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碱预处理对麦草秸秆酶解的影响



全 文 :第32卷 第2期               陕西科技大学学报           Vol.32No.2
 2014年4月            Journal of Shaanxi University of Science &Technology       Apr.2014
* 文章编号:1000-5811(2014)02-0011-04
碱预处理对麦草秸秆酶解的影响
罗 清1,赵 登1,张安龙1,王光艳2
(1.陕西科技大学 轻工与能源学院 陕西省造纸技术及特种纸品开发重点实验室,陕西 西安 710021;2.南
京林业大学 江苏省制浆造纸科学与技术重点实验室,江苏 南京 210037)
摘 要:对麦草秸秆进行了碱预处理和酸性木聚糖酶后处理,分析了不同碱用量、温度对麦草
浆的聚戊糖含量和得率的影响.结果表明,在碱预处理用碱量7%,反应温度50℃,反应时间
60min和酶后处理时pH=5.5,木聚糖酶用量600IU·g-1,反应温度50℃,酶解时间为120
min的条件下,处理后麦草浆聚戊糖含量有较好的降解效果,同时麦草浆得率达到最佳效果.
最后,用纤维质量分析仪观察纤维形态,酶处理前后和麦草原料比较,重均纤维长度减少,细小
纤维含量增加,卷曲指数增加,扭结程度增大.
关键词:木聚糖酶;麦草秸秆;碱预处理
中图法分类号:TS71+1    文献标识码:A
Effects of alkali pretreatment of wheat straw
pulp on its enzymatic hydrolysis
LUO Qing1,ZHAO Deng1,ZHANG An-long1,WANG Guang-yan2
(1.Colege of Light Industry and Energy,Shaanxi Province Key Laboratory of Papermaking Technology and
Specialty Paper,Shaanxi University of Science &Technology,Xi′an 710021,China;2.Jiangsu Province Key
Laboratory of Pulp and Paper Science and Technology,Nanjing Forestry University,Nanjing 210037,China)
Abstract:Alkali pretreatment and acidic xylanase treatment of wheat straw were performed.
The analysis of the effect of different dosage of alkali,temperature on wheat straw pulp pen-
tosan content and yield were discussed.The results showed:when alkali pretreatment with
alkali content of 7%,the reaction temperature was 50℃,the reaction time was 60min and
enzyme treatment with pH=5.5,xylanase dosage of 600IU·g-1,the reaction temperature
was 50℃,enzymatic hydrolysis time was 120min conditions,wheat straw pulp pentosan con-
tent and pulp yield achieved the best effect.Finaly,fiber morphology before and after enzyme
treatment was observed by fiber quality analyzer,comparing alkali treatment and enzyme
treatment and wheat straw,weight-average fiber length is reduced;fines content,curl index
and kink level were increased.
Key words:xylanase;wheat straw;alkali pretreatmen
* 收稿日期:2014-01-22
基金项目:陕西省科技厅自然科学基础研究计划项目(2010JM2012);陕西省教育厅科研计划项目(2010JS053);陕西科技大学研究
生创新基金项目
作者简介:罗 清(1973-),男,陕西西安人,讲师,在读博士研究生,研究方向:植物纤维资源高效利用
陕西科技大学学报 第32卷
0 引言
木质纤维素原料作为丰富而廉价的可再生资
源,已经逐渐成为制取生物乙醇的有效途径.但由
于木质纤维原料的生物构造和化学组成等原因,必
须经过有效的预处理以提高酶水解转化效率[1,2].
草类原料结构较木材疏松,灰分和二氧化硅含量较
高,不宜采用强烈的预处理条件.
木聚糖酶是能催化降解木聚糖的一类半纤维
素酶,应用木聚糖酶处理麦草浆料,其直接作用就
是降解浆中的木聚糖,使浆中半纤维素的含量降
低,并使纤维素细胞壁结构变得松弛,同时使浆中
残余木素连接的半纤维素降解,破坏了LCC,形成
脱木素或有利于脱木素的状态[3,4].因此本文就不
同碱用量和温度的条件下,对麦草秸秆的化学组成
和木聚糖酶的酶解效率进行了研究,为实现生物质
精炼理念在制浆造纸行业中的应用提供参考.
