全 文 ：国际药学研究杂志 2011 年 2 月 第 38 卷 第 1 期 J Int Pharm Res， Vol.38， No.1， February， 2011
回回蒜子正丁醇部位化学成分研究
徐 瑞 1，陈 立 1，李 彬 1，李 建 2，董俊兴 1
中草药回回蒜子是毛茛科毛茛属植物回回
蒜（Rannunculus chinensis）的种子，又名水胡椒、
蝎虎草、黄花草等，全国均有分布。 回回蒜味苦，
性微温，常用于消炎退肿、截疟、杀虫、治肝炎、肝
硬化腹水、疟疾、疮癞、银屑病、哮喘、牙痛、胃痛、
风湿痛［1］。回回蒜在国内虽已用于临床，但对其化
学成分研究的报道较少，目前回回蒜子的乙酸乙
酯部位已有研究 ［2］，所以本实验对回回蒜子的正
丁醇萃取部位进行系统的分离纯化，得到 9 个单
体化合物，其中化合物 3，4，5，7 为首次从回回蒜
子中分离得到。
1 材料与仪器
BP211D 电子天平，美国 Sartorius 公司；JNM-
ECA-400超导 NMR仪， 日本电子株式会社，TMS
为内标；Finnigan LCQ Advantage Max 高分辨质谱
仪，美国 Thermo 公司；显微熔点测定仪，X-4 型；
薄层色谱硅胶（GF254）和柱层析色谱硅胶（200~
300 目）， 青岛海洋化工厂；AB-8 型大孔吸附树
脂， 沧州宝恩化工有限公司 ；Sephadex LH-20，
Pharmacia公司；试剂均为分析纯。
回回蒜种子购于安徽亳州市冷背中药颗粒
饮片有限公司，由本室李彬副研究员鉴定为毛茛
科毛茛属植物回回蒜的种子，标本现存于本室。
2 提取和分离
回回蒜的干燥种子 35 kg， 粉碎后用 70%乙
醇加热回流提取 3 次，每次 2 h，合并提取液，回
［摘要］ 目的 对中草药回回蒜子（Rannunculus chinensis Bunge）的正丁醇部位进行化学成分研究。 方法 采用
硅胶柱色谱、Sephadex LH-20 凝胶柱色谱和制备薄层等方法进行分离纯化， 根据波谱数据和理化性质进行结构鉴定。
结果 分离鉴定出 9个单体化合物，分别为：对羟基苯甲酸（1）、咖啡酸（2）、tachioside（3）、蛇床子素（4）、蒽醌（5）、大黄素
（6）、1，7-二羟基-6-甲氧基-2-甲基蒽醌（7）、β豆甾醇（8）和熊果酸（9）。 结论 化合物 3、4、5、7 为首次从回回蒜子中分离
得到。
［关键词］ 回回蒜子；正丁醇部位；化学成分
［中图分类号］ R979.1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1674-0440（2011）01-0068-04
Study on the chemical constituents in the n-butanol extract of
Rannunculus chinensis Bunge
XU Rui1， CHEN Li1， LI Bin1， LI Jian2， DONG Jun-xing1
（1.Institute of Radiation Medicine，Academy of Military Medicial Sciences，Beijing 100850，China; 2.Institute of
Chemical Defence，Beijing 102205，China）
［Abstract］ Objective To investigate the chemical constituents in the n-butanol extract of Rannunculus chinensis Bunge.
Methods The compounds were isolated by column chromatography on silica gel and Sephadex LH-20 coupled with prepara-
tive silica gel TLC. Their structures were elucidated on the basis of physicochemical properties and spectral data. Results
Nine compounds were isolated from this extract and their structures were identified as p-hydroxybenzoic acid（1）， caffeic acid
（2）， tachioside （3）， osthole （4）， anthraquinone （5）， emodin （6）， 1，7-dihydroxy-6-methoxy-2-methylanthraquinone （7），β-
stigmasterol（8）and ursolic acid（9）. Conclusion Compounds 3、4、5、7 were obtained from this plant for the first time.
