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 , 摇匀 ,即得。
2.2.2　对照品溶液的制备 精密称取麦冬皂苷 D对照品 10.42
mg,置 50ml量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇匀 ,即得。
2.2.3　测定波长的选择 精密称取葡萄糖 10.31 mg, 按对照品溶
液的制备方法制成阴性对照溶液。分别吸取对照品溶液 、供试品
溶液 、阴性对照溶液各 2 ml,置具塞试管中 , 挥去甲醇 , 加入高氯
酸 10ml, 混匀 , 65℃水浴加热 15 min, 冰水浴冷却 , 终止反应后按
分光光度法测定吸光度 ,对照品溶液 、供试品溶液在 317 nm处有
最大吸收峰 ,阴性对照溶液无干扰。结果见图 1。因此选 317 nm
为麦冬总皂苷的测定波长。
1.对照品　2.供试品　 3.葡萄糖
图 1　湖北麦冬总皂苷含量测定波长选择图
2.2.4　线性关系考察 精密吸取麦冬皂苷 D对照品溶液 0.4,
0.6, 0.8, 1.0, 1.5, 2.0 ml, 分别置干燥具塞试管中 , 挥去甲醇 , 加
入高氯酸 10 ml, 混匀 , 65℃水浴加热 15min,冰水浴冷却 , 终止反
应后按分光光度法测定吸光度 , 以浓度为横坐标(X)、吸光度为
纵坐标(Y), 绘制标准曲线 , 求得回归方程:Y=6.991 4X+
0.035 2, r=0.999 9。
2.2.5　总皂苷的含量测定 精密吸取供试品溶液 1 ml, 按
“ 2.2.3”项下自 “置具塞试管中 , 挥去甲醇 , 加入高氯酸 10 ml”
起 , 同法操作 ,测定吸光度。
2.3　大孔吸附树脂的前处理 取 D-101大孔吸附树脂 , 用乙醇
浸泡过夜 , 使充分溶胀 ,湿法装柱。然后用乙醇冲洗 ,至洗脱液在
试管中加水稀释不浑浊 ,且洗脱液在 200 ～ 400 nm扫描无吸收峰
为止。再用水洗去乙醇。
2.4　湖北麦冬药材的提取 湖北麦冬药材 2 kg加 10倍水提取 3
次 , 1h/次 , 滤过 ,合并。滤液冷却至室温 , 备用。
2.5　总皂苷及总多糖的提取及纯化 将 “ 2.4”项下提取液通过
处理后的大孔吸附树脂柱 ,用蒸馏水洗脱 , 至 Mollish反应呈现阴
性 , 然后用 70%乙醇洗脱 , 收集洗脱液 ,至 Liberman反应呈阴性。
过柱液及水洗脱液合并 ,浓缩至相对密度为 1.25, 加乙醇至
含醇量为 80%, 静置 24 h, 沉淀物减压干燥 , 得总多糖 349g(含量
为 66.52%)。 70%乙醇洗脱液合并 ,回收乙醇 , 浓缩至相对密度
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL.20NO.5 时珍国医国药 2009年第 20卷第 5期
为 1.25的浸膏 , 减压干燥 ,得总皂苷 15g(含量为 81.15%)。
3　讨论
湖北麦冬是湖北的独特品种和道地药材 ,所含的多糖及皂苷
类都是其有效成分。 但文献报道中 , 湖北麦冬的提取仅限于多
糖 [ 3, 6, 7]或仅限于皂苷类 [ 8]成分 , 常造成了另一大类有效成分的
浪费 , 不利于湖北麦冬的综合利用。对于麦冬的提取 , 这种情况
也经常发生 [ 9 ～12] 。本文运用大孔吸附树脂法同步提取湖北麦冬
中的总皂苷和总多糖 ,有利于湖北麦冬中总多糖和总皂苷的综合
利用 , 同时 ,也为麦冬的综合利用提供参考。
文献报道的湖北麦冬总多糖的提取及纯化过程都比较复杂。
如有人将湖北麦冬用石油醚脱脂后 ,依次用乙醇 、水提取 ,水提取
液合并 , 浓缩 ,浓缩液依次用 Savage法脱蛋白质 ,活性炭脱色 ,然
后乙醇沉淀 , 沉淀物依次用 95%乙醇 、无水乙醇 、乙醚 、丙酮洗
涤 , 烘干 ,得粗多糖(得率为 7%)[ 3] 。有的运用 0.9%氯化钠溶
液提取湖北麦冬 , 用氯仿 -正丁醇除蛋白质 , 透析除小分子杂质 ,
浓缩 , 浓缩液用乙醇沉淀 , 沉淀物依次用无水乙醇 、丙酮 、乙醚洗
涤 , 干燥 ,得总多糖 [ 7] 。以上两种方法提取 , 精制的步骤多 , 操作
比较复杂 , 因此有效成分损失较多 ,产品得率偏低。 还有将湖北
麦冬依次用乙醇 、水提取 , 水提取液合并 , 微滤后 ,采用螺旋卷式
超滤系统超滤 , 浓缩 ,干燥 , 得到不同分子量分布范围的多糖 [ 6] 。
但超滤法仅仅是根据分子量大小对中药提取液中的成分进行分
级 , 在中药生产中的应用仍很少。主要是因为中药的有效成分复
杂 , 易造成分离膜污染 ,加上分离膜价格昂贵等原因 ,使这项技术
至今不能在中药生产中得到推广应用。 本文运用大孔吸附树脂
法同步提取湖北麦冬中的总皂苷和总多糖 ,步骤少 , 工艺简单 ,操
作性强 ,易产业化 , 值得推广应用。
参考文献:
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收稿日期:2008-03-04;　修订日期:2008-07-23
作者简介:吴　军(1975-),男(汉族),江苏如皋人 ,现任江苏省中医药研
究院主管中药师 ,学士学位 ,主要从事临床药学研究工作.
