全 文 ：瑞香狼毒总黄酮的提取及体外抗氧化作用研究
霍 强，王 宇，高荣远，李文龙，杜 越，刘 坤
（内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古 呼和浩特 010018）
摘要：运用超声波技术提取瑞香狼毒中的总黄酮，用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定总黄酮含量，瑞香狼毒总黄酮提取物
中的黄酮含量为 24.30%，采用抗坏血酸（VC）作为对照，测定了瑞香狼毒总黄酮对超氧阴离子自由基的清除能力与羟
基自由基的清除能力。 结果表明，瑞香狼毒总黄酮具有显著的体外清除超氧阴离子自由基、羟基自由基的作用，其作用
强于 VC，是一种有开发价值的天然抗氧化剂。
关键词：瑞香狼毒；总黄酮；超声波技术；抗氧化
中图分类号：Q949.761.1 文献标识码：A 文章顺序编号：1672-5190（2010）02-0083-02
Study on Atioxidation for Extraction of Total-flavonoid in Stellera chamaejsme L. in Vitro
HUO Qiang, WANG Yu, GAO Rong-yuan, LI Wen-long, DU Yue, LIU Kun
（College of Veterinary Science , Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China）
Abstract：The total-flavonoid in Stellera chamaejasme L. was extracted by ultrasonic technology and its content was determined by
colorimetry, and the cleanup rate of the polyphenolic extract towards superoxide anion radical and hydroxyl radical also was determined
with control of ascorbic acid. The result showed that the content of total-flavonoid were 24.30%, and the flavonoids extract from S.
chamaejsme L.had remarkable function of removing superoxide anion radical and hydroxyl radical in vitro and it was stronger than VC.
The conclusion could be made that it is a promising natural antioxidant for the exploitation and development.
Key words：Stellera chamaejasme L.; total-flavonoid; ultrasonic technology; anti-oxidation
瑞香狼毒（Stellera chamaejasme L.）是瑞香科狼毒属植
物，药用部位为根，广泛分布于我国西北、西南、东北以及河
北等地，在内蒙古有广泛分布，资源极其丰富。据本草考证，
瑞香狼毒是狼毒正品，又名断肠草、红狼毒，有逐水、祛痰、
破积、杀虫之功效 ［1］。 近年的研究发现，狼毒提取物对肿瘤
细胞有较强的抑制作用，此外还有抗菌、抗病毒与抗氧化等
作用，是一个理想的天然药物开发品种 ［2］。 狼毒中的主要化
学成分有黄酮类、香豆素类、二萜类、三萜类、木质素类、苯
丙烯酸醇苷类等。 从瑞香狼毒提取的黄酮类化合物大多为双黄
酮，双黄酮主要有狼毒素 A.B.C、新狼毒素 A.B、异狼毒素、
狼毒素异消旋体、内消旋体异狼毒素，以及狼毒色原酮 ［3］。
黄酮类化合物是具有酚羟基的一类还原性化合物， 在复杂
的生物化学反应过程中， 由于黄酮类化合物的自身氧化而
使其具有较强的抗氧化性 ［4］。 我国主要研究瑞香狼毒的杀
虫、抗肿瘤作用，但对瑞香狼毒黄酮提取物抗氧化作用的研
究报道较少。
超氧阴离子自由基、 羟基自由基等活性氧自由基是在
机体代谢过程中产生的。在生理状态下，活性氧自由基处于
较低的水平，其产生与清除处于动态平衡，但在某些病理情
