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鸡血藤化学成分研究



全 文 :Traditional Chinese Drug Research & Clinical Pharmacology,2012 March,Vol.23 No.2
收稿日期:2011- 12- 25
作者简介:舒顺利,男,硕士研究生,研究方向:中药材品质评价研究。Email:shufu84722@yahoo.cn。通讯作者:应军,男,主任中药师,主要
从事中药新药研发及管理工作。Email:yingj@gpc.com.cn。
基金项目:粤港关键领域重点突破项目(2006A35003001)。
鸡血藤为豆科植物密花豆 Spatholobus suberectus
Dunn的干燥藤茎。具有补血、活血、通络的功效,
主要用于月经不调、血虚萎黄、麻木瘫痪、风湿痹
痛等症的治疗[1]。迄今为止,国内外学者对鸡血藤化
学成分的研究主要集中于中小极性部位,对其极性
较大的正丁醇部位少有报道。目前,已从鸡血藤中
分离得到的化合物类型主要为黄酮、三萜类、甾醇
类、蒽醌类等[2-6]。现代药理研究表明,鸡血藤对造血
系统,尤其是对白细胞的增殖、分化有促进作用[7-8],
临床上亦被广泛应用于放、化疗导致的白细胞减少
症。本课题组已初步筛选出鸡血藤升高白细胞的有
效部位[9],为了研究其药效物质基础,本文对其有效
部位的化学成分及其正丁醇部位的化学成分做了初
步探讨。
1 材料
1.1 药品 鸡血藤药材于 2009年购自广州清平市场,
经广州中医药大学刘军民教授鉴定为豆科植物密花
豆 Spatholobus suberectus Dunn 的干燥藤茎,样本存
放于广州医药工业研究院天然药物研发中心。
1.2 仪器与试剂 DSQ电子轰击电离质谱,THERMO
公司;AVANCE AV 400 超导核磁共振仪,瑞士
Bruker公司;ESI-MS(LCQ DECAXP)液相色谱-质谱
联用仪,美国 Thermo-Finnigan质谱公司;YRT-3熔
鸡血藤化学成分研究
舒顺利 1,2,应 军 1,刘军民 2,周 焘 1(1. 广州医药工业研究院,广州 510240;2. 广州中医药大学中药学
院,广州 510006)
摘要:目的 研究密花豆 Spatholobus suberectus Dunn藤茎的化学成分。方法 采用色谱技术进行分离纯化,
波谱技术分析结构。结果 从鸡血藤中分离得到 4个化合物,鉴定其结构分别为:表儿茶素(epicatechin)、芒
柄花苷(Ononin)、染料木苷(genistin)、羊红膻醇 thellungianol。结论 染料木苷(genistin)为首次在鸡血藤中发
现,羊红膻醇 thellungianol 为首次在本科植物中发现。
关键词:鸡血藤;豆科;化学成分;染料木苷;羊红膻醇
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:1003-9783(2012)02-0184-03
doi:10.3969/j.issn.1003-9783.2012.02.018
Study on Chemical Constituents of Spatholobus suberectus Dunn
SHU Shun li1,2, YING Jun1, LIU Junmin2, ZHOU Tao1 (1. Guangzhou Institute of Pharmaceutical Industry,
Guangzhou 510240,China;2.College of Chinese Medicine,Guangzhou University of Chinese Medicine,Guangzhou
510006,China)
Abstract:Objective To investigate the chemical constituents from the stem of Spatholobus suberectus Dunn. Meth-
ods The constituents were isolated and purified by various chromatographic methods and their structures were identi-
fied on base of spectral data. Results Four compounds were isolated from Spatholobus suberectus Dunn. and were i-
dentified as epicatechin(Ⅰ),ononin(Ⅱ),genistin(Ⅲ),thellungianol(Ⅳ). Conclusion Compound(Ⅲ)genistin
has been found for the first time in the stem of Spatholobus suberectus Dunn.,and Compound(Ⅳ)thellungianol has
been found for the first time in the plant of Spatholobus suberectus.
