全 文 ：鸡血藤为豆科植物密花豆 Spatholobus suberectus
Dunn 的干燥藤茎。 具补血、 活血、 通络的功效，
用于月经不调、 血虚萎黄、 风湿痹痛等症[ 1 ]。 现代
药理研究表明： 鸡血藤具有改善造血系统、 降血脂、
抗血栓形成、 抗肿瘤、 镇静、 催眠等作用 ［2-4］。 鸡血
藤含多种成分， 如黄酮类、 有机酸类、 萜类、 甾醇
类等， 其总黄酮 （STF） 具有显著的促进造血功能
恢复的作用 [ 5 -6 ]。 黄烷醇类成分儿茶素、 表儿茶素
等对骨髓各系祖细胞生长有显著的促进作用 [ 7 -9 ] 。
由于野生鸡血藤药材资源满足不了药用需求， 近年
来， 在其主产区广东、 广西开始有大面积的人工栽
培。 目前， 广东省平远县已建立了 3 335 000 m2鸡
血藤野生转家栽产业化生产基地， 本课题组成员建
立了相应的规范化种植研究示范基地。 然而栽培鸡
血藤藤茎几年采收才可达到入药标准， 目前尚不明
确。 因此， 本研究在对不同生长年限、 不同月份的
栽培鸡血藤藤茎性状特征观察与描述的基础上， 开
展了醇溶性浸出物、 总黄酮及指标性成分原儿茶
酸、 儿茶素、 表儿茶素的含量测定研究， 考察其在
藤茎中的动态积累变化趋势， 为栽培鸡血藤采收期
的合理制定提供科学依据， 现报道如下。
1 仪器、 试药与材料
WFH-UV-2100 三用紫外分光光度计 （精科上
海）； 高效液相色谱仪 （日本岛津 , SPD-10A VP
PLUS 紫外可见检测器）； BP211D 型十万分之一天
平、 BSA124S 万分之一天平 （德国 Sartorius公司）；
芦丁 （批号： 100080-200707）、 表儿茶素 （批号：
110878-200102）、 儿茶素 （批号： 877-200001）、
原儿茶酸 （批号： 110809-200604）， 纯度归一化
法均大于 980 mg/g， 购于中国药品生物制品检定研
究院； Millipore 超纯水系统； 甲醇、 乙腈为色谱
纯， 其他试剂均为分析纯。
实验用样品均采自广东平远鸡血藤规范化种植
（GAP） 研究基地， 由广州中医药大学刘军民教授
鉴定为豆科植物密花豆 Spatholobus suberectus
Dunn 的干燥藤茎， 凭证标本存于广州中医药大学
中药资源研究室。
2 方法与结果
2. 1 醇溶性浸出物 照《中华人民共和国药典》 [ 1 ]
附录 XA 项下的热浸法测定， 用乙醇作溶剂， 浸出
栽培鸡血藤藤茎次生代谢产物的动态积累变化研究
收稿日期： 2014-11-05
作者简介： 安冉 （1985- ）， 男， 实验师； E-mail： 635387742@QQ.com
通讯作者： 刘军民 （1973- ）， 女， 教授； E-mail： liujunmin812@163.com
基金项目： 广东省教育部科技部企业科技特派员行动计划专项 (编号： 2009B090600135)； 广东省梅州市科技计划项目 （编号： 2013B36）
安冉 1， 翟明 2， 孙林霞3， 刘军民 3
(1． 新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所， 新疆乌鲁木齐 830091；
2． 嘉应学院医学院， 广东梅州 514031； 3. 广州中医药大学中药学院， 广东广州 510006)
摘要： 【目的】 研究栽培鸡血藤藤茎中次生代谢产物在不同生长期的动态积累变化趋势， 为其采收期的合理制定提供科学依
据。 【方法】 参照 《中国药典》 （2010 年版一部） 附录 XA 测定醇溶性浸出物的含量； 采用紫外分光光度法测定总黄酮的含
量， 采用高效液相色谱法同时测定原儿茶酸、 儿茶素及表儿茶素的含量。 【结果】 鸡血藤藤茎中醇溶性浸出物、 总黄酮及指标性成
分原儿茶酸、 儿茶素和表儿茶素的含量均随着生长年限的增加呈递增的趋势； 而 1 年中不同月份样品的醇溶性浸出物、 总黄
酮、 表儿茶素的含量变化均呈抛物线状， 7 ~ 9 月含量达到峰值； 儿茶素的含量则一直呈上升状态； 7 ~ 9 月采收的 4 ~ 6 年生
鸡血藤样品中醇溶性浸出物已达到现行版 《中国药典》 的要求。 【结论】 初步建议栽培鸡血藤藤茎以 7 年生以上采收为宜，
其最佳采收年限与采收月份有待进一步研究确定。
关键词： 栽培鸡血藤/化学； 总黄酮/分析； 原儿茶酸/分析； 儿茶素/分析； 表儿茶素/分析； 动态变化； 分光光度法， 紫外；
色谱法， 高压液相
中图分类号： R282.2 文献标志码： A 文章编号： 1007－3213 （2015） 03 － 0485 － 04
DOI： 10． 13359 ／ j． cnki． gzxbtcm． 2015． 03． 023
·中药质量控制·
2015 年 5 月第 32 卷第 3 期
May 2015，Vol． 32，No． 3
广州中医药大学学报
Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine 485
