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蕲艾油抑菌作用研究



全 文 :第 14 卷第 l期
19 9 5年 3月
中南民族学 院学 报 (自然科学版 )
J O U R N A L O F S O U T H 一 C E N T R A L C O L L E G E F O R N A T I O N A LI T l l巧 ( N a r . S e i . )
V o l
.
1 4 N o
.
1
M a
r . 19 9 5
薪艾油抑菌作用研究
洪宗国 周西友 伊定 杨菊红
(化学系 )
摘要 采用贴片法测定了薪艾油对各种病原菌的抑菌圈大小 ,并用试管法测定了薪艾油最低抑菌浓
度 . 结果表明 :薪艾油对所检测的 1 种病菌全部具有抑制作用 ,其中对金黄色葡萄球菌抑制作用最
强 . 对大肠杆菌 ,金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的最低抑菌浓度均在 0 . 03 1%左右 .
关键词 薪艾油 ;抑菌作用 ;最低抑菌浓度
艾 ( A rt e m is a ar gy i eL vl et 、 a n t) 是菊科植物 ,为传统中草药 · 其干燥叶经水蒸汽蒸馏可提取
挥发油 . 艾叶油为淡黄色或黄绿 色澄明液体 , 有艾的特异香气 , 具有平喘 、 镇咳 、 祛痰 、 消炎 、 抗
过敏等药效 . 在体外对白色葡萄球菌 、 甲型链球菌 、 奈瑟氏菌 、 肺炎球菌及多数革兰氏阴性细菌
有一定抑制作用 . 其最低抑菌浓度为 Z x 1 o一 3一 3 x l o一 ’之间口〕 .
由于气候条件 、 土壤与环境的差异 , 不同地区生产的艾差异较大 . 李时珍认为 : 明成化前以
北艾 (河南汤阴 ) 、 海艾 (浙江 四 明 )为胜 、 成化后以薪艾 (湖北薪春 )为佳 〔幻 . 现代分析结果表
明 : 薪艾 ( A ir e m is a a gr iy vc iq ia )在出油率和中馏分含量两方面确具优势 . 但薪艾的抑菌作用如
何 , 目前文献尚未明确报道 . 本工作采用贴片法测定了薪艾油对 n 种常见病原菌的抑制作用 .
用试管法测定了最低抑菌浓度 .
实验
1
.
1 实验材料
( 1) 薪艾油 : 薪艾采集于 1 9 9 1年端 阳节 . 以水蒸汽蒸馏法提取挥发油 , 得绿黄色澄明液
体 . 比重 0 . 9 08 ,折光率〔司 ~ 1 . 4 7 2 5 . 有薪艾特异香气 .
( 2) 菌种 : 由同济医科大学微生物教研室提供 : 结核杆菌 、 金黄色葡萄球菌 、 脑膜炎双球
菌 、 乙型链球菌 、 奈瑟氏菌 、 大肠杆菌 、 白色葡萄球菌 、 甲型链球菌 、 绿脓杆菌 、 肺炎球菌 、 白色念
珠菌 .
( 3) 针筒式过滤器及滤膜 (孔径 0 . 4 5o m ) ,上海医药工业研究院 .
( 4) 圆片 : 用打孔器 (上海通用牌 N o 3 3 0) 在白色滤纸上打出直径为 6 m m 的小圆片 .
( 5) 试剂 : 吐温 一 80 , 浙江游龙化工试剂厂
牛肉膏 ,河南省陕县生化厂
蛋白膝 .武汉化学试剂厂
琼脂旧 本进 口分装
收稿日期 : 1 9 9刁一 12一 2 7
洪宗国 , 男 , 3 6岁 ,讲师 , 中南民族学院化学 系 , 武汉 刁3 0 0 7刁
中南民族学院学报 (自然科学版 ) 第 14 卷
1
.
2 实验方法
1
.
2
.
