全 文 ：〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 1917
世界科学技术—中医药现代化★技术应用研究
　　　收稿日期：2015-06-30
　　　修回日期：2015-08-21
＊　　 扬州大学高层次人才科研启动基金（203310068）：赶黄草化学成分研究，负责人：刘量。
＊＊　 通讯作者：刘量，女，博士，讲师，主要研究方向：天然产物化学成分与生物活性。
见血清为兰科植物脉羊耳兰 Liparis nervosa
（Thunb.） Lindl 的全草，生长于海拔 850-1 000m
的山坡阔叶林下，分布于江西、湖南、福建、台湾、广
东、广西及西南地区，具有凉血止血、清热解毒的功
效，是民间的止血要药，主治胃热吐血、肺热咯血、
肠风下血、崩漏、手术止血、创伤出血、疮疡肿毒、毒
蛇咬伤、跌打损伤等症 [1]。中药见血清的疗效确切，
在民间药用历史悠久，但关于见血清化学成分的研究
较少，现有文献主要报道从中分离得到的生物碱 [2-6]、
有机酸 [4，5] 及黄酮 [7，8] 等成分，药效物质基础尚不
明确，这限制其进一步的开发利用。本文报道了见
血清干燥带根全草 95%乙醇提取物的石油醚部位中
7种单体化合物的分离纯化方法，其中化合物 3-7为
首次从本属植物中分离得到，化合物 1-7为首次从见
血清中分离得到。
1 仪器与材料
AVANCE 600 型核磁共振仪（Bruker 公司，德
国）；HPLC 3000型高效液相色谱仪（北京创新通恒
科技有限公司）；Trace DSQ II 气相色谱 - 质谱联
用仪（Thermo 公司，美国）；Cosmosil 5C18-MS- Ⅱ
（10 mm×250 mm，5 μm）半制备色谱柱（Nacalai
Tesque公司，日本）；Sephadex LH-20色谱柱（Par-
macia Bioteck公司）；100-200 目柱色谱硅胶（批号：
0150026，青岛海洋化工厂）；200-300 目柱色谱硅
胶（批号：0120171，青岛海洋化工厂）；硅胶 H（批号：
0130518，青岛海洋化工厂）；GF254薄层色谱板（批
号：20140806，青岛海洋化工厂）；色谱甲醇（批号：
20150422，国药集团化学试剂有限公司）；萃取、分
离纯化所用有机试剂（分析纯）均为国药集团化学
试剂有限公司产品；提取所用 95% 乙醇为上海凌峰
化学试剂有限公司产品。
见血清药材采集于重庆市黔江区，经扬州大学
生物科学与技术学院淮虎银教授鉴定为兰科羊耳
蒜属植物脉羊耳兰 Liparis nervosa的干燥全草，凭证
标本（JXQ 20140205）存放于扬州大学医学院药学系
标本室。
2 提取分离
见血清干燥带根全草 10 kg，粉碎，在 85℃下回
流提取 4 次，每次 2 h，提取液减压浓缩回收溶剂，
得总浸膏 837 g。将总浸膏混悬于 10倍的蒸馏水中，
依次用等体积石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压
回收溶剂得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇
见血清石油醚部位化学成分研究＊
刘 量＊＊，殷启蒙，李 佳，童 丹，张婉菁，刘子琦，陈 璋，何 洋，沈新宇
（扬州大学医学院药学系 扬州 225009）
摘 要：目的：研究见血清石油醚部位的化学成分。方法：采用多种色谱方法进行化合物的分离纯化，
通过波谱数据及核对文献鉴定化合物的准确结构。结果：从见血清的石油醚部位分离得到 7个化合物，分
别是 Moscatin （1），山药素Ⅲ（2），香柑内酯（3），异茴芹素（4），花椒毒素（5），欧前胡素（6）和 β-谷甾醇
（7）。结论： 化合物 3-7为首次从该属植物中分离得到，化合物 1-7为首次从见血清中分离得到。
关键词：见血清 石油醚部位 分离纯化 化学成分
doi：10.11842/wst.2015.09.030　　中图分类号：R93　　文献标识码：A
2015　第十七卷　第九期　★Vol.17 No.9
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕1918
部位和水层。石油醚部位浸膏 152 g 经硅胶柱色谱
分离，用石油醚 -乙酸乙酯（5׃1→0׃100）梯度洗脱，
得到 18 个部分（Fr.1-18）；Fr.10 中析出沉淀，重
结晶得化合物 7（650 mg）；Fr.12 经硅胶柱色谱分
离，用石油醚 - 丙酮（10׃1→1׃1）梯度洗脱，得 6 个
馏分（Fr.12-1~Fr.12-6），Fr.12-6 经凝胶柱色谱，
氯仿 -甲醇（2׃1）洗脱，得到 5个馏分（Fr.12-6-1~
Fr.12-6-5），Fr.12-6-4 再经 ODS 柱色谱，70% 甲