1 实验部分
1.1 实验原料、仪器和试剂
(1)原料:实验所用麦草取自陕西某造纸厂.碱
处理、酶处理和纤维形态分析使用时,将自然风干
的麦草切成2~3cm;纤维化学成分分析检测时,
将麦草用植物粉碎机粉碎,筛出40~60目的部分.
(2)仪器:电热恒温水浴锅(HH-Z);电热蒸煮
锅(ZQS1);电子分析天平(BL310);电热恒温鼓风
干燥箱(DHG-9053A);纤维质量分析仪(LDA02).
(3)主要试剂:上海丹尼悦生物科技有限公司
的商业用酸性木聚糖酶,该产品呈米色,粉末状,酶
活力为12 000IU·g-1,适宜pH为5~6,适宜温
度为50℃~60℃,使用时需适当稀释.
1.2 实验方法
1.2.1 麦草秸秆的碱处理
分别称取一定量实验1.1中的麦草原料置于
250mL具塞磨口锥形瓶中,按照质量分数为1%、
3%、5%、7%加入NaOH溶液,固液比1∶10,待试
样充分湿润后,置于(50±0.5)℃恒温水浴振荡器
中,转速140r/min,1h后,对麦草进行抽滤分离
处理,将试样残渣用去离子水洗涤至中性,干燥至
恒重.取样对聚戊糖含量和麦草得率进行检测分
析.
1.2.2 麦草秸秆的酶处理
取一定量按章节1.2.1所述方法碱处理后的
原料置于100mL碘量瓶中,加入蒸馏水后微沸30
min,冷却到室温,用稀 HCl调pH为5.5左右,加
入酸性木聚糖酶用量600IU·g-1,补加蒸馏水至
反应体系的总体积为60mL,摇匀置于(50±0.5)
℃恒温水浴振荡器中,转速为165r/min下酶解作
用120min.反应结束后微沸30min进行酶灭火处
理,冷却至室温后用去离子水洗涤处理试样至中
性,105℃下干燥至恒重,取样进行聚戊糖含量和
麦草得率检测.
1.3 检测方法
麦草原料水分含量、灰分含量、综纤维素含量、
木素含量和聚戊糖含量的测定方法均按国标(GB/
T2677.2-1993)、(GB/T2677.3-1993)、(GB/
T2677.10-1995)、(GB/T2677.8-1994)、(GB/
T2677.9-1994)进行检测;纤维质量分析仪采用奥
普泰斯特(Optest)观察纤维形态.
1.4 聚戊糖得率的计算
聚戊糖得率指原料经预处理后未被降解的聚
戊糖占原料中聚戊糖总量的质量百分比,计算方法
为:
聚戊糖含量=
原料聚戊糖含量-处理后聚戊糖含量
原料聚戊糖含量 ×100%
2 结果与讨论
2.1 麦草原料的化学成分
实验所用麦草原料按国标进行检测分析,主要
化学成分如表1所示.
表1 麦草原料主要化学成分含量
原料
水分含量
/%
灰分/%
综纤维素
/%
木素/% 聚戊糖/%
麦草 7.748 9  5.934 5  69.486 9 12.556 2  25.26
2.2 用碱量对酶处理前后聚戊糖得率的影响
不同用碱量对麦草浆进行碱预处理和酶后处
理,用碱量对酶处理前后聚戊糖含量的影响见图1
所示.
由图1可知,酶处理前后聚戊糖的含量随着用
碱量的增加均在减少,且聚戊糖含量在酶处理后下
降趋势明显.在碱预处理条件下聚戊糖含量下降较
平缓,而在用碱量为7%时,酶处理后聚戊糖含量
有较大的下降趋势,聚戊糖含量减少了近50%.聚
戊糖含量下降说明碱预处理中碱液与纤维原料反
应后脱除一定量的半纤维素[5-7];酶处理后麦草秸
秆聚戊糖含量下降明显,说明 NaOH 预处理提高
了木聚糖酶与底物的可及度,提高了酶解效率,促
·21·
第2期 罗 清等:碱预处理对麦草秸秆酶解的影响
图1 用碱量对聚戊糖含量的影响
进了麦草秸秆的酶解,聚戊糖含量下降.因此,用碱
量在7%时聚戊糖含量下降较快,即酶解糖量及糖
化率较大.
