作 者 :苏何玲;肖雅伦;谭燕莲;梁斌;谷云艳;刘永明;吴耀生;
期 刊 :安徽农业科学 2016年 32期 页码:142-146
关键词:佛手瓜;鲨烯合酶;基因克隆;结构分析;
摘 要 :[目的]克隆佛手瓜鲨烯合酶(SQS)基因,并基于克隆的SQS序列分析该酶的分子结构,为佛手瓜生物活性成分的利用提供理论依据。[方法]根据SQS基因5‘末端保守序列和3‘race方法扩增的佛手瓜SQS基因3‘末端序列设计佛手瓜SQS基因克隆引物。扩增的佛手瓜SQS基因片段插入p GEM-T Easy Vector后经DNA测序。应用生物信息学方法分析克隆序列的开放阅读框架(ORF)、酶蛋白的疏水性/亲水性和蛋白质磷酸化位点,预测酶蛋白的二级结构、结构域、三级结构和跨膜区。以布朗葡萄藻为outgroup,应用MEGA 5.0进行UPGMA算法构建系统树,并进行1 000次的Bootstrap测试。...