全 文 ：　　化合物 Ⅷ:白色针晶 , mp233-236℃,三氯化铁溶
液显蓝色 。1H-NMR(DMSO-d6):δ6.89(2H, s)为烯
烃质子信号 , δ12.20(1H, s)为羧基质子信号 , δ9.16
(2H, s)、 8.81(1H, s)提示有 3个活泼质子。13C-
NMR(DMSO-d6):δ167.46 为羧基碳 , δ108.68、
145.40、120.39、 139.97显示为 6个苯环碳信号 ,
HMBC谱显示 δ6.89 质子与 δ167.46、 145.40、
137.97、120.39、108.68碳信号远程相关 , δ9.16质
子与 δ145.40、 137.97、 108.68碳信号远程相关 ,
δ8.80质子与 δ145.40、137.97碳信号相关 ,根据波
谱数据综合分析 , 该化合物为没食子酸 (galic
acid),为首次从该植物中分离得到。1H-NMR(DM-
SO-d6):δ6.89(2H, s, 2 , 6-H)、 12.20(1H, s, -
COOH)、 9.16(2H, s, 3, 5-OH)、 8.81(1H, s, 4-
OH);13C-NMR(DMSO-d6):δ120.39(C-1)、 108.68
(C-2, C-6)、 145.40(C-3, C-5)、 139.97 (C-4)、
167.46(C-7)。
参 考 文 献
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(2006-10-08收稿)
白花败酱化学成分研究
黄　龙 1 ,张如松2 ,王彩芳 3 , 张善飞 1
(1.正大青春宝药业有限公司研究所 ,浙江杭州 310023;2.浙江中医药大学药学系 ,浙江杭州 310053;
3.郑州大学药学院 ,河南郑州 450052)
　　摘要　目的:研究白花败酱草的化学成分。方法:在体外抗肿瘤活性试验的指导下 ,利用溶剂萃取后硅胶色谱
分离纯化 , 根据理化性质并采用现代波谱技术(FAB-MS、1HNMR、13CNMR)鉴定结构 。结果:从石油醚和乙酸乙酯
萃取部位分离并鉴定了 5个化合物:熊果酸(Ⅰ )、β -谷甾醇(Ⅱ)、山柰酚-3-O-β -D-吡喃半乳糖苷(Ⅲ )、山柰酚-3-O-
β -D-吡喃半乳糖(6-1)-α-L-鼠李糖苷(Ⅳ)和 Patrinaloside(Ⅴ)。体外抗肿瘤试验显示 , 熊果酸对肿瘤细胞具有良
好的细胞作用 , 其 IC50 =15μg/ml。结论:除化合物Ⅱ外 , 其它化合物均为从该植物中首次分到;熊果酸对乳腺癌细
胞株具有明显的细胞毒活性。
关键词　白花败酱;抗肿瘤活性;化学成分
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)04-0415-03
StudiesonChemicalConstituentsofPatriniavilosa
HUANGLong1 , ZHANGRu-song2 , WANGCai-fang3 , ZHANGShan-fei1
(1.ZhengDaiQingChunBaoPharmacyCo.Ltd, Hangzhou310023, China;2.ZhejiangColegeofTCM, Hangzhou310053, China;
3.ZhengzhouUniversity, Zhengzhou450052, China)
Abstract　Objective:ToinverstigatethechemicalconstituentsofPatriniavillosa.Method:Underthedirectionoftetrazoliumsalt
(MTT)assay, thechemicalconstituentswereisolatedbysilicagelcolumnchromatographyandidentifiedbyphysicochemicalproperties
andspectralanalysis(MS, FAB-MS, 1HNMR, 13CNMR).Result:Fivecompoundswereisolatedfrompetroleumetherandethylac-
etateextractandidentifiedas:ursolicacid(Ⅰ ), β-sitosterol(Ⅱ), patrinaloside(Ⅲ), kaempferol-3-O-β -D-glucopyranoside(Ⅳ),
·415·中藥材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 4期 2007年 4月
andkaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside-7-O-α-L-rhamnoside(Ⅴ).Conclusion:CompoundsIandⅤ wereobtainedfromtheplantof
genusPatriniaforthefirsttime.Ursolicacidshowedpowerfulanticanceractivitythroughtetrazoliumsalt(MTT)assay, anditsIC50
was15.0 μg/ml.
