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不同体积分数洗脱剂对海边月见草茎提取物抗氧化活性的影响



全 文 :第 23卷 第 6期
2007年 11月
福建师范大学学报 (自然科学版 )
Journal of Fujian Normal Univ e rsity ( Na tural Science Edition)
Vo l. 23  No. 6
Nov . 2007
文章编号: 1000-5277( 2007) 06-0086-06
不同体积分数洗脱剂对海边月见草茎提取物抗氧化活性的影响
陈炳华 , 谢玉玲 , 刘剑秋
(福建师范大学生命科学学院 , 福建 福州  350108)
  摘要: 海边月见草茎提取物经 X-5大孔树脂吸附 , 用体积分数为 10% 、 30% 、 50% 、 70%的乙醇溶液进
行洗脱 , 得到 4种洗脱级分 . 采用二苯代苦肼自由基 ( DPPH· ) 体系、 羟自由基体系、 超氧阴离子自由基
体系及抗卵黄脂蛋白脂质过氧化体系对 4个级分的抗氧化活性进行了测定 . 结果表明 , 海边月见草茎提取物
4种洗脱级分具有不同程度的清除自由基能力 , 其中 30%乙醇级分的抗氧化活性最强 . 该级分对 DPPH自由
基的清除率为 82. 60% , 对 H2O2 /Fe2+ 产生羟自由基的清除率为 65. 43% , 对邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子
自由基的抑制率为 26. 16% ,对卵黄脂蛋白 PUFA过氧化的抑制率为 80. 97% . 综合评价其抗氧化活性比芦丁
好或相当 , 但比槲皮素略差 . 同时显示抗氧化活性与其黄酮体积分数有一定的相关性 .
关键词: 海边月见草 ; 茎提取物 ; 洗脱剂体积分数 ; 不同级分 ; 抗氧化活性
中图分类号: Q946. 91; S792. 95   文献标识码: A
 收稿日期: 2007-01-22
 基金项目: 福建省自然科学基金资助项目 ( C0540001)
 作者简介: 陈炳华 ( 1970—  ) , 男 , 福建长汀人 , 副教授 , 硕士 , 主要从事天然产物化学的科研及植物学教学工作 .
Effects of Elution Concentration on the Antioxidant Activity of
Stem Extract of Oenothera drummondii Hook.
CHEN Bing-hua, XIE Yu-ling, LIU Jian-qiu
(College of Lif e Sciences , Fujian Normal University , Fuzhou 350108, China )
Abstract: The c rude ex tract from Oenothera drummondii Hook. stem w as adso rbed on mac ropo rous resin
X-5, and four frac tions we re obtained by eluting with 10% , 30% , 50% , 70% ethano l. The antiox idant
activity wa s then charac terized by the assays o f 1, 1-diph eny l -2- picry lhydr azyl ( DPPH) radical, hydr oxy l
radical, supero xide anion r adica l and polyunsa turated fa tty acid ( PUFA ) from lipopr otein. The results
sh ow ed tha t four fr actions had different scavenging effects on free radical, while the 30% e thano l frac tion did
the best. Th e scavenging or inhibition ra te o f 30% ethano l frac tion to DPPH radical, h ydro xy l r adica l
g ener ated by Fenton reaction, supero xide anion radical g enera ted by pyr oga llol auto-ox idation sy stem and
pero xida tion of po lyunsa tur ated fa tty acid fr om lipopro tein w ere 82. 60% , 65. 43% , 26. 16% , 80. 97% ,
r espectiv ely. It showed higher or the sam e antioxidant activity than Rutin, but lower than Quercetin. In
addition, the r esults also show ed tha t ther e wa s a clo se cor relation betw een antiox idant activ ity and the
concentra tion o f tota l flav ono ids of fr actions.