龙葵提取物对小牛血清白蛋白
所致大鼠实验性肾炎的影响
吴　军 , 陈　晨 , 王宇环
(江苏省中医药研究院 ,江苏 南京　210028)
摘要:目的 研究龙葵对大鼠实验性肾炎的药理作用。方法 采用静脉注射小牛血清白蛋白造成大鼠肾炎模型 , 按体重给
予龙葵提取物 35 d, 观察龙葵给药后大鼠各项指标的变化。结果 龙葵提取物可使给药组动物 24 h尿蛋白排出明显减
少 , 血清尿素氮及血清肌酐含量显著降低 , 大鼠肾小管内的蛋白管型大小和数量明显减少 , 灶性出血明显少于模型组。
结论 龙葵提取物对小牛血清白蛋白所致大鼠实验性肾炎有明显的防治作用 。
关键词:龙葵提取物;　大鼠;　实验性肾炎
中图分类号:R285.5　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2009)05-1236-01
　　慢性肾炎在临床上是一种多发病 、常见病 , 较难治愈 ,临床上
以蛋白尿为常用诊断指标 ,而目前仍以激素及免疫抑制剂为主要
治疗手段。近年来 , 以中医药治疗慢性肾炎已成为研究的热点。
龙葵为茄科茄属植物龙葵 SolanumnigrumL.的全草 ,含有多种化
学成分及药理作用 , 药源广泛 ,易于采集 ,具有相当重要的生产及
研究价值。本实验采用小牛血清白蛋白所致的大鼠实验性肾炎
模型来观察龙葵提取物的药理作用 ,现将结果报道如下。
1　材料与仪器
1.1　动物 SD大鼠 , ♀♂各半 , 清洁级 , 由上海斯莱克实验动物
有限责任公司提供 , 合格证号:SCXK(沪)2007-0005。
1.2　试药 龙葵提取物(0.2 g/丸):含生药 2.278 g/g, 批号
20071115, 江苏省中医药研究院制剂室提供;济生肾气丸:6 g/
丸 , 国药准字 Z12020082, 批号 20070106,天津中新药业集团股份
有限公司达仁堂制药厂。加蒸馏水研匀 ,配成适宜浓度的混悬液
备用;小牛血清白蛋白:1g/瓶 ,批号 20070601, 上海生物化学公司
进口分装;尿蛋白试剂盒(批号 20070625)、肌酐试剂盒(批号
20070606)、尿素氮试剂盒(批号 20070606)由南京建成生物工程
公司生产。
1.3　仪器 贝克曼 DU-640紫外分光光度计 , 美国产;HH-60
型快速恒温数显水浴箱 ,常州国华电器有限公司生产;大鼠代谢
笼:苏州实验动物笼具厂生产;Axioskop2 plus高级生物显微镜
及 Axiovision图象分析处理系统:德国 ZEISS公司生产。
2　方法与结果 [ 1 ～ 3]
大鼠 60只 , ♀♂各半 , 体重 180 ～ 220 g, 随机分为 6组 , 即:
正常组 、模型组 、济生肾气丸组(2.5 g生药 /kg)、龙葵提取物高
(2.5 g生药 /kg)、中(1.25 g生药 /kg)、低剂量组(0.75 g生药 /
kg)。大鼠按组开始给药 , 正常组及模型组均灌胃给予同体积的
蒸馏水 ,共给药 35 d。于第 14天 ,除正常组外 , 其余大鼠均一次
性尾静脉注射小牛血清白蛋白 1 g/kg。给药 35 d后 , 将大鼠置
于代谢笼 ,收集 24 h尿 ,并测定尿蛋白含量 , 同时采血分离血清 ,
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 5期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL.20NO.5