物不得少于 80 mg/g， 结果见表 1。
2. 2 总黄酮含量测定
2. 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒定
质量的芦丁对照品 7.56 mg， 置 50 mL 容量瓶中，
加体积分数 40%乙醇适量超声使之溶解， 冷却至室
温， 并稀释至刻度， 摇匀， 即得芦丁 0.151 2 mg/mL。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 参照文献 [10] 并经
实验筛选得出供试品溶液制备方法如下： 精密称取
鸡血藤药材粉末 1 g （过 50 目筛）， 加体积分数
40%乙醇 50 mL加热回流 30 min， 过滤， 滤液定容
至 50 mL 容量瓶； 再精密吸取 1 mL 至 50 mL 容量
瓶中稀释至刻度， 摇匀， 即得。
2. 2. 3 标准曲线的制备 分别精密移取对照品溶
液 1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0 mL 至 10 mL 量瓶中，
精密加入 50 mg/L 亚硝酸钠 0.3 mL， 摇匀， 放置
6 min。 精密加入 100 mg/L 的硝酸铝 0.3 mL， 摇
匀， 放置 6 min。 精密加入 40 g/L 氢氧化钠 4 mL，
体积分数 40%乙醇定容至刻度， 静置 15 min， 采
用紫外分光光度计于 505 nm 波长下测定溶液的最
大吸光度。 以芦丁的浓度 (mg/mL) 为横坐标 (X)、
芦丁吸光度值为纵坐标 (Y)， 绘制标准曲线， 得回
归方程为 Y=12.605 X-0.014 5 (r = 0.999 9)。 表明
芦丁在 0.013 986 ～ 0.069 93 mg/mL线性关系良好。
2. 2. 4 精密度试验 按 2.2.3 项方法制备对照品
溶液， 显色后连续测定其吸光度 6次， 总黄酮的平
均质量分数为 132.2 mg/g， sR为 0.07%。
2. 2. 5 稳定性试验 按 2.2.2 项方法制备供试品，
显色后放置于室温下， 45 min内每间隔 5 min 测定
其吸光度， 结果 sR为 4.99%。 表明溶液在 45 min 内基
本稳定。
2. 2. 6 重现性试验 按 2.2.2 项方法制备 6 份供
试品， 显色后测定其吸光度。 结果总黄酮的平均质
量分数为 132.9 mg/g， sR为 0.10%。
2. 2. 7 加样回收率试验 精密称取已知含量鸡血
藤药材粉末 6 份， 准确加入等量芦丁对照品， 按
2.2.2 项方法制备供试品， 显色后测定其吸光度，
计算加样回收率， 结果平均回收率为 98.16%， sR
为 1.53%。
2. 2. 8 样品的测定 [10] 精密吸取 5 mL 供试品溶
液至 10 mL量瓶中， 按 2.2.3项方法显色后， 于 505
nm波长下测定吸光度。 结果见表 1、 图 1、 图 2。
2. 3 原儿茶酸、 儿茶素、 表儿茶素的含量测定
参照 《鸡血藤商品药材质量评析》[ 9 ]方法进行测定。
进样 10 μL， 取平均值计算含量， 结果见表 1、 图
1、 图 2。
3 讨论
3. 1 测定波长的选择 取对照品溶液和供试品溶
表 1 不同生长年限及 6 年生不同月份鸡血藤藤茎浸出物、 总黄酮及指标性成分的含量 （x ± s）
Table 1 The contents of ethanol-soluble extractives, total flavonoids and the major components in Spatholobus
suberectus Dunn at different growing age and in 6-year old plant on different months
采集
时间
N生长/年 l直径/cm
w/(mg·g-1）
浸出物
(N=3)
总黄酮
(N=3)
原儿茶酸
(×10-3， N=4)
儿茶素
(×10-2， N=4)
表儿茶素
(×10-2， N=4)
2007.09 3 2.0 ～ 3.0 56.7 ± 48.8 26.9 ± 14.8 7.5 ± 4.1 6.2 ± 12.9 0.3 ± 9.9
2008.09 4 3.0 ～ 5.0 85.2 ± 23.7 53.0 ± 23.0 3.8 ± 22.9 12.4 ± 13.6 18.0 ± 3.8
2009.12 5 3.2 ～ 3.5 64.4 ± 32.8 40.4 ± 17.5 1.8 ± 20.3 7.4 ± 15.4 12.5 ± 2.7
2010.01 6 4.5 ～ 6.5 72.1 ± 32.8 50.0 ± 40.5 1.3 ± 7.3 18.5 ± 2.6 24.0 ± 4.3
2010.03 6 4.5 ～ 6.5 73.9 ± 12.5 77.9 ± 27.2 3.9 ± 42.1 35.8 ± 17.1 44.1 ± 1.7