Key words: Oenothera drummondii Hook. ; stem ex tract; elution concentra tion; different fractions ;
antio xidant ac tiv ity
活性氧物质 ( ROS) 主要包括超氧阴离子自由基 ( O2 )、 羟基自由基 (· OH)、 烷氧基自由基
( RO· )、 脂质过氧化自由基 ( ROO· ) 等 , 它们是人体生命活动中多种生化反应的中间代谢产物 , 其
中 O2 产生最早 , · OH活性最高且造成的氧化性损伤最大 [ 1] . 在正常情况下 , 体内自由基的产生和清
除是平衡的 , 一旦自由基产生过多或抗氧化体系出现故障 , 体内自由基代谢可能失衡 , 从而导致脂质
过氧化、 细胞损伤、 DNA断裂等 [2 ] . 现代医学研究表明 , 衰老、 癌症、 心血管疾病、 炎症的产生与发
展等都可由自由基及其代谢产物诱发 [3 ] .因此 ,摄入一些天然抗氧化剂将有助于维持体内自由基代谢的
平衡 ,对于防止上述疾病的发生和保持机体健康十分重要 [2 ] .大多数多酚类物质在化学结构上具有活泼
的酚羟基 , 能直接清除或淬灭 O2 、 · OH、 H2O2等活性氧自由基 [4 ] , 从而终止自由基连锁反应 , 达到
抗氧化、 抗炎、 抗癌及心血管保护等作用 . 因此 , 寻找不同植物源的多酚类物质作为潜在的天然抗氧
化剂已成为当今的研究热点之一 .
海边月见草 (Oenothera drummondii Hook. )是柳叶菜科月见草属野生植物 , 分布于福建中部、 南
部沿海向阳滨海沙滩地 , 资源相当丰富 [ 5] . 据分析 , 海边月见草植株含有黄酮类、 香豆素等多种化合
物 [6 ] . 资料表明 , 同属的月见草 (O. ery throstpala Bord. ) 全草具有较强的抗氧化活性 , 其茎叶乙醇提
取物对 DPPH自由基的清除率达 98. 9% [ 7] . 而有关海边月见草提取物的抗氧化性研究 , 国内外尚未见
报道 . 因此 , 本试验在大孔树脂分离纯化海边月见草总黄酮的基础上 [6 ] , 以茎为材料 , 经超声波提取、
X-5树脂吸附 , 用不同体积分数的乙醇梯度洗脱 ,得到 4种级分 , 重点考察它们在不同体系中清除自由
基的能力和抗卵黄脂蛋白 PU FA过氧化的作用 , 旨在综合评价海边月见草茎提取物的抗氧化活性 .
1 材料与方法
1. 1 供试材料和试剂
海边月见草 2006年 7月采自福建惠安崇武的滨海沙滩地 , 取其茎洗净、 烘干、 粉碎后 , 备用 . 新
鲜鸡蛋 (超市自购 ) , X-5大孔吸附树脂系天津南开大学化工厂产品 ,其物理性能是: 比表面积为 500~
600 m
2· g- 1 , 孔径为 29~ 30 nm ,孔容为 1. 20~ 1. 40 mL· g- 1 , 孔隙率为 50%~ 60% , 粒径范围为 0. 3
~ 1. 25 mm.
芦丁为槲皮素 (上海医药集团上海化学试剂公司产品 ) , 二苯基苦味酰基苯肼基自由基 ( DPPH· ,
购自 SIGMA公司 ) , 2-硫代巴比妥酸 ( TBA, 购自 MERCK公司 ) , 邻二氮菲 , 邻苯三酚 , 三羟甲基氨
基甲烷 ( T ris) , 三氯乙酸 ( TCA) 等 , 均为国产分析纯 .
1. 2 主要仪器
752型紫外光栅分光光度计 (上海精密科学仪器有限公司 ) , RE-52AAA旋转蒸发器仪 (上海鹏嘉
科技有限公司 ) , LyoLab3000冷冻干燥机 ( Heto-Holten公司 ) , 超低温电冰箱 ( New Brunswick
Scientific) , 超声波破碎仪 ( SONISS公司 ) , DL-6M大容量冷冻离心机 (长沙湘仪离心机仪器有限公
司 ) , S HK-99-Ⅱ台式摇床 (北方同正 ) 等 .
