全 文 ：西北林学院学报 ２０１５，３０（６）：２２２～２２６
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
　　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７４６１．２０１５．０６．４０
６个不同种源梓树叶片的总酚含量和抗氧化性能的比较
　收稿日期：２０１４－１１－１８　修回日期：２０１５－０８－０７
　基金项目：国家“十二五”科技支撑计划专题（２０１２ＢＡＤ０１Ｂ０５０２）。
　作者简介：陈　龙，男，硕士研究生，研究方向：楸树遗传多样性及亲缘关系。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｔｇｕ２０１２ｃｌ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
＊通信作者：王军辉，男，研究员，博士生导师，研究方向：楸树和云杉的遗传育种。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｈ＠ｃａｆ．ａｃ．ｃｎ
陈　龙１，２，景丹龙２，王军辉２＊
（１．三峡大学 生物技术研究中心，湖北 宜昌４４３００２；２．中国林业科学研究院 林业研究所，国家林业局 林木培育重点实验室，
国家林木种质资源平台，北京１０００９１）
摘　要：总酚含量和抗氧化性能水平的高低是植物做为药用价值的重要指标。为了比较不同种源
梓树叶片的总酚含量和抗氧化性能的差异，寻找抗氧化性能较强的梓树品种，首先进行了提取方法
的优化，然后使用最优的提取方法提取了６个种源（辽宁、甘肃、河南、湖北、湖南、贵州）１年生梓树
叶片的抗氧化物质，测定了总酚含量、还原力、羟自由基清除率、ＤＰＰＨ 清除率、ＡＢＴＳ清除率和
ＦＲＡＰ铁离子还原能力。结果表明：使用６０％甲醇，料液比１∶１０，超声提取９０ｍｉｎ，获得梓树叶片
的总酚含量较高，辽宁、甘肃和河南种源梓树叶片的总酚含量和抗氧化能力较高，而湖南、湖北和贵
州地区的较低。总酚含量和抗氧化能力具有显著的地理差异，北方梓树的显著高于南方。可为选
育具有更高抗氧化性能的林木提供指导，为进一步研究抗氧化性能差异的机理提供基础。
关键词：梓树；种源；抗氧化；总酚
中图分类号：Ｓ７２２．３　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００１－７４６１（２０１５）０６－０２２２－０５
Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　Ｔｏｔａｌ　Ｐｈｅｎｏｌｓ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｅ
Ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｃａｔａｌｐａ　ｏｖａｔｅ　ｆｒｏｍ　Ｓｉｘ　Ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓ
ＣＨＥＮ　Ｌｏｎｇ１，２，ＪＩＮＧ　Ｄａｎ－ｌｏｎｇ２，ＷＡＮＧ　Ｊｕｎ－ｈｕｉ　２＊
（１．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｃｈｉｎａ　Ｔｈｒｅｅ　Ｇｏｒｇｅｓ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｃｈａｎｇ，Ｈｕｂｅｉ　４３００２，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｄｅ　ｏｆ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ，Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｔｒｅｅ　Ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ａｎｄ　Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，
Ｓｔａｔｅ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，Ｃｈｉｎａ　Ｆｏｒｅｓｔ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｒｅ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ　ｆｏｒ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔｓ．
Ｔｏ　ｃｏｍｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　１－ｙｅａｒ－
ｏｌｄ　Ｃａｔａｌｐａ　ｏｖａｔｅ　ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓ　ｔｏ　ｓｅｌｅｃｔ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｗｉｔｈ　ｓｒｏｎｇ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ
ｆｒｏｍ　６ｒｅｇｉｏｎｓ　ｓｕｃｈ　ａｓ　Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｇａｎｓｕ，Ｈｅｎａｎ，Ｈｕｂｅｉ，Ｈｕｎａｎ　ａｎｄ　Ｇｕｉｚｈｏｕ　ｗｅｒｅ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ
