免费文献传递   相关文献

茺蔚子油脂提取条件优化及其抗氧化的作用



全 文 :茺蔚子油脂提取条件优化及其抗氧化的作用
宋 宇 孙立伟 姜 锐 申 野 (北华大学医学部 ,吉林 吉林 132013)
  〔摘 要〕 目的 优化茺蔚子油脂提取的最佳条件 ,研究其体外抗氧化作用。方法 采用正交实验法 ,对影响茺蔚子油脂提取工艺的因素进行
研究 ,即以提取温度 、提取时间 、固液比和乙醇浓度为影响因素 ,将不同剂量的提取物放入花生油中测定过氧化值研究其抗氧化活性, 选择最优剂量 ,
并与其他抗氧化剂活性相比较。结果 茺蔚子油脂提取的最佳条件为乙醇浓度 70%,提取温度为 70℃,提取时间为 3.0h,固液比为 1∶20;茺蔚子油
脂具有较好的抗氧化活性 ,当加入 60mg时茺蔚子抗氧化活性优于VC、VE、BHT、BHA,低于茶多酚。结论 正交实验法能够有效优化茺蔚子油脂的
提取条件;茺蔚子油脂在体外具有很强的抗氧化活性 ,与其所含亚油酸 、亚麻酸和油酸有关。
〔关键词〕 茺蔚子;抗氧化;正交实验
〔中图分类号〕 R385.5  〔文献标识码〕 A  〔文章编号〕 1005-9202(2010)24-3741-02
基金项目:北华大学健峰教师研究基金项目(201016)
通讯作者:孙立伟(1970-),女 ,硕士生导师, 博士 ,主要从事基因工程药
物研究。
第一作者:宋 宇(1973-),女 ,硕士,主要从事基因工程药物研究。
  茺蔚子(FructusLeonuri)又名小虎麻 , 为唇形科植物益母
草的果实。味辛 、苦 ,性微寒 , 具有活血调经 、清肝名目的功效。
茺蔚子富含油脂 , 包括油酸 、亚麻酸 ,其中大部分为人体必需的
不饱和脂肪酸 , 具有丰富的食用价值和药用价值 〔1, 2〕 , 但茺蔚子
油脂抗氧化研究未见报道。本实验通过正交实验法优化茺蔚
子油脂提取条件 , 研究不同剂量的茺蔚子油脂提取物的体外抗
氧化活性 , 评价其体外抗氧化能力 , 为进一步研究其药用价值
和开发新型保健品提供理论依据。
1 材料及试剂
1.1 材料 茺蔚子采自吉林省吉林市;旋转蒸发仪 RE-52A
(上海亚荣生化仪器厂);维生素 C(VC)、维生素 E(VE)、二丁
基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基茴香醚(BHA)、茶多酚为食品级;
无水乙醇等均为分析纯;花生油为市售澄清无异味。
1.2 方法
1.2.1 茺蔚子油脂条件优化 茺蔚子干燥粉碎称重 ,取 20 g
麻布包好置于索氏提取器中加入无水乙醇水浴回流提取茺蔚
子油脂 , 选取提取温度 、提取时间 、乙醇浓度 、固液比为影响因
素 , 提取液回收乙醇称重 , 所得提取物进一步研究其体外抗氧
化性质 〔3〕。见表 1。
表 1 提取条件及水平
水平 A乙醇浓度(%)
B
提取温度(℃)
C
提取时间(h)
D
固液比(g/ml)
1 60 70 3 1∶10
2 70 60 2 1∶15
3 80 50 1 1∶20
1.2.2 不同剂量提取物的抗氧化活性 分别添加 15、30、 45、
60、75、90、 105 mg的茺蔚子油脂提取物于 50 g花生油中 , 搅拌
使其充分混合 , 置于 70℃恒温箱中 , 每隔 3 d测定过氧化值
(POV),测定 6次 ,以空白花生油为对照品。
1.2.3 茺蔚子油脂提取物与其他抗氧化剂的比较 以实验中
抗氧化活性最佳剂量与 0.02%茶多酚 、VC、VE、BHT、BHA比
较 〔4~ 7〕 ,每隔 3 d测量 POV。
1.3 统计学分析 采用 SPSS12.0软件行 t检验。
2 结 果
2.1 正交实验结果 按照 L9(3)4正交表进行实验 , 对茺蔚子
油脂的提取条件进行优化 , 做平行实验 5次 , 取平均值进行统
计学分析 , 结果见表 2、表 3。
表 2 正交试验结果(x±s)