1. 3 实验方法
1. 3. 1 不同体积分数乙醇洗脱剂获得的海边月见草茎提取物的制备
称取海边月见草茎粉末 50 g , 用体积分数为 75%的乙醇溶液以 0. 05 g /mL浸泡 6 h后 , 超声处理
45 min, 参照文献 [6 ]的方法获得海边月见草茎提取物母液 . 母液经适当稀释后 ,分装于三角瓶中 , 共
5份 , 各加入预处理好的 X-5树脂 16 g (湿质量 ) , 在 20℃下振荡吸附 6 h (振速为 160 r· min- 1 ) . 将
吸附饱和的树脂合并装柱 , 树脂床体积 ( VB ) 为 120 mL, 依次用水、 体积分数为 10% 、 30% 、 50% 、
70%的乙醇进行洗脱 ,各洗脱液体积用量为 2VB (约 240 mL) , 流速为 3 VB· h- 1 ,收集各洗脱级分 , 分
别经真空浓缩、 冷冻干燥后得冻干粉 , 称其质量 , 计算不同洗脱级分中固形物得率及测定总黄酮的含
量 .
总黄酮含量测定采用 NaNO2-Al( NO3 ) 3-NaOH比色法 , 具体做法参照前文 [ 6] .
1. 3. 2 对 DPPH自由基清除能力的测定
参照彭长连等的方法 [8 ] . 反应体积为 2 mL, DPPH先溶于少量无水乙醇后 , 用体积分数 50%的乙
醇配制成 120μmoL· L- 1 , 样品也用 50%乙醇配制成 0. 012 5~ 1 mg· mL- 1系列质量浓度 . 反应时加
入 0. 1 mL的样液和 1. 9 mL DPPH· , 摇匀室温静置 20 min后 ,测定各反应液的 A525值变化 . DPPH自
由基清除率 /% = 1- [ ( A样品 - A对照 ) /A空白 ]× 100, 式中 A空白为未加样的 DPPH· ( 1. 9 m L DPPH·
+ 0. 1 mL 50%乙醇 )的吸光值 , A样品为样液与 DPPH·反应后的吸光值 , A对照为样液 0. 1 mL+ 1. 9 m L
50%乙醇的吸光值 . 实验中设槲皮素为阳性对照 .
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1. 3. 3 对羟自由基清除能力的测定
羟自由基由 Fenton反应 , 参照刘晓丽等的方法 [ 9]略加修改 , 样品吸光值 ( A样品 ): 取 7. 50 mmol·
L
- 1邻二氮菲 0. 5 mL于试管中 , 依次加入 0. 2 mmo l· L- 1磷酸缓冲液 ( pH 7. 4 ) 2. 5 mL、 7. 50 mmol
· L- 1 FeSO4 (现配现用 ) 0. 5 mL、 蒸馏水 0. 5 m L、 样液 0. 5 mL和体积分数为 0. 10% H2O2 0. 5 mL,
混匀后 ,于 37℃恒温水浴 60 min,用光径 0. 5 cm比色皿测定 A536值 . 以体积分数为 50%乙醇 0. 5 mL和
蒸馏水 0. 5 mL分别替代样液和 H2O2 , 测定空白吸光值 ( A空白 ) ; 以体积分数为 50%乙醇 0. 5 mL替代
样液测定损伤吸光值 ( A损伤 ) . 羟自由基清除率 /% = ( A样品 - A损伤 ) / ( A空白 - A损伤 ) × 100.
