全 文 ：ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
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ｄａｓａ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｓｕｐｅｒ－ｏｘｉｄｅ　ｓｃａｖｅｎｇｅｒｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏ－
ｃｈｅｍ　Ａｎａｌ，２００６，１７（１）：１５－１９．
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Ｓａｎｍｉａｏ　ｗａｎ　ａｓ　ａ　ｈｙｐｏｕｒｉｃｅｍｉｃ　ａｇｅｎｔ：ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｃ　ＸＯＤ　ａｎｄ　ｒｅｎａｌ　ｍＵＲＡＴ１ｉｎ　ｈｙｐｅｒｕｒｉｃｅ－
ｍｉｃ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｊ　Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１０，１２８：１０７－１１５．
（收稿日期：２０１４－０３－２５）
珠子参抗肝损伤药效的物质基础研究
许苗苗１，张　旋２，宋　蓓２，王　薇１，宋小妹１＊（１．陕西中医学院，咸阳　７１２０４６；２．陕西中医学院第二附属医院，咸阳　
７１２０００）
摘要：目的　探索珠子参抗肝损伤药效的物质基础。方法　利用溶剂提取法、大孔树脂法及各种色谱技术，进行珠子参有效部位
和化学成分的提取分离；采用ＣＣｌ４ 所致小鼠化学性肝损伤模型，进行珠子参药效部位及有效成分筛选。将小鼠平均分为对照
组、模型组、阳性对照组、珠子参不同剂量组，共９组。每天灌胃１次，连续７ｄ。检测血清中ＡＳＴ和ＡＬＴ含量的变化。结果　
珠子参总皂苷高剂量、中剂量可以降低ＡＬＴ和ＡＳＴ含量，珠子参多糖低剂量组与模型组比较也可以降低ＡＬＴ和ＡＳＴ的含量，
而总皂苷高剂量有显著作用；竹节参皂苷Ⅳａ各剂量组、人参皂苷Ｒｏ中、低剂量组均能降低 ＡＬＴ和 ＡＳＴ的含量，与模型组对
比，差异有统计学意义，竹节参皂苷Ⅳａ低剂量效果显著。结论　珠子参总皂苷为珠子参抗肝损伤的有效部位，主要化学成分竹
节参皂苷Ⅳａ为其抗肝损伤的主要有效成分。
关键词：珠子参；总皂苷；总多糖；竹节参皂苷Ⅳａ；人参皂苷Ｒｏ
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０５．０１６
中图分类号：Ｒ９６５　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０５－０４８６－０４
Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　ｉｎ
ａｎｔｉ－ｈｅｐａｔｉｃ　ｉｎｊｕｒｙ
ＸＵ　Ｍｉａｏｍｉａｏ１，ＺＨＡＮＧ　Ｘｕａｎ２，ＳＯＮＧ　Ｂｅｉ　２，ＷＡＮＧ　Ｗｅｉ　１，ＳＯＮＧ　Ｘｉａｏｍｅｉ　１＊（１．Ｓｈａａｎｘｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｘｉａｎ－
ｙａｎｇ　７１２０４６，Ｃｈｉｎａ；２．ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｓｈａａｎｘｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｘｉａｎｙａｎｇ　７１２０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　ｉｎ　ａｎｔｉ－ｈｅｐａｔｉｃ　ｉｎｊｕｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｍｐｏｓｉ－
ｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ａｎｄ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｂｙ　ｍａｃｒｏｐｏｒｏｕｓ　ｒｅｓｉｎ　ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ
ｓｃｒｅｅｎｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｍｉｃｅ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　ａｃｕｔｅ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ．Ｔｈｅ　ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｎｉｎｅ　ｇｒｏｕｐｓ，ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ，ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｐｏｓｉ－
ｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ，ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ａｎｄ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　ｇｒｏｕｐ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ，ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｌｏｗ－ｄｏｓｅ．Ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ
ＡＬＴ，ＡＳＴ　ｗｅｒｅ　ｅｘａｍｉｎｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｒｕｇｓ　ｏｒａｌｙ　ｆｏｒ　７ｄａｙｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ
ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ａｎｄ　ｍｅｄｉｕｍ　ｄｏｓｅ　ａｎｄ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　ｇｒｏｕｐ　ｗｉｔｈ　ｌｏｗ－ｄｏｓｅ　ｃｏｕｌｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｅｃｒｅａｓｅ
ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＡＬＴ，ＡＳＴ；ｃｈｉｋｕｓｅｔｓｕｓａｐｏｎｉｎⅣａ　ａｌ－ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ　Ｒｏ　ｗｉｔｈ　ｍｅｄｉｕｍ　ａｎｄ　ｌｏｗ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ　ｃｏｕｌｄ　ｓｉｇｎｉｆｉ－
ｃａｎｔｌｙ　ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡＬＴ，ＡＳＴ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ａｎｄ　ｃｈｉｋｕｓｅｔｓｕｓａｐｏｎｉｎⅣａ　ｗｅｒｅ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｐａｒｔｓ　ａｎｄ
ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｆｏｒ　ａｎｔｉ－ｈｅｐａｔｉｃ　ｉｎｊｕｒｙ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ；ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｃｈｉｋｕｓｅｔｓｕｓａｐｏｎｉｎⅣａ；ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ　Ｒｏ
６８４ 西北药学杂志　２０１４年９月　第２９卷　第５期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
基金项目：国家自然科学基金项目（编号：８１１０２８０５／Ｈ２８０４）；陕
西省科技统筹创新工程项目（编号：２０１１ＫＴＣＱ
０３－０２）；陕西省教育厅专项科研计划项目（编号：
２０１０ＪＫ４９０）；陕西省教育厅省级重点实验室科
研与建设计划项目（编号：０９ＪＳ０１６）
作者简介：许苗苗，女，在读硕士研究生
＊通信作者：宋小妹，女，博士，教授
　　肝脏是人体内最大的实质器官，结构与功能复
杂，易受多种病原体、毒物和免疫病理危害。当ＣＣｌ４
进入肝细胞后，使线粒体膜的脂质溶解，从而影响线
粒体的结构和功能，使酶蛋白质合成减少，导致酶被
破坏，进而影响代谢功能和能量的生成，致使肝细胞
变性、坏死［１］。珠子参为五加科人参属植物珠子参
Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ．ｖａｒ．ｍａｊｏｒ（Ｂｕｒｋ．）
Ｃ．Ｙ．Ｗｕ　ｅｔ　Ｋ．Ｍ．Ｆｅｎｇ或羽叶三七Ｐａｎａｘ　ｊａ－
