全 文 ：基金项目:国家科学技术部农业科技成果转化资金项目(03EFN216300247)
作者简介:胡延萍 ,女 ,硕士研究生　　*通讯作者:李毅 ,男 ,研究员　　Tel:(0971)6101454　　E-mai l:liy i@ nw ipb. ac. cn
唐古特大黄染色体的核型分析
胡延萍 1, 2 ,谢小龙 1 ,冯海生 1 ,赵旭东 1, 2 ,王莉 1 ,李毅 1*(1.中国科学院西北高原生物研究所 ,西宁 810001;2.中国科学院研究
生院 ,北京 100049 )
摘要:目的　对蓼科(Po lygonaceae)植物唐古特大黄(Rheum tanguticum M axim. ex Ba lf.)染色体核型进行研究。方法　采用常
规压片方法 , 并结合显微摄影对染色体进行检测分析。结果　唐古特大黄体细胞染色体数目为 2n =22;核型公式为 K(2n)=
22=20m +2sm ,核型为 “ 1A”型。结论　唐古特大黄染色体的核型属于较原始的类型。
关键词:唐古特大黄;染色体数目;核型
中图分类号:R284　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001 -2494(2007)04 - 0258 -03
Karyotype Ana lysis ofRheum tanguticum Chrom osom e
HU Yan-ping1, 2 , X IE Xiao-long1 , FENG Ha i-sheng1 , ZHAO Xu-dong1, 2 , WANG Li1 , LI Yi1*(1.Northwest P la teau
Institute of B iology, Chinese Academ y of Sciences, X in ing 810001, China;2.GraduateUniversity of Chinese Academ y of Sciences, B ei-
jing 100049, China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　 The chrom osom e num be r and karyo type o f Rheum tanguticum w ere firstly repo rted in th is pape r.
METHOD S　Sec tions combined w ith m icrog raph w ere used to ana lyze chromosom e karyo type. RESULTS　The results are presented
as fo llow s:norm a l diploid 2n =22;ka ryo type fo rm ula is K(2n)=22=20m +2 sm , be longing to S tebbinss 1A type.CONCLUSION
　The ka ryotype o fRheum tanguticum be longs to orig ina l type.
KEY WORDS:Rheum tanguticum M ax im. ex Ba lf.;chrom osome number;karyo type
　　唐古特大黄 (Rheum tanguticum Maxim. ex
Ba lf.)为蓼科 (Po lygonaceae)大黄属 (Rheum L.)多
年生草本植物 。其干燥根及根茎可入药 ,性寒 ,味
苦;具有泻热通肠 ,凉血解毒 ,逐瘀通经之功效 [ 1] 。
分布在海拔 2 300 ～ 4 200m ,生于林缘 、林下沟谷或
灌丛[ 2] 。
目前 ,大黄属植物的研究主要集中于药用化学
成分的提取分析 [ 3-4]和胚胎学[ 5] 。唐古特大黄染色
体数目及核型尚未见报道 ,本实验首次对其染色体
核型进行研究 ,以便为该植物的鉴定 、起源 、演化 、良
种培育及进一步的分子生物学研究提供必要的细胞
学资料 。
1　材料与方法
1.1　材料
唐古特大黄 (Rheum tanguticum M axim. ex
Ba lf.)种子于 2005年 9月采自青海省果洛州玛沁
县大武乡军牧场附近 。原植物由中科院西北高原生
物所刘尚武研究员鉴定为唐古特大黄 (Rheum tan-
guticum M ax im. ex Ba lf.)。
1.2　方法
实验采用常规压片方法 [ 6] 。选取纯净的唐古
特大黄种子于室温下用蒸馏水浸泡 3 h, 0.1%的高
锰酸钾灭菌 10m in,蒸馏水冲洗 ,室温下培养萌发 ,
当根尖长至 1 cm左右时 ,于上午 8:30 ～ 9:30取材 ,
用冰水预处理 24 h后 ,卡诺固定液 (纯酒精-冰醋
酸 =3∶1)固定 24 h,蒸馏水冲洗后用 1mo l L- 1盐
酸在 60 ℃恒温下解离 10 m in,改良石炭酸品红染
色 , 45%醋酸压片 ,镜检。取 100个染色体分散良好
的细胞进行染色体计数 ,并对其中着丝点清晰的细
胞进行显微摄影。在放大照片中剪下染色体 ,并测
量比较 ,对同源染色体进行配对(图 1),并绘制核型
模式图(图 2)。
染色体核型分析按李懋学 [ 7]等的标准 ,核型分
类以 S tebb ins[ 8]的方法进行 。采用 A rano[ 9] 的核型
不对称系数(A s.K%)来确定染色体核型不对称程
度。着丝粒位置按 Levan[ 10]等标准计算。核型参数
计算公式为:染色体相对长度 (%) =染色体长度 /
染色体组总长度 ×100;染色体臂比 =染色体长臂长
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Ch in Pha rm J , 2007F ebrua ry, Vol. 42 No. 4　　　　　　　　　　　　　 中国药学杂志 2007年 2月第 42卷第 4期