序号 A B C D 油脂(%)
1 1 1 1 1 29.77
2 1 2 2 2 25.62
3 1 3 3 3 26.17
4 2 1 2 3 33.09
5 2 2 3 1 29.08
6 2 3 1 2 31.71
7 3 1 3 2 30.46
8 3 2 1 3 29.63
9 3 3 2 1 27.83
K1 27.19 31.11 30.37 28.89 ∑yi=9.53
K2 31.29 28.11 28.85 29.26 CT=(∑yi)2 /n
K3 29.31 28.57 28.57 29.63 R=Kmax-Kmin
R 4.11 3.00 1.80 0.74 Si=∑(Ki2 /i)CT
表 3 方差分析表(x±s)
方差来源 离差平方和 Si自由度df均方 Z F值 P
A 25.32 2 12.66 39.05 <0.05
B 15.66 2 7.83 19.14 <0.05
C 5.64 2 2.82 6.89 >0.1
D 0.12 2 0.41 1.00
 F0.01(2, 2)=99, F0.05(2 , 2)=19, F0.1(2 , 2)=9
  在茺蔚子油脂提取率的影响因素中 , 乙醇浓度(A)、提取
·3741·宋 宇等 茺蔚子油脂提取条件优化及其抗氧化的作用 第 24期
温度(B)对油脂得率有显著性影响 , C、D因素的影响不显著 ,
四因数的影响顺序依次为:乙醇浓度(A)>提取温度(B)>提
取时间(C)>固液比(D)。 在这四个因素中 , 提取温度和乙醇
浓度对提取效果的影响最大 ,均达到显著水平(P<0.05),起决
定作用;提取时间影响次之;固液比影响最小。由此可以得出 ,
提取茺蔚子油脂的最佳工艺条件是:A2B1C1D3 , 即乙醇浓度
70%, 提取温度为 70℃,提取时间为 3.0 h, 固液比为 1∶20。
2.2 不同剂量的提取物的抗氧化活性 随着添加茺蔚子油脂
剂量的增加 , 其抗氧化活性随之增强 , 当茺蔚子油脂≤60 mg
时 , 其抗氧化活性显著增强(P<0.05);当茺蔚子油脂 >60 mg
时 , 其抗氧化活性增加不明显(P>0.05)。因此 , 60 mg为茺蔚
子油脂抗氧化活性的最佳质效剂量。见表 4。
2.3 蔚子油脂提取物与其他抗氧化剂的比较 60 mg茺蔚子
抗氧化活性优于 VC、VE、BHT、BHA, 低于茶多酚。实验中所使
用的茺蔚子油脂为乙醇提取的粗提物 , 其成分相对复杂 , 除所
含的抗氧化成分外 , 还含有大量无抗氧化活性物质及干扰物
质 , 应对粗提物进一步分离纯化 , 研究其不同组分的抗氧化活
性。见表 5。
表 4 茺蔚子油脂剂量与抗氧化活性 POV的关系(x±s, mg/kg)
油脂剂量(mg) 3d 6d 9d 12d 15d 18d
15 4.12±0.24 7.28±0.33 13.37±0.66 17.02±0.54 23.95±0.82 38.23±0.94
30 4.08±0.22 6.83±0.35 12.54±0.69 15.91±0.61 22.51±0.86 33.74±0.98
45 3.83±0.25 5.88±0.31 10.83±0.58 14.52±0.65 22.13±0.93 33.06±1.05
60 3.41±0.191) 4.71±0.281) 10.25±0.541) 14.03±0.681) 20.08±0.881) 30.51±0.891)
75 3.38±0.171) 4.65±0.271) 10.20±0.761) 13.95±0.631) 19.82±0.971) 30.24±1.071)
90 3.32±0.181) 4.55±0.291) 10.08±0.551) 13.85±0.711) 19.53±0.781) 29.43±1.031)
105 3.28±0.211) 4.50±0.301) 9.95±0.541) 13.56±0.671) 19.16±0.711) 29.15±1.101)