［Key words］ Rannunculus chinensis Bunge； n-butanol extraction； chemical constituents
[作者简介］徐 瑞，男，在读硕士研究生，研究方向：天然药物有效成分研究， E-mail：xurui_86@163.com
[作者单位］1. 100850 北京，军事医学科学院放射与辐射医学研究所七室（徐 瑞，陈 立，李 彬，董俊兴）；2. 102205 北京，解放军防化指挥工
程学院 3 系（李 建）
[通讯作者］董俊兴，男，研究员，博士生导师，研究方向：天然药物有效成分研究，Tel：010-66931314，E-mail：dongjx@vip.sina.com
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DOI:10.13220/j.cnki.jipr.2011.01.003
国际药学研究杂志 2011 年 2 月 第 38 卷 第 1 期 J Int Pharm Res, Vol.38, No.1, February, 2011
收乙醇至无醇味，再依次用三氯甲烷、乙酸乙酯
和正丁醇萃取， 减压回收溶剂得到正丁醇部位
（260 g）。 用 1.2 L的水分散溶解正丁醇部位后通
过 AB-8 型大孔吸附树脂柱色谱，依次用水、25%
乙醇、50%乙醇和 95%乙醇洗脱分为 4 个组分：
Fr-1~4。对 Fr-3（65 g）进行硅胶柱色谱分离，氯仿-
甲醇（50∶1→1∶1）梯度洗脱粗分成若干组分，再反
复经硅胶柱色谱 、Sephadex LH-20 柱色谱和重
结晶等方法分离纯化， 得到化合物 1 （46 mg）、2
（31 mg）、4（13 mg）；同样方法对 Fr-4（31 g）进行分
离纯化 ，得到化合物 5 （11 mg）、6 （15 mg）、8
（7 mg）；在 Fr-2（74 g）中分离得到化合物 3（76 mg）、
7（21 mg）、9（13 mg）。其中化合物 3，4，5，7为首次
从回回蒜子中分离得到。
3 结构鉴定
化合物 1 白色针晶（甲醇），mp 216~218℃，
文献值 210~213°C ［3］，ESI-MS m/z：137 ［M-H］-，
1H NMR （400 MHz，DMSO-d6）δ：11.23 （s，1H，1-
COOH），7.77 （d，2H，J = 8.8 Hz，H-2，6），6.80 （d，
2H，J = 8.8 Hz，H-3，5）。 13C NMR （100 MHz，DMSO-
d6） δ：122.5 （C-1），131.3 （C-2，6），114.9 （C-3，
5），161.3 （C-4），167.6 （COOH）。 以上波谱数据与
文献数据［4］一致，1H NMR 谱图中 p-OH 吸收峰为
溶剂水信号峰掩盖，因此该化合物确定为对羟基
苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）。
化合物 2 淡黄色粉末（乙酸乙酯-甲醇），mp
207~209℃，文献值 221~223 °C［5］，ESI-MS m/z：179
［M-H］-， 1H NMR （400 MHz，DMSO-d6） δ：11.23
（s，1H，1-COOH），7.02 （d，1H，J=1.6 Hz，H-2），6.75
（d，1H， J= 8.0 Hz，H-5）， 6.95 （dd，1H，J=8.0，1.6 Hz，
H-6），7.39 （d，1H，J=15.6 Hz，H-7），6.15 （d，1H，J=
15.6 Hz，H-8）， 9.27 （s，2H，-OH）。 13C NMR （100
MHz，DMSO-d6） δ：125.7 （C-1），114.6 （C-2），145.6
（C-3），148.1（C-4），115.1 （C-5），121.2 （C-6），144.6
（C-7），115.8 （C-8），167.9 （C-9）。以上波谱数据与
文献数据 ［6］一致 ，因此该化合物确定为咖啡酸
（caffeic acid）。
化合物 3 无色针晶（甲醇），mp 211~213℃，
文献值 211~213 °C［7］，ESI-MSm/z：603 ［2M-H］-，301
［M-H］-，结合 1H 和 13C NMR 谱推断其分子式为
C13H18O8。 1H NMR （400 MHz，DMSO-d6） δ：8.55
（s，1H，1-OH），6.68 （d，1H， J= 2.4 Hz， H-3）， 6.46
（dd，1H，J= 2.4，8.4 Hz，H-5）， 6.64 （d，1H， J= 8.4
Hz，H-6），4.66 （d，1H，J= 7.6 Hz，glc-1′），3.11~3.47
（m，6H，H-2′~6′），3.71 （s，3H，-OCH3）。13C NMR （100
MHz，DMSO-d6） δ：141.3 （C-1）， 147.8 （C-2）， 102.5
（C-3），150.7 （C-4），107.9 （C-5），115.2 （C-6），101.7
（C-1′），73.3 （C-2′），77.0 （C-3′），70.0 （C-4′），76.7
（C-5′），60.9 （C-6′），55.5 （-OCH3）。以上波谱数据与
文献数据［7］一致，1H NMR 谱图中糖基醇 OH 吸收
峰为溶剂水信号峰掩盖， 因此该化合物确定为