　　
图 1　唐古特大黄染色体核型图
F ig 1　Karyog ram ofRheum tanguticum chromosom e
图 2　唐古特大黄染色体核型模式图
F ig 2　 Idiogram ofRheum tanguticum chrom osom e
度 /染色体短臂长度;染色体长度比 =最长染色体长
度 /最短染色体长度;染色体相对长度指数 =染色体
长度 /全组染色体平均长度;着丝粒指数 =短臂 /染
色体全长 ×100。
2　结果与分析
2.1　染色体数目
对 100个细胞进行染色体数目统计 ,其中 8个
细胞染色体数目为 20条;4个细胞染色体数目为 21
条;3个细胞染色体数目为 23条;85个细胞染色体
数目为 22条 ,占计数细胞总数的 85%,因此确定唐
古特大黄体细胞染色体数目为 2n =22(图 3)。观
察中未发现随体和多倍体现象 。
图 3　唐古特大黄体细胞分裂中期 , 示染色体 2n=22
F ig 3　Chromosom e number 2n =22 m e taphase ofRheum tan-
guticum som atic ce ll
2.2　染色体相对长度组成与核型分析
核型分析共测量了 7个细胞的染色体 ,核型参
数取平均值。相对长度变化范围为 8.47% ～
10.03%,臂比变化范围为 1.01 ～ 1.81, 平均臂比
1.24,臂比大于 2的染色体为 0, 染色体长度比
1.70,核型为 “ 1A ”。核型不对称系数 A s.K% =
54.86 %。核公式为 K(2n) =22=20m +2sm。由
表 1和图 1可以看出 ,唐古特大黄体细胞的 11对染
色体中 10对为中部着丝点区染色体 (m), 1对为亚
中部着丝点区染色体(sm)。
表 1　唐古特大黄染色体的核型参数
Tab 1　Chromosom e pa rame ter o fRheum tanguticum
No.
Re lativ e leng th /%
To ta l=S+L
A rm ratio
L /S
Type
Levan Kuo[ 11]
Index relative
leng th
Centrome ric
index
1 10. 03=4. 78+5. 25 1. 10 m M 2 1. 10 47. 63
2 9. 39=4. 22+5. 17 1. 23 m M 2 1. 03 44. 94
3 9. 35=4. 40+4. 95 1. 12 m M 2 1. 03 47. 07
4 9. 26=4. 55+4. 71 1. 04 m M 2 1. 02 49. 12
5 9. 20=3. 88+5. 33 1. 39 m M 2 1. 01 42. 05
6 9. 06=3. 98+5. 09 1. 28 m M 1 1. 00 43. 86
7 8. 95=4. 34+4. 60 1. 06 m M 1 0. 99 48. 54
8 8. 87=3. 56+5. 31 1. 51 m M 1 0. 98 40. 06
9 8. 73=4. 07+4. 66 1. 14 m M 1 0. 96 46. 61
10 8. 69=4. 33+4. 36 1. 01 m M 1 0. 96 49. 84
11 8. 47=3. 06+5. 43 1. 81 sm M 1 0. 93 35. 73
注:m -中部着丝粒;sm -亚中部着丝粒;M 1 -中短染色体;M 2 -中长染色体
N o te:m -med ian reg ion;sm - submedian reg ion;M 1 -m edian sho rt chromosome;
M 2 -median long chromosome
3　讨　论
一般认为 ,核型进化的基本趋势是由对称向不
对称发展的 ,系统演化上处于比较古老或原始的植
物 ,大多具有较对称的核型 ,而不对称的核型则常见
于衍生的 、特化的 、以及比较进化的植物类群中 [ 8] 。
核型不对称系数越接近 50%,核型的对称程度越
高 ,进化程度越原始 ,对唐古特大黄核型不对称系数
和核型类型分析 ,唐古特大黄的 A s.K%=54.86%,
接近于 50%,具有较大的对称性;其核型属 “1A ”
型 ,也显示了较高的对称性。因此 ,唐古特大黄在进
化过程中处于比较原始的地位。
染色体是遗传物质的载体 ,是细胞生命的控制
者。植物染色体的数目 、形态等是最稳定的细胞学
特征之一 。染色体的核型 、类型等也是表明该种系
统演化位置以及和相近种亲缘关系的重要依据。随
着基因工程技术和分子生物学飞速发展 ,以及在对
中草药进行深入研究的同时 ,作为细胞生物学的主
要研究内容 ,药用植物染色体核型分析技术将逐渐
渗透到生药学的研究领域 ,对植物物种的鉴定 、亲缘
关系的确定 、新药源的寻找和开发 、良种培育及驯化
等方面有特殊的意义。
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259 中国药学杂志 2007年 2月第 42卷第 4期　　　　　　　　　　　　 Ch in P harm J , 2007F ebruary, Vol. 42No. 4
作者简介:秦元华 ,女 ,硕士 ,讲师　　*通讯作者:崔昱 ,男 ,教授　　Tel:(0411)84720061　　E-mai l:q inyuanhua_1975@hotmai l. com
中药鸦胆子及补骨脂抗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的疗效观察
秦元华 ,戴晓冬 ,郑莉莉 ,陶琳 ,崔昱*(大连医科大学寄生虫学教研室 ,辽宁大连 116027)
