全 文 ：· 158 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2009, 44 (2): 158−161



丰城鸡血藤异黄酮类化合物的分离鉴定
向 诚, 成 军, 梁 鸿*, 赵玉英, 冯 洁
(北京大学药学院天然药物学系, 北京 100191)
摘要: 为建立丰城鸡血藤质量控制方法提供对照品, 对其化学成分进行了研究, 从中分离鉴定了 8 个化合物,
分别为丰城鸡血藤异黄酮苷 F (1), 芒柄花素 (2), 芒柄花苷 (3), 奥刀拉亭 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (4), 澳白檀苷
(5), 阿夫罗摩辛 (6), 圆荚草双糖苷 (7) 和丰城鸡血藤异黄酮苷 B (8)。化合物 1 为新化合物, 化合物 3～5 和 7 为
首次从本属植物中分离得到, 2 为首次从本植物中分离得到。
关键词: 丰城鸡血藤; 异黄酮; 丰城鸡血藤异黄酮苷 F
中图分类号: R284.1; R284.2 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (2009) 02-0158-04
Isoflavones from Millettia nitida var. hirsutissima
XIANG Cheng, CHENG Jun, LIANG Hong*, ZHAO Yu-ying, FENG Jie
(Department of Natural Medicines, School of Pharmaceutical Sciences, Peking University Health Science Center,
Beijing 100191, China)

Abstract: To study the chemical constituents of Millettia nitida var. hirsutissima, the constituents were
isolated by chromatographic techniques, and structures were identified by spectroscopic methods. Eight
isoflavones were isolated and identified, including a new compound, hirsutissimiside F (1), and seven known
compounds, formononetin (2), ononin (3), odoratin 7-O-β-D-glucopyranoside (4), lanceolarin (5), afromosin (6),
sphaerobioside (7), and hirsutissimiside B (8). Compounds 3, 4, 5 and 7 were isolated from the genus Millettia
for the first time, 2 was obtained from this plant for the first time.
Key words: Millettia nitida var. hirsutissima; isoflavones; hirsutissimiside F

丰城鸡血藤为豆科植物丰城崖豆藤Millettia
nitida var. hirsutissima的根或藤茎, 有活血、补血、通
络之功效。主治肢体麻木、瘫痪、腰膝酸痛、月经不
调、贫血, 为《江西中药材标准》收录品种, 是药典
收载鸡血藤的地方代用品。前期研究表明: 丰城鸡血
藤的总提取物具有抑制ADP诱导的血小板聚集作用,
从中分离得到异黄酮、二氢黄酮、异黄烷和紫檀素类
成分[1−3]。为建立丰城鸡血藤质量控制方法提供对照
品, 同时进一步研究丰城鸡血藤抗血小板聚集活性,
本研究在HPLC指导下用溶剂法和色谱法从 95%乙醇

收稿日期: 2008-10-29.
基金项目: 国家自然科学基金重点资助项目(20432030); 长江学者和
创新团队计划资助项目(985-2-063-112).
*通讯作者 Tel: 86-10-82801592, E-mail: nmechem@bjmu.edu.cn
提取物的乙酸乙酯和正丁醇萃取物中分离得到 8 个
异黄酮类化合物, 用波谱方法鉴定了结构, 分别为丰
城鸡血藤异黄酮苷F (1)、芒柄花素 (2)、芒柄花苷
(3)、奥刀拉亭 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (4)、澳白檀苷
(5)、阿夫罗摩辛 (6)、圆荚草双糖苷 (7) 和丰城鸡血
藤异黄酮苷B (8) (图 1)。化合物 1 为新化合 物, 化
合物 3～5 和 7 为首次从本属植物中分离得到, 2 为首
次从本植物中分离得到, 化合物 6[2]和 8[1]曾从该植物
中分离得到。
化合物 1 无色片状结晶 (丙酮-水), mp 176～
179 ℃; [α] 25D −42.7° (c 0.75, H2O)。UV λmax (MeCN):
260 nm, 1H NMR 谱显示特征质子信号 δ 8.47 (1H, s,
H-2), 13C NMR 谱显示特征碳信号 δ 180.8 (C-4)、155.6
(C-2) 和 122.4 (C-3), 表明该化合物为异黄酮类化合
DOI:10.16438/j.0513-4870.2009.02.006
向 诚等: 丰城鸡血藤异黄酮类化合物的分离鉴定 · 159 ·