tachioside。
化合物 4 无色针晶（甲醇-水），mp 79~81℃，
文献值 83~84℃［8］，ESI-MS m/z：245［M+H］+， 1H
NMR （400 MHz， DMSO-d6） δ： 6.27 （d，1H， J= 9.2
Hz，H-3），7.98 （d， 1H， J = 9.6 Hz，H-4），7.56 （d，
1H，J = 8.4 Hz，H-5），7.06 （d，1H，J = 8.4 Hz，H-6），
3.90 （br.s，3H，7-OCH3），3.41 （d，2H，J = 6.8 Hz，H-
1′ ），5.12 ~5.16 （m，1H，H-2′ ），1. 63 （br.s， 3H，3′ -
CH3），1.78 （br. s，3H，3′-CH3）。 13C NMR （100 MHz，
DMSO-d6） δ：160.3 （C-2）， 112.2 （C-3），144. 7 （C-
4），127.1 （C-5），108.0 （C-6），160.0 （C-7），116.1 （C-
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8），112.6 （C-4a），152.1 （C-8a），56.3 （7-OCH3），21.4
（C-1′），121.2 （C-2′），131.8 （C-3′），17.7 （3′-CH3），
25.4 （3′-CH3）。 以上波谱数据与文献数据［9］一致，
因 此 该 化 合 物 确 定 为 蛇 床 子 素 （osthole）。
化合物 5 黄色粉末（氯仿-甲醇），mp285~287°C，
文献值 284~286 °C［10］，ESI-MS m/z：265 ［M+H］+，
1H NMR （400 MHz，DMSO-d6） δ：8.30~8.33（m，
4H，H-1，4，5，8），7.79~7.82 （m，4H，H-2，3，6，7）。
13C NMR （100 MHz，DMSO-d6） δ：127.2 （C-1，4，5，
8），134.1（C-2，3，6，7），183.2（C-9，10），133.5 （C-11，12，
13，14）。 以上波谱数据与文献数据［11］一致，因此化
合物 5确定为蒽醌（anthraquinone）。
化合物 6 橙色针晶（甲醇），mp 251~254℃，
文献值 256~257℃［12］，ESI-MS m/z：271 ［M+H］+，根
据 1H 和 13C NMR 谱推测分子式为 C15H10O5。 1H
NMR （400 MHz，DMSO-d6） δ：12.06 （s，1H，1-OH），
11.37 （s，1H，3-OH），11.99 （s，1H，8-OH），6.57 （d，
1H，J= 2.0 Hz，H-2），7.09 （d，1H，J= 2.4 Hz，H-4），
7.46 （d，1H，J= 2.0 Hz，H-5），7.10 （d，1H，J = 2.0
Hz，H-7），2.40 （s，3H，-CH3）。 13C NMR （100 MHz，
DMSO-d6） δ：166.1 （C-1），108.5 （C-2），165.0 （C-
3），109.3 （C-4），124.7 （C-5），148.8 （C-6），114.0
（C-7），162.0 （C-8），190.3 （C-9），182.0 （C-10），133.4
（C-11），121.0 （C-12），109.6 （C-13），135.7 （C-14），
22.0 （-CH3）。以上波谱数据与文献数据［13］一致，因
此该化合物确定为大黄素（emodin）。
化合物 7 橙黄色粉末 （氯仿-甲醇 ），mp
299~300 °C，文献值 298~300 °C ［14］，ESI-MS m/z：
285 ［M+H］+，1H NMR（400 MHz，DMSO-d6） δ：12.92
（s，1H，1-OH），10.83 （s，1H，7-OH），2.29 （s，3H，2-
CH3），7.60 （d，1H，J= 7.6 Hz，H-3），7.63 （d，1H，J =
7.6 Hz，H-4），7.55 （s，1H，H-5），3.40 （s，3H，6-OCH3），
7.58（s，1H，H-8）。 13C NMR（100 MHz，DMSO-d6） δ：
159.8 （C-1），133.6 （C-2），137.0 （C-3），118.5 （C-4），
112.1 （C-5），153.3 （C-6），152.4 （C-7），109.0 （C-8），
188.1 （C-9），180. 1 （C-10）， 127.4 （C-11）， 126.9
（C-12），114.8 （C-13），131.2 （C-14），56.1 （-OCH3），
15.6 （-CH3）。 以上波谱数据与文献数据［14］一致，
因此该化合物确定为 1，7-二羟基-6-甲氧基-2-
甲基蒽醌（1，7-dihydroxy-6-methoxy-2-methy lan-
thraquinone）。
化合物 8 白色粉末（甲醇），mp 153~155°C，
文献值 136~138°C ［15］，Liberman-Burchard 反应阳
性，5% H2SO4-乙醇香草醛显色为红色， 示为甾类
物质。 ESI-MSm/z：413［M+H］+，1H NMR （400 MHz，