况下，这种平衡被打破，将导致机体损伤。 体内自由基生成
过多时，常常导致细胞膜和生物大分子的损伤。许多疾病如
动脉粥样硬化、心脑血管疾病、中枢神经系统功能障碍、糖
尿病、癌症及肝脏的化学毒性反应、衰老、休克、炎症等病理
过程的发生都直接或间接与自由基的损伤有关。因此，寻找
高效、低毒的抗氧化剂一直备受关注 ［5］。 该试验运用超声波
技术提取瑞香狼毒中的总黄酮， 并且测定瑞香狼毒中的总
黄酮对羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除作用，旨在测
定瑞香狼毒黄酮提取物的抗氧化能力， 从而为瑞香狼毒的
深度开发和利用提供一些有益的参数， 并为瑞香狼毒早日
成为天然药物奠定理论基础。
1 材料
1.1 药材 试验中所用瑞香狼毒均于同一时间采自内蒙古
呼和浩特市清水河县， 经内蒙古农业大学兽医学院中兽医
教研室鉴定为瑞香狼毒， 将采集的瑞香狼毒在干燥箱中于
60 ℃干燥至恒重，粉碎，过 120 目筛，装入塑料袋密封于冰
箱中备用。
1.2 主要药品与试剂 芦丁标准品 （中国药品生物制品检
定所）；其余试剂均为市售分析纯。
2 方法
2.1 总黄酮成分的提取 精确称取狼毒粉末 200 g，首先用
95%的乙醇浸泡 12 h， 超声波提取 3 次， 每次超声波提取
30 min，料液比为1∶30，提取温度为 50 ℃。 取 95%乙醇提取
液减压浓缩， 将减压后的 95%乙醇提取物放入分液漏斗
中，加入石油醚 50 mL 萃取，弃去石油醚层，重复 3 次。 在
减压旋转蒸发仪内减压浓缩 95%乙醇提取液，使提取物至
浸膏，挥干溶剂后放入烧杯中，加入蒸馏水 5 mL，60 ℃水浴
加热 2 h，静置到室温，过滤，弃去滤液，重复 3 次，挥干溶剂
后得到的成分即为总黄酮成分， 将其装入试剂瓶密封于冰
箱中备用。
2.2 总黄酮含量的测定
2.2.1 标准曲线的制作：精确称取芦丁 2.0 mg，加适量乙醇
及蒸馏水，加热溶解，冷却后用蒸馏水定容至 100 mL，摇匀
备用。用移液管分别量取芦丁标准液 0，0.5，1，2，4，8 mL 置
于 10 mL 容量瓶中，用 30%乙醇补充至 5 mL，加入 0.4 mL
NaNO2溶液摇匀，放置 5 min 后加入 0.4 mL Al（NO3）3溶液，
收稿日期：2010－02－10
基金项目：内蒙古农业大学学生创新基金资助项目。
作者简介：霍强（1987—），男，主要研究方向为动物医学。
通讯作者：王宇（1981—），男，实验师，硕士，主要研究方向为动
物营养代谢及中毒性疾病。
Animal Husbandry and Feed Science畜牧与饲料科学 2010，31（2） :83-84
DOI:10.16003/j.cnki.issn1672-5190.2010.02.016
6 min后再加入 3 mL NaOH 溶液，用 30%乙醇溶液定容，10
min 后于波长 510 nm 处进行比色测定 ， 以试剂空白参
比。 最后以吸收度（A）为纵坐标，芦丁浓度 C（mg/mL）为
横坐标，绘制标准曲线。得回归曲线： A=10.515C + 0.0142，
R2=0.9998。
2.2.2 样品的测定： 称取待测样品定容于 20 mL 30%乙醇
溶液中，准确称量待测样品 1 mL 置于 25 mL 容量瓶中。 分
别加入 5% NaNO2溶液 0.3 mL， 摇匀， 静置 6 min。 再加入
10%Al（NO3）3 溶液 0.3 mL，摇匀，静置 6 min。 加入 1 mol/L
NaOH溶液 4 mL，用 30%乙醇定容，静置 15 min。 在 510 nm
处测定吸光度。 对照标准曲线，计算出总黄酮含量。
2.2.3 超氧阴离子自由基清除能力测定 ［6-7］： 取 0.05 mol/L
pH 值为 8. 2 的 Tris-HCl 缓冲液 4.5 mL， 置于 25 ℃水浴中
预热 20 min， 分别加入 1 mL 试样和 0.4 mL 25 mmol/L 的邻
苯三酚溶液，混匀后于 25 ℃水浴中反应 5 min，加入 8 mol/L
HCl 1.0 mL 终止反应，以 Tris-HCl 缓冲液作参比，在 299 nm
处测定吸光度，计算清除率。 空白对照组以 1 mL 试样溶剂
代替样品，每个处理均做 3个重复。 清除率计算公式为：
超氧阴离子自由基清除率= （A0-A1）/A0×100%
其中，A0 为空白的平均吸光度；A1 为试样的平均吸光
度。
2.2.4 羟基自由基清除能力测定 ［6-7］：羟基自由基由 Fenton
