全 文 ：海枫藤抗类风湿性关节炎的实验研究
曹巧巧 施昕磊
【摘要】 目的 观察海枫藤醇提物的抗类风湿性关节炎作用。方法 采用佐剂性关节炎模型观察
大鼠体重、原发侧足跖肿胀度以及关节炎指数的变化。结果 海枫藤醇提物可以不同程度的减轻大鼠
原发侧足跖肿胀度以及关节炎指数。结论 海枫藤醇提物高浓度组对大鼠类风湿关节炎具有较强的抑
制作用。
【关键词】 海枫藤;类风湿性关节炎;弗氏完全佐剂
Experimental study of Marsdenia officinalis Tsiang et P． T． Li． in anti-rheumatoid arthritis CAO Qiao-
qiao，SHI xin-lei． Biological and Environmental Branch Courts Jiaxing Vocational Technical College，Jiaxing
314036，China
【Abstract】 Objective To observe the anti-inflammatory action of ethanol extract of the stems of Mars-
denia officinalis Tsiang et P． T． Li． Methods After establishing experimental model which was adjuvant in-
duced arthritis rat，the body weight of rats，the swelling of primary side，and the changes of arthritis index were
observed． Results Ethanol extract of M． officinalis high dosage group could inhibit the swelling of primary side
and arthritis index． Conclusion High dosage of M． officinalis ethanol extracts group have obvious inhibitory ac-
tion in anti-rheumatoid arthritis．
【Key words】 Marsdenia officinalis Tsiang et P． T． Li．;rheumatoid arthritis，Freund’s adjuvant com-
plete (CFA)
海枫藤［Marsdenia officinalis Tsiang et P． T． Li．］，系萝藦
科牛奶菜属植物［1］，主要分布于浙江、湖北、四川、云南等省，
作为浙江民间草药，全株药用，具有舒筋活络、散寒、除湿、止
痛的功效，对类风湿性关节炎以及跌打损伤的治疗有较好的
疗效［2］。但经查阅有关文献资料，国内外未见其抗类风湿关
节炎药理作用的研究报道，因此本文对上述海枫藤抗类风湿
性关节炎的药理作用进行研究
1 资料与方法
1. 1 试剂与器材 海枫藤［Marsdenia officinalis Tsiang et P．
T． Li．］，实验前以乙醇回流对其提取，然后用生理盐水配制
成 1 g生药 /ml的溶液。雷公藤多苷片由湖南协力药业有限
公司生产，国药准字:Z43020138，用生理盐水配制成 9. 45
mg /kg混悬液［3］。弗氏完全佐剂为美国 Sigma公司产品。千
分尺，沈阳市第三量具厂。
1. 2 动物 清洁级 SD大鼠，雄性，体重(160 ± 20)g，购自上
海必凯实验动物有限公司。
1. 3 大鼠佐剂性关节炎(AA)模型的制备 弗氏完全佐剂
(CFA) ，充分振荡、混匀，用 1 ml注射针头于 SD 大鼠右后肢
足跖内注射 0. 1 mlCFA。
1. 4 动物分组及给药 将 SD雄性大鼠随机分为 6 组，每组
6 只，设为空白对照组，模型组，雷公藤组，海枫藤醇提取物
高、中、低浓度组。其中除空白组外其余各组均按 0. 1 ml /只
弗氏完全佐剂注射于大鼠右后肢足跖内。实验第 8 天每天
灌胃给药，1 次 /d，模型组、空白组每日以 1 ml /100 g 体重生
理盐水给大鼠灌胃，其他组按对应组别每日给予海枫藤醇提
物灌胃，高浓度均以 1. 86 g /kg，中浓度均以 1. 23 g /kg，低浓
度均以 0. 64 g /kg灌胃。连续 21 d。
1. 5 测定指标与方法
1. 5. 1 体重的测量 从实验第 1 天起称重，以后每隔 6 天
称重 1 次。
1. 5. 2 大鼠足跖厚度的测定 实验第 1 天，用千分尺分别
测量大鼠足跖的厚度并记录，第 8 天起，隔日测量，并根据给