2.3 用碱量对酶处理前后麦草浆得率的影响
不同用碱量对麦草进行碱预处理和酶后处理,
用碱量对酶处理前后麦草浆得率的影响见图2.
图2 用碱量对麦草浆得率的影响
由图2可知,随着用碱量的增加,酶处理前后
麦草浆的得率均在减少,且麦草浆得率在酶处理后
明显小于酶处理前的.在不同碱预处理条件下,酶
处理后比酶处理前麦草浆得率少5%左右.说明在
碱预处理过程中,适当提高氢氧化钠溶液的浓度有
助于浆料中半纤维素及低分子质量纤维素的溶解,
有利于纤维素的充分润胀[8];当较多的半纤维素溶
出后,添加木聚糖酶使水解达到较高的反应速率,
半纤维素的酶解速度加快,麦草浆得率下降.因此,
结合聚戊糖含量和麦草浆得率的综合考虑,用碱量
在7%时较好.
2.4 反应温度对聚戊糖含量的影响
在碱用量为7%时,不同温度下对麦草进行碱
预处理和酶后处理.反应温度对酶处理前后聚戊糖
含量的影响见图3.
由图3可知,酶处理前随着温度的升高,聚戊
图3 反应温度对酶处理前后
聚戊糖含量的影响
糖含量先下降较快,在温度大于50℃时,聚戊糖含
量的减少趋势基本比较平缓;酶处理后麦草聚戊糖
含量一直减少,在80℃时酶处理后麦草秸秆聚戊
糖含量减少了近50%.说明半纤维素在相对温和
的条件下就有较快的溶出,这因为麦草纤维结构较
为疏松,半纤维素与木素纤维素的结合力较弱,这
也说明了麦草的脱木素选择性差.当温度大于50
℃时,碱处理过程对聚戊糖降解的促进作用极为有
限,聚戊糖含量的减少趋势基本比较平缓.因此,综
合考虑酶处理前后,反应温度为50℃时为最佳条
件.
2.5 反应温度对麦草得率的影响
在碱用量为7%时,不同温度下对麦草进行碱
预处理和酶后处理.反应温度对酶处理前后麦草浆
得率的影响见图4.
图4 反应温度对酶处理前后
麦草浆得率的影响
由图4可知,随着反应温度的增加,酶处理前
后麦草浆的得率均在减少,且麦草浆得率在酶处理
后明显小于酶处理前的.随着温度的升高,碱预处
理过程中麦草浆得率的下降趋势比较缓和,麦草浆
得率下降了5%,可以看出温度升高,碱预处理浆
得率逐渐下降,可能木质素脱除并未显著增加;酶
·31·
陕西科技大学学报 第32卷
处理后麦草浆得率下降较明显,而且温度越高麦草
浆得率下降越快,但得率下降并不都是聚戊糖酶解
作用造成的,木聚糖酶处理在酸性条件作用下也会
除去灰份、铁质,因为酸能够溶解铁质,还可以去除
灰份,酸处理中的 H+将 Mg2+或Ca2+交换掉,重
新变成 -COOH(羧基),即降低了成品的灰
份[9-12],麦草浆得率下降.考虑到麦草浆得率不能
太低,温度应该在50℃时酶处理前后麦草浆得率
都相对较好.
2.6 酶处理前后麦草纤维形态分析
在碱用量为7%,反应温度为50℃时,用奥普
泰斯特纤维质量分析仪观察处理后浆料的纤维形
态.原料和酶处理前后麦草浆纤维的形态分析如表
2所示.