ｐｏｎｉｃｕｓ　Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ．ｖａｒ．ｂｉｐｉｎｎａｔｉｆｉｄｕｓ（Ｓｅｅｍ．）Ｃ．
Ｙ．Ｗｕ　ｅｔ　Ｋ．Ｍ．Ｆｅｎｇ的干燥根茎，具有补肺、养
阴、活络、止血功效［２］。研究表明，珠子参主要化学成
分为皂苷、多糖等［３］。根据民间用药经验和现代化
学、药理学研究［４－５］，我们拟在预实验的基础上，进行
珠子参抗肝损伤作用及药效物质基础的筛选研究，为
中药保肝降酶及抗肝损伤药物的研制提供依据，并将
促进秦巴山区优势资源珠子参的合理开发利用。
１　仪器与材料
１．１　仪器　ＢＰ－１２１Ｓ电子天平（北京赛多利斯仪器
系统有限公司）；ＮＦＣＡ－１６８０型生化仪（北京华运安
特科技有限责任公司）；８０－１型离心机（常州国华电
器有限公司）。
１．２　试药　珠子参药材（购于陕西眉县槐芽镇），经
陕西中医学院药学院王继涛高级实验师鉴定，来源为
珠子参Ｐａｎａｘ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ　Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ．ｖａｒ．ｍａｊｏｒ
（Ｂｕｒｋ．）Ｃ．Ｙ．Ｗｕ　ｅｔ　Ｋ．Ｍ．Ｆｅｎｇ的干燥根茎；鲁
花花生油（山东鲁花集团）；四氯化碳（天津市红岩化
学试剂厂）；护肝片（黑龙江葵花药业股份有限公司，
批号：２００８１００２６）；丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）试剂盒
（南京建成生物工程公司产品，批号：０８１２０１）；谷氨酸
氨基转移酶（ＡＳＴ）试剂盒（南京建成生物工程公司
产品，批号：０８１２０１）。
１．３　动物　昆明种小鼠２０±２ｇ，雌雄兼用，由第四
军医大学实验动物中心提供。合格证号：陕动字
１０－１３。大鼠饲料、垫料均由第四军医大学实验动物
中心提供。
２　实验方法
２．１　提取物制备及含量测定
２．１．１　珠子参总皂苷制备及含量测定［６－９］　取珠子
参药材５００ｇ，粉碎成粗粉，加６倍量体积分数５０％
乙醇提取２次，每次１．５ｈ，合并滤液，减压浓缩至
１∶１，过预先处理好的Ｄ１０１大孔吸附树脂柱，水洗
后，继用体积分数６０％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压
回收乙醇，浓缩至干，即得珠子参总皂苷提取物。以
人参皂苷Ｒｏ和竹节参皂苷Ⅳａ为对照品，采用高效
液相色谱法进行总皂苷含量测定，结果显示总皂苷含
量为８０．９％。
２．１．２　珠子参总多糖制备及含量测定　取珠子参乙
醇提取后的药渣，挥干乙醇，继用１０倍量水提取２次，
每次２ｈ，合并滤液，浓缩至１∶１，加乙醇１　４００ｍＬ调
整滤液乙醇体积分数为７０％，搅拌均匀，放置２４ｈ，
滤取沉淀，干燥，得珠子参多糖提取物。以葡萄糖为
对照，采用硫酸－蒽酮法测定多糖含量，结果显示，总
多糖提取物中多糖质量分数为５０．６％。
２．１．３　竹节参皂苷Ⅳａ、人参皂苷Ｒｏ制备及含量测
定　总皂苷经硅胶色谱、凝胶色谱等方法分离得到，
核磁共振波谱技术鉴定结构，高效液相色谱法测定含
量，结果显示，各单体成分含量均大于９８％。
２．２　珠子参抗肝损伤有效部位的筛选　取昆明种小
鼠，雌雄各半，体质量为２０±２ｇ，共９０只。将小鼠随
机分成９组，即对照组、模型组、阳性对照组（护肝片
１．０５ｇ·ｋｇ－１，临床人用量１２片／ｄ）、珠子参总皂苷
高剂量组（２００ｍｇ·ｋｇ－１）、珠子参总皂苷中剂量组
（１００ｍｇ·ｋｇ－１）、珠子参总皂苷低剂量组（５０ｍｇ·ｋｇ－１）、
珠子参多糖高剂量组（２００ｍｇ·ｋｇ－１）、珠子参多糖
中剂量组（１００ｍｇ·ｋｇ－１）和珠子参多糖低剂量组
（５０ｍｇ·ｋｇ－１）。每天灌胃１次，连续７ｄ。末次给
药２４ｈ后，除对照组腹腔注射０．０１ｍＬ·ｇ－１花生油
溶液外，其他各组均按０．０１ｍＬ·ｇ－１腹腔注射体积
分数０．１％ＣＣｌ４ 花生油溶液。禁食１２ｈ后摘眼球取
血，离心，取血清。按试剂盒说明测定血清中ＡＳＴ和
ＡＬＴ的含量［１０］。
２．３　珠子参抗肝损伤有效成分的筛选　取昆明种小
鼠，雌雄各半，共９０只。将９０只小鼠随机分成９组，
即对照组、模型组、阳性对照组（护肝片１．０５ｇ·ｋｇ－１，
临床人用量 １２ 片／ｄ）、人参皂苷 Ｒｏ 高剂量组
（１００ｍｇ·ｋｇ－１）、人参皂苷Ｒｏ中剂量组（５０ｍｇ·ｋｇ－１）、
人参皂苷Ｒｏ低剂量组（２５ｍｇ·ｋｇ－１）、竹节参皂苷
Ⅳａ高剂量组（１００ｍｇ·ｋｇ－１）、竹节参皂苷Ⅳａ中剂
量组（５０ｍｇ·ｋｇ－１）、竹节参皂苷Ⅳａ低剂量组
（２５ｍｇ·ｋｇ－１）。同２．２项下方法进行筛选。
３　实验结果
３．１　珠子参抗肝损伤有效部位的筛选结果　与对照
组比较，ＣＣｌ４ 模型组小鼠 ＡＬＴ和 ＡＳＴ含量显著升
高，说明ＣＣｌ４ 小鼠急性肝损伤模型造模成功。由于