1 试管法 ( MI C)
取 Zm L薪艾油 , 加入 5 0匹 吐温 一 80 摇匀 ,用微孔滤膜过滤器过滤到塑料小指管内 . 通过倍
比稀释法加入 已备好培养液的试管中 . 使其浓度 依次为 1 0%。 、 5%。 、 2 . 5%。 、 1 . 25 编 、 0 . 能 5%。 、
0
.
3 1 2 5%
。 、 0
.
1 5 6叼。 、 0 . 0 7 8%。 、 0 . 0 3 9%。 . 再用刻度滴管加入浓度为 一0 5~ 1 06 CF 。 / m L 的各种菌液
0
.
05 m L
,置 37 ℃摆床 ( 2 0 0印m )中培养 1 8小时 , 观察试管澄清度 .将开始出现浑浊的试管及其前
后序号的试管涂布于无菌固体培养基上 , 观察菌管数〔”口.
1
.
2
.
2 贴片法
将小圆片贴于已涂布菌体的牛肉膏蛋白陈 固体培养基上 ,用 s o L 进样器取 2件L 薪艾油滴于
小 圆片中间 ,于 37 ℃培养 1 8小时后测定抑菌圈大小 〔” 〕. 用卡那霉素滴于小圆片上 ,测定对大肠
杆菌的抑菌圈大小作为对照 .
2 结果与讨论
2
.
1 薪艾油的最低抑菌浓度
用试管法 M l e , 使用各种浓度 的薪艾油 , 即一0 0% , 5 0% , 2 5% , 1 2 . 5% , 6 . 2 5% , 3 . 1 2 5% ,
1
.
62 5%
,全部试管均产生 白色沉淀 ,经涂布培养过液 ,均无菌落生长 . 降低薪艾油浓度 , 以大肠
杆菌 、 金黄 色葡萄球菌 、 白色念珠菌为试验菌种 ,观察结果见表 1 .
表 1 试管法观察结果 薪艾油浓度 (编 )
菌 别 一儒厂一会 3号 月号 5号 6号 7号 8号 9号2 . 5%。 1 . 2 5%。 0 . 6 2 5%。 0 . 3 1 2 5%。 0 . 15 6编 0. 0 7 8%。 0 . 0 3 9%。
大肠杆菌 十 十 + + + +
金黄色葡萄球菌 + 十 + + + +
白色念珠菌 + + + + + +一- - ~一下 - -一 - . - - ~ - ~ - - ~ - - ~ 一 ~ 一 . - ~ ~ -一 .一一一一 ~ `一 -一 - ~ ~一 - -无一 寺 一 一 一注 : “ 杏” 为白色乳状沉淀 ; “ 一 ” 为澄清液体 ; “ + ’ 生为微浑浊 ; “ + + ” 为浑浊 ; “ + + + ” 为严重浑浊从表 1看出 : 从 7号试管开始出现微浑浊浓度愈小 ,浑浊愈严重 . 无菌对比试验表明 , 浑浊是细菌生长造成的 . 为检验这 一假定 ,取上述 5号 、 6号与 7号试管中薪艾油溶液 5 0以进行涂布 , 于3 7℃培养箱中培养过夜 ,计算菌落数结果见表 2 . 数据表明 、 6号 (0 . 3 1 2 5编 )试管澄清 , 菌落数有限 , 可以认为该浓度为薪艾泊对上述病原菌的最低抑菌浓度 .
表 2 37 毛培养后 菌落数观察结果 薪艾油浓度 (%。 )
5号 6号 7号
1呈 子 只 11
0
.
6 2 5%
。 0
.
3 1 2 5%
。 0
.
1 5 6 2 5%

大 肠 杆 菌 无 6相个 多 . 无法计数
金 黄 色 葡 萄 球 菌 无 15 0个 多 . 无法计数
白 色 念 珠 菌 无 无 多 . 无法计数
2
.