2010.05 6 4.0 ～ 6.0 93.9 ± 23.0 96.2 ± 9.5 5.5 ± 14.2 30.5 ± 3.9 64.4 ± 5.0
2010.07 6 4.5 ～ 7.5 144.4 ± 11.8 110.2 ± 12.0 2.5 ± 16.0 58.0 ± 15.5 143.0 ± 13.8
2010.09 6 4.0 ～ 5.0 135.1 ± 19.4 115.0 ± 17.6 2.1 ± 28.8 54.7 ± 30.4 133.0 ± 4.0
2010.11 6 5.0 ～ 6.0 135.5 ± 16.9 61.3 ± 9.0 3.0 ± 3.6 69.3 ± 23.0 86.9 ± 4.3
2011.01 7 8.0 ～ 10.0 99.9 ± 15.5 52.2 ± 21.0 11.2 ± 24.5 81.4 ± 19.4 104.0 ± 38.6
广州中医药大学学报 2015 年第 32 卷486
安冉， 等． 栽培鸡血藤藤茎次生代谢产物的动态积累变化研究
液， 在 200～ 800 nm进行波长扫描， 两者都在 505 nm
处有最大吸收， 满足分光光度法的基本要求， 故选
择505 nm为测定波长。
3. 2 供试品制备方法的考察 参照文献 [11] 方
法， 本研究前期比较了超声提取法、 热回流提取
法、 索式回流提取法， 考查了不同溶剂浓度的提取
效果， 分别加体积分数为 40%、 60%、 80%乙醇 50
mL加热回流 30 min 提取总黄酮， 结果表明乙醇加
热回流提取 30 min效果最佳。
3. 3 含量动态变化 表 1、 图 1 结果显示： 鸡血
藤藤茎中醇溶性浸出物、 总黄酮及指标性成分儿茶
素、 表儿茶素及原儿茶酸的含量随着生长年限的增
加呈递增的趋势。 其中 5 年生 （12 月采） 与 7 年
生 （1 月采） 样品中的含量较前 1 年低， 结合图 2
分析， 是由于样品的采收月份正好处于其含量动态
变化的波谷期。 图 2结果显示： 不同月份采收的鸡
血藤藤茎醇溶性浸出物、 总黄酮及表儿茶素的含量
在 7月份含量最高， 随后至次年 1月则呈不断下降
趋势； 儿茶素的含量在 1年之中则呈不断递增的趋
势， 但总体变化比较平缓。 我国历代本草对鸡血藤
的记载中未见有关采收时间的记述， 而 《中国药
典》 （2010 年版一部） 规定其在秋、 冬两季采收，
且醇溶性浸出物含量不得低于 80 mg/g。 本研究结
果显示： 7 年生栽培鸡血藤藤茎醇溶性浸出物含量
全年均高过 80 mg/g。 若以醇溶性浸出物含量为限
定指标， 并结合总黄酮、 儿茶素、 表儿茶素及原儿
茶酸等指标性成分含量的动态变化趋势， 建议栽培
鸡血藤藤茎以 7年生以上入药为宜。 此外， 栽培鸡
血藤藤茎中醇溶性浸出物、 总黄酮及指标性成分表
儿茶素的含量， 1 年之中以夏季含量为最高， 秋冬
季反而下降， 与现代的秋冬季采收时间不一致。 因
此， 今后尚需进一步考察栽培鸡血藤藤茎的次生代
谢物在 1 年之中每个月份的动态变化状况， 并对 7
年生以上的藤茎继续进行研究， 为其最佳采收年限
和采收季节的确定提供科学依据。
（致谢： 感谢广东南台药业有限公司的林伟强经理
在样品采集上给予的大力帮助！）
参考文献：
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业出版社， 2010： 180．
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图 1 不同生长年限鸡血藤次生代谢物的含量动态变化
Figure 1 Dynamic changes of contents of secondary metabolite in cultivatied Spatholobus suberectus Dunn
at different growing age
不同采收月份
不同采收月份
w/
(m
g·
g-
1 ）
w/
(m
g·
g-
1 ）
w/
(×
10
-2
，
m
g·
g-
1 ）
图 2 6 年生不同月份鸡血藤次生代谢物的含量动态变化
Figure 2 Dynamic changes of contents of secondary metabolite in 6-year old Spatholobus suberectus
Dunn on different months
w/
(×
10
-2
，
m
g·
g-
1 ）
N生长/年 N生长/年
第 3 期
浸出物 总黄酮 儿茶素 表儿茶素
儿茶素 表儿茶素浸出物 总黄酮
487
Research on Dynamic Changes in Content of Secondary Metabolite from
Cultivated Spatholobus suberectus Dunn
AN Ran1, ZHAI Ming2, SUN Linxia3, LIU Junmin3