醇洗脱，得 7个馏分（Fr.12-6-4-1~Fr.12-6- 4-7），
Fr.12-6-4-5 经半制备 HPLC 分离纯化，以 78% 甲
醇为流动性，得化合物 6（5 mg）；Fr.13 经硅胶柱
色谱分离，用石油醚 -丙酮（6׃1→0׃100）梯度洗脱，
得到 3 个馏分（Fr.13-1~Fr.13-3）；Fr.13-2 经制备
薄层分离纯化，得化合物 3（6 mg）和化合物 4、5
的混合物，该混合物再经半制备 HPLC分离纯化，以
63%甲醇洗脱得 4（12 mg），5（8 mg）；Fr.13-3 经
凝胶柱色谱分离，以氯仿 - 甲醇（2׃1）洗脱得 8 个
馏分（Fr.13-3-1~Fr.13-3-8），Fr.13-3-8 经半制备
HPLC纯化，以 60%甲醇洗脱，得化合物 2（3 mg）；
Fr.16 经硅胶柱色谱，以石油醚 - 丙酮（6׃1→1׃1）
梯 度 洗 脱，得 10 个 馏 分（Fr.16-1~Fr.16-10），
Fr.16-4经凝胶柱色谱分离，氯仿 -甲醇（2׃1）洗脱，
得 7个馏分（Fr.16-4-1~Fr.16-4-7），Fr.16-4-7 再
经半制备 HPLC 分离纯化，以 60% 甲醇洗脱，得化
合物 1（4 mg）。
3 结构鉴定
化合物 1：棕色无定形粉末，EI-MS ES+：m/z
240 [M]+。1H-NMR（Acetone-d6，600 MHz）：δ 9.53
（1H，s，5-OH），7.63（1H，d，J=8.4 Hz，H-9），7.51
（1H，d，J=8.4 Hz，H-10），7.43（1H，t，J=7.6，7.6
Hz，H-7），7.40（1H，dd，J=2.4，7.2 Hz，H-6），7.10
（1H，dd，J=2.4，7.2 Hz，H-8），7.01（1H，br. s，
H-3），7.08（1H，br. s，H-1），4.15（3H，s，H-4-
OCH3）；
13C-NMR（Acetone-d6，150 MHz）:δ 58.7
（4-OCH3），102.8（C-3），108.0（C-1），114.0（C-
4a），117.1（C-6），119.9（C-4b），121.2（C-8），
127.1（C-10），127.5（C-9），129.8（C-7），135.1
（C-8a），137.2（C-10a），155.3（C-5），156.5（C-2），
157.6（C-4）。以上数据与文献 [9] 报道基本一致，
故鉴定为 Moscatin。
化合物 2：棕色无定形粉末，EI-MS ES+：m/z 244
[M]+。1H-NMR（CD3OD，600 MHz）：δ 7.05（1H，
dd，J=7.2，7.8 Hz，H-4），6.65（1H，d，J=7.8 Hz，
H-3），6.58（1H，dd，J=2.4，7.8 Hz，H-5），6.61
（1H，br.s，H-1），6.22（1H，br.s，H-14），6.23（1H，
br.s，H-10），6.17（1H，dd，J=1.8，2.4 Hz，H-12），
2.77（2H，m，H-7），2.77（2H，m，H-8），3.70（3H，s，
13-OCH3）;
13C-NMR（CD3OD，150 MHz）：δ 39.0
（C-7），39.3（C-8），55.7（13-OCH3），100.1（C-
12），106.7（C-10），109.2（C-14），113.9（C-1），
116.5（C-3），121.0（C-5），130.4（C-4），144.8
（C-6），145.6（C-9），158.5（C-2），159.6（C-11），
162.4（C-13）。以上数据与文献 [10]报道基本一致，
故鉴定为山药素Ⅲ。
化合物 3：白色针晶，EI-MS ES+：m/z 216 [M]+。
1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ 4.27（3H，s，H-5-
OCH3），6.27（1H，d，J=9.6 Hz，H-3），7.02（1H，
br. s，H-3′），7.13（1H，s，H-8），7.59（1H，br. s，
H-2 ′），8.15（1H，d，J= 9.6 Hz，H-4）；13C-NMR
（CDCl3，150 MHz）δ: 60.1（5-OCH3），93.9（C-8），
105.0（C-3′），106.5（C-10），112.6（C-3），112.7
（C-6），139.3（C-4），144.8（C-2′），149.6（C-5），
152.7（C-9），158.4（C-7），161.2（C-2）。以上数
据与文献 [11]报道基本一致，故鉴定为香柑内酯。
化合物 4：淡黄色针晶，EI-MS ES+：m/z 246