1. 3. 4 对超氧阴离子自由基清除能力的测定
参照王关林等的方法 [10 ]略加修改 , 在 3. 0 m L 0. 01 mo l· L- 1 Tris-HCl缓冲溶液 ( p H8. 2) 中加入
0. 1 mL样液和 0. 1 mL 0. 45 mol· L- 1邻苯三酚 (用 0. 1 mol· L- 1 HCl溶液现配 ) , 每 30 s记录一次吸
光度 A325值 , 时间为 4. 0 min,以回归方程的斜率作为邻苯三酚的自氧化速率 v. 超氧阴离子自由基抑制
率 /% = (v对照 - v样品 ) /v对照× 100, 式中 v对照为邻苯三酚自氧化反应速率 , v样品为加入样品后邻苯三酚
自氧化速率 .
1. 3. 5 抗卵黄脂蛋白 PU FA过氧化作用的测定
参照张尔贤等的方法 [ 11 ]略加修改 . 以卵黄脂蛋白 PU FA为底物的脂质体过氧化模型反应体系包
括: 按 1∶ 25稀释的卵黄悬液 (卵黄用等体积 pH7. 45、 0. 2 mo l· L- 1磷酸盐缓冲液配成 , 使用前用磁
力搅拌器搅拌 10 min) 0. 2 mL、 1 mg· mL- 1的样液 0. 1 mL、 25 mmol· L- 1 FeCl2溶液 (现配现用 ) 0. 2
m L, 用缓冲液补足 2. 0 m L (为样品管 ) . 对照管除不加样液外其它试剂同前 . 试验开始将上述两种试
管同时置 37℃水浴中振荡 6 h, 取出后 , 加入质量分数为 20% TCA 0. 5 mL终止反应 , 静置 10 min后 ,
离心 10 min ( 3 500 r· min- 1 ) , 取 2. 0 mL上清液 , 加入质量分数为 0. 8%的 TBA溶液 1. 0 mL, 沸水
浴 15 min, 冷却 , 测定各自的吸光度 A532值 . 样品抗卵黄脂蛋白 PU FA过氧化的抑制率 /% = ( A对照 -
A样品 ) /A对照× 100.
2 结果与分析
2. 1 不同体积分数洗脱剂获得的提取物各级分的相对得率及黄酮纯度
图 1 不同体积分数洗脱剂获得的提取
物 4种级分的黄酮纯度及其相对得率
海边月见草茎提取液经 X-5大孔树脂充分吸附 , 湿法装柱 ,
先用蒸馏水洗去多糖、 蛋白质等杂质后 , 再用体积分数为 10% 、
30%、 50% 、 70%乙醇溶液进行梯度洗脱 ,获得 4个洗脱级分 , 冷
冻干燥得冻干粉 , 外观呈浅黄色或土黄色 , 其相对得率及黄酮纯
度见图 1.
从图 1可知 , 4个洗脱级分中 50%乙醇级分的黄酮纯度最高 ,
达 22. 65% , 其次是 30%、 10%、 70%乙醇级分 ; 从固形物的相
对得率看 , 30%乙醇级分所得的固形物最多 , 占 48. 6% , 其次是
50%、 10%、 70%乙醇级分 ; 30% 、 50%乙醇级分两者之和占全部固形物的 70. 2% , 为主要洗脱产物 ,
黄酮纯度亦较高 ,而 70%乙醇级分在浓缩时产生较多的泡沫 ,推测可能是含有三萜皂苷之类的物质 ,因
此黄酮纯度偏低 . 为此 , 本实验以 10%、 30%、 50%、 70%乙醇级分的海边月见草茎提取物为研究对
象 , 探讨它们在不同体系中的抗氧化活性及其与黄酮含量的相关性 .