（1. Institute of Agricultural Quality Standard and Testing Technology， Xinjiang Academy of Agricultural Sciences， Urumqi 830091
Xinjiang, China； 2. Medical College of Jiaying University， Meizhou 514031 Guangdong, China； 3． College of Chinese Herbal
Medicine， Guangzhou University of Chinese Medicine， Guangzhou 510006 Guangdong， China)
Abstract: Objective The dynamic accumulation trend of secondary metabolite in cultivated Spatholobus
suberectus Dunn at different growth time was studied to provide scientific basis for confirming its reasonable
harvesting time. Methods Ethanol -soluble extractives were measured by the method recorded in Chinese
Pharmacopoeia ( A) Appendix XA ( 2010 edition). The content of total flavonoids was tested by ultraviolet
spectrophotometer. The contents of protocatechuic acid， catechin， and epicatechin in Spatholobus suberectus
Dunn were determined by high performance liquid chromatography (HPLC). Results The contents of ethanol-
soluble extractives， total flavonoids and the major components such as protocatechui cacid， catechin and
epicatechin in Spatholobus suberectus Dunn showed increasing trend with the prolongation of growth time. The
changes of contents of alcohol-soluble extract， total flavonoids and epicatechin in samples collecting at different
months in one year showed a parabolic trend， and the contents reached the peak values from July to September.
Catechin content kept increasing continually. The content of ethanol -soluble extractives of Spatholobus
suberectus Dunn aged 4-6 years met the requirements of the current edition of Chinese Pharmacopoeia when
harvested from July to September. Conclusion It is preliminarily recommended that Spatholobus suberectus
Dunn cultivated for more than 7 years is suitable for harvesting， but the optimal harvest period and the harvest
month still need to be further studied.
Key words: Spatholobus suberectus Dunn/chemistry； Total flavonoids/analysis；
Protocatechui acid/analysis； Catechin/analysis；
Epicatechin/analysis； Dynamic change；
Spectrophotometry， ultraviolet；
Chromatography， high pressure liquid
643.
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【责任编辑： 黄玲】
广州中医药大学学报 2015 年第 32 卷488