CDCl3） δ：3.52~3.55 （m，1H，H-3），5.34~5.36（m，1H，
H-6），0.69 （s，1H，H-18），5.15 （dd，1H，J= 8.7，15.2
Hz，H-22），5.02 （dd，1H，J= 8.7，15.2 Hz，H-23），且
高场区出现由多个-CH3、-CH2-和-CH-质子信号重
叠堆集成的“扫帚峰”，甾体 OH 吸收峰为溶剂水
信号峰掩盖。 薄层层析发现，该化合物与标准对
照品 β 豆甾醇具有相同的 Rf 值。 该化合物波谱
数据与文献数据［15］一致，因此该化合物确定为 β-
豆甾醇（β-stigmasterol）。
化合物 9 白色粉末（甲醇），mp 261~263°C，
文献值 259~261 °C［16］，ESI-MS m/z：457 ［M+H］+，1H
NMR （400 MHz，DMSO-d6） δ：4.28 （d，1H，J= 4.8
Hz，3-OH），11.90 （s，1H，28-COOH），2.99~3.01 （m，
1H，H-3），5.13 （br, s，1H，H-12），2.12 （d，1H，J=
10.8Hz，H-18），0.91 （d，3H，J= 6.0Hz，H-29），1.05 （d，
3H，J= 6.0 Hz，H-30），0.68~0.90 （m， 15H，-CH3×
5）；13C NMR （100 MHz，DMSO-d6） δ：38.9 （C-1），
28.0 （C-2），78.0 （C-3），39.2 （C-4），55.6 （C-5），
18.6（C-6），33.4（C-7），39.8 （C-8），47.9 （C-9），37.1
（C-10），24.7 （C-11），125.5 （C-12），139.1 （C-13），
42.3 （C-14），28.5 （C-15），23.5 （C-16），47.3 （C-
17），53.4 （C-18），39.3 （C-19），39.2 （C-20），30.9 （C-
21），37.3 （C-22），28.6 （C-23），15.5 （C-24），16.4 （C-
25），17.4 （C-26），23.7 （C-27），179.7 （C-28），17.3
（C-29），21.2 （C-30）。 以上波谱数据与文献数据［17］
一致 ， 因此该化合物确定为熊果酸 （ursolic
acid）。
【 参 考 文 献 】
［1］ 中药大辞典（上册）［M］.上海：上海科学技术出版社，2000：
869-871.
［2］ 李箐晟， 李 建， 尹海龙， 等. 回回蒜子化学成分的研究
［J］. 军事医学科学院院刊， 2010， 34（1）： 68-70.
［3］ 郑万金， 仲 英， 孙敬勇，等. 瓦松的化学成分研究［J］.中
草药， 2009， 40（6）： 859-862.
［4］ NIU， LI S， Na Z， et al. Studies on chemical constituents of
Isodon eriocalyx var. lax if lora［J］. Herb， 2003， 34（4）： 300-
303.
［5］ 章 为， 徐康平， 周应军， 等. 两色紫金牛化学成分研究
［J］.中南药学， 2007， 5（5）： 444-448.
［6］ 柴兴云， 窦 静， 贺清辉， 等 . 山银花中酚酸类成分研究
［J］. 中国天然药物， 2004， 2（6）： 339-340.
［7］ Inoshiri S， Sasaki M， Kohda H， et al. Aromatic glycosides from
berchemia racemosa［J］. Phytochemistry，1987，26 （10）： 2811-
2814.
（下转第 85 页）
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［9］ Fujioka T， Furumi K， Fujii H， et al. Antiproliferative con-
stituents from umbelliferae plantsV. a new furanocoumarin and
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［10］ Luxon SG. Hazards in the Chemical Laboratory ［M］.5th ed.
Royal Society of Chemistry， 1992，83.
［11］ 吴立军.《天然药物化学》［M］. 2003年版. 北京：人民卫生出
版社，2003： 161-163.
［12］ 戚欢阳， 张朝凤， 张 勉，等.毛脉寥化学成分及抑菌活性
的研究［J］. 中国药学杂志， 2005， 40（11）：819-822.
［13］ 赵 军， 常军民， 堵年生. 枝穗大黄化学成分研究［J］.中国
中药杂志， 2002， 27（4）： 281-282.
［14］ SchripsemaJ，Ramos-ValdiviaA，VerpoorteR.Robustaquinones，
novel anthraquinones from an elicited Cinchona robu sta sus-
pension culture［J］. Phytochemistry， 1999， 51（1）：55-60.