Keywords:Spatholobus suberectus Dunn;Leguminosae;Chemical Constituents;Genistin;Thellungianol
·化学成分研究·
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中药新药与临床药理 2012年 3月第 23卷第 2期
点仪,天津大学精密仪器厂;层析硅胶(100~200目,
200~300目)均为青岛海洋化工厂产品;HPD-400大
孔树脂,沧州宝恩吸附材料科技有限公司;所有溶
剂、试剂均为分析纯,由广州化学试剂厂提供。
2 方法与结果
2.1 提取与分离 取鸡血藤药材饮片 10 kg,8 倍量
50 %乙醇提取 2次,每次 2 h,浓缩成稠浸膏,浸膏
用水溶解,分次上 HPD-400大孔树脂柱,充分吸附,
先用蒸馏水洗至无糖反应(molish反应呈阴性,2 mL
洗脱液置于试管中,加几滴 α-萘酚,摇匀,倾斜试
管,沿着试管壁缓缓加入浓硫酸,观察界面变化,
至两液面不出现紫色环为止),洗脱液弃去。再用 25
%乙醇洗至颜色明显变浅,洗脱液弃去,然后用 70
%乙醇洗脱,收集洗脱液浓缩待用。经过薄层预实
验,确定用醋酸乙酯进一步萃取分离。经醋酸乙酯
萃取,得到醋酸乙酯部位 171 g。
经硅胶(100~200目)柱层析,石油醚(60~90 ℃)
-醋酸乙酯梯度洗脱,其中,石油醚-醋酸乙酯(2 ∶ 1)
洗脱的流份,通过多次重结晶,得化合物 1(2.8 g);
石油醚-醋酸乙酯(1 ∶ 4)洗脱的流份,通过多次柱层
析和凝胶柱 LH-20纯化得到化合物 2(100 mg)和化
合物 3(50 mg)。
鸡血藤药材饮片 8 kg,80 %乙醇回流提取,提
取液浓缩至稠膏,水混悬,依次用石油醚、三氯甲
烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到正丁醇部位干膏
(40 g),硅胶柱层析,三氯甲烷-甲醇梯度洗脱,三
氯甲烷-甲醇(5 ∶ 1)洗脱流份得到化合物 4(40 mg)。
2.2 结构鉴定 化合物 1:白色针状结晶,mp 240 ℃
~241 ℃,IE-MS m/z:139(100),123(50),152(30),
290(20);12C-NMR:(100MHz,MeoD)2-C(79.88),3-
C(67.49),4-C(29.24),5-C(157.98),6-C(96.43),
7-C(156.67),8-C(95.91),8a-C(157.36),5a-C
(100.09), 1’-C(132.28), 2’-C(115.90), 3’-C
(145.94), 4’-C(145.78), 5’-C(115.33), 6’-C
(119.41);1H-NMR(400MHz,MeoD)δ:6.97(1H,d,
J=1.96Hz,2’-H),6.80(1H,d,J=9.16Hz,5’-H),
6.78(1H,d d,J=9.16,1.96Hz,6’-H),5.93(1H,
d,J=2.32Hz,8-H),5.91(1H,d,J=2.32Hz,6-
H),4.79(1H,s,2-H),4.11(1H,m,3-H),2.85
(1H,dd,J=16.72,4.56Hz,3-H),2.73(1H,dd,J=
16.84,2.92Hz,3-H);以上数据与文献报道表儿茶
素一致[10],故确定化合物 1为表儿茶素(epicatechin)
(2R,3R)- epicatechin,即:(-)-cis-3,5,7,3’,
4’-五羟基黄烷。
化合物 2:白色粉末,mp 220 ℃~221 ℃,IE-
MS m/z:268(M,100)、253(18)、132(53),1H-NMR
(400MHz,DMSO-d6)δ:8.46(1H,s,2-H),8.08
(1H,d,J=9.0Hz ,H-5),7.54(2H,d,J=9.0 Hz,
H-2’, 6’),7.24(1H,d,J=2.1Hz ,H-8),7.15
(1H,dd, J =9.0,2.1 Hz H-6),7.0(2H,d, J =
9.0Hz,H-3’,H-5’),5.11(1H,d,J=9.0Hz,glc-
1),3.79(3H,s,OCH3)。以上数据与文献[11]报道的
基本一致,故确定为芒柄花苷 Ononin。
化合物 3:白色粉末,mp 254 ~255 ℃, IE-MS
m/z:270(M,100),118(13),153(25); 1H-NMR
(400MHz, DMSO -d6): 8.42 (1H, S, 2 -H)6.47
(1H,d,J=2.16Hz,6-H),6.72(1H,d,J=2.16Hz,
8-H),7.40(2H,dd,J=6.68,1.96Hz,2’、6’-H),
6.83(2H,dd,J=6.68,1.96Hz,3’、5’-H), 12C-
NMR:(100MHz,DMSO-d6):154.52(2-C),122.53
