全 文 :2 3 1 0年第 04期
(总第 3 1 0期 )
吉 林 农 业
JI LIN A G R I C U LT U R E
N O
.
04
,
20 13
( C
u m u l a t i v e t y N O
.
30 1 )
凤尾鸡冠花的试管开花诱导研究
刘家富 ) , 卞利权2 , 马 坷 ) , 王 霞 ) ’
(l
. 吉林农业科技学院生物工程学院 , 吉林 长春 1 3 2 1 0 1 ; 2 . 吉林天景食品有限公司 , 吉林 长春 13 0 1 2 3)
摘要 : 以凤尾鸡冠花带腋 芽的茎段为材料 , 探讨不 同外源激素及蔗糖浓度对鸡冠花试管成花的影响 。
N-A 能显著提高鸡冠花的开花率 , 当培养基中含有。 . sm g / L 6 一BA 和 。 . lm g / L NA A时 , 开花率 最高为 60 % ;
结果表明 : 适量 的 6 一 B A 和
单因素试验中发现 , 适量的
GA 3和蔗糖利于试管开花 , 当GA 3和蔗糖浓度依 次为0 . sm g / L和 40 m g / L时 , 鸡冠花开花率 分别为 65 . 7 1%和 60 . 0 %。
关键词 : 鸡冠花 ; 激素 ; 蔗糖 ; 试管开花
中图分类号 : 5 68 文献标识码 : A 文章编号 : 1 6 7 4一 。4 32 ( 2 0 1 3) 一。 4一 。。 7 5
凤尾鸡冠花 , 是宽科青箱属一年生草本植物 , 株高30 一 60 厘
米 , 茎直立 , 叶卵状披针形 , 花序 由多数小花序聚集呈穗状 。 试
管开花是指用组织培养的方法 , 使植物开花的过程在培养基中完
成 。 目前国内外对鸡冠花试管开花的研究很少 , 组培技术尚不成
熟 l[ 一 2〕 , 本文主要研究外源激素及蔗糖浓度对凤尾鸡冠花瓶内开花
的影响 , 为凤尾鸡冠花试管花商品化生产提供理论指导 。
1 材料与方法
1
.
1 材料
凤尾鸡冠花种子 。
1
.
2 方法
1
.
2
.
1 试管苗 萌发 选取籽粒饱满的鸡冠花种子 , 蒸馏水浸泡
1 h0
, 然后转移至超净工作台内 , 70 %酒精浸泡 3 0 5 , 无菌水清洗 3
次 , 。 . 1%升汞灭菌 1 1 m i n , 无菌水清洗 5次 , 接种于MS培养基中 ,
25
O
C
,
20 0 xl
, 光照 1 2 h / d , 14 d天后 , 统计种子萌发及试管苗生
长情况 。
1
.
2
.
2 不同 6一 BA和 N-A 浓度 组合对试管苗开花诱导的影响 取试管
苗上部带腋芽的茎段接种到Ms 培养基中 , 蔗糖 3 0 9 / L , 6 一BA 和NA A
的处理浓度见表 1 , 每个处理接种35 瓶 , 每瓶接种 1个试管苗 。 4d5
后统计无菌苗开花情况 。
1
.
2
.
3 GA 3对试管苗开花诱导的影响 取试管苗上部带腋芽的茎段
接种到Ms 培养基中 , 蔗糖浓度为 3 0 9 / L , 6 一BA和 N-A 的处理浓度分
别为 。 . s m g / L和。 . lm g / L , GA 3的处理浓度见表 3 , 每个处理接种 35
瓶 , 每瓶接种 1个试管苗 。 4 d5 后统计无菌苗开花情况 。
1
.
2
.
4 蔗糖浓度对试管苗开花诱导的影响 取试管苗上部带腋芽的
茎段接种到Ms 培养基中 , 6 一BA和NA A的处理浓度分别为 。 . sm g / L和
0
.
lm g / L
, 蔗糖浓度见表 4 , 每个处理接种35 瓶 , 每瓶接种 1个试管
苗 , 4 5 d后统计无菌苗开花情况 。
2 结果与分析
2
.
