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鸡血藤商品药材质量评析



全 文 :中药新药与临床药理 2012年 9月第 23卷第 5期
鸡血藤为豆科植物密花豆 Spatholobus suberectus
Dunn.的干燥藤茎。具有补血、活血、通络的功效,
用于月经不调、血虚萎黄、风湿痹痛等症[1],主产于
广西、广东,以野生药材入药。由于近年来的过度
砍伐与利用,其野生资源蕴藏量不断下降,一些比
较细的藤茎亦被药用。鸡血藤中主要含有黄酮类、
有机酸、蒽醌、甾体、三萜类等成分[2- 4]。其中,黄
烷醇类成分儿茶素、表儿茶素等含量较高,而其他
黄酮类成分含量普遍偏低。儿茶素和表儿茶素可显
著刺激骨髓细胞,抑制小鼠造血祖细胞的增殖,从
而加速造血干细胞的增殖与分化[5]。有机酸类成分原
儿茶酸,具有抗菌和抗炎的作用,对心血管系统亦
收稿日期:2012- 04- 10
作者简介:刘军民,女,教授,研究方向:中药材 GAP与中药材品质评价。Email:liujunmin812@163.com。
基金项目:广东省教育部科技部企业科技特派员行动计划专项(2009B090600135);广东省重大科技专项(2007A032200001)。
鸡血藤商品药材质量评析
刘军民 1,安 冉 1,翟 明 2,黄颖喻 1(1. 广州中医药大学中药学院,广州 510006;2. 嘉应学院医学院,广
东梅州 514031)
摘要:目的 对鸡血藤商品药材质量现状进行分析与评价。方法 观察与描述鸡血藤药材断面的性状特征;依
照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录 XA方法测定醇溶性浸出物含量;采用高效液相色谱法同时测定鸡
血藤中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的含量。结果 鸡血藤商品药材饮片的直径大小及其断面含树脂的环纹数
均具有较明显的差异;醇溶性浸出物在 5.80~10.47 %之间;原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素含量分别为 0.005 %~
0.024 %,0.021 %~0.133 %,0.029 %~0.266 %。结论 鸡血藤商品药材质量差异较大,部分商品药材尚未达到
入药要求。
关键词:鸡血藤;商品药材;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:1003- 9783(2012)05- 0573- 03
doi:10.3969/j.issn.1003- 9783.2012.05.022
Quality Assessment of Medicinal Material of Caulis Spatholobi
LIU Junmin1,An Ran1,ZHAI Ming2, HUANG Yingyu1(1. College of Chinese Medicine,Guangzhou University of
Chinese Medicine,Guangzhou 510006,China;2. Medical College of Jiaying University,Meizhou 514031 Guang-
dong,China)
Abstract:Objective To investigate the status of the quality of medicinal material of Caulis Spatholobi. Methods The
sectional characteristics of Caulis Spatholobi were observed. Ethanol- soluble extractives were measured by the method
of Chinese Pharmacopoeia(a)Appendix XA(2010 edition),and the contents of protocatechuic acid,catechin,and
epicatechin in Caulis Spatholobi were determined by HPLC. Results There were obvious differences of slice diameter
and resin- containing ring pattern count in the samples of medicinal material of Caulis Spatholobi. The contents of the
ethanol- soluble extractives were 3.07 %~11.62 %. The contents of protocatechuic acid,catechin,epicatechin were
0.005 %~0.024 %,0.021 %~0.133 %,and 0.029 %~0.266 %,respectively. Conclusion The quality of medicinal
material of Caulis Spatholobi varies greatly,and some of them were inferior to the standard of Chinese Pharmacopoeia
(edition 2010).
Keywords:Caulis Spatholobi;Chinese medicinal material;Determination
573· ·
Traditional Chinese Drug Research & Clinical Pharmacology,2012 September,Vol. 23 No. 5
40
30
20
10
0
0 5 10 15 20 25 30
40
30
20
10
0
0 5 10 15 20 25 30
1
2 3
3
2
1
t /min
A. 对照品
t /min
B. 供试品
具有明显的药理活性[6]。为了进一步探讨鸡血藤商品
药材质量现状,本文从其横断面性状特征、醇溶性
浸出物及原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的含量等方
面对其商品药材质量进行分析与评价,并建立了
HPLC法同时测定鸡血藤中上述 3 种成分含量的方
法,为鸡血藤药材质量的监测与控制提供借鉴。
1 仪器与试药
T2000p高效液相色谱仪,上海天美科学仪器有限
公司;LC2030紫外检测器,T2000p化学工作站。原
儿茶酸(批号: 110809- 200604)、儿茶素(批号:
877- 200001)、表儿茶素(批号:110878- 200102)对
照品均为中国药品生物制品检定所产品,纯度均>
98 %。甲醇、乙腈为色谱纯,水为超纯水,其他试
剂均为分析纯。样品经广州中医药大学徐鸿华教授
鉴定为豆科植物密花豆 Spatholobus suberectus Dunn.