[M]+。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ 4.19（6H，s，
H-9-OCH3，H-10-OCH3），6.31（1H，d，J=9.6 Hz，
H-3），7.01（1H，d，J=2.4 Hz，H-3′），7.64（1H，
d，J=2.4 Hz，H-2′），8.14（1H，d，J=9.6 Hz，H-4）；
13C-NMR（CDCl3，150 MHz）：δ 60.4（9-OCH3），
61.2（10-OCH3），104.6（C-3 ′），107.2（C-8a），
112.4（C-3），114.4（C-6），127.8（C-8），138.9
（C-4），143.2（C-4a），143.8 （C-5），144.6（C-2′），
149.5（C-7），160.0（C-2）。 以上数据与文献 [12]
报道基本一致，故鉴定为异茴芹素。
化合物 5：淡黄色针晶，EI-MS ES+：m/z 216
[M]+。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ 4.31 （3H，s，
H-8-OCH3），6.39（1H，d，J=9.6 Hz，H-3），6.83
（1H，d，J=2.4 Hz，H- 2′），7.37（1H，s，H-5），7.71
（1H，d，J=2.4 Hz，H- 3′），7.78（1H，d，J=9.6 Hz，
H-4）；13C-NMR （CDCl3，150 MHz）：δ 60.8（8-
OCH3），106.2（C-3′），112.4（C-5），114.3（C-3），
116.0（C-10），125.6（C-6），132.3（C-8），142.5
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕 1919
世界科学技术—中医药现代化★技术应用研究
（C-9），143.8（C-4），146.1（C-2′），147.2（C-7），
159.9（C-2）。以上数据与文献 [11] 报道基本一致，
故鉴定为花椒毒素。
化合物 6：淡黄色粉末，EI-MS ES+：m/z 270
[M]+。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）：δ 1.73 （3H，s，
H-3″-CH3），1.75（3H，s，H-3″-CH3），5.01（2H，
d，J=7.2 Hz，H-1″），5.62（1H，t，J=7.2 Hz，H-2″），
6.34（1H，d，J=9.6 Hz，H-3），6.82（1H，d，J=1.8
Hz，H-5），7.37（1H，s，H-3 ′），7.70（1H，d，J=
2.4 Hz，H- 2 ′），7.71（1H，d，J=9.6 Hz，H-4）；
13C-NMR （CDCl3，150 MHz）：δ 18.4（3″-CH3），
26.1（3″-CH 3），70.4（C- 1″），107.0（C-3 ′），
113.4 （C-5），115.0（C-3），115.8（C-10），120.0
（C-2″），125.1（C-6），131.9（C-8），140.0（C-3″），
144.1（C-9），144.6（C-4），146.9（C-2 ′），148.9
（C-7），160.8（C-2）。以上数据与文献 [11] 报道
基本一致，故鉴定为欧前胡素。
化合物 7：白色针晶。与 β- 谷甾醇对照品共同
进行 TLC 分析，在 3 种溶剂系统中展开，色谱行为
完全一致，故鉴定为 β- 谷甾醇。
4 讨论
见血清为苗族常用止血药物，在民间的药用历
史悠久，疗效确切，值得进行深入的研究。从少数民
族常用止血药中发现新的止血药物是创新药物发现
的重要途径。如具有良好的止血作用的壮药白花九
里明 [13]、彝药“麻补”[14]已引起中医药学者的关注。
本研究从见血清乙醇提取液的石油醚部位中分
离得到了菲类、联苄、香豆素及甾醇类成分，化合物
3-7 为首次从该属植物中分离得到，化合物 1-7 为
首次从见血清中分离得到。其中，1 曾在同属植物
长叶羊耳蒜 L.nakaharai [15]中分离得到，2 曾在同属
植物香花羊耳蒜 L. odorata [16]及 L.nakaharai [15] 中
分离得到，1和 2分别属于菲类和联苄类，这两类是
兰科特征性成分，具有多种生物活性。3-6为香豆
素类，这类成分曾在兰科石斛属植物中分离得到 [17]。
羊耳蒜属和石斛属均属于兰科兰亚科，两者亲缘关系
较近，本实验结果为化学分类学提供了一定的分类学
证据，同时也丰富了对见血清的化学成分的认识。本
课题组将继续开展对见血清乙醇提取物大极性部位
化学成分的系统研究，为其深入开发提供参考依据。
1 国家中医药管理局中华本草编委会 . 中华本草 . 上海 : 上海科学技
术出版社 , 1999׃ 736-737.