Figure 1 The structures of compounds 1−8

物。1H NMR 谱显示低场羟基质子信号 δ 12.84 (1H,
s) 为 5-OH; 一组 AA′BB′ 偶合芳香质子信号 δ 7.52
(2H, d, J = 8.7 Hz, H-2′, 6′ ), 7.11 (2H, d, J = 8.7 Hz,
H-3′, 5′ ), 表明 B 环为 4′-取代; 另有一组间位偶合质
子信号 δ 6.74 (1H, d, J = 2.4 Hz) 和 6.45 (1H, d, J = 2.0
Hz), 表明 A 环为 5, 7-二取代; 在 δ 3.0～5.5 有一些与
氧相连的质子信号和连氧碳上的质子信号, 13C NMR
谱在 δ 60～80 显示 14 个碳信号, 参考 H 的积分数和
化合物的极性, 推测该化合物可能是三糖苷, 水解 1
得到苷元和糖, 将得到的糖与标准葡萄糖和鼠李糖
共薄层, Rf 值相同, 1H NMR 谱显示 δ 1.10 (3H, d, J =
6.3 Hz) 质子信号, 提示可能有一个鼠李糖基和两个
葡萄糖基。分析 1H NMR、13C NMR、HMQC 和 HMBC
数据, 归属了全部 1H NMR 和 13C NMR 数据 (表 1)。
通过分析 HMBC 相关确定苷元结构为 5, 7, 4′-三羟基
异黄酮 (相关关系见图 2), HMBC 显示一个葡萄糖端
基质子信号 δ 5.03 (1H, d, J = 8.7 Hz) 与苷元 7 位碳
信号 δ 163.3相关, 另一个葡萄糖端基质子信号 δ 4.92
(1H, d, J = 7.5 Hz) 与苷元 4′ 位碳信号 δ 157.7 相关;
鼠李糖端基质子信号 δ 4.53 (1H, br s) 与一个葡萄糖
的 6 位碳信号 δ 66.8 相关, 故确定 1 为双糖链苷, 根
据糖的端基氢偶合常数和 13C NMR 数据及不同构型
糖的天然存在丰度, 确定糖基为 β-D-葡萄糖和α-L-
鼠李糖 , 即一个糖链为α -L-吡喃鼠李糖基 -(1→
6)-β-D-吡喃葡萄糖, 另一为 β-D-吡喃葡萄糖。为了确
定糖链与苷元的连接位置, 测定了 1D TOCSY 谱, 选
择性照射与鼠李糖连接的葡萄糖的 6 位氢信号 δ 3.86,
发现它和端基质子 δ 5.03 处于一个自旋体系中, 而该
端基质子与苷元 7 位碳相关, 说明α-L-吡喃鼠李糖基-
(1→ 6)-O-β-D-吡喃葡萄糖与苷元 7 位相连, 则另一
葡萄糖与 4′ 位连接。最终确定化合物 1 为染料木素
7-O-[(α -L-吡喃鼠李糖基 )-(1→ 6)-β-D-吡喃葡萄糖
基 ]-4-O-β-D- 吡 喃 葡 萄 糖 苷 (genistein-7-O-[(α -L-
rhamnopyranosyl)-(1→6)-β-D-glucopyranosyl]-4-O-β-
D-glucopyranoside)。化合物 1 的 HR-ESI-MS 给出准
分子离子峰 741.225 1 [M+H]+和 763.205 8 [M+Na]+,
分子式为 C33H40O19, 进一步证明以上结构正确。1 为
新 化 合 物 , 命 名 为 丰 城 鸡 血 藤 异 黄 酮 苷 F
(hirsutissimiside F)。


Figure 2 The structure and key HMBC of compound 1

Table 1 1H NMR and 13C NMR spectral data of compound 1
(DMSO-d6)
No. 13C NMR 1H NMR HMBC
2 155.6 8.47 (s) C-1′, 3, 4, 9
3 122.4
4 180.8
5 161.9
6 100.2 6.45 (d, 2.4) C-5, 7, 8, 10
7 163.3
8 95.1 6.74 (d, 2.4) C-6, 7, 9, 10
9 157.7
10 106.5
5-OH 12.84 (s) C-5, 6, 10
1′ 124.4
2′ 130.4 7.52 (d, 8.7) C-3, 4′, 6′
3′ 116.4 7.11 (d, 8.7) C-1′, 4′, 5′
4′ 157.7
5′ 116.4 7.11 (d, 8.7) C-1′, 3′, 4′
6′ 130.4 7.52 (d, 8.7) C-3, 2′, 4′
7-Glc 1 100.3 5.03 (d, 8.7) C-7
2 73.4
3 76.9
4 70.7
5 76.0
6 66.8 3.86 (m), 3.39 (m)
Rha 1 101.0 4.53 (br s) C-6′′
2 70.1
3 70.3
4 72.5
5 68.8
6 18.3 1.10 (d, 6.3)
4′-Glc 1 100.6 4.92 (d, 7.5) C-4′
2 73.6
3 77.0
4 71.1
5 77.4
6 61.1