摘要:目的　研究中药鸦胆子及补骨脂对实验大鼠肺孢子虫肺炎的疗效。方法　SD大鼠皮下注射地塞米松 , 连续 6周 , 建立
大鼠卡氏肺孢子虫肺炎动物模型 ,用鸦胆子 、补骨脂及两者合剂治疗实验大鼠 , 同时设复方磺胺为治疗对照组 , 通过体重 、肺
孢子虫感染程度及大鼠肺病理学观察等指标考核疗效。结果　鸦胆子 、补骨脂及合剂治疗组实验大鼠体重明显回升 , 与模型
对照组有显著差异(P <0. 05);各治疗组的包囊减少率均高于 60%, 合剂治疗组不优于各组分单独治疗组。病理学结果显示
治疗后肺部呈修复性变化。结论　鸦胆子及补骨脂对大鼠肺孢子虫肺炎具有疗效。
关键词:卡氏肺孢子虫;鸦胆子;补骨脂
中图分类号:R969　　　文献标识码:A　　　文章编号:1001 -2494(2007)04 - 0260 -04
Therapeutic E ffec t ofBrucea Javan ica and F ructus P soraleae on Pneumocystis Car in ii Pneumonia in Rat
Q IN Yuan-hua, DA IX iao-dong, ZHENG Li-li, TAO Lin, CU IYu*(Departm ent of Parasitology, DalianM edicalUn iversi-
ty , Da lian 116023, Ch ina)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To assess the the rapeutic effect of brucea jav anica and fruc tus psoraleae on pneum ocy stis carinii enum o-
nia (pcp) in immunosuppressed experim enta l ra ts.METHODS　PCP anima lm ode ls we re estab lished by hypode rm ic injec tion of dex-
am ethasone in rats, tw ice a w eek fo r 6 w eek s.The PCP ra ts w ere adm iniste red ora lly w ith brucea javanica at the dose of 2 mL once a
day, fruc tus psora leae a t the doe s of 2 mL once a day , m ix ture a t the do se o f brucea javanica 1 mL and fructu s pso ra leae 1 mL once a
day for 14 day s, respec tively. Positive contro lwas adm inistered o ra llyw ith SWZ Co( su lfam e thoxazo le 250 m g kg - 1 +T rim ethoprim e 50
m g kg - 1) .A ll ratsw ere euthanized a t the end o f 8 th w eek. The eva luation of drug e fficacyw as dec ided on the base of increased body
w eight and m ean cy st number per fie ld in lung print sm ea r.RESULTS　The increase o f body we ight trea ted w ith brucea jav anica,
fruc tus pso ra leae and m ix ture we rem o re than tha t o f imm unosuppressed rats in con tro l g roup, respective ly.The dec reased ra tes o f cyst in
the treated g roups w ere m ore than 60%( the group treated w ith m ix turew as no be tter than the othe r two g roups). It w as a obv ious re-
pairm ent in the slice o f lung of the trea tm en t g roup.CONCLUSION　The the rapeutic e ffec ts of brucea javan ica and fructus pso ra leae
on rat Pneum ocy tstis carinii peneum on ia are ac tive.
KEY WORDS:pneum ocy stis ca rinii enum on ia;brucea javan ica;fructus pso ra leae.
　　卡氏肺孢子虫肺炎 (pneumocystis ca rinii pneu-
mon ia, PCP)是一种极其严重的机会感染性疾病 ,多
发于免疫功能低下或缺陷人群 ,特别是近年接受免
疫抑制剂治疗的器官移植者 、肿瘤化疗者以及艾滋
病患者等高危人群的扩大 ,本病已成为此类人群的
重要死亡原因 [ 1] 。目前防治 PCP的主要药物为戊
烷脒 、甲氧苄啶-磺胺甲基异口恶唑 (TMP-SMZ),但由
于其严重的不良反应 [ 2] ,病人无法耐受 [ 3] ,使其应
用受到限制。尽管近些年来国内外学者探讨用多种
药物防治本病 [ 4-6] ,但一直未能找到理想的药物 ,因
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