反应产生。在 10 mL具塞试管中依次加入 10 mmol/L 的水杨
酸溶液 0.5 mL、0.2 mol/L 的磷酸缓冲液 （pH =7.4） 3 mL、3.8
mmol/L Fe2+-EDTA（1∶1）溶液 0.5 mL、待测液 1 mL，最后加入
1 mL 4 mmol/L H2O2溶液启动反应，于 25℃水浴中反应 90min
后，加入 1 mL 6 mol/L HCl终止反应，再加入 0.5 g NaCl，4 mL
冷的乙醚充分混匀，静置后移取上层乙醚 3 mL 于 10 mL 离
心管内，在 40 ℃恒温水浴中蒸干乙醚，之后依次加入 10%
三氯乙酸 （W/V）0.15 mL、10%钨酸钠 （W/V）0.25 mL、0.5%
NaNO2（W/V） 0.25 mL，混匀 ，放置 5 min 后 ，加入 1 mol/L
NaOH溶液 0.25 mL，滴加去离子水至 4 mL，混匀，在 510 nm
处测定吸光度，计算清除率。 空白用 1 mL 试样溶剂代替试
样，每个处理均做 3个重复。
清除率计算公式为：
羟基自由基清除率=（A0-A1）/A0×100%
3 结果
3.1 黄酮定量检测结果 检测结果见表 1。
3.2 总黄酮对超氧阴离子自由基的清除作用 见图 1。
3.3 总黄酮对羟基自由基清除能力的清除作用 见图 2。
4 讨论
该研究利用超声波技术提取瑞香狼毒中的总黄酮，得
到的总黄酮含量为 24.30%。 超声波提取法是近年来兴起的
新方法，很多研究表明，利用超声波技术可加速植物材料中
的有效成分进入溶剂，增加有效成分的提取率，缩短提取时
间，并可避免高温对提取成分的影响，在粗提中显示出明显
的优势［8-9］。
瑞香狼毒总黄酮对超氧阴离子自由基有显著清除作用
（见图 1），随着浓度的增加有逐渐上升的趋势，当总黄酮浓
度在 10.0 μg/mL时，消除率达 90.0%以上。 而 VC 在较低的
浓度范围内，消除率呈负值，说明在该浓度范围内，VC 对超
氧阴离子自由基不但没有清除作用， 反而可能产生促进作
用。 当 VC浓度为 1～50 μg/mL时，消除率上升得比较平稳，
消除率最高仅为 7.0%，在此之后，随着 VC 浓度的提高，消
除率逐渐增加，但 VC 浓度达到最大时（500 μg/mL），消除率
未达到 80.0%， 说明瑞香狼毒总黄酮对超氧阴离子自由基
的清除能力较好， 远远高于 VC 对超氧阴离子自由基的清
除能力。
瑞香狼毒总黄酮对羟自由基同样有较高的清除能力
（见图 2），随瑞香狼毒总黄酮和 VC 浓度的升高，它们对羟
基自由基的清除能力都逐渐增强，在 0.3~1.8 mg/mL 浓度范
围内， 总黄酮和 VC 对羟基自由基的消除率分别为 34%～
82%、25%～63%，由此说明，瑞香狼毒总黄酮清除羟基自由
基的能力强于 VC。
通过测定瑞香狼毒总黄酮对超氧阴离子自由基、 羟基
自由基的清除率， 来探讨瑞香狼毒总黄酮的体外抗氧化活
性，结果表明，瑞香狼毒总黄酮具有较强的抗氧化能力，是
一种有开发价值的天然抗氧化剂。 该试验可为进一步研究
用于防治与自由基相关的各类疾病的药品提供实验依据。
参考文献：
［1］
［2］
［3］
［4］
表 1 黄酮定量检测结果
项 目
超声提取法
%
样品 1
24.42
平均值
24.30
样品 3
24.01
样品 2
24.47
图 1 瑞香狼毒总黄酮和 VC对超氧阴离子自由基的清除作用
100
80
60
40
20
0
-20
消
除
率
（ %
）
0.4 1 5 10 50 100 500
浓度（μg/mL）
黄酮
VC
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图 2 瑞香狼毒总黄酮和 VC对羟基自由基的清除作用
0.3 0.6 0.9 1.2 1.5 1.8
浓度（mg/mL）
VC
黄酮
消
除
率
（ %
）
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
畜牧与饲料科学 第 31 卷84
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农业企业财务管理存在的问题与对策
那顺朝克图
（锡林郭勒职业学院经济管理系，内蒙古 锡林浩特 026000）
摘要：现代农业企业是以现代企业制度建立起来的，从事种植业、养殖业或以其为依据，进行农、工、商综合经营，实行独
立核算和具有法人地位的经济组织。我国是个农业大国，涉农企业数量多、覆盖面广，因此，农业企业的会计核算制度如