2. 2 不同体积分数洗脱剂获得的提取物清除 DPPH自由基能力的比较
DPPH· 是一种稳定的以氮为中心的有机自由基 ,其乙醇 -水溶液中呈深紫色 ,最大吸收波长为 525
nm
[8 ] . 当 DPPH· 溶液中加入自由基清除剂时 , 其孤电子被配对 , 吸收消失或减弱 , 导致溶液颜色变
浅 , 吸光度 A525值变小 ,其变化程度与自由基清除程度呈线性关系 . 故此法可以用来表征某种物质对有
机自由基的清除能力 , 常用清除率表示 . 清除率越大 , 表明该物质清除自由基的能力越强 [ 12 ] . 作者测
定了不同体积分数的 4个级分对 DPPH自由基的清除率 , 结果见图 2.
从图 2可知 , 4个级分对 DPPH有机自由基均具有不同程度的清除能力 ,且清除能力均随样品质量
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图 2 不同体积分数洗脱剂获得的提取物
清除 DPPH自由基能力的比较
浓度的增加而增大 ,在检测的质量浓度范围内 ( 0. 012 5~ 0. 1
mg· mL- 1 ) , 10%、 30%、 50%乙醇级分清除率与质量浓度之
间有明显的量效依赖关系 ,相关系数 R2分别为 0. 990 8、 0. 967
0和 0. 966 9, 但当样品质量浓度≥ 0. 2 mg· mL- 1时 , 3个级
分对 DPPH· 的清除率仍有所增加 , 但增幅不大 , 显示当样品
质量浓度达到一定程度时 ,对 DPPH自由基的清除能力不再增
强 , 这结果与槲皮素对 DPPH·的清除能力很接近 ; 而 70%乙
醇级分则在 0. 1~ 1. 0mg· mL- 1质量浓度范围内 ,清除率随质
量浓度的增加而增大 , 呈明显的线性关系 (R2= 0. 980 9) , 表
明 70%乙醇级分清除 DPPH·能力弱 .
将清除 50% DPPH· 所需样品的质量浓度定义为dIC50 , 以评价各级分的抗氧化水平 , 10% 、 30% 、
50%、 70%乙醇级分的dIC50分别为 0. 064、 0. 056、 0. 070、 0. 505 mg· m L- 1 , 而槲皮素的dIC50为 0. 036
mg· mL- 1 . 因此 , 在该体系中 , 4个级分中 10%、 30%、 50%乙醇级分清除 DPPH· 效果相近 , 70%
乙醇级分与前三者相关近 10倍 , 效果最差 , 其大小依次为: 30%乙醇级分> 10%乙醇级分> 50%乙醇
级分> 70%乙醇级分 . 同时 , 可以看出 4个级分对 DPPH· 的清除能力比槲皮素差 , 尤其是 70%乙醇级
分 .
2. 3 不同体积分数洗脱剂获得的提取物清除羟自由基能力的比较
采用 H2O2 /Fe2+体系 ,通过 Fenton反应生成羟自由基 ,促使邻二氮菲-Fe2+ 被氧化为邻二氮菲 -Fe3+ ,
造成溶液在波长 536 nm最大吸收峰消失 [9 ] . 当加入自由基清除剂后 , 使溶液在波长 536 nm最大吸收
峰消失的程度减弱 , 其变化程度与自由基清除程度呈线性关系 . 故此法可以用来表征某种物质对羟自
由基的清除能力 , 通常用清除率表示 . 清除率越大 ,表明该物质清除羟自由基的能力越强 [9 ] . 作者测定
了不同质量浓度的 3个级分及槲皮素、 芦丁对羟自由基的清除率 , 结果见图 3.
从图 3表明 ,除 70%乙醇级分对羟基自由基抑制作用很弱外 ,其余 3个级分对羟自由基均有清除能
力 , 且清除率随质量浓度增加而增大 , 呈现明显的量效依赖关系 , 其清除能力大小依次为: 10%乙醇
级分> 30%乙醇级分> 50%乙醇级分 . 以清除 50%羟自由基所需样品量定义dIC50评价各级分的抗氧化
水平 , 其中 10%乙醇级分和 30%乙醇级分的dIC50分别为 0. 665 mg· mL- 1和 0. 771 mg· mL- 1 , 50%乙
醇级分的dIC50> 1 mg· mL- 1 , 前两者清除羟自由基的能力比槲皮素弱 (dIC50= 0. 498 mg· mL- 1 ) ,比芦
丁强 (dIC50= 0. 827 mg· mL- 1 ) ; 另外 , 在实验中还发现 , 在低质量浓度 (≤ 0. 2 mg· mL- 1 ) 时 , 芦
丁、 50%乙醇级分和 70%乙醇级分有助于羟自由基的生成 , 其中的原因有待于进一步探讨 .