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实验部分
X4 型显微熔点仪, 温度计未校正; 1H NMR 和
13C NMR 谱由 VXR-300 型核磁共振波谱仪测定 ,
TMS 为内标; 薄层色谱和柱色谱硅胶均为青岛海洋
化工厂产品; Sephadex LH-20 为 Pharmacia 产品。
丰城鸡血藤药材于 2004 年 4 月采自江西丰城,
由北京大学药学院天然药物学系陈虎彪教授鉴定为
豆科崖豆藤属植物丰城崖豆藤 Millettia nitida var.
hirsutissima。
1 提取分离
丰城鸡血藤藤茎粗粉 13 kg, 用 10 倍量的 95%乙
醇渗漉提取, 减压回收溶剂, 提取物用水混悬, 依次
用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取, 分别得到石油醚
萃取物 (80.0 g)、乙酸乙酯萃取物 (125.0 g)、正丁醇
萃取物 (380.0 g)。
正丁醇萃取物 (380.0 g) 经硅胶柱色谱分离, 氯
仿 -甲醇 -水 (65∶35∶10) 洗脱 , 得到 5 个部分
(Fr.1～Fr.5)。Fr.1 (24.7 g) 经硅胶柱色谱分离, 氯仿-
丙酮 (10∶1) 洗脱, 并经 Sephadex LH-20 柱色谱纯
化, 丙酮-水 (1∶1) 洗脱得到化合物 2 (210 mg) 和 6
(300 mg); Fr.2 (37.6 g) 经硅胶柱色谱分离, 氯仿-甲
醇 ( 8∶1) 洗脱 , 再经 Sephadex LH-20 柱色谱和
RP-18 柱色谱分离, 分别用甲醇和 20%～60%乙腈洗
脱得到化合物 3 (40 mg)、4 (8 mg) 和 5 (30 mg); Fr.4
(40.0 g) 经硅胶柱色谱分离, 乙酸乙酯-乙醇-水梯度
洗脱, 再经Sephadex LH-20柱色谱分离, 甲醇洗脱得
到化合物 7 (630.0 mg) 和 8 (830.0 mg)。Fr.5 (40.0 g)
经 HP-20 大孔吸附树脂柱色谱分离, 乙醇-水梯度洗
脱, 20%乙醇洗脱物再经 Sephadex LH-20 柱色谱和
Rp-18 柱色谱分离, 得到化合物 1 (38.0 mg)。
2 结构鉴定
化合物 1 无色片状结晶 (丙酮-水), mp 176～
179 ℃; [α] 25D −42.7°(c 0.75, H2O)。UV (MeCN) λmax:
260 nm, 1H NMR 和 13C NMR 数据见表 1。
化合物 2 无色针晶 , mp 252～253 ℃, UV
(MeOH) λmax nm (log ε): 248 (0.73), 300 (0.30); NaOAc:
254 (0.77)。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.71
(1H, s, OH), 8.35 (1H, s, H-2), 7.97 (1H, d, J = 8.7 Hz,
H-5), 7.51 (2H, d, J = 8.7 Hz, H-2′, 6′), 6.99 (2H, d, J =
8.7 Hz, H-3′, 5′), 6.94 (1H, dd, J = 8.7, 2.1 Hz, H-6),
6.88 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-8), 3.79 (3H, s, OCH3)。以
上数据与文献[4]报道芒柄花素 (formononetin) 数据
一致。
化合物 3 白色粉末 , mp 220～221 ℃, UV
(MeOH) λmax nm: 260.5, 287.0。1H NMR (300 MHz,
DMSO-d6) δ: 8.45 (1H, s, H-2), 8.06 (1H, d, J = 9.0 Hz,
H-5), 7.54 (2H, d, J = 9.0 Hz, H-2′, 6′), 7.25 (1H, d, J =
2.1 Hz, H-8), 7.15 (1H, dd, J = 9.0, 2.1 Hz, H-6), 7.01
(2H, d, J = 9.0 Hz, H-3′, 5′), 5.11 (1H, d, J = 9.0 Hz,
glc H-1′′), 3.79 (3H, s, OCH3)。13C NMR (75 MHz,
DMSO-d6) δ: 153.7 (C-2), 124.0 (C-3), 174.7 (C-4),
127.0 (C-5), 115.6 (C-6), 161.4 (C-7), 103.4 (C-8),
157.1 (C-9), 118.4 (C-10), 123.4 (C-1′), 130.1 (C-2′, 6′),
113.6 (C-3′, 5′), 159.0 (C-4′), 100.0 (C-1′′), 73.1 (C-2′′),
76.4 (C-3′′), 69.6 (C-4′′), 77.2 (C-5′′), 60.2 (C-6′′), 55.2
(OCH3)。以上数据与文献 [4]报道芒柄花苷 (ononin)
数据一致。
化合物 4 白色粉末 , mp 221～223 ℃, UV
(MeOH) λmax nm (log ε): 219 (4.14), 262 (4.05), 319
(3.67)。1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 9.04 (1H, s,
OH), 8.39 (1H, s, H-2), 7.48 (1H, s, H-5), 7.33 (1H, s,
H-8), 7.06 (1H, s, H-2′), 6.97 (2H, s, H-5′, 6′), 5.18 (1H,
d, J = 7.0 Hz, glc H-1″), 3.89 (3H, s, OCH3-6), 3.80
(3H, s, OCH3-4′)。13C NMR (75 MHz, DMSO-d6) δ:
151.5 (C-2), 123.0 (C-3), 174.3 (C-4), 104.7 (C-5),
147.5 (C-6), 151.2 (C-7), 103.4 (C-8), 151.5 (C-9),
117.8 (C-10), 124.7 (C-1′), 116.4 (C-2′), 146.0 (C-3′),
147.5 (C-4′), 111.9 (C-5′), 119.7 (C-6′), 99.6 (C-1′′),
73.0 (C-2′′), 77.2 (C-3′′), 69.6 (C-4′′), 76.8 (C-5′′), 60.6
(C-6′′), 55.8 (OCH3), 55.7 (OCH3)。以上数据与文献[5, 6]
报道奥刀拉亭 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (odoratin 7-O-β-
D-glucopyranoside) 数据一致。
化合物 5 白色针晶 , mp 190~192 ℃; UV
(MeOH) λmax nm (log ε): 210.0 (0.952), 261.0 (1.428),
323.5 (0.225). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 12.90
(OH-5), 8.44 (1H, s, H-2), 7.52 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2′,
6′), 7.02 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-3′, 5′), 6.75 (1H, d, J =
1.5 Hz, H-8), 6.48 (1H, d, J = 1.5 Hz, H-6), 5.03 (1H, d,
J = 7.2 Hz, glc H-1), 4.80 (1H, d, J = 3.0 Hz, api H-1).
13C NMR (75 MHz, DMSO-d6) δ: 155.0 (C-2), 122.8
(C-3), 180.5 (C-4), 163.0 (C-5), 99.7 (C-6), 161.6 (C-7),
94.6 (C-8), 157.2 (C-9), 106.1 (C-10), 122.2 (C-1′),
130.2 (C-2′, 6′), 113.8 (C-3′, 5′), 159.2 (C-4′), 99.8 (glc
C-1′′), 73.0 (C-2′′), 78.7 (C-3′′), 69.9 (C-4′′), 76.4
(C-5′′), 67.6 (C-6′′), 109.3 (api C-1′′′), 75.9 (C-2′′′),
75.6 (C-3′′′), 73.3 (C-4′′′), 63.2 (C-5′′′)。以上数据与文
献[7]报道澳白檀苷 (lanceolarin) 数据一致。
向 诚等: 丰城鸡血藤异黄酮类化合物的分离鉴定 · 161 ·

