全 文 ：文章编号: 1009 - 5276( 2003) 06 - 0910 - 02 中图分类号:R931. 6 文献标识码:A 收稿日期: 2002 - 09 - 21
筒鞘蛇菰镇痛抗炎作用的研究
阮汉利 李 娟 赵晓亚 张勇慧 向 明 吴继洲
(华中科技大学同济医学院药学院, 430030, 湖北武汉 / /第一作者女, 1968年生, 副教授)
摘 要:目的:研究筒鞘蛇菰的镇痛抗炎作用。方法: 其一, 利用小鼠热板法和醋酸扭体法,观察筒鞘蛇菰的
镇痛作用; 其二,制备小鼠二甲苯致炎和腹腔毛细血管通透性增高炎症模型,观察筒鞘蛇菰的抗炎作用。结果:筒
鞘蛇菰甲醇提取物能显著提高小鼠热刺激的痛阈水平;对小鼠二甲苯致炎性耳廓水肿均有显著的抑制作用;对小
鼠醋酸扭体反应具有显著的抑制作用。结论: 筒鞘蛇菰甲醇提取物具有显著的镇痛抗炎作用。
关 键 词:筒鞘蛇菰; 镇痛抗炎
筒 鞘 蛇 菰 ( Balanophora
involucrata HK . f . )属蛇菰科, 别名鸡
心七、文王一只笔, 药用其全草。筒鞘
蛇莸是湖北省民间著名中草药, 具有消
炎止痛、润肺止咳、活血止血等功效, 用
来治疗胃痛、月经不调、跌打损伤及外
伤出血等症, 112疗效奇佳。目前国内未
有关于其药理活性的研究。本实验对
主要研究筒鞘蛇菰的抗炎镇痛药理作用。
1 材料与方法
药品和试剂 筒鞘蛇菰药材由神农架地区药监局石世
贵主任药师采集并鉴定。取筒鞘蛇菰粗粉, 用甲醇回流提
取,浓缩蒸干得总浸膏, 用 CMC - Na配制成混悬液备用, 高
剂量组每 1ml相当于原生药 0. 8g, 低剂量组相当于 0. 5g。
伊文思蓝( Evan. s blue) : 上海化学试剂采购供应站, 实验时
用蒸馏水稀释成所需浓度,备用;冰醋酸: 分析纯,武汉市中
南化学试剂厂,实验时用蒸馏水稀释成所需浓度; 氢化可的
松注射液:湖北中天爱百颗药业有限公司, 每支 25mg, 实验
时用蒸馏水稀释成所需浓度,备用; 双氯灭痛、盐酸吗啡均为
市售;二甲苯: 分析纯,北京化工厂。
动 物 清洁级昆明种小鼠,雌雄兼用, 购自同济医学
院实验动物学部。
仪 器 恒温水浴锅: 上海跃进医疗器械厂生产; 751
型分光光度计: 上海分析仪器厂; 电子天平: Metter AE160
型, Switzerland。
2 方法与结果
最大耐受量试验(安全限度试验) 122 方法 取体重 18
~ 22g的健康昆明种小鼠 20 只,雌雄各半, 禁食 12小时后,每
只小鼠灌服含生药 1. 0g /ml(最大浓度)的筒鞘蛇菰混悬液 0.
5ml(最大给药体积) ,一日内连续 3次给药,连续观察 7 天。
结 果 动物未出现任何毒性反应及死亡。
总给药量= 1. 0g /ml@ 0. 5ml/20g@ 3= 75g /kg (相当于生
药量) ,故该药一日内小鼠最大耐受量( MTD)大于 75g /kg。
对小鼠热板痛反应时间的影响132 方法 取筛选合格
雌性小鼠 [( 55? 0. 5) e 舔后足时间大于 5s 小于 30s] 60 只,
体重 18~ 22g,随机分为 6 组, 每组 10 只, 各鼠测 2 次痛阈,
取均值作为基础痛阈。阴性对照采用等容量 NS, 阳性对照
采用盐酸吗啡和双氯灭痛,分别按表 1 给予供试液, 给药后
30 分钟、60 分钟、90 分钟、120 分钟测定各鼠痛阈值 1 次。
小鼠 60s 仍不舔后足者, 立即取出小鼠以免烫伤, 并以 60s
计。计算各鼠用药后痛阈提高百分率,并在药效达峰值处作
t检验,比较给药组与对照组间差异显著性。结果见表 1。
表 1 筒鞘蛇菰提取物对小鼠热板痛反应时间的影响(…x ? s)
组别 剂量 动物数
(只) 给药前痛阈值 /S
给药后痛阈值( S)
30分钟 60分钟 90分钟 120分钟
NS - 10 21. 63 ? 2. 76 29. 37 ? 8. 49 27. 24 ? 4. 31 27. 86 ? 10. 97 30. 05 ? 6. 17
筒鞘蛇菰 20g /kg 10 22. 03 ? 3. 67 44. 82 ? 18. 12* 42. 79 ? 16. 48* 51. 87 ? 12. 36 49. 94 ? 12. 5* *
筒鞘蛇菰 12. 5g /kg 10 19. 81 ? 3. 32 44. 36 ? 17. 23* 42. 12 ? 13. 15* * 48. 55? 15. 02# # * * 43. 04 ? 17. 18*