2. 4 不同体积分数洗脱剂获得的提取物清除超氧阴离子自由基能力的比较
邻苯三酚在碱性条件下能迅速氧化 , 释放出 O2 , 生成有色的中间产物 , 在 325 nm处有最大的吸
收峰 , 当有抑制剂存在时 , 可清除 O2 , 抑制中间产物的形成 . 测定样品与邻苯三酚混合后在 325 nm
处的吸光度 A值随时间变化的曲线 , 以回归方程的斜率作为邻苯三酚的自氧化速率 [10 ] . 用抑制率来表
征某种物质对超氧阴离子自由基的清除能力 , 抑制率越大 , 表明该物质清除超氧阴离子自由基的能力
越强 . 作者测定了 4个级分及槲皮素、 芦丁对超氧阴离子自由基的清除作用 , 结果见图 4和表 1.
由图 4和表 1可以看出 ,在该体系中 4个级分对邻苯三酚自氧化速率具有一定程度的抑制作用 ,其
抑制率的大小依次为: 30%乙醇级分> 50%乙醇级分> 10%乙醇级分> 70%乙醇级分 ;同时可以看出 , 4
个级分中 30%乙醇级分抑制邻苯三酚自氧化的能力最强 ,但抑制率仅为 26. 16% ,比槲皮素 ( 39. 41% )
低 ,而略高于芦丁 ( 22. 03% ) .这结果与楮实子黄酮抑制邻苯三酚自氧化体系的结果 [1 1]相近 .
表 1 不同体积分数洗脱剂获得的提取物抑制邻苯三酚自氧化的能力
  对照 ( CK) 10%乙醇级分 30%乙醇级分 50%乙醇级分 70%乙醇级分 槲皮素 芦丁
每 min的 A值变化 0. 212 9 0. 192 0 0. 157 2 0. 169 1 0. 197 0 0. 129 0 0. 166 0
相关系数 R2 0. 978 6 0. 978 6 0. 982 0 0. 979 9 0. 983 4 0. 966 6 0. 978 9
抑制率 /% 0 9. 82 26. 16 20. 57 7. 47 39. 41 22. 03
  以抗氧化活性较强的 30%乙醇级分进一步实验 , 结果发现抑制率随着加样量的增加而增大 , 当加
89 第 6期       陈炳华等: 不同体积分数洗脱剂对海边月见草茎提取物抗氧化活性的影响
图 3 不同体积分数洗脱剂获得的
提取物清除羟自由基能力的比较
图 4 不同体积分数洗脱剂获得的提取物
抑制邻苯三酚自氧化能力的比较
样量为 0. 1、 0. 2、 0. 3、 0. 4、 0. 5 mL时 ,其抑制率分别为 20. 23%、 37. 30%、 55. 74%、 74. 56%、 84. 50% ,
显示在实验剂量范围内 , 30%乙醇级分对邻苯三酚自氧化的抑制率呈明显的量效关系 .
2. 5 不同体积分数洗脱剂获得的提取物对卵黄脂蛋白 PUFA过氧化体系的抑制作用
卵黄中所含的多不饱和脂肪酸 ( PUFA)在亚铁离子的催化下 , 经振荡、 能诱发过氧化 , 产生烷氧
基和烷过氧基 , 再引发链式支链反应 . 在加热的条件下 , 过氧化产物丙二醛可与 TBA反应产生粉红色
化合物 , 并在 532 nm处有最大吸收值 [13 ] . 当加入抗氧化剂后 , 吸收值下降 , 以此来判断抗氧化活性的
大小 . 测定了 4个级分及槲皮素、 芦丁对卵黄脂蛋白 PUFA过氧化的抑制作用 , 结果见图 5.
