全 文 ：第 23卷第 4期
2001年 12月
大 连 医 科 大 学 学 报
Journal of Dalian Medical University
Vol.23 , No.4 Dec.2001
文章编号:1000-5676(2001)04-0283-02
希莶草对小白鼠抗体生成的影响
宫晓红1 ,王忠利2 ,刘海燕3
(1.大连市中医医院检验科,辽宁 大连 116013; 2.大连医科大学第二临床学院检验科 ,辽宁 大连 116027;
3.大连医科大学第二临床学院风湿内科 , 辽宁大连 116027)
摘要:目的:探讨希莶草对小白鼠机体免疫系统作用的变化。方法:采用 ELISA法和微量凝集实验
测定小鼠抗体的含量 。结果:微量凝集实验测定的 Ⅰ 、Ⅱ组的抗体效价及 ELISA法测定的Ⅲ 、Ⅳ组
的抗体含量均有显著性差异(P <0.05)。结论:中药希莶草对小白鼠在免疫调节方面具有增强作
用。
关键词:希莶草;抗体;免疫功能;ELISA
中图分类号:R282.7 文献标识码:A
一直以来 ,中药对机体的治疗作用是予以肯定
的 ,大多具有补益作用的中药被认为是通过调节机
体免疫系统而起作用的。本实验选用希莶草来研究
其对小白鼠体内抗体生成能力的影响。我们试图通
过对小白鼠体内的抗体水平的研究 ,说明希莶草对
其机体免疫系统的作用。实验研究报告如下 。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物:昆明种小白鼠 ,体重(20±2)g ,由
大连医科大学实验动物中心提供。
1.1.2 试剂与药物:5%葡萄糖注射液(GS);0.9%
氯化钠注射液(NS);20%绵羊红细胞悬液;卵清蛋
白;辣根过氧化物酶 ,底物 A 、B和终止液;希莶草生
药水煎剂(希莶草经大连市药检所鉴定为正品)。
1.1.3 仪器:酶标仪;台式离心机;电热恒温箱。
1.2 实验方法
1.2.1 动物分组:取小白鼠 40只 ,随机分成 4 组
(Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ、Ⅳ组),即两个实验组(Ⅰ 、Ⅲ)和两个正
常对照组(Ⅱ、Ⅳ)。
1.2.2 免疫动物及实验方案:
1)第 0周 ,基础免疫阶段
将Ⅰ 、Ⅱ组动物用 20%绵羊红细胞(SRBC)0.2
ml在小鼠左腿腹侧注射;将 Ⅲ、Ⅳ组动物用 1:5卵
黄生理盐水稀释液 0.2 ml在小鼠左腿腹侧注射 。
2)第 1周 ,将 Ⅰ 、Ⅲ实验组的小鼠每只用水煎
剂 0.2 ml/qd(相当于 0.02 g 生药)灌胃;Ⅱ 、Ⅳ正常
对照组的小鼠每只用 5%葡萄糖注射液 0.2 ml/qd
灌胃7 d。
3)第 2周 ,加强免疫 ,重复第 0周免疫动物过
程 。
4)第 3周 ,将小鼠断头取血 ,分离血清。
1.2.3 测定抗体含量:
1)用微量直接凝集实验法测定 Ⅰ 、Ⅱ组的抗体
效价见表1。
表 1 用微量直接凝集实验法测定Ⅰ 、Ⅱ组的抗体效价
1 2 3 4 5 6 7 8
NS(μl) 25 25 25 25 25 25 25 25
待检血清(μl) 25 25 25 25 25 25 25 弃去
20%SRBC(μl) 25 25 25 25 25 25 25 25
注:NS 和待检血清倍比稀释至第 2 管 , 依次类推 , 最后一管
弃去
混匀震荡后 ,放入湿盒 , 37 ℃温浴 1 h ,观察抗
体效价 。
作者简介:宫晓红(1969-),女 , 大连人 ,主管检验师 , 硕士在读。
2)用酶联免疫吸附法(ELISA)测定 Ⅲ、Ⅳ组 ,在
酶标仪测A450 ,读各孔光密度值。
2 结果
2.1 希莶草对小鼠体内抗体生成的结果
第Ⅰ组:1:16 , 1:32 , 1:16 , 1:128 , 1:32 ,1:64 , 1:
16 ,1:128 ,1:32 ,1:64。
第Ⅱ组:1:4 ,1:4 ,1:4 ,1:8 ,1:4 ,1:8 ,1:16 ,1:8。
第 Ⅲ 组:2.103 , 1.940 , 1.845 , 1.847 , 2.103 ,
1.788 ,1.606。
第 Ⅳ组:1.741 , 1.322 , 1.832 , 1.692 , 1.813 ,
1.751 ,1.763 ,1.504 ,1.442 ,0.998。
2.2 希莶草组与对照组比较
将结果进行统计学分析(成组的 t检验),见表
2和表3。
表 2 小鼠的 SRBC抗体检测结果
GROUP n MEAN P