的干燥藤茎,标本存于广州中医药大学中药资源研
究室。
2 方法与结果
2.1 性状特性 采用常规的药材性状特征鉴别方法,
观察与描述鸡血藤商品药材饮片的横切面特征。结
果表明,鸡血藤商品药材多为横切片,极少数破碎;
断面含树脂的偏心性环纹数基本上为 3圈以上,少
数达 5圈以上。
2.2 醇溶性浸出物 依照《中华人民共和国药典》2010
年版一部附录 X A测定。
2.3 原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的含量测定
2.3.1 色谱条件 Phenomenex synergi- C18 色谱柱(4.6
mm× 250 mm,4 μm);流动相 A- 0.1 %磷酸,B-
乙腈;梯度洗脱:0~18 min,10 % B;18~35 min,
12 % B;35~40 min,100 % B;40~50 min,10 % B;
流速 1.0 mL·min-1;室温检测;检测波长 280 nm;进
样量 10 μL。原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素与其他峰
分离度大于 1.5,理论塔板数均大于 10 000,峰形较
好。对照品溶液及供试品溶液色谱图见图 1。
2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取原儿茶酸、儿茶
素和表儿茶素对照品适量,加甲醇 - 水(1∶1)制成
每 1 mL分别含 0.955,0.895,0.695 mg的溶液,作
对照品贮备溶液。然后,依次从中吸取 60,150,
300 μL,置于 2 mL棕色量瓶中,加甲醇 - 水(1∶1)
至刻度,摇匀,制成混合对照品溶液,于 4 ℃冰
箱中放置,备用。
2.3.3 供试品溶液的制备 取样品粉末(过 40目筛)
约 1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇
30 mL,称定质量。静置 30 min后超声处理 50 min,
再称定质量,加甲醇补足失质量,摇匀,滤过,精
密吸取 20 mL续滤液置瓷蒸发皿中,水浴挥干甲醇,
残渣用 15 mL蒸馏水溶解,转置分液漏斗中,分别
加醋酸乙酯 15 mL,萃取 4 次,合并醋酸乙酯萃取
液,减压回收至干。加甲醇 - 水(1∶1)定容于 5 mL
棕色量瓶中,摇匀,过 0.45 μm的微孔滤膜,作为供
试品溶液。
2.3.4 线性关系考察 分别精密吸取混合对照品溶液
1,5,10,15,20 μL注入液相色谱仪中,测定峰面
积的积分值。以峰面积(Y)为纵坐标,以对照品的进
样量(X)为横坐标,绘制标准曲线。得到的回归方
程及相关系数分别为:Y=1.52×106X- 5.37×103,
r = 0.9999;Y = 4.60×105X+1.20×104, r = 0.9968;
Y = 3.60×105X+2.77×103,r=0.9998。表明原儿茶酸
在 0.029~0.573 μg时,儿茶素在 0.067~1.343 μg
时,表儿茶素在 0.104~2.085 μg时,峰面积与进样
量呈良好的线性关系。
2.3.5 精密度试验 精密吸取混合对照品溶液,按照
2.3.1 项下的色谱条件连续进样 6 次,进样量为 10
μL,记录 3种对照品的峰面积,计算 RSD 值。3种
对照品 RSD分别为原儿茶酸 0.02 %,儿茶素 0.04 %,
表儿茶素 0.05 %(n=6),表明仪器精密度良好。
2.3.6 重现性试验 精密称取同一批(样 5)鸡血藤样品
6 份,每份 1 g,依照 2.3.3 项下制备供试品溶液,
2.3.1 项下的色谱条件进行分析,各进样量为 10 μL,
计算 3种成分的质量分数,取平均值。结果显示,平
均含量为:原儿茶酸 0.212 mg·g-1,儿茶素 0.147 mg·
g-1,表儿茶素 0.288 mg·g-1;RSD依次为 2.0 %,2.1
%,2.7 %(n=6),结果表明本方法重现性良好。
图 1 鸡血藤对照品及样品HPLC图
1. 原儿茶酸;2. 儿茶素;3. 表儿茶素
Figure 1 HPLC chromatograms of the reference substance(A)and
Spatholobus suberectus Dunn(B)
574· ·
中药新药与临床药理 2012年 9月第 23卷第 5期
2.3.7 稳定性试验 取 2.3.3 项下的供试品溶液,室
温放置,分别于 0,2,4,8,12,24 h,按 2.3.1项
下的色谱条件进行测定,每次进样 10 μL,分别记录
保留时间与峰面积值。结果显示,24 h内原儿茶酸、
儿茶素、表儿茶素的保留时间与峰面积相差不大,
24 h峰面积 RSD分别为 1.5 %,1.6 %,1.1 %,表明
供试品溶液在 24 h内稳定。
2.3.8 加样回收率试验 准确称取已知含量的(样 4)
鸡血藤样品粉末 6 份,每份 0.5 g,分别精密加入
2.3.2 项下的对照品溶液,依 2.3.3 项下制备供试品
溶液,按照 2.3.1 项下的色谱条件进行测定,结果
见表 1。
2.3.9 样品测定 按 2.3.3 项下制备供试品溶液,各