盐酸吗啡 20mg /kg 10 21. 50 ? 5. 47 55. 33 ? 8. 37* 35. 53 ? 17. 95 19. 92 ? 9. 81 ) ) )
双氯灭痛 20mg /kg 10 17. 77 ? 4. 74 29. 45 ? 10. 37 37. 76 ? 7. 42* * 40. 59 ? 15. 36 30. 66 ? 7. 76
与 NS比较: * P < 0. 5; * * P < 0. 01 与吗啡比较: # P < 0. 05; # # P < 0. 01
结 果 热板法镇痛实验表明筒鞘蛇菰提取物高、中两
个剂量组对小鼠有非常显著的镇痛作用,低剂量组与阴性对
照组无显著性差异。故以后的实验中仅设置两个剂量, 即
20g /kg与 12. 5g /kg。实验结果表明对物理性刺激(热板致
痛) ,筒鞘蛇菰提取物药效强(与 NS 组比较, 90 分钟达峰值
时药效有非常显著性差异)、持续时间长( 120 分钟时药效与
NS 组比较仍有显著性差异 )。与吗啡、双氯灭痛比较,筒鞘
蛇菰提取物药效强于双氯灭痛, 可与吗啡相比,且持续时间
比吗啡长。
小鼠扭体反应的影响(醋酸扭体法) 142 方法 取健康
小鼠 40 只, 雌雄各半,体重 18~ 22g ,随机分成 4 组,每组 10
只。分别按表 2 缩示剂量 ig 给药。阴性对照组给予等容量
#910#
中 医 药 学 刊 2003年 6月第 21卷第 6期
DOI：10.13193/j.archtcm.2003.06.75.ruanhl.045
NS,阳性对照组给予氢化可的松 20mg /kg, ip。给药后 90 分
钟(阴性对照组 30分钟) ,各鼠腹腔注射 0. 6%的醋酸溶液。
0. 1mg /10g, 观察注射后 15 分钟内小鼠出现扭体反应的时
间及扭体次数。计算镇痛的百分率, 并作 t 检验, 比较给药
组与对照组间差异的显著性。结果见表 2。
表 2 筒鞘蛇菰提取物对冰醋酸所致小鼠扭体反应的
影响(…x? s)
组别 动物数 剂量
反应
动物数
扭体出现时间
( min)
扭体次数
镇痛率
%
NS 10 ) 10 3. 70 ? 1. 44 33. 5 ? 8. 2 )
筒鞘蛇菰 10 20g/kg 10 5. 54 ? 3. 53 17. 8 ? 10. 3* * 46. 9
筒鞘蛇菰 10 12. 5g/kg 10 5. 34 ? 2. 09 20. 31 ? 1. 8* * 39. 4
氢化可的松 10 20mg /kg 10 6. 46 ? 2. 75 12. 9 ? 8. 9* * 61. 5
与 NS组比较: * P < 0. 05; * * P < 0. 01 与氢化可的松比
较: # P < 0. 05; # # P < 0. 01
结 果 表明筒鞘蛇菰提取物高、低两个剂量组均能减
少小鼠扭体次数( P < 0. 01)及延长扭体出现时间, 且药效
可与氢化可的松相比。
二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 (耳廓肿胀法) 132 方
法 取健康雄性小鼠40 只,体重 25~ 30g, 随机分为4 组, 每
组 10 只。分别按表 3 所示剂量给药, Qd @ 3d, ig。阴性对照
组给予等容量 NS, 阳性对照组给予双氯灭痛 20mg /kg , Qd
@ 3d, ip。末次给药后 1小时 (阳性对照组 30 分钟) , 用微量
移液器精密吸取 50Ll二甲苯于各鼠右耳前后两面致炎。15
分钟后,将小鼠颈椎脱臼处死 ,沿耳廓基线剪下两耳。用直
径 8mm 的打孔器分别在两耳同一部位打下圆耳片, 迅速以
电子天平称重。每鼠右耳片减去左耳片重量即为耳片炎症
肿胀度。结果见表 3。
肿胀抑制率= | (对照组平均肿胀度 -给药组平均肿胀
度) /对照组平均肿胀度| @ 100%
表 3 筒鞘蛇提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响
(…x? s)
组别 动物数 剂量 肿胀度 肿胀抑制率%
NS 10 - 13. 00? 4. 76 -
筒鞘蛇菰 10 20g /kg 7. 87 ? 5. 60* 39. 46
筒鞘蛇菰 10 12. 5g /kg 5. 91? 5. 46* * 54. 54
双氯灭痛 10 20mg /kg 7. 56 ? 4. 72* 41. 85
与 NS比较: * P < 0. 05; * * P < 0. 01 与双氯灭痛比较: # P < 0.