肝脏是富含酶的脏器，在肝内 ＡＬＴ和 ＡＳＴ主要分
布于细胞浆和线粒体中。在肝脏组织受损时，酶从细
７８４西北药学杂志　２０１４年９月　第２９卷　第５期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
胞内逸出进入血液，致使血清中ＡＬＴ和ＡＳＴ增高。
因此，肝组织ＡＳＴ和ＡＬＴ活性下降及血清ＡＳＴ和
ＡＬＴ活性升高为肝功能受损的特异性指标。结果表
明，珠子参皂苷高剂量、中剂量可以降低 ＡＬＴ 和
ＡＳＴ含量，与模型组比较，差异有统计学意义。因
此，认为珠子参总皂苷具有一定的保肝作用，为珠子
参的保肝降酶的主要有效部位。此外，珠子参多糖低
剂量组与模型组比较，也可以降低 ＡＬＴ和 ＡＳＴ的
含量。结果见表１。
表１　珠子参抗肝损伤有效部位筛选结果
Ｔａｂ．１Ｔｈｅ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｐａｒｔ　ｏｆ　Ｐａｎａｘ　ｊａ－
ｐｏｎｉｃｕｓ　ｉｎ　ａｎｔｉ－ｈｅｐａｔｉｃ　ｉｎｊｕｒｙ
组别
给药剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
ＡＬＴ／Ｕ·Ｌ－１　 ＡＳＴ／Ｕ·Ｌ－１
对照组 ５７．２１±１９．７４＊＊ １２８．８６±１９．０９＊＊
模型组 ２２４．５３±６４．８４　 １８３．６１±３７．０１
珠子参皂苷高剂量组 ２００　 ８９．５５±２３．５７＊＊ １１８．８６±５０．９０＊＊
珠子参皂苷中剂量组 １００　 １０１．０５±７８．９１＊＊ １３６．７２±２９．０９＊
珠子参皂苷低剂量组 ５０　 １２８．８６±３６．８８＊ １４１．２０±２８．５５＊
珠子参多糖高剂量组 ２００　 １８２．６１±５７．１９　 １９４．０１±５２．８３
珠子参多糖中剂量组 １００　 １７７．６６±６６．５９　 １６９．３０±２７．２６
珠子参多糖低剂量组 ５０　 １２５．６７±４８．８８＊ １４２．５２±２９．４３＊＊
阳性对照组 １．０５ｇ·ｋｇ－１　１０５．９８５±９３．７５＊＊ １２８．２４±４８．８３＊
　注：与模型组比较＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１。
３．２　珠子参抗肝损伤有效成分的筛选结果　与对照
组比较，ＣＣｌ４ 模型组小鼠 ＡＬＴ和 ＡＳＴ［１１］含量显著
升高，说明ＣＣｌ４ 小鼠急性肝损伤模型造模成功。竹
节参皂苷Ⅳａ各剂量组均能降低 ＡＬＴ和 ＡＳＴ的含
量，与模型组对比，差异有统计学意义；人参皂苷Ｒｏ
中剂量和低剂量能降低 ＡＬＴ和 ＡＳＴ的含量，与模
型组对比，差异有统计学意义。结果见表２。
表２　竹节参皂苷Ⅳａ、人参皂苷Ｒｏ抗急性肝损伤效果
Ｔａｂ．２Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｈｉｋｕｓｅｔｓｕｓａｐｏｎｉｎⅣａ　ａｎｄ　ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ　Ｒｏ　ｏｎ
ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｗｉｔｈ　ａｃｕｔｅ　ｌｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ
组别
给药剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
ＡＬＴ／Ｕ·Ｌ－１　 ＡＳＴ／Ｕ·Ｌ－１
对照组 ５７．５７±２４．５１＊＊ １１４．１１±２５．４８＊＊
模型组 ２４９．２５±２８．６１　 ２３８．２２±３８．７１
竹节参皂苷Ⅳａ高剂量组 ２００　 １７３．５０±７５．８５＊ １６７．００±７３．５２＊
竹节参皂苷Ⅳａ中剂量组 １００　 １５７．２５±４３．７１＊＊ １８０．３３±５４．９０＊
竹节参皂苷Ⅳａ低剂量组 ５０　 １５４．５７±２４．６０＊＊ １６１．４４±４５．７９＊＊
人参皂苷Ｒｏ高剂量组 ２００　 ２１４．２０±５９．４０　 ２２８．６６±５６．９４
人参皂苷Ｒｏ中剂量组 １００　 １９８．６６±７６．２５＊ １９１．２８±４４．５１＊
人参皂苷Ｒｏ低剂量组 ５０　 １９９．２０±３３．３１＊ １５１．８０±５１．２７＊＊
阳性对照组 １．０５ｇ·ｋｇ－１１７１．２８±３２．５４＊＊ １７２．００±４９．５９＊＊
　注：与模型组比较＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１。
４　讨论
基于对太白楤木［１２］、三七［１３］等中药材总皂苷成
分的降酶保肝等作用的研究，我们在对珠子参保肝降
酶药效研究的基础上，进行了珠子参总皂苷提取物和
总多糖提取物的抗肝损伤作用的研究，结果显示，珠
子参总皂苷具有一定保肝降酶作用，为珠子参的主要