予 CFA前后的厚度之差计算肿胀度(cm) ，连续 21 d。
1. 5. 3 关节炎指数(AI)的计算 致炎后第 12 天开始观察
并记录全身关节病变程度，1 次 /3 d。全身病变按 5 级评分
法评价，根据未注射佐剂的其余 3 只肢体的病变程度累计积
分，计算出 AI。无红肿为 0 分;小趾关节红肿为 1 分;趾关节
和足跖肿胀为 2 分;踝关节以下的足爪肿胀为 3 分;包括踝
关节在内的全部足爪肿胀为 4 分。把各个关节的积分累计
起来，即为每只大鼠的 AI［4］。
1. 6 统计学方法 实验结果用 x ± s表示，数据用 SPSS统计
软件分析，组间差异用 t 检验计算，P ＜ 0. 05 差异有统计学
意义。
表 1 各组 AA大鼠体重变化的比较(x ± s，kg)
组别 1 d 8 d 15 d 22 d 29 d
空白组 145. 30 ± 6. 46 158. 69 ± 5. 25 177. 12 ± 5. 52 192. 70 ± 6. 09 209. 52 ± 6. 33
模型组 146. 96 ± 10. 27 161. 10 ± 10. 79 166. 24 ± 10. 07* 163. 33 ± 11. 98＊＊ 162. 54 ± 12. 72＊＊
雷公藤组 149. 74 ± 10. 90 159. 89 ± 10. 56 174. 98 ± 11. 36 181. 10 ± 11. 73* # 191. 32 ± 9. 10＊＊##
高剂量组 144. 61 ± 8. 23 160. 07 ± 7. 65 178. 81 ± 10. 01# 185. 38 ± 11. 70## 196. 49 ± 11. 84* ##
中剂量组 142. 87 ± 9. 78 161. 38 ± 12. 35 174. 72 ± 11. 54 179. 19 ± 11. 60# 188. 31 ± 10. 84* #
低剂量组 144. 59 ± 12. 39 160. 81 ± 12. 15 169. 30 ± 13. 64 170. 30 ± 12. 64* 173. 14 ± 10. 44＊＊
注:与空白组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 001;与模型组比较，#P ＜ 0. 05，##P ＜ 0. 001;n = 6
作者单位:314036 嘉兴职业技术学院生物与环境分院
·4· 中国现代药物应用 2011 年 11 月第 5 卷第 22 期 Chin J Mod Drug Appl，Nov 2011，Vol． 5，No． 22
DOI:10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2011.22.015
2 结果
2. 1 对 AA模型大鼠状态及体重的影响 实验过程中，与空
白组相比。模型组大鼠毛发枯槁，进食量减少，在实验前 2
周体重略有增加，实验后 2 周出现降低。大鼠右后足及继发
病变关节红肿明显并逐日加重，足跖明显增厚，动作迟缓，反
应不灵敏，爬行困难，活动减少。海枫藤醇提物 3 个浓度组
大鼠所出现的症状相对较轻，且摄食积极，大鼠活跃，体重均
持续增加，皮毛光滑有光泽，右后足及继发病变关节红肿较
轻，反应灵敏。雷公藤组大鼠虽症状有所减轻，但进食较少，
体重增长缓慢，倦怠，不喜欢活动，皮毛粗糙或发黄，脚底发
白，右后足及继发病变关节红肿较轻，反应较灵敏。见表 1。
2. 2 对 AA模型大鼠原发侧足跖厚度的影响
2. 2. 1 对 AA模型大鼠原发病变关节外观变化的影响 模型
大鼠在右后足跖皮内注射 CFA 后，后足爪开始变红、明显肿
胀，持续 3 d后，逐渐减轻，第 8 天开始左后足再度肿胀，肿胀
局部皮肤充血、红肿、增厚、温度升高，触之有明显的躲避
行为。
2. 2. 2 对 AA 模型大鼠右后足跖肿胀度变化的影响 足跖
厚度是反应 AA模型大鼠炎症程度的外部客观指标。由表 2
可知，各组大鼠在致炎前右后足跖厚度差异无统计学意义(P
＞ 0. 05)。致炎 8 d 后各组大鼠右后足跖均发生肿胀，其厚
度与空白组比较均差异有统计学意义(P ＜ 0. 001) ，模型复
制成功。给予不同浓度药物作用 24 ～ 28 d后可以观察到，雷
公藤组与海枫藤醇提物高、中、低剂量组均可以减轻弗式完
全佐剂引发的大鼠足跖肿胀，其中海枫藤醇提取物高浓度组
抑制作用最强 (P ＜ 0. 05)。
表 2 各组 AA大鼠右后足跖厚度的比较(x ± s，cm)
组别 致炎前
致炎后
8 d 14 d 20 d 24 d 28 d
空白组 4. 84 ± 0. 27 4. 88 ± 0. 26 4. 93 ± 0. 26 4. 97 ± 0. 29 5. 00 ± 0. 29 5. 03 ± 0. 28