何，农业企业会计信息质量的好坏，对整个国民经济有着十分重要的影响。 分析了现阶段我国农业企业财务管理存在
的问题，并对问题的成因进行了探讨，提出了解决问题的对策和建议。
关键词：农业企业；财务管理；问题；对策
中图分类号：F275 文献标识码：A 文章顺序编号：1672-5190（2010）02-0085-02
农业是我国国民经济的基础， 随着市场经济的发展和
经济体制改革的深入， 我国农业企业在产权明晰、 权责明
确、政企分开、管理科学的前提下，实行自主经营、自负盈
亏。这一切经济行为都牵动着财务关系，财务管理在农业企
业管理中处于中心地位， 财务管理风险也贯穿在企业各个
财务环节之中，尤其在当前市场经济条件下，我国农业企业
正面临着巨大的挑战。因此，建立健全农业企业财务管理对
于农业企业的生存至关重要。
1 农业企业的特点决定了农业企业会计的特殊性
农业企业会计是以农业企业为会计主体的一种行业会
计。农业企业是从事种植业、养殖业或以其为依据，进行农、
工、 商综合经营， 实行独立核算和具有法人地位的经济组
织。农业企业的生产过程、组织形式和管理体制等与其他行
业存在较大的差别，因此，农业企业会计也具有自身的一些
特点。
1.1 农业企业的主要特点 ①土地是农业生产的重要生
产资料，是农业生产的基础。②农业生产具有明显的季节性
和地域性，劳动时间与生产时间的不一致性，生产周期长。
③农业生产中部分劳动资料和劳动对象可以相互转化，部
分产品可作为生产资料重新投入生产。 ④种植业和养殖业
之间存在相互依赖、相互促进的关系，从而要求经营管理上
必须与之相适应。 一般都实行一业为主、多种经营、全面发
展的经营方针。⑤农业生产不仅在经营上实行一业为主、多
种经营，而且在管理上实行联产承包、统分结合、双层经营
的体制。
1.2 农业企业会计的主要特点 ①核算内容的多样性。 农
业企业经营，往往涉及到农、林、牧、副、渔、工、商等多种行
业。这就要求会计核算既要满足企业综合管理的需要，又要
适应多种行业生产经营的特点， 分别计算各个行业的费用
成本与财务成果，并考核各种非生产性的开支。②管理体制
的复杂性。 农业企业实行多种经营与双层经营体制，如国营
农场有场部、分场、生产队多个层次，还普遍建立了专业性
服务组织和职工家庭农场； 农村经济合作组织在普遍推行
农户联产承包的同时， 也相应建立了统一经营的生产和服
务组织；乡镇企业的体制更是复杂多样。 这就无疑会给会计
核算与管理体制带来复杂性。③核算方法的灵活性。现阶段
我国农业企业的生产组织比较分散， 经营形式以集体经济
为主，经营管理的自主权较大，生产成果的自给程度较高，
会计核算水平与会计工作的管理水平差距较大， 因此农业
会计核算方法也应该具有较大的灵活性。
2 农业企业财务管理中存在的问题
企业财务活动主要包括 3 个方面，即筹资活动、投资活
动和分配活动。 随着市场经济的发展，财务管理逐步被越来
越多的企业重视，纷纷加强了在以上 3 个方面的管理，但由
于目前体制尚不成熟和健全，当前条件下，我国农业企业的
财务管理中仍存在很多问题，亟待解决。
2.1 与会计制度改革的大环境不相适应， 不能适应农业企
业自身发展的新需要 我国农业企业的会计核算应针对其
与新《企业会计制度》及具体会计准则有冲突的地方作相应
的调整和补充。
目前在市场经济条件下，农业企业的经营管理体制、经
营模式和经营活动范围均发生了巨大的变化， 农业企业的
会计核算仍然执行《农业企业会计制度》，不能满足会计信
息使用者的需要， 更不能保证农业企业会计核算资料的质
量。
2.2 财务管理未体现经营的经营目标 财务管理工作包含
建立内部管理制度，加强会计核算和成本管理工作，是实施
财务反映、监督、决策三项管理之基础。 目前一些农业企业
基础工作薄弱，管理混乱，领导班子懒散，纪律松弛，工作效
率不高， 加之财务人员素质参差不齐， 财务管理机构不健
全，很难适应市场经济发展的要求。 例如一些农业企业会计
分工不明确， 出纳和会计由一个人担任， 从而造成账目不
清、账物不符等。 一些农业企业的原始记录、定额管理、财产
收稿日期：2010－01－25
作者简介：那顺朝克图（1962—），男，讲师，经济师，主要研究方
向为经济管理与财务会计。
□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□
Animal Husbandry and Feed Science畜牧与饲料科学 2010，31（2） :85-86