有效部位。此外，珠子参多糖低剂量组与模型组比较，
也可以降低ＡＬＴ和ＡＳＴ的含量，但与珠子参总皂苷相
比作用较弱，因而不是抗肝损伤的主要有效部位。
由筛选结果可知，珠子参总皂苷具有一定的抗肝
损伤活性，为了探索其有效成分，进一步对从珠子参
总皂苷中分离得到的２种主要皂苷成分竹节参皂苷
Ⅳａ和人参皂苷Ｒｏ进行降酶活性筛选，结果显示，竹
节参皂苷Ⅳａ各剂量组均能降低 ＡＬＴ和 ＡＳＴ的含
量，与模型组对比，差异有统计学意义；人参皂苷Ｒｏ
中剂量和低剂量能降低 ＡＬＴ和 ＡＳＴ的含量，与模
型组对比差异有统计学意义。人参皂苷Ｒｏ虽有作
用但效果比竹节参皂苷Ⅳａ弱，故认为竹节参皂苷Ⅳａ
为主要有效成分。但从直观分析来看，２种单体成分降
酶效果并没有总皂苷的降酶效果强，这也从某方面说明
了中药多组分、多靶点、多途径发挥药效的作用特点。
由研究结果可知，珠子参总皂苷为珠子参抗肝损
伤的有效部位，主要化学成分竹节参皂苷Ⅳａ，为其抗
肝损伤的主要有效成分。由于中药在抗肝损伤与肝
纤维化方面有广阔的应用前景，从天然药物中发掘抗
肝损伤、肝纤维化药物已成为热点［１］。因此，本实验
的研究结果为珠子参抗肝损伤作用机制的研究及以
珠子参为主的抗肝损伤新产品开发奠定了基础，从而
促进秦巴山区特色资源的开发利用。
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８８４ 西北药学杂志　２０１４年９月　第２９卷　第５期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
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（收稿日期：２０１４－０５－１５）
丹参滴注液对ＱＳＧ－７７０１细胞的毒性研究
吴　涓１，朱丹凤２，帅维维２，程建明２＊（１．南京市胸科医院，南京　２１００２９；２．南京中医药大学，南京　２１００４６）
摘要：目的　研究丹参滴注液对人肝细胞的毒性，为药品的安全性评价提供参考依据。方法　对人肝细胞ＱＳＧ－７７０１加样培养，
收集２４，３６和４８ｈ细胞上清液，分别检测ＡＬＴ、ＡＳＴ和ＬＤＨ的含量，将所得的各种酶活力的单位与《中国药典》规定的酶活力
范围比较，若在范围之内则为无毒性或毒性较小；若超过范围，则表示毒性较大。结果　细胞株的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＬＤＨ实验数据均
在《中国药典》规定的安全范围内。结论　在临床用量５０倍内，丹参滴注液的肝毒性较小。
关键词：丹参滴注液；人肝细胞；毒性实验
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０５．０１７
中图分类号：Ｒ９６５　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０５－０４８９－０３
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｄａｎｓｈｅｎ　Ｄｒｉｐｐｉｎｇ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ＱＳＧ－７７０１ｃｅｌ
ＷＵ　Ｊｕａｎ１，ＺＨＵ　Ｄａｎｆｅｎｇ２，ＳＨＵＡＩ　Ｗｅｉｗｅｉ　２，ＣＨＥＮＧ　Ｊｉａｎｍｉｎｇ２＊（１．Ｎａｎｊｉｎｇ　Ｃｈｅｓｔ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１００２９，Ｃｈｉｎａ；２．Ｎａｎｊｉｎｇ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１００４６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｄａｎｓｈｅｎ　Ｄｒｉｐｐｉｎｇ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｈｕｍａｎ　ｌｉｖｅｒ　ｃｅｌｓ，ＱＳＧ－７７０１，ａｎｄ　ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ
ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｒｕｇ　ｓａｆｅｔｙ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ａｄｄｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｌｉｖｅｒ　ｃｅｌｓ　ＱＳＧ－７７０１，ｔｈｅ　ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｃｕｌｖａｔｅｄ　ｆｏｒ