1 不同 6一B A和 N A A浓度组合对试管苗开花诱导的影响
不同 6一 BA和 NA 浓度组合对试管苗开花诱导的影响非常显著 ,
如表 1所示 : 带腋芽的茎段在 不含有激素的MS培养基中可 以缓慢
分化 , 形成不定根和不定芽 , 35 株鸡冠花中 , 有 2株形成花芽并开
花 , 开花率为 5 . 71 % , 但其花型小 , 花色暗淡 , 而在含有不同 6一 BA
和 N AA浓度组合的Ms培养基中 , 试管苗开花率均有明显提高 。 随
N-A 浓度升高 , 开花率呈现先升后降趋势 , NA 浓度为 0 . 119 / L时 ,
开花率相对较高 , 培养基中NA A浓度达到 0 . mZ g / L时 , 部分试管苗
出现愈伤组织 , 不利于观赏 ; 同样 , 随 6 一 BA浓度升 高 , 开花率亦
呈现先升后降趋势 , 6 一BA 浓度为 0 . 119 / L时 , 开花率相对较高 , 培
养基中6 一BA浓度达到 1 . Zm g / L时 , 个别试管苗出现局部组织肿胀 、
半透明、 失绿等玻璃化现象 。 综合考虑 , 当培养基中添加。 . 819 / L
6一 BA和 。 . l m g / LN-A 时 , 开花率最高为6。% , 试管苗生长良好 , 单株
花芽多 , 为最佳开花诱导培养基 。
表 1 不 同6 一BA和 N、 、浓度组合对试管苗开花诱导的影响
辱 6一 BA+ NAA 接种 开花 开花 开花率 生长状况万 (m g / L ) 数 株数 期 (% )
1 0
.
0 + 0
.
0 3 5 2 7 7 5
.
7 1 生长慢 , 花小
2 0
.
4 + 0
.
0 5 35 12 4 5 34
.
2 9 生长一般
3 0
.
4 + 0
.
1 35 18 4 9 5 1
.
4 3 生长较好
4 0
.
4 + 0
.
2 35 11 4 2 3 1
.
4 3 不定根多 , 少量愈伤组织
5 0
.
8 + 0
.
0 5 35 17 4 6 48
.
5 7 生长较好
6 0
.
8 + 0
.
1 35 2 1 5 3 60
.
0 0 健壮 , 花芽多
7 0
.
8 + 0
.
2 35 13 4 5 3 7
.
14 生长较好 , 少量愈伤组织
8 1
.
2 + 0
.
0 5 35 1O 4 1 2 8
.
5 7 不定芽多 , 少量玻璃化苗
9 1
.
2 + 0
.
1 35 14 4 5 40
.
0 0 不定芽多 , 少量玻璃化苗
1O 1
.
2 + 0
.
2 35 9 3 8 2 5
.
7 1 出现愈伤组织和玻璃化苗
2
.
2 G A 3对试管苗开花诱导的影响
不同浓度GA 3对试管苗开花诱导的影响如表 3所示 , 当 G3A 浓
度为 0 . 4 m g / L时 , 试管苗变高 , 长势较好 , 开化率为 5 1 . 4 3% , 当
GA 3浓度为 。 . s m g / L时 , 试管苗长势最好 , 花芽最多 , 开化率为
65
.
71 %
, 而且单株花芽数量最多 , 而当 G3A 浓度为 1 . 219 / L时 , 开
花率则降为 54 . 2 9% , 可见 , 适量的GA 3可促进凤尾鸡冠花开花 。
表 2 不同浓度 GA 3对试管苗开花诱导的影响
序号 GA 3 接种数 开花率 生长状况
(。 g/ L ) ( % )
升化休数
1 0
.
4 3 5 18 51
.
4 3 茎较长 , 长势较好
2 0
.
8 3 5 2 3 6 5
.
7 1 健壮 、 茎较长 、 花芽多
3 1
.
2 3 5 19 5 4
.
2 9 生长良好
表 3 不 同浓度蔗糖浓度对试管苗花芽诱导的影响
序号 蔗糖 开花率 生长状况
(m g / L ) ( % )
按个甲数 汁化休数
1 2 O 3 O 1 3
.
3 3 淡绿色叶片 , 细弱
2 3 O 3 O 16 5 3
.
33 生长较好
3 4 O 3 O 18 6 0
.
00 粗壮 、 深绿色叶片 , 花色鲜
艳 , 不定根多
4 5 O 3 O 4 13
.
33 无菌苗矮小 、 生长缓慢
2
.
