作 者 ：贺立燕Organ-单位: 南京林业大学
期 刊 ：南京林业大学 2011年 05期 页码：90
关键词：漆酶；基因克隆；表达条件；定点突变；杂色云芝；
摘 要 ：采用基因工程技术提高漆酶产量和改善其酶学特性是降低漆酶使用成本和提高酶解效率的有效途径。论文以杂色云芝为出发菌株,克隆、表达和改造了漆酶基因,并建立了适宜的表达条件。主要研究结果如下： (1)通过RT-PCR克隆出两个漆酶基因lccl和lcc2。其中lccl基因全长1,497 bp,lcc2基因全长1,515 bp。lccl和lcc2氨基酸水平同源性为76.59%。 (2)成功构建了漆酶毕赤酵母基因工程菌KM71H/lcc1和KM71H/lcc2。最高表达水平分别达到530 U/L、580 U/L。酶学性质研究表明,lccl最适温度为50℃,lcc2最适温度为60℃,二者在30℃、...