Keywords　Patriniavillosa;Antitumoractivity;Chemicalcompounds
　　白花败酱系败酱科植物白花败酱 Patriniavilo-
saJus.的全草 ,广泛分布于我国南方各省 ,药源丰
富 。败酱始载于 《神农本草经 》 ,具有清热解毒 ,利
湿排脓 ,活血化瘀 ,镇心安神的功效。常用于治疗阑
尾炎 ,肺脓痈 ,结核瘰疬 ,痈肿疮毒 ,肠炎 ,痢疾 ,肝
炎 ,扁桃体炎 ,眼结膜炎 ,产后瘀血腹痛 ,咯血 ,衄血 ,
神经衰弱 ,心脏神经官能症等 〔1〕。彭金咏等 〔2〕对白
花败酱草脂溶性部位化学成分进行了研究 。为了充
分利用和开发白花败酱草的丰富资源 、阐明其药效
物质基础尤其是抗肿瘤活性成分 ,笔者对其成分进
行了研究 ,从其 95%乙醇提取物的石油醚和乙酸乙
酯萃取物中分离得到了五个化合物 ,分别鉴定为:熊
果酸(Ⅰ )、β-谷甾醇(Ⅱ)、山柰酚 -3-O-β -吡喃半乳
糖苷(Ⅲ)、山柰酚 -3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(6-1)-α-
L-鼠李糖苷(Ⅳ)和 Patrinaloside(Ⅴ)。除化合物Ⅱ
外 ,其它化合物均为从该植物中首次分到 。
1 　仪器与材料
WATERS高效液相(WATERS型 RPC18柱(5.0
mm×150 mm);DAD紫外检测器;日本岛津 LI-
BRORAEC-200型熔点测定仪;Perkin-Elmer577型
IR光谱仪;Shel/JB2300型细胞培养箱;DG-3022A
型酶联免疫检测仪;柱层析硅胶 (200-300目 )和
GF254为青岛海洋化工厂产品;其余所用试剂均为分
析纯。白花败酱购自华东医药有限公司 ,经浙江中
医药大学张如松研究员鉴定为 Patriniavilosa
Juss.。
2 　提取分离
取干燥的白花败酱全草 7.0 kg,加 10倍量的
95%乙醇加热回流提取 3次 ,每次 2 h,过滤 ,减压回
收乙醇 ,依次用石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇萃取 ,萃取
液减压浓缩 ,得石油醚 、乙酸乙酯和正丁醇三个萃取
部位。其中石油醚部位用硅胶柱分离 ,以石油醚 -乙
酸乙酯反复梯度洗脱 ,根据 TLC检测流份 ,分离得
到了熊果酸(Ⅰ)40mg。乙酸乙酯部位用氯仿-甲醇
系统梯度洗脱 ,得到 β-谷甾醇(Ⅱ)55 mg、山柰酚 -3-
O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)26 mg、山柰酚-3-O-β -D-
吡喃葡萄糖苷 -(6-1)-α-L-鼠李糖苷 (Ⅳ)27 mg和
patrinaloside(Ⅴ)15mg。
3 　药理活性研究
将生长旺盛的乳腺癌细胞用胰蛋白酶消化后 ,
调整细胞浓度为 2×105个 /ml;置于 37℃、5%CO2、
相对湿度 100%培养箱中培养 24 h后 ,加入测试药
液 ,继续培养 3 d后 ,每孔加 5 mg/mlMTT溶液(用
生理盐水配制),在培养箱中温育 4 h,每孔加入 200
μlDMSO,于微量振荡器振荡以使甲臜完全溶解 ,最
后用酶标仪在 570 nm波长处测吸光度 A值 ,计算
其半数抑制浓度 IC50。
4　结果
4.1　化合物结构鉴定　化合物 Ⅰ:白色结晶性粉
末 , mp234 ～ 236℃, Liebermann-Burchard反应呈紫红
色。 MSm/z:456(M+), 438(M-H2O), 423(M-H2O-
CH3), 410, 300, 249, 248, (100);233, 219, 207, 203
(248-COOH), 189 , 133, 119, 95, 81, 55, 43。1H-NMR
(CDCl3)δ:5.29(1H, br, H-12), 3.25(1H, m, H-3),
1.28(6H, s, 2×CH3), 1.11(3H, s, CH3), 1.01(6H,
s, 2 ×CH3), 0.96(3H, s, CH3), 0.82(6H, d, J=
6.5Hz, 2 ×CH3)。13C-NMR(CDCl3)δ:41.9(C-1),
27.9(C-2), 78.0(C-3), 30.5(C-4), 55.3(C-5),
18.2(C-6), 33.0(C-7), 41.9(C-8), 48.1(C-9),
39.0(C-10), 23.1(C-11), 125.5(C-12), 138.2(C-