模型组 4. 73 ± 0. 29 7. 37 ± 0. 46＊＊ 7. 40 ± 0. 45＊＊ 7. 45 ± 0. 45＊＊ 7. 39 ± 0. 47＊＊ 7. 37 ± 0. 49＊＊
雷公藤组 4. 80 ± 0. 34 7. 12 ± 0. 60＊＊ 7. 00 ± 0. 48＊＊ 6. 77 ± 0. 41＊＊# 6. 36 ± 0. 31＊＊## 5. 84 ± 0. 31＊＊##
高剂量组 4. 76 ± 0. 23 7. 18 ± 0. 52＊＊ 7. 22 ± 0. 47＊＊ 7. 07 ± 0. 48＊＊ 6. 98 ± 0. 49＊＊ 6. 79 ± 0. 50＊＊#
中剂量组 4. 77 ± 0. 18 7. 33 ± 0. 56＊＊ 7. 25 ± 0. 55＊＊ 7. 25 ± 0. 51＊＊ 7. 22 ± 0. 47＊＊ 7. 14 ± 0. 45＊＊
低剂量组 4. 91 ± 0. 27 7. 30 ± 0. 65＊＊ 7. 36 ± 0. 68＊＊ 7. 26 ± 0. 63＊＊ 7. 25 ± 0. 65＊＊ 7. 24 ± 0. 63＊＊
注:与空白组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊P ＜ 0. 001;与模型组比较，#P ＜ 0. 05，##P ＜ 0. 001;n = 6
2. 3 对 AA模型大鼠关节炎指数变化的影响 由表 3 可知，
实验第 12 天各给药组大鼠与模型组大鼠关节炎指数(AI)比
较差异不显著(P ＞ 0. 05)。此后模型组大鼠 AI逐渐升高，在
实验第 21 天达到高峰。实验第 21 和 28 天，雷公藤组和各
给药组均有不同程度抑制模型大鼠 AI 升高的作用，其中雷
公藤组、海枫藤醇提物高、中浓度组与模型组比较有显著性
差异(P ＜ 0. 05，P ＜ 0. 01，P ＜ 0. 001)。以上结果表明，海枫
藤醇提取物能抑制 AA模型大鼠继发侧肢体的关节病变，海
枫藤醇提物高浓度组和雷公藤组疗效尤佳。
表 3 各组 AA大鼠致炎后 AI的比较(x ± s)
组别 12 d 18 d 21 d 28 d
空白组 0 0 0 0
模型组 2. 4 ± 1. 1 4. 2 ± 1. 3 7. 2 ± 1. 6 6. 8 ± 1. 9
雷公藤组 2. 2 ± 0. 8 2. 4 ± 0. 6* 4. 2 ± 1. 6＊＊ 3. 8 ± 1. 8＊＊
高剂量组 2. 0 ± 0. 7 3. 0 ± 1. 2 4. 8 ± 1. 3* 3. 8 ± 1. 8＊＊
中剂量组 2. 2 ± 0. 8 3. 8 ± 1. 8 5. 2 ± 1. 3* 4. 8 ± 1. 3*
低剂量组 2. 6 ± 1. 1 4. 0 ± 1. 6 6. 6 ± 1. 7 6. 0 ± 1. 4#
注:与模型组比较，* P ＜ 0. 05，＊＊＊P，0. 001;与阳性药雷公藤
组比较，#P ＜ 0. 05
3 讨论
本实验观察到，模型组大鼠在右足垫皮内注入 CFA 后，
2 ～ 4 h内大鼠右足局部即开始红肿，并伴有发热现象，此时
可见大鼠活动明显减少，并伴随有跛行或拖腿现象，3 d后局
部肿胀开始逐渐消退，第 8 天右后足再度肿胀。第 10 天时
开始出现全身性的继发性炎症反应，在大鼠的对侧肢体(左
后肢)及前肢也出现关节红肿热痛症状。在整个实验过程
中，实验性 AA大鼠的足跖肿胀出现了两次高峰，这与有关
文献所报道的 AA大鼠经历的几个阶段性变化基本相似［5］，
说明本实验所复制的实验性 AA 动物模型是十分成功的。
致炎后本实验结果表明，模型组大鼠足跖肿胀度与空白组比
较有显著性差异，证明海枫藤对 AA 大鼠有明显的抗炎消肿
作用，能减轻或减缓炎性反应，促进足跖炎症肿胀的吸收和
消散，具有减轻关节肿胀和有效缓解早期症状的特点，为海
枫藤治疗类风湿性关节炎的确切疗效提供了有价值的实验
依据。
参考文献
［1］ 浙江植物志编辑委员会．浙江植物志(第五卷)． 杭州:浙江科
学技术出版社，1992．
［2］ 邱声祥，张壮鑫，周俊． 球花牛奶菜甾体成分研究． 植物学报，
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［3］ 吴艳．药理学实验指导．北京:人民军医出版社，2003，9:124．
［4］ 张钧田．现代药理实验方法． 北京:北京医科大学中国协和医
科大学联合出版社，1998:1383.
［5］ 陈奇．中药药理研究方法学．北京:人民卫生出版社，1993:44.
·5·中国现代药物应用 2011 年 11 月第 5 卷第 22 期 Chin J Mod Drug Appl，Nov 2011，Vol． 5，No． 22