Xixiancao 10 1.595 <0.05
Control 8 0.7905
表 3 小鼠的卵黄抗体检测结果
GROUP n MEAN P
Xixiancao 7 1.89 <0.05
Control 10 1.586
由此可见希莶草组与对照组的抗体效价及含量
均有显著性差异 。
3 讨论
希莶草(Siegesbeckia herb)属菊科 ,有希莶 、腺梗
希莶 、毛梗希莶 ,性辛 、苦 、寒 ,入肝肾经。祛风湿 ,利
关节 ,解毒。用于风湿痹痛[ 1] 、筋骨无力 、腰膝酸软 、
四肢麻痹[ 2] 、半身不遂 、风疹湿仓[ 3] 、外伤性截瘫 、面
神经瘫痪等 。
抗原根据其物理形状可分为可溶性抗原和颗粒
性抗原。本文用SRBC及 5倍稀释的卵黄液分别作
为可溶性抗原和颗粒性抗原对杂系小鼠进行基础免
疫 ,1周后Ⅰ组及 Ⅲ组给与希莶草灌胃 , Ⅱ组及Ⅳ组
给与5%葡萄糖灌胃以对照 ,分别采用微量直接凝
集实验法及酶联免疫吸附法对小鼠血清中抗体作定
量分析 ,希莶草组与对照组的抗体效价及含量均有
显著性差异(P <0.05),提示希莶草在调节小鼠免
疫方面具有增强作用 ,这与文献报道一致[ 4] 。灌服
希莶草 ,可促进脾淋巴细胞增殖功能 ,通过增强 T细
胞的功能进而调整大鼠的机体免疫功能 ,从而改善
大鼠的免疫状态。
有文献资料表明[ 5] ,希莶草对小白鼠体液免疫
和细胞免疫有抑制作用 ,怀疑其具有双向调节作用 ,
有待于进一步实验的研究证实。
参考文献:
[ 1] 钱瑞琴 ,张春英 ,付宏征 ,等.希莶草活性部位抗风湿作用机理研
究[ J] .中国中西医结合杂志 , 2000 , 20(3):192-195.
[ 2]夏俊杰 ,朱晓鸣.运用希莶草治疗痹症经验[ J] .山西中医 , 1997 ,
13(2):7-8.
[ 3] 王频.中药希莶草的研究概况[ J] .西北药学杂志 ,1990 , 5(2):39-
40.
[ 4] 李俊 ,汤晓林 ,陈敏珠 ,等.白芍甘对佐剂性关节炎大鼠的免疫调
节机制[ J] .中国药理学通报 , 1995 , 11(4):475-477.
[ 5] 卜长武.希莶草对小白鼠免疫功能的影响[ J] .中国中药杂志 ,
1989, 14(3):44-45.
Effects of Xixiancao on the levels of antibody in mice
GONG Xiao-hong1 ,WANG Zhong-li2 , LIU Hai-yan3
(1.Department of Clinical Laboratory , Dalian Hospital of Traditional Chinese Medicine , Dalian 116013 , China;
2.Department of Clinical Laboratory , the Second Affiliated Hospital , Dalian Medical University , Dalian 116027 , China;
3.Department of Neurology)
Abstract:Objective:To observed the effect of Xixiancao to immune system in mice.Methods:ELISA andmicro-agglu-
tination test were used to detect antibody concentration inmice.Results:There had significant difference in antibody titre
of Ⅰ , Ⅱ groups by micro-agglutination test and antibody concentration of Ⅲ , Ⅳgroups by ELISA(P <0.05).Con-
clusion:It could be improved by Chinese medicine Xixiancao for immune function of organism in mice.
Key words:Xixiancao;antibody;immunity;ELISA
(收稿日期:2001-09-03 修回日期:2001-10-19)
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