２４，３６ａｎｄ　４８ｈｏｕｒｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｅｌｓ　ｗａｓ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＡＬＴ，ＡＳＴ　ａｎｄ　ＬＤＨ．Ｔｈｅ　ｒｅ－
ｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｗｅｒｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ　ｔｏ　ｃｏｎｆｉｒｍ　ｔｈｅ　ｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｄａｎｓｈｅｎ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．
Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｄａｔａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｅｌ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｗｅｒｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓａｆｅｔｙ　ｒａｎｇｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｄａｎｓｈｅｎ　Ｄｒｉｐｐｉｎｇ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｈａｓ　ｌｉｔｔｅｒ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ
ｆｏｒ　ｈｕｍａｎ　ｌｉｖｅｒ　ｗｉｔｈｉｎ　ｔｈｅ　５０ｆｏｌｄｓ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｕｓｅ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄａｎｓｈｅｎ　Ｄｒｉｐｐｉｎｇ　Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ；ｈｕｍａｎ　ｌｉｖｅｒ　ｃｅｌｓ；ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｔｅｓｔ
作者简介：吴涓，女，主管药师，硕士研究生
＊通信作者：程建明，男，博士，副研究员
　　丹参滴注液是由丹参一味药制成，现代药理和临
床研究表明，丹参滴注液对心血管系统、血液系统、消
化系统等方面均有药理作用［１］。丹参注射液能较好
地缓解冠心病、心绞痛患者的临床症状及改善心肌供
血状况［２］。
但临床出现了一些不良反应，如心慌、剧烈头痛、
急性喉头水肿、全身性黄疸、哮喘、药疹、心跳停止、皮
肤瘙痒、过敏性休克等［３－９］。
王娟等［１０］比较了丹参注射液与丹参素钠对小鼠
的急性毒性实验，得出静脉注射丹参注射液组全部死
亡，病理学检查，肝细胞肿胀，肝血窦缩小，血窦充血；
杨解人等［１１］实验发现高剂量组部分动物有不同程度
的肝脂肪变性及肝细胞水肿，即丹参高剂量长期应用
对Ｂｅａｇｌｅ犬肝细胞有一定毒性；张跃萍［１２］临床发现
复方丹参注射液引起的药物性肝炎１例。即丹参注
射液临床使用出现肝毒性，为了验证丹参滴注液是否
具有肝毒性，本实验采用常用的人肝细胞ＱＳＧ－７７０１
进行实验，这样不仅避免了个体差异性，而且更贴近
临床，使获得的实验结果更可靠。据文献报道，目前
丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）是反映肝受损的敏感指标
之一，谷草转氨酶（ＡＳＴ）是反映肝受损较重的指标。
当肝细胞受损较轻时，仅使细胞膜通透性增加，胞浆
内ＡＬＴ和ＡＳＴ释放入血，而线粒体内ＡＳＴ则不释
放；只有在肝细胞严重受损时，线粒体ＡＳＴ才释放入
血；所以当肝细胞受损较轻时以 ＡＬＴ为主，当肝细
胞受损较严重时，以 ＡＬＴ 和 ＡＳＴ 为主［１２］。采用
ＡＬＴ和ＡＳＴ活性来评定肝细胞损伤程度时，一般与
乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）一并使用［１３］。因此，本实验检测
了这３种指标，通过比较３种指标的数据结果来综合
判断丹参滴注液的肝细胞毒性，得出的结果更加可靠。
１　仪器与材料
１．１　仪器　Ｓｐｅｃｔｒａ　Ｍａｘ　１９０型酶标仪（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｄｅｖｉｃｅｓ公司）；ＴＧＬ－１６Ｇ型离心机（上海安亭科学仪
９８４西北药学杂志　２０１４年９月　第２９卷　第５期