进样 10 μL,取平均值计算含量,结果见表 2。
3 讨论
研究结果显示,鸡血藤商品药材断面含树脂的
偏心性环纹数基本上可达传统入药标准(3圈以上),
而 5圈以上者甚少;醇溶性浸出物在 5.80~10.47 %之
间,14批样品中只有 3批样品达到现行版《中国药
典》中的规定。而鸡血藤药材中 3种成分的含量差异
亦非常大,其中,原儿茶酸含量很低,为 0.005 %~
0.024 %,儿茶素与表儿茶素的含量分别为 0.021 %~
0.133 %、0.029 %~0.266 %,相对较高。建议可将鸡
血藤中儿茶素类成分的含量作为评价鸡血藤药材品
质好坏的指标之一。此外,随着我国鸡血藤野生资
源蕴藏量的不断减少,一些达不到入药要求的鸡血
藤藤茎也被采挖入药,质量参次不齐,并呈明显下
降趋势。因此,如何确保鸡血藤药材资源的可持续
利用也是今后值得深入研究与探讨的问题。
参考文献:
[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典(1部)[M]. 北京:中国医
药科技出版社,2010:180.
[2] 崔艳君,刘屏,陈若芸. 鸡血藤的化学成分研究[J]. 药学学报,
2002,37(10):784- 787.
[3] 严启新,李萍,胡安民 . 鸡血藤化学成分的研究 [J]. 中草药,
2003,34(10):876- 878.
[4]郑岩,刘桦,赵玉英,等. 鸡血藤黄酮类化合物的研究[J]. 中国中
药杂志,2008,33(2):152- 154.
[5]刘屏,王东晓,陈若芸,等. 儿茶素对骨髓细胞增殖周期及造血生
长因子基因表达的作用[J]. 药学学报,2004,39(6):424.
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院药用植物资源开发研究所,等. 新华本草纲要[M]. 第 3册. 上
海:上海科学技术出版社,1990:95.
(编辑:宋威)
对照品
原儿茶酸
儿茶素
表儿茶素
样品量
/ mg
500.3
500.1
500.3
500.4
500.2
500.2
500.3
500.1
500.3
500.4
500.2
500.2
500.3
500.1
500.3
500.4
500.2
500.2
样品中含量
/ mg
0.117
0.117
0.117
0.117
0.117
0.117
0.185
0.185
0.185
0.185
0.185
0.185
0.359
0.359
0.359
0.359
0.359
0.359
加入量
/ mg
0.11
0.11
0.11
0.11
0.11
0.11
0.18
0.18
0.18
0.18
0.18
0.18
0.36
0.36
0.36
0.36
0.36
0.36
测得量
/ mg
0.226
0.208
0.263
0.238
0.233
0.226
0.352
0.374
0.364
0.360
0.370
0.375
0.635
0.712
0.733
0.722
0.753
0.669
回收率
/ %
99
102
105
104
102
99
102
102
99
98
101
102
100
99
102
100
105
101
平均回收
率 / %
102
100
101
RSD
/ %
1.25
1.09
1.26
表 1 原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的加样回收率(n=6)
Table 1 Recoveries of protocatechuic acid,catechin and epicate-
chin
表 2 鸡血藤药材中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素及醇溶性浸
出物的含量(n=6,%)
Table 2 The contents of protocatechuic acid,catechin,epi-
catechin and ethanol- soluble extractives in Caulis Spatholobi
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
购买地
江苏南京
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湖北十堰
湖北武穴
乌鲁木齐
福建厦门
云南昆明
原儿茶酸 /
×10-2
0.82
1.44
0.90
2.35
2.12
0.60
1.83
1.50
0.67
0.51
0.49
0.49
0.91
1.50
儿茶素 /
×10-2
6.17
2.09
2.54
3.70
1.47
13.26
2.36
5.26
8.01
9.27
3.33
10.30
6.53
3.31
表儿茶素 /
×10-2
26.62
4.50
19.43
7.82
2.88
21.38
4.64
9.78
26.28
25.32
13.56
23.57
12.73
10.05
醇溶性浸出物
(n=3)
7.93
5.80
9.27
6.95
5.88
10.47
6.25
7.32
6.93
7.88
7.18
9.17
7.58
6.73
575· ·