2 Nishikawa K, Miyamura M, Hirata Y. Chemotaxonomical alkaloid
studies structures of Liparis alkaloids. Tetrahedron, 1969, 25(13)׃
2723-2741.
3 Huang S, Zhou X, Wang C J, et al. Pyrrolizidine alkaloids from Liparis
nervosa with inhibitory activities against LPS-induced NO production
in RAW264.7 macrophages. Phytochemistry, 2013, 93׃ 154-161.
4 Huang S, Zhou X, Wang C J, et al. New nervogenic acid derivatives
from Liparis nervosa. Planta med, 2013, 79(3-4)׃ 281-287.
5 Huang S, Pan M F, Zhou X l, et al. Five new nervogenic acid derivatives
from Liparis nervosa. Chin Chem Lett, 2013, 24(8)׃ 734-736.
6 Song Q, Shou Q Y, Goun X J, et al. A new nervogenic acid glycoside
with procoagulant activity from Liparis nervosa. Nat prod commun,
2013, 8(8)׃ 1115-1156.
7 赵颖 , 胡少南 , 王昌华 , 等 . 见血青化学成分研究 . 中草药 , 2013,
44(21)׃ 2955-2959.
8 赵颖 , 胡少南 , 王昌华 , 等 . 兰科药用植物见血青乙酸乙酯部位化
学成分研究 . 中国实验方剂学杂志 , 2013, 19(22)׃ 111-113.
9 李玉鹏 , 蒋金和 , 刘莹 , 等 . 金钗石斛化学成分的研究 . 时珍国医
国药 , 2010, 21(1)׃ 39-40.
10 李建晨 , 冯丽 , 野原捻弘 , 等 . 细叶石仙桃的化学成分 . 中国中药
杂志 , 2008, 33(14)׃ 1691-1693.
11 赵爱红 , 杨秀伟 . 兴安白芷脂溶性部位中新的天然产物 . 中草药 ,
2014, 45(13)׃ 1820-1828.
12 刘韶 ,章伟 ,何桂霞 ,等 .单面针茎化学成分的研究 .中国中药杂志 ,
2009, 34(5)׃ 571-573.
13 黄艳 , 宁小清 , 原鲜玲 , 等 . 壮药白花九里明水煎液止血作用机制
探讨 . 世界科学技术 - 中医药现代化 . 2013, 15(7)׃ 1552-1556.
14 尹鸿翔 , 文飞燕 , 张浩 . 彝药“麻补”止血活性物质基础及机理研
究 . 世界科学技术 - 中医药现代化 . 2014, 16(1)׃ 177-180.
15 Kuo W L, Huang Y L, Shen C C, et al. Prenylated benzoic acids and
phenanthrenes from Liparis nakaharai. J Chin Chem Soc, 2007, 54(5)׃
1359-1362.
16 Li B, Liu H D, Zhang D M, et al. Three new bioactive phenolic
glycosides from Liparis odorata. Nat Prod Res, 2014, 28(8)׃ 522-529.
17 张光浓 , 毕志明 , 王峥涛 , 等 . 石斛属植物化学成分研究进展 . 中
草药 , 2003, 34(6)׃ 附 5-8.
参考文献
2015　第十七卷　第九期　★Vol.17 No.9
〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica〕1920
Study on Chemical Constituents from Petroleum Ether Fraction of Liparis nervosa
Liu Liang, Yin Qimeng, Li Jia, Tong Dan, Zhang Wanjing, Liu Ziqi, Chen Zhang, He Yang, Shen Xinyu
(Pharmaceutical Department, Medical College, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)
Abstract: This article was aimed to study the chemical constituents of the petroleum ether fraction of Liparis
nervosa. Chemical compounds were isolated and purified through various chromatography techniques. The
accurate structures of chemical compounds were confirmed with spectral data and literatures. The results showed
that 7 chemical constituents were isolated from the petroleum ether fraction of Liparis nervosa, which were
moscatin (1), batatasin Ⅲ (2), bergapten (3), isoimpinellin (4), xanthotoxin (5), imperatorin (6) and β-sitosterol
(7). It was concluded that chemical constituents 3-7 were isolated from this genus for the first time. And chemical
constituents 1-7 were isolated from this plant for the first time.
Keywords: Liparis nervosa, petroleum ether fraction, separation and purification, chemical constituent
（责任编辑：马雅静　张志华，责任译审：王　晶）