13), 47.5(C-14), 27.6(C-15), 24.0(C-16), 48.1
(C-17), 52.9(C-18), 39.4(C-19), 39.4(C-20),
29.4(C-21), 36.7(C-22), 23.0(C-23), 15.2(C-
24), 16.5(C-25), 18.2(C-26), 23.0(C-27), 180.4
(C-28), 16.5(C-29), 20.5(C-30)。以上数据与文
献报道〔3〕相符 ,因此鉴定化合物 Ⅰ为熊果酸。
化合物Ⅱ:白色片状结晶 , mp137 ～ 138℃。 EI-
MSm/z:414[ M, 100] +, 396 , 330, 329, 273, 255。经
与对照品对比较 ,混合熔点不下降 TLC检测 Rf值
一致 。1H-NMR(400MHz, CDCl3)δ:0.67, 0.81, 0.82,
0.85, 0.94, 1.01(各 3H, s, 6×Me), 3.52(1H, m, 3-
H), 5.35(1H, brs, 6-H)。13C-NMR(400MHz, CDCl3)
δ:11.9(C-18), 12.0(C-29), 18.8(C-21), 19.1(C-
27), 19.4(C-19), 19.8(C-20), 21.1(C-11), 23.1
(C-28), 24.3(C-15), 26.1(C-23), 28.3(C-16),
29.2(C-25), 31.7(C-2), 31.9(C-7, C-8), 36.2(C-
22), 36.5(C-10), 37.3(C-1, C-26), 39.8(C-12),
42.3(C-13), 42.3(C-4), 45.9(C-24), 50.2(C-9),
56.1(C-17), 56.8(C-14), 71.8(C-3), 121.7(C-6),
140.8(C-5)。以上数据与文献〔4〕报道一致 ,故化合
·416· 中藥材 JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 4期 2007年 4月
物确定为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
化合物 Ⅲ:黄色针状结晶(甲醇), mp194.0 ～
195.5℃(dec),三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 ,示有
酚羟基存在;盐酸镁粉反应阳性 ,推测为黄酮类化合
物;Molish反应阳性 。 FAB-MSm/z:447.0([ M-
H] +, 409, 307 , 153(100), 64 , 32。1H-NMR(400MHz,
CDCl3):B环质子:δ8.10(2H, d, J=8.0Hz, 2′, 6′-
H)与 δ6.90(2H, d, J=9Hz, 3′, 5′-H):A环质子:
δ6.42(1H, d, J=2.0Hz, 8-H)与 6.18(1H, d, J=
2.0Hz, 6-H);糖质子:δ5.16(1H, d, J=8.0Hz, C-1″-
H), δ4.00 ～ 3.32 (6H, C2-C6-H)。13 C-NMR
(400MHz, CDCl3)δ:157.1(C-2), 134.2(C-3),
178.2(C-4), 160.2(C-5), 98.5(C-6), 164.1(C-7),
93.4(C-8), 157.7(C-9), 103.6(C-10), 161.7(C-
4′), 131.0(C-2′, 6′), 114.7(C-3′, 5′), 101.7(C-
1″), 71.6(C-2″), 73.6(C-3″), 68.6(C-4″), 75.7(C-
5″), 60.6(C-6″)。以上数据与文献 〔5、6〕中化合物山
柰酚-3-O-β -D-吡喃半乳糖苷吻合 ,故确定其为山柰
酚 -3-O-β -D-吡喃半乳糖苷(kaempferol-3-O-β -D-ga-
lactopyranoside)。
化合物 Ⅳ:黄色针晶 (甲醇 ), mp246.0 ～
247.0℃,三氯化铁 -铁氰化钾反应阳性 ,示有酚羟基
存在;盐酸镁粉反应阳性 ,推测为黄酮类化合物;
Molish反应阳性 ,说明为苷类化合物 。 HRFAB-MS:
分子式为 C27H30O15 , m/z:593([ M-H] +, 447([ M-
146] +, 153(100), 64。化合物Ⅳ与 Ⅲ相比 ,质谱中