空白 4.41±0.25 8.31±0.51 15.06±0.74 18.93±0.82 26.17±1.05 39.56±1.31
 与空白组比较:1)P<0.05
表 5 茺蔚子油脂与其他抗氧化剂 POV的比较(x±s, mg/kg)
组别 3d 6d 9d 12d 15d 18d
茺蔚子油脂(粗提物) 4.31±0.181) 7.58±0.311) 13.70±0.591) 17.52±0.821) 24.53±1.051) 38.26±1.151)
茶多酚 4.11±0.17 6.75±0.37 12.53±0.61 15.67±0.87 22.31±1.11 36.01±1.18
BHT 4.31±0.24 7.75±0.32 13.82±0.62 18.43±0.94 24.67±1.08 38.64±1.32
BHA 4.34±0.18 7.80±0.33 13.83±0.66 18.52±0.95 24.72±1.13 38.65±1.57
VC 4.35±0.16 7.88±0.37 13.85±0.68 18.58±1.08 24.77±1.21 38.68±1.66
VE 4.38±0.19 7.93±0.32 13.95±0.71 18.66±0.98 24.87±1.29 38.71±1.53
空白 4.41±0.21 8.12±0.38 14.09±0.63 18.94±1.13 25.31±1.34 39.14±1.87
 与茶多酚组比较:1)P<0.05
3 讨 论
  茺蔚子富含大量脂肪油 ,其中包括大量的亚油酸 、亚麻酸 ,
及其他不饱和脂肪酸。 本实验通过正交实验法有效优化茺蔚
子油脂的提取条件 , 其最佳的提取条件是乙醇浓度 70%, 提取
温度为 70℃, 提取时间为 3.0h,固液比为 1∶20, 能够有效提高
茺蔚子油脂的提取效率 , 为进一步分离纯化抗氧化奠定基础。
通过分析实验结果 , 证明了茺蔚子油脂具有抗氧化活性。研究
表明 , 茺蔚子含有大量的不饱和脂肪酸 , 生物碱 、二萜类化合
物 、甾醇 、烯类化合物及维生素 A样物质 , 其中生物碱和稀类化
合物可能是其主要抗氧化活性物质 〔8〕。由于实验中所用油脂
为粗提物 , 所以在油脂中会有其他成分 , 这些成分可能会影响
或强化其抗氧化作用。 为了寻找其抗氧化活性物质并提高其
有效浓度 , 将在现有实验基础上对粗提物进行分离纯化 , 评价
其各组分的抗氧化活性。实验结果表明 , 茺蔚子油脂具有较强
的体外抗氧化活性 , 其中富含人体必需的不饱和脂肪酸 , 具有
丰富的营养价值 , 可进一步开发成新型的保健品或功能食品。
4 参考文献
1 冉先得.中华药海〔M〕.哈尔滨:哈尔滨人民出版社 , 1993:1219.
2 国家药典委员会 .中华人民共和国药典 〔M〕.北京:化学工业出版
社 , 2005:237.
3 郭宇洁 ,马燕琼 ,吴晓洋 .正交试验法研究茺蔚子提取工艺 〔J〕.中
国实验方剂学杂志 , 2003;9(2):9-10.
4 晁 志 ,周秀佳 .益母草中药的研究概况和进展〔J〕.中草药 , 1998;
29(6):414-6.
5 林文群 ,陈宏靖 ,陈 忠 .茺蔚子化学成分的研究 〔J〕.福建师范大
学学报 , 2001;17(2):84-7.
6 安伟建.中药益母草有效成分提取和测定方法的研究〔J〕.天津药
学 , 2003;15(3):68.
7 冯年平 ,郁 威 .中药提取分离技术原理于应用〔M〕.北京:中国医
药科技出版社 , 2005.
8 常 影 .茺蔚子化学成分及药理研究 〔J〕.吉林中医药 , 2008;28
(3):207-8.
〔2010-09-14收稿  2010-10-14修回〕
(编辑 袁左鸣)
·3742· 中国老年学杂志 2010年 12月第 30卷