化合物 7 白色粉末, 不溶于甲醇、乙醇、水等
常规溶剂, 溶于四氢呋喃水溶液。1H NMR (300 MHz,
DMSO-d6) δ: 12.89 (OH-5), 9.63 (OH-4′), 8.41 (1H, s,
H-2), 7.40 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2′, 6′), 6.83 (2H, d, J =
8.4 Hz, H-3′, 5′), 6.73 (1H, d, J = 2.4 Hz, H-8), 6.44
(1H, d, J = 2.4 Hz, H-6), 5.03 (1H, d, J = 7.5 Hz, glc
H-1′′), 4.52 (1H, br s, rha H-1′′′)。13C NMR (75 MHz,
DMSO-d6) δ:154.5 (C-2), 121.1 (C-3), 180.5 (C-4),
157.5 (C-5), 99.7 (C-6), 161.5 (C-7), 94.6 (C-8), 157.2
(C-9), 106.2 (C-10), 122.4 (C-1′), 130.2 (C-2′, 6′),
115.1 (C-3′, 5′), 162.8 (C-4′), 100.7 (glc C-1′′), 73.0
(C-2′′), 76.5 (C-3′′), 70.0 (C-4′′), 75.6 (C-5′′), 66.4
(C-6′′), 99.9 (rha C-1′′′), 70.3 (C-2′′′), 70.7 (C-3′′′), 72.1
(C-4′′′), 68.4 (C-5′′′), 17.9 (C-6′′′)。薄层酸水解检出葡
萄糖和鼠李糖。苷元部分碳谱数据与文献[8]一致, 糖
部分碳谱数据与文献[9]一致, 故确定化合物 7 为圆荚
草双糖苷 (sphaerobioside), 即 5, 7, 4′-三羟基异黄酮-
7-O-α -L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

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