具有 447([ M-146] + ,氢谱及碳谱中也均多出一个
甲基五碳糖 ,同时与化合物Ⅲ中的半乳糖碳谱数据
相比 C-6向低场位移至 66.0, C-5略微向高场位移
至 74.0,说明甲基五碳糖连接于半乳糖的 C-6位 ,
甲基五碳糖碳谱数据与文献 〔6〕中鼠李糖一致 ,氢谱
中甲基五碳糖端基氢化学位移为 4.54(1H, s),端基
碳构型为 α型 ,通过 HMBC证明半乳糖连于山柰酚
的 C-3位 ,故而化合物Ⅳ为山柰酚-3-O-β -D-吡喃半
乳糖(6-1)-α-L-鼠李糖苷 , 通过 1H-1HCOSY、HSQC
及 HMBC对化合物 Ⅳ的氢谱和碳谱数据进行了归
属 。13 C-NMR(400MHz, CD3OD)δ:158.0(C-2),
134.3(C-3), 178.1(C-4), 161.6(C-5), 98.6(C-6),
164.7(C-7), 93.5(C-8), 157.1(C-9), 104.1(C-
10), 121.3(C-1′), 131.1(C-2′, 6′), 114.7(C-3′,
5′), 160.3(C-4′);半乳糖:104.1(C-1″), 71.6(C-
2″), 73.7(C-3″), 68.8(C-4″), 74.0(C-5″), 66.0(C-
6″);鼠李糖:100.5(C-1 ), 70.7(C-2 ), 70.9(C-
3 ), 72.5(C-4 ), 68.3(C-5 ), 16.6(C-6 )。1H-
NMR(400MHz, CD3OD)δ:6.23(1H, d, J=2.0Hz, H-
6), 6.42(1H, d, J=2.0Hz, H-8), 8.11(2H, d, J=
8.0Hz, H-2′, 6′), 6.91(2H, d, J=8.0Hz, H-3′, 5′),
5.06(1H, d, J=8.0Hz, gal-H-1″), 4.54(1H, s, rha-
H-1 ), 4.00 ～ 3.32(10H, gal-H-2″-H-6″andrha-H-
2″-H-5″), 1.20(3H, d, J=6.5Hz, rha-C5 -CH3)。
化合物 Ⅴ:白色结晶 (氯仿 -甲醇), mp63℃,与
氨基酸共同加热形成蓝紫色沉淀;与 Shear试剂反
应 ,产生紫色然后变成棕色 。 FAB-MSC21H34O11m/
z:462(M+), 377, 298.1, 299.1。1H-NMR(400MHz,
CDCl3)δ:6.35(s, H-3), 6.19(d, J=4Hz, H-1), 4.58
(d, J=8Hz, H-1′), 4.33(m, H-7), 4.12(J=12Hz,
2H-11), 3.94(t, J=3Hz, H-3′), 3.85(dd, J=1.7,
11.0Hz, H-6′), 3.80(dd, J=7.4, 11.0Hz, 1H-10),
3.71(dd, ABX, J=5.6, 10.9Hz, H-6′), 3.47(dd, J=
3.0, 9.4Hz, H-4′), 3.22(m, H-5), 2.23(-CH2-),
2.22(dt, J=5.3, 8.6Hz, H-9), 2.03-2.09(m, 2H, H-
6, -CH<), 2.02(m, H-8), 2.00(m, H-6), 0.96(d, J
=6.6Hz, XH, 2X)。13 C-NMR(400MHz, CDCl3)
δ171.1(C=O), 139.9(C-3), 115.6(C-4), 102.2
(C-1′), 91.9(C-1), 74.3(C-5′), 73.6(C-7), 71.7
(C-3′), 70.8(C-2′), 70.5(C-11), 70.3(C-4′), 66.4
(C-6′), 66.3(C-10), 47.0(-CH2 -), 42.9(C-9),
36.7(C-6), 30.7(C-5), 25.4(-CH<), 21.6(-CH,
2X)。根据文献 〔6〕 ,确定其为 patrinaloside。
4.2　体外抗癌活性试验结果　分离所得化合物中
熊果酸对乳腺癌细胞表现出明显的细胞毒活性 ,其
IC50为 15 μg/ml,活性较强。
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(2006-09-25收稿)
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