05; # # P < 0. 01 给药时间比较: ý P < 0. 05; ý ý P < 0. 01
结 果 表明,筒鞘蛇菰提取物高、低两个剂量组均能
显著抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀。与双氯灭痛比较,筒鞘
蛇菰两个剂量组药效均可与之相比, 且高、低两个剂量组间
无显著性差异。
对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响122 方法 取健康
雄性小鼠 40 只, 体重 18~ 22g, 随机分为 4 组,每组 10 只。
分别按表 4 所示剂量给药, Qd @ 3d, ig。阴性对照组给予等
容量 NS,阳性对照组给予双氯灭痛0. 1g /kg , Qd@ 3d, ig。末
次给药后 1 小时 (阳性对照 30 分钟) , 各鼠尾静脉注射 0.
5%伊文思蓝生理盐水溶液 0. 1ml/10g , 并立即腹腔注射 0.
6%的醋酸生理盐水溶液 0. 1ml /10g。20 分钟后, 将小鼠颈
椎脱臼处死,腹腔注射 6ml生理盐水。轻揉小鼠腹部后, 沿
腹中线剪一小口, 用尖端圆滑的吸管吸出腹腔洗出液(出血
者弃去不用) , 1500rpm 离心 5 分钟, 然后在 751 型分光光度
计于波长 590nm 处测定吸收度( OD值)。结果见表 4。
表 4 筒鞘蛇菰提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性的
影响(…x? s)
组别 动物数 剂量 OD 值
NS 10 - 0. 033 ? 0. 017
筒鞘蛇菰 10 20g /kg 0. 029 ? 0. 013
筒鞘蛇菰 10 12. 5g /kg 0. 024 ? 0. 008
双氯灭痛 7 0. 1g /kg 0. 085 ? 0. 073
结 果 结果表明,筒鞘蛇菰提取物对小鼠腹腔毛细血
管通透性增高没有显著的抑制作用。
3 讨 论
筒鞘蛇菰的甲醇提取物两个剂量均能延长小鼠热板痛
反应时间,且药效强、持续时间长。其镇痛效果强于双氯灭
痛,可与吗啡相比, 且持续时间比吗啡长。筒鞘蛇菰提取物
高、低两个剂量组均能减少小鼠扭体次数及延长扭体出现时
间,且药效可与氢化可的松相比。以上实验结果表明筒鞘蛇
菰具有很好的镇痛效果,与文献记载筒鞘蛇菰有/ 止痛0功效
相符合。112筒鞘蛇菰提取物高、低两个剂量组均能显著抑制
二甲苯所致的小鼠耳肿胀。其作用可与双氯灭痛相比。但
筒鞘蛇菰提取物对小鼠腹腔毛细血管通透性增高没有显著
的抑制作用。故筒鞘蛇菰的抗炎作用及其作用机制有待进
一步研究。
参考文献
112湖北省卫生局.湖北中草药志 (二)1M2.武汉:湖北人民出版社,
1982, 523
122陈奇主编.中药药理研究方法学1M2.北京: 人民卫生出版社,
1994, 118
132李仪奎主编.中药药理实验方法学1M2.上海:上海科学技术出版
社, 1994, 350
142徐叔云主编.药理实验方法学1M2.第二版,北京: 人民卫生出版
社, 1991, 700
Studies on Anti- inflammatory and Analgesic effects of Balanophora involucrata
1Abstract2Objective: T o study the Analgesic and Anti - inflammatory effects of Balanophora involucrata. Methods: ( 1) Adopting hot
plate and ace tic acid w rithing test in mice, we evaluated the pain releasing effect of Balanophora involucrata. ( 2) By using the model of
ear swelling caused by xy lol and abdominal capillary permeability of mice, we evaluated the anti - inflammatory effect of Balanophora
involucrata. Results: Balanophora involucrata could markedly inhibited the ear sw elling induced by xylol, decreased mice writhing and
had evident analgesic effect with ho t - plat in mice. Conclusion: Balanophora invo lucrata had significant anti - inalammato ry and anal-
gesic effects.
1Key words2Balanopho ra involucrata; Analgesic; Anti - inflammation
#911#
筒鞘蛇菰镇痛抗炎作用的研究