表2 酶处理前后纤维形态分析
序号
重均长度
/mm
细小纤维
含量/%
卷曲指数
/mm
扭结
扭结指数
/(1/mm)
总扭结
角度/(°)
原料 0.599  24.44  0.020  0.08  1.9
酶处理前 0.528  31.1  0.022  0.1  2.4
酶处理后 0.442  40.8  0.03  0.26  5.4
  由表2的数据可知,酶处理前后麦草浆料的纤
维重均长度均减少,酶处理后比酶处理前的重均长
度相对减少了14.45%;酶处理前后的细小纤维含
量、卷曲半径、扭结指数和总扭结角度相对麦草原
料均有所增加.原因可能是碱处理和酶处理后使得
纤维的碳水化合物聚合度降低,降解后产生部分纤
维碎片,导致重均纤维长度降低和细小纤维含量增
加.另一方面,碱处理和酶处理使得纤维细胞壁的
化学成分溶出,提高了纤维细胞壁的通透性,纤维
吸水润张能力增加,使得卷曲指数和扭结指数增
加[13-15].即酶处理前后和麦草原料比较,重均长度
减少,细小纤维含量增加,卷曲指数增加,扭结程度
增大.
3 结论
(1)碱预处理和酶后处理过程中,随着用碱量
的增加麦草浆的得率和聚戊糖含量都呈下降趋势.
在碱预处理用碱量7%,反应温度50℃,反应时间
60min和酶后处理时pH=5.5,木聚糖酶用量600
IU·g-1,反应温度50℃,酶解时间120min的条
件下,处理后麦草浆聚戊糖含量有较好的降解效
果,同时麦草浆得率达到了最佳效果.
(2)用纤维质量分析仪观察纤维形态,酶处理
前后和麦草原料比较,纤维重均长度减少,细小纤
维含量、卷曲指数和扭结程度均增加.
参考文献
[1]陈洪章.纤维素生物技术[M].北京:化学工业出版社,
2005.
[2]刘洪斌,王松林,张瑞霞,等.造纸节能减排技术[M].北
京:化学工业出版社,2010.
[3]鲁 杰,石淑兰.NaOH预处理刘棺物纤维素酶解特性的
影响[J].纤维素科学与技术,2004,12(1):1-6.
[4]Faaij A.Modern biomass conversion technologies[J].
Mitig Adapt Strateg Glob Change,2006,11:343-375.
[5]胡 健,曾靖山,郑炽嵩.几种非木材原料爆破法制浆的研
究[J].造纸科学与技术,2004,23(6):32-34.
[6]袁 平,余惠生,付时雨,等.纤维素酶和半纤维素酶对纤
维改性的研究进展[J].中国造纸,2001,20(5):53-57.
[7]Eiras K M,Co lodette J L.Eucalyptus kraft pulp bleach-
ing with chlorine dioxide at high temperature[J].JPPS,
2003,29(2):64-69.
[8]冯文英,李振岩,常清容.木聚糖酶的制备及其在麦草浆漂
白中的应用[J].中国造纸,2002,21(2):8-13.
[9]李忠正.禾草类纤维制浆特性及进一步发展我国非木材造
纸的对策[J].中华纸业,2006,27(2):6-8.
[10]李 科,靳艳玲,甘明哲,等.木质纤维素生产燃料乙醇的
关键技术研究现状[J].应用与环境生物学报,2008,14
(6):877-884.
[11]曾 健,陈克复,李伟伟,等.纸浆漂白前螯合预处理条件
对金属离子去除的影响[J].中国造纸学报,2009,24(2):
22-26.
[12]李海龙,陈嘉川,杨桂花,等.麦草NaOH-AQ浆ECF漂
白[J].中国造纸,2006,25(6):35-37.
[13]张学金,李友明,陈克利,等.甘蔗渣的 NaOH 预处理研
究和氧碱制浆[J].纸和造纸,2008,27(4):16-20.
[14]方 诩,秦玉琪,李雪芝,等.纤维素酶与木质素生物降解
转化的研究进展[J].生物工程学报,2010,26(7):864-
869.
[15]李宏强,陈洪章.纤维素生物转化过程工程的研究[J].生
物产业技术,2010(1):40-46.
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