(3-C),180.47(4-C),161.60(5-C),99.55(6-C),
162.98(7-C),94.50(8-C),157.46(9-C),106.06
(10-C),99.85(1’-C),73.05(2’-C),76.38(3’-C),
69.58(4’-C),77.16(5’-C),60.60(6’-C)为糖上碳。
以上数据同文献[12]报道的基本一致,鉴定化合物 3为
5, 4’-二羟基异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,即
染料木苷(genistin),为鸡血藤中首次发现,见图 1。
化合物 4:无色透明针状结晶,mp 156 ℃~160
℃, IE-MS m/z:205(M+1,65),103(100),73
(65), 149 (90); 1H -NMR (400MHz, MeoD)δ:
3.84,3.79(2H,-CH2),3.65(1H,> CHOH),3.73
(1H,> CHOH),3.71(1H,> CHOH),3.90,3.76
(1H,-CH2),3.51(2H,-CH2),1.57(2H,m),1.40
(2H,m),0.93(3H,t,J=7.36Hz,-CH3);12C-NMR:
(100MHz,MeoD):101.58(1-C), 63.54(2-C),
71.08(3-C),71.57(4-C),70.72(5-C), 65.17(6-C),
61.65(1’-C),33.31(2’-C),20.49(3-’C),14.30
(4’-C)。以上数据同文献[13]报道的基本一致,鉴定化
合物 4 为 1-buty-3,4,5-thihydroxy-cyclohexanol,
即羊红膻醇 thellungianol,为本科植物中首次发现,
见图 2。
3 讨论
本文从鸡血藤升高白细胞的有效部位中分离得
到 3个化合物,均为黄酮类,其中,表儿茶素含量
较高,有报道儿茶素有促进小鼠脾脏细胞 IL-6 mR-
NA和 GM-CSF mRNA表达的作用,能够促进小鼠骨
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Traditional Chinese Drug Research & Clinical Pharmacology,2012 March,Vol.23 No.2
髓干细胞和骨髓祖细胞的增殖分化[14],表儿茶素为儿
茶素的立体异构体,可能为鸡血藤升高白细胞的药
效物质基础之一,课题组将进一步深入研究;染料
木苷 genistin为鸡血藤中首次发现,具有雌激素样活
性,可能是鸡血藤活血调经的有效成分之一;从鸡
血藤正丁醇部位分得羊红膻醇 thellungianol,为豆科
植物中首次发现,曾有学者从伞形科植物缺刻叶茴
芹Pimpinella thellungiana Wolff.中首次发现 [13],现有
文献中,尚未检索到其他有关报道。针对该化合物
的药理活性,课题组将进一步深入研究。目前,有
关鸡血藤化学成分的研究主要集中在黄酮类,笔者
发现鸡血藤中黄酮类化合物中除表儿茶素、儿茶素
等黄烷类成分含量较高外,其他成分含量普遍偏低。
另据报道,鸡血藤中缩合鞣质的含量较高[15],因此,
有关鸡血藤药效物质基础方面的研究有待深入。
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(编辑:宋威)
图 1 染料木苷
Figure 1 Genistin
图 2 羊红膻醇
Figure 2 Thellungianol
《中药新药与临床药理》杂志继续入选“中文核心期刊”
接《中文核心期刊要目总览》 2011年版编委会通知:《中药新药与临床药理》杂志入编《中文核心期刊要目
总览》2011年版(即第六版)中国医学类核心期刊。2011年版核心期刊评选采用了被索量、被摘量、被引量、他
引量、被摘率、影响因子、被国内外重要检索工具收录、基金论文比、Web下载量等 9项定量评价指标,并经
专家定性评审,最终从 14400余种我国正在出版的中文期刊中评选出 1982种核心期刊。《中药新药与临床药理》
再次入选《中文核心期刊要目总览》,这是继 2008年《中药新药与临床药理》杂志入编《中文核心期刊要目总览》
以来,再次取得的可喜成绩。
《中药新药与临床药理》是全面报道中药新药研究与开发的专业学术刊物,坚持以“提高杂志学术质量,扩
大杂志影响力”为重点的办刊方向,为中药新药研发、中药临床药理学科重要的学术交流平台,学科影响指
标、影响因子以及学科排序在全国同类期刊中位居前列,并全面进入国内重要的核心期刊评价系统,是中国中
文核心期刊、中国科技核心期刊、中国科学引文数据库来源期刊(CSCD)、RCCSE中国核心学术期刊,并被
WHO西太平洋地区医学索引及美国化学文摘收录,还被评为中国精品科技期刊,先后获得全国中医药优秀期
刊、广东省优秀期刊、广东优秀科技期刊等重要奖项。
(编辑部讯)
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