由图 5可以看出 ,在该体系中 4个级分对卵黄脂蛋白脂质过氧化均具有较强的抑制作用 ,其抑制效
果大小依次为: 30%乙醇级分> 10%乙醇级分> 50%乙醇级分> 70%乙醇级分 . 进一步将 30%乙醇级
分与槲皮素、 芦丁进行对比 , 设计了加样量从 0. 025~ 0. 15 mL的 5组实验 , 结果表明 (见图 6) , 槲皮
素的抗氧化活性最强 , 但量效关系不明显 , 而 30%乙醇级分和芦丁两者的抗氧化活性相当 , 抑制率随
着加样量的增加而增大 , 且量效依赖关系明显 .
图 5 不同体积分数洗脱剂获得的
提取物对脂质体过氧化的抑制作用
图 6 不同加样量 30%乙醇级分、 槲皮素和
芦丁对脂质体过氧化的抑制作用
3 讨论与结论
3. 1 海边月见草茎提取物不同级分抗氧化活性的综合评价
海边月见草茎提取物经非极性的 X-5大孔树脂吸附后 , 以体积分数为 10%~ 70%的梯度乙醇溶液
洗脱 , 获得 4种不同洗脱级分 . 利用 DPPH· 法、 H2O2 /Fe2+ 体系通过 Fenton反应生成羟自由基、 邻苯
三酚自氧化体系产生超氧阴离子自由基 O2 、在卵黄脂蛋白 PU FA过氧化体系中抗脂质过氧化实验 ,测
定分析了不同体积分数洗脱剂获得的海边月见草茎提取物 4个级分的抗氧化活性 ,结果显示 ,这 4个级
分均具有不同程度的清除自由基能力和抗脂蛋白 PUFA过氧化作用 , 但在不同体系中 , 各洗脱级分的
抗氧化活性强弱不尽相同 . 不过 , 总体趋势基本一致 , 30%乙醇级分中物质的抗氧化活性较强 , 总体
效果比槲皮素弱 , 比芦丁强或相当 . 以上只是体外试验的研究结果 , 还需要进行体内试验研究来
证实 .           
3. 2 不同级分的抗氧化活性与其黄酮体积分数的相关性分析
尽管 4个级分在不同的抗氧化体系中效果并不完全一致 , 但总体来看 , 30%乙醇级分和 10%乙醇
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级分的抗氧化效果较好 , 黄酮体积分数也较高 , 分别为 20. 93%和 18. 24% , 而 70%乙醇级分抗氧活性
最弱 ,黄酮体积分数也最低 ,显示不同级分的抗氧化活性强弱与其总黄酮体积分数有一定的相关性 , X-
5树脂吸附、梯度乙醇洗脱亦可将海边月见草茎提取物中抗氧化成分进行初步分离 . 不过 , 50%乙醇级
分中总黄酮体积分数 ( 22. 65% )最高 , 其抗氧化活性仅表现在清除 DPPH自由基能力和抑制邻苯三酚
自氧化的能力及抗卵黄脂蛋白脂质过氧化作用方面效果较好 ,说明抗氧化物质不仅仅是黄酮类物质 ,还
有其它物质 (如多酚类物质、 β -胡萝卜素等 )在起协同作用或拮抗作用结果 , 因此 , 还有待于进一步对
各个级分进行纯化或检测更多的物质含量 , 才能为各洗脱级分抗氧化活性的强弱与其成分之间的关系
做出更准确的判断 .
参考文献:
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(责任编辑: 余 望 )
91 第 6期       陈炳华等: 不同体积分数洗脱剂对海边月见草茎提取物抗氧化活性的影响