2 薪艾油的抑菌作用
在牛 肉膏蛋白陈 固体培养基上 ,涂布 0 . Zm L 菌液 ,放入圆片 , 加入 2匹 薪艾油 ,培养 24 小
时 , 观察抑菌圈 ,结果见表 3 :
第 1期 洪宗国等 :薪艾油抑菌作用研究
表 3 薪艾油对各细 菌的抑 菌圈
细 菌 名 抑菌环直径 (m m )
1号 2号 3号 4号 5号 6号 (平均值 )
金 黄 色 葡 萄 球 菌 17 . 1 1 7 . 0 1 6 . 5 1 6 . 3 17 . 0 1 6 . 5
甲 型 链 球 菌 1 3. 1 1魂. 1 1 3 . 8 一5 . 1 1刁. 3 1 4 . 1
肺 炎 球 菌 13 . 7 14 . 1 1 5 . 2 12 . 7 12 . 3 13 . 6
结 核 杆 菌 13 . 5 1 2 . 7 r通. 0 1 3 . 0 1 3 . 2 13 . 3
奈 瑟 氏 菌 12 . 5 一2一 1 2 . 0 13 . 0 22 . 5 12 . 4
脑 膜 炎 双 球 菌 13 . 1 1 2 . 9 1 0 . 8 12 . 0 1 0 . 1 1 1 . 6
大 肠 杆 菌 1一 5 1一 0 1 1 . 5 1 1 . 4 1 1 . 0 一1 . 3
白 色 葡 萄 球 菌 12 . 1 1 1 . 弓 1 2 . 3 9 . 4 9 . 3 10 . 9
乙 型溶血性链球菌 10 . 0 9 . 3 9 . 6 9 . 7 10 . 1 9 . 7
白 色 念 珠 菌 10 . 0 9 . 1 9 . 0 8 . 2 5 . 1 9 . 3
绿 脓 杆 菌 9 . 5 日. 0 8 . 2 8 . 7 1 0 . 3 9一
大 肠 杆菌 ’ (对 照 ) 2 0 . 0 1 8 . 1 1 9 . 0 1 8 . 0 1 9 . 0 18 . 8
卡那霉素对大肠杆菌抑菌圈
从表 3可知 ,薪艾油对革兰 氏阴性细菌 , 阳性细菌均有一定的抑制作用 ; 对金黄色葡萄球
菌 、 甲型链球菌和肺炎球菌有较好的抑制作用 ;对结核杆菌 、 奈瑟氏菌 、 脑膜炎双球菌 、 大肠杆
菌 、 白色葡萄球菌 、 乙型链球菌 、 白色念珠菌 、 绿脓杆菌等也有一定的抑制作用 .
2
·
3 溶剂乳化剂对抑菌作用的影响
由于薪艾油在水中溶解度非常小 ,为避免使薪艾油浮于液体培养基表面 , 影响抑菌效果 ,
必须找到一种助溶剂使薪艾油与水混溶 . 尽管 乙醇对两者都能溶解 ,是理想的助溶剂 , 但乙醇
本身能杀菌 , 故不宜采用 . 我们用 1 0 %吐温 一 80 作贴片试验时 , 发现对大肠杆菌 、 白色念珠菌有
一定 的抑制作用 , 但对金黄色葡萄球菌无作用 . 而据文献报道 , ] , 用 0 . 5%一 3 . 0%吐温 一 80 作
为乳化剂使用时 ,对各细菌均无明显作用 . 据此 , 我们选用 2 . 5%吐温 一 80 作为乳化剂 . 此浓度能
使薪艾油在水中形成均匀乳液 . 并认为采用此浓度吐温 一 80 作乳化剂不会影响薪艾油最低抑菌
浓度的测定 .
参 考 文 献
杨铭清编 . 中草药有效成分理化和药理特性 (修订本 ) . 第二版 . 长沙 : 湖南科学技术出版社 , 19 8 2 . 5妮
明 ·李时珍 . 本草纲目 (上册 ) . 北京 : 人 民卫生出版社 , 1 9 8 5 . 93 5
范秀容等 . 微生物实验 . 第二版 . 北京 : 人民教育出版社 , 198 .9
王云峰等编 . 消毒技术规范 . 北京 : 人民卫生出版社 , 1 9 91 . 85
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