ｐｈｅｎｏｌ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｐｏｗｅｒ，ｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｓｃａｎｖｅｎｇｉｎｇ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ，ｓｕｃｈ　ａｓ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ，ＤＰ－
ＰＨ　ｒａｄｉｃａｌ　ａｎｄ　ＡＢＴＳ，ａｎｄ　ＦＲＡＰ　ｉｒｏｎ　ｃｌｅａｒａｎｃｅ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ
ｏｐｔｉｍａｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｓｏｌｖｅｎｔ：６０％ ｍｅｔｈａｎｏｌ，ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｔｏ　ｓｏｌｖｅｎｔ：１∶１０，ａｎｄ　ｔｉｍｅ　ｏｆ
ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｗａｖｅ　ａｉｄｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ：９０ｍｉｎ．Ｓａｍｐｌｅｓ　ｃｏｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｇａｎｓｕ，ａｎｄ　Ｈｅｎａｎ　ｗｅｒｅ　ｆｏｕｎｄ
ｈｉｇｈｅｒ　ｐｈｅｎｏｌ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｓｔｒｏｎｇ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｏｓｅ　ｆｒｏｍ　Ｈｕｎａｎ，Ｈｕｂｅｉ，ａｎｄ　Ｇｕｉｚｈｏｕ
ｗｅｒｅ　ｌｏｗｅｒ．Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ：ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｆｒｏｍ　ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｃｈｉｎａ　ｗｅｒｅ　ｓｕｐｅｒｉ－
ｏｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｆｒｏｍ　ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｃｈｉｎａ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｗｏｕｌｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｇｕｉｄａｎｃｅ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ　ｗｉｔｈ
ｈｉｇｈ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｓ　ｗｅｌ　ａｓ　ｆｏｒ　ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｓｔｕｄｙ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃａｔａｌｐａ　ｏｖａｔｅ；ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌ
　　梓树（Ｃａｔａｌｐａ　ｏｖａｔａ）为紫葳科梓树属高大落
叶乔木，原产我国，主要分布在长江流域及以北地
区，树体端正，叶大荫浓，叶中含有黄酮、酚类等药用
成分，具有很高的观赏和药用价值［１－２］。植物叶片内
的抗氧化物水平不仅反映了植物的生长状态，而且
反映了植物对周围环境的适应能力，是其自身基因
和所处环境共同作用的结果；植物叶片内的抗氧化
物对脂质过氧化物、活性氧自由基以及ＤＮＡ 氧化
损伤具有较强的抑制作用，从而起到保护植物的作
用［３－６］。因此，关于植物叶片的抗氧化物研究是近年
来研究的热点之一。王丹阳［７］等采用Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌ－
ｔｅｕ法对陕西产的２种鹿蹄草的多酚定量，并用ＤＰ－
ＰＨ法、ＡＢＴＳ法、ＦＲＡＰ法３种方法进行评价自由
基能力。吴媛琳［８］等研究了枇杷不同部位总黄酮、
总酚酸、总三萜酸的分布情况以及抗氧化活性。通
过对梓树叶片的抗氧化物活性进行研究，有利于梓
树优良抗氧化品种的筛选。此外，梓树叶片内的抗
氧化类化合物具有治疗心脑血管疾病、降血压、抗菌
作用和药用保健等功能［２］。长期以来，对梓树的叶
片研究主要集中在叶片密度、厚度、干物质含量和相
对叶绿素含量等方面［９－１０］，而对其抗氧化物性能方
面的研究较少。
本研究对甘肃、湖北种源１年生梓树叶片中总
酚的提取方法进行优化，并测定、分析了６个不同种
源（辽宁、甘肃、河南、湖北、湖南、贵州）１年生梓树
叶的总酚含量、还原力、羟自由基清除率、ＤＰＰＨ清
除率、ＡＢＴＳ清除率和ＦＲＡＰ铁离子还原能力的差
异性。以揭示不同种源梓树叶的总酚含量和抗氧化
物的差异性，为梓树的抗氧化品种筛选提供理论
依据。
１　材料与方法
１．１　材料
试验林由“国家林木种质资源平台—楸树种质