［15］ 李 萍， 左甜甜， 王晓秋， 等.半枝莲的化学成分研究（Ⅱ）
［J］.中国药物化学杂志， 2008， 18（5）：374-376.
［16］ 张 蕾， 徐云峰， 沈 硕，等 .肉豆蔻的化学成分研究［J］.
中国现代中药， 2010， 12（6）：16-19.
［17］ 尹海龙， 李 建， 李箐晟，等.白英的化学成分研究［J］.军
事医学科学院院刊， 2010， 34（1）： 65-67.
（收稿日期：2010-11-17 修回日期：2010-12-20）
(16%)和恶心(10%)。
4. 2 Prevnar 13 美国 FDA 和欧盟分别于 2010
年 2 月 24 日和 2009 年 12 月 9 日批准 Wyeth 制
药的肺炎球菌 13 价结合疫苗 Prevnar 13 用于 5
岁以下婴幼儿预防 13 种血清型肺炎链球菌感
染。
剂量和用法：在 2、4、 6、和 12～15 月龄时给
予肌肉内注射 0.5 ml。
警告和注意事项：早产婴儿免疫接种应注意
呼吸暂停。
最常见不良反应报告(20 %)包括注射部位红
肿和压痛、发热、食欲减低、易激动、睡眠增加和
减少。
4. 3 sipuleucel-T 美国 FDA 于 2010 年 4 月 29
日批准 Dendreon 公司的 sipuleucel-T （Provenge）
用于对标准化疗无效的症状或症状较轻的前列
腺癌的治疗。 该疫苗为首个自体移植的细胞免疫
疫苗，针对肿瘤引起的免疫抑制，可刺激机体产
生免疫反应攻击癌细胞，代表了前列腺癌治疗的
一大进步。
作用机制： 疫苗由自体树突状细胞组成，可
将融入免疫刺激细胞因子 GM-CSF 中的重组抗
原前列腺酸性磷脂酶蛋白（PAP）消化成多肽，并
在细胞表面表达，进而为 T细胞识别。T细胞识别
表达 PAP抗原的癌细胞后，可经免疫反应将其击
毁。
剂量和用法：仅为自体使用，每 2 周 3 次 ，
60 min内静脉输注，给药前应先口服对乙酰氨基
酚和一种抗组胺药物如苯海拉明。
最常见不良反应 （发生率 ≥ 15%） 包括畏
寒、疲劳、发热、背痛、恶心、关节痛和头痛。
临床研究：3项随机、双盲、安慰剂对照、多中
心临床试验研究了该疫苗针对激素难治性前列
腺癌的疗效。 研究 1入选无症状或症状较轻激素
难治性前列腺癌患者 512例， 以 2:1比例随机分
至接受该疫苗组 (n=341)或对照组 (n=171)， 所有
患者基线睾酮水平< 50 ng/ml。 结果表明该疫苗
可将总存活时间延长 4个月。 研究 2针对转移性
去势耐受性前列腺癌和无癌症相关性疼痛患者，
研究主终点为疾病进展时间，但分析主终点发现
未达统计学显著性差异。 两项研究中疫苗组总存
活时间分别为 25.8 和 25.9 个月， 而对照组分别
为 21.7 和 21.4 个月。 第 3 项研究在试验结束前
被终止。
【 参 考 文 献 】
［1］ Drugs. New drug approvals[EB/OL]. (2011-01-01) [2011-01-01].
http://www.drugs.com/ newdrugs. html.
［2］ USA FDA. Drug Approval Reports[EB/OL]. (2011-01-01) [2011-
01-01]. http://www. accessdata.fda.gov/scripts/cder/drugsatfda/.
［3］ USA FDA. Vaccines, Blood & Biologic [EB/OL]. (2011-01-01)
[2011-01-01]. http://www.fda. gov/BiologicsBloodVaccines/de-
fault.htm.
［4］ European Medicines Agency. EPARs for authorised medicinal
products for human use [EB/OL]. (2011-01-01) [2011-01-01].
http://www.emea.europa.eu/htms/human/epar/a.htm.
［5］ 国家食品药品监督管理局 . 国产药品 (含包材 )[EB/OL].
(2003-04-17) [2011-01-01]. http://app1.sfda.gov.cn/datasearch/
face3/base.jsp?tableId=8&tableName=TABLE8&title=批准临
床研究的新药 &bcId=124356683643430217478147499292.
（收稿日期：2011-01-06 修回日期：2011-01-15）
（上接第 70 页）
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