3 蔗糖浓度对试管苗开花诱导的影响
J I L I闪 AGRI c u L T u RE 7 5
如表 4所示 , 不 同蔗糖浓度对凤尾鸡冠花开花诱导的影响差异
显著 , 当蔗糖浓度为 ZOm g / L 、 30 m g / L和 40 m g / L时 , 随蔗糖浓度升
高 , 开花率逐渐升高 , 依次为 3 . 3 %、 53 . 3 %和 60 . 009 , 试管苗叶
片颜色逐渐加深 , 茎段由纤弱变得粗壮 , 不定根数量逐渐增加 ,
而当蔗糖浓度增加到 50 m g / L时 , 开花率骤降为 1 3 . 3390 , 花芽 由腋
芽直接抽 出 , 试管苗矮小、 生长缓慢 、 叶片变黄变小 , 有的叶片
甚至呈玻璃花状 。
3 讨论
外源激素是影响外植体形态建成的关键因素 。 3j[ 本研究发
现 , 培养基中添加 6 一BA 和 N-A 能明显促进试管苗的瓶内开花 , 并且
随着 6一BA 和N-A浓度的升高 , 开花率呈先升后降趋势 , 这与赵子刚
等的研究成果一致 。 4j[ GA 3也是植物组织中的常用激素 , 本研究发
现适量浓度的 G3A 可促进试管苗的瓶内开花率 , 当培养基中含有
。 . sm g / L GA 3时 , 试管苗开花率最高 , 可达65 . 7190 , 而且单株花芽
数也最多 , 但培养基中GA 3浓度为 0 . 4 m g / L和 1 . Zm g / L时 , 开花率均
有所下降 , 说明过高或过低浓度的GA 3能抑制开花率 。 蔗糖为外植
体的生长提供探源和能源 , 本研究发现 , 凤尾鸡冠花试管苗开花
所需蔗糖的最佳浓度为 40 % , 并且随着蔗糖浓度的升高 , 鸡冠花叶
片颜色加深 , 但当蔗糖浓度达到 50 m g / L时 , 试管苗植株矮小 , 开
花率降低为 1 3 . 3 3% , 有的甚至出现玻璃化现象 , 这与蔗糖对万寿
菊瓶内开花影响一致 。 LS」综上 , 适量的外源激素和蔗糖浓度是提
高试管苗瓶内开花率所必需的 。
参考文献
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南方农业 , 2 0 0 7 ( 3 ) : 7 2 一 7 4 .
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南大学硕士学位论文 , 2 0 0 9 .
作者简介 : 刘家富 ( 1 9 9 0勺 , 男 , 就读 于 吉林农业科技学
院 。
通讯作者 : 王霞 ( 1 9 7 8 一 ) , 女 , 江苏人 , 吉林农业科技学院
生物工程学院讲师 , 从事植物分子生物 学方面研 究工作 。
(上接 7 7页 )
量 , 计算每亩产量 , 计算时将调查取样的损失 (拔节期 、 抽穗期
和成熟期测千物质取样各 3穴 , 成熟期调查每穗总粒数取 3穴 , 共
取样 12 穴 ) 补回 。
3 超级稻试验的结果
试验详细记载分集期分集数进展调查情况 。 记录内容包括拔
节期 、 抽穗期和成熟期的叶面积测定 、 叶面积系数 ( LA工) 、 有效
穗粒数 、 千粒重 以及实收产量 。 将超级稻 Q优 6号的 8个处理 , 3组
随机重复下的 24 个小区记录数据进行对比分析 。 最终得出Q优 6号
的平均生长情况和平均亩产情况 , 详细见表 2 , 3 。
表 2 成熟期各组Q优 6号生育产量情况表
根据表 2 , 3 , 可 以看出超级稻Q优 6号实验组里面生长及产量
最高的为 3A BZ 组 , 产量每亩均产为 7 9 5 . 8 4 k g ; 最低为 A ZBI 组 , 均
产为 6 51 . s k g 。 由此我们可以较精确的得出 : 对超级稻的管理采用
A 3BZ 的种植方式可 以比其他方式获得更多的生产收获 。
编号 处理名称 叶面积 (矿 ) LA I 有效穗数 千粒重 ( g )
1 A I B I 0
.
17 13 4
.
11 10
.
5 2 8
.
4 1
2 A I B Z 0
.
2 0 46 4
.
9 1 10
.
1 2 9
.
2 7
3 AZB I 0
.
14 80 4
.
44 9
.
1 2 8
.
87
4 AZB Z 0
.
18 64 5
.
59 9
.
1 2 8
.
3 1
5 A3B I 0
.
14 95 5
.
38 7
.
7 2 8
.
7 8
6 A3B Z 0
.
16 84 6
.
06 8
.
5 2 7
.
37
7 A4B I 0
.
1138 4
.
7 8 6
.
3 2 8
.
55
8 A4B Z 0
.
117 3 6
.
03 1 1
.
8 2 8
.
00
参考文献
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术 出版社 , 2 01 2 .
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作者简介 : 黄继魁 ( 1 9 6 2勺 , 男 , 广西 乐业县 良种示范繁殖
农场 , 研 究方向 : 水稻新品种高产栽培试验 、 示范与推广 。
表 3 成熟期各组Q优 6号总平均产量情况表
处理 小区平均产量 平均亩产量 单位 (k g )
A I B I 19
.
7 4 68 6
.
7
A I B Z 19
.
6 0 68 1
.
6
AZB I 19
.
5 5 65 1
.
8
AZB Z 19
.
7 5 65 8
.
3
A3B I 2 1
.
3 8 7 1 2
.
8
A3B Z 2 3
.
8 8 7 9 5
.
8
A4B I 2 0
.
4 4 68 1
.
2
A4B Z 2 0
.
2 9 67 6
.
2
7 6 J I L I闪 AGR I c u L T u RE