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作 者 ：张雪瑶Organ-单位: 福建农林大学

期 刊 ：福建农林大学 2012年 12期 页码：97

关键词：实时荧光定量PCR；人胰岛素BCA基因；酶联免疫吸附试验；配对出耳；发酵条件优化；

摘 要 ：在实验室利用农杆菌介导法转化人胰岛素BCA基因成功的基础上，根据潮霉素抗性实验和PCR检测结果选取5个银耳转基因菌株进行人胰岛素BCA基因的表达分析，并对转基因菌株的配对出耳和发酵条件进行研究。实验结果如下： 采用qRT-PCR绝对定量法，以3-磷酸甘油醛脱氢酶基因（GPD）作为内参基因，构建外源目的基因BCA和内参基因GPD的标准质粒并绘制标准曲线。其中，内参基因GPD标准曲线为y=-3.349x+40.25，R~2=0.998，PCR扩增效率为98.89%；外源目的基因BCA标准曲线为y=-3.379x+37.75，R~2=0.995，PCR扩增效率为97.67%。根据标准曲线和各样...

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