资源保存库”提供。２０１３年１０月４日，在河南省洛
阳市的梓树种源苗圃试验林（１１３°１４′Ｅ，３４°４３′Ｎ，
海拔１１０ｍ），采集６个不同种源（辽宁、甘肃、河南、
湖北、湖南、贵州）的１年生梓树顶端第３轮的叶片，
分家系进行采集，采集后将每个种源１０个家系的叶
片混合。分别采集每个种源１年生、长势接近的梓
树新鲜叶片后混合，每个种源的样品３个重复，各叶
片采集后９０℃杀青处理２０ｍｉｎ，６０℃烘干，粉碎，过
２０目筛，备用。
１．２　方法
１．２．１　样品的制备　准确称取０．５００　０ｇ样品干
粉于离心管中，加入５ｍＬ　６０％甲醇超声提取９０
ｍｉｎ（分３次提取，每次超声３０ｍｉｎ），合并上清，滤
液用封口膜封口后放于冰箱内保存，备用测定各种
物质和抗氧化指标。
１．２．２　梓树叶片内的总酚含量提取优化　选取甘
肃、湖北种源的梓树叶片样品，分别用５种提取溶剂
（纯甲醇、无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯和石油醚）进行
总酚的提取优化，料液比为１∶１０，超声时间为９０
ｍｉｎ，选择适宜的提取溶剂；将该适宜的溶剂配制成
６个浓度（５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％）的溶
液进行总酚提取，料液比为１∶１０，超声时间为９０
ｍｉｎ，获得适宜提取浓度；每隔３０ｍｉｎ更换超声仪中
的水，以维持室温。
在适宜浓度的溶剂下，进行超声３０、６０ｍｉｎ和
９０ｍｉｎ的比较，选择适宜的超声时间；在适宜浓度
的溶剂和超声时间条件下，配制３个料液比：１∶５、
１∶１０、１∶２０，进行提取效果比较，选择适宜的料液
比；获得较为理想的总酚提取条件。
１．２．３　梓树叶片的总酚含量测定　梓树叶片中的
总酚含量采用Ｆｏｉｌｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ［１１－１３］法进行测定，稍
加改进。准确吸取４００μＬ样品提取液，加入５ｍＬ
Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ酚试剂和２ｍＬ　７．５％碳酸钠溶液，
涡旋混匀，置于２５℃水浴反应１ｈ后测Ａ７６０ｎｍ。用
没食子酸（０．２～１．６ｍｇ·ｍＬ－１）作为标准品制作
标准曲线，得到回归方程：ｙ＝０．６２０　５ｘ－０．０１３　８
（Ｒ２＝０．９９３　９）。根据标准曲线计算梓树叶片中的
总酚含量，以每克样品干重中含有的没食子酸毫克
数计，单位为ｍｇ·ｇ－１。
１．２．４　梓树叶片的还原力测定　梓树叶片中的还
原力采用ＦｅＣｌ３ 还原力测定法［１４］，稍有改进。吸取
１ｍＬ样品提取液，加２．５ｍＬ　ＰＢＳ（０．２Ｍ，ｐＨ　６．６）
和２．５ｍＬ　１％铁氰化钾溶液，在５０℃水浴中保温
２０ｍｉｎ后迅速冷却，加入２．５ｍＬ　１０％ 三氯乙酸溶
液，混合均匀，３　０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，取上清
液１．０ｍＬ，依次加入１．０ｍＬ蒸馏水和０．２ｍＬ
０．１％ＦｅＣｌ３，充分混匀，静置反应１０ｍｉｎ后，在７００
ｎｍ下测定其吸光度。
还原力＝［１－（Ａｉ－Ａｊ）／Ａｏ］×１００％ （１）
式中Ａｉ：样品提取液＋ＰＢＳ＋铁氰化钾＋三氯乙酸
＋三氯化铁；Ａｏ：ＰＢＳ＋铁氰化钾＋三氯乙酸＋三氯
化铁；Ａｊ：样品提取液＋ＰＢＳ。
１．２．５　梓树叶片的羟自由基清除率测定　羟自由
基的测定按照Ｊ．Ｒｅｎ［１５］等的方法，略有改进。取２
ｍＬ样品提取物，加入２ｍＬ　９ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＦｅＳＯ４·
７Ｈ２Ｏ－ＥＤＴＡ混合溶液、２ｍＬ　９ｍｍｏｌ·Ｌ－１水杨酸
３２２第６期 陈　龙 等：６个不同种源梓树叶片的总酚含量和抗氧化性能的比较
乙醇溶液和２ｍＬ　８．８ｍｍｏｌ·Ｌ－１　Ｈ２Ｏ２，混匀后置
于３７℃水浴中，反应６０ｍｉｎ。
羟自由基清除率＝［１－（Ａｓ－Ａ０）／Ａｃ］×１００％
（２）
式中Ａｃ：ＦｅＳＯ４＋水杨酸醇溶液＋Ｈ２Ｏ２；Ａｓ：加Ｆｅ－
ＳＯ４＋水杨酸醇溶液＋Ｈ２Ｏ２＋样品提取液；Ａ０：加
ＦｅＳＯ４＋水杨酸醇溶液＋样品提取液。
１．２．６　梓树叶片的ＤＰＰＨ自由基清除率测定　制
备ＤＰＰＨ溶液：用９５％乙醇将７８．８６ｍｇ的ＤＰＰＨ
试剂溶解定容，配置成７８．８６ｍｇ·Ｌ－１　ＤＰＰＨ·乙
醇溶液，置于冰箱中待用。在５ｍＬ　７８．８６ｍｇ·Ｌ－１
ＤＰＰＨ·乙醇溶液中加入１ｍＬ提取液，每隔５ｍｉｎ
测定溶液的吸光度Ａ５１７ｎｍ，３０ｍｉｎ后吸光度基本稳
定。分别在５ｍＬ　ＤＰＰＨ·乙醇溶液中加入１ｍＬ
样品提取液，其吸光值为Ａｓａｍｐｌｅ，同时用１ｍＬ　９５％
乙醇代替样品提取液作为对照组，其吸光值为
Ａｂｌａｎｋ，混匀放置反应３０ｍｉｎ，在５１７ｎｍ 测定吸光
度，并测定５ｍＬ　９５％ 乙醇加１ｍＬ样品提取液的
吸光值Ａｃｏｎｔｒｏｌ。
ＤＰＰＨ清除率＝［１－（Ａｓａｍｐｌｅ－Ａｂｌａｎｋ）／Ａｃｏｎｔｒｏｌ］
×１００％ （３）
１．２．７　梓树叶片的ＡＢＴＳ自由基清除能力　测定
的自由基采用ＡＢＴＳ与过硫化钾溶液反应产生，取
５ｍＬ　ＡＢＴＳ（７ｍｍｏｌ·Ｌ－１），然后加入１２３μＬ过硫
化钾溶液（１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１）。混匀后，暗处静置１３
ｈ待用。使用前用乙醇稀释到吸光值在７３２ｎｍ处
为０．７０±０．０２。
分别吸取样品提取液１００μＬ加入到ＡＢＴＳ·
＋
溶液２．０ｍＬ摇匀、静置１０ｍｉｎ，以溶剂（７０％乙醇）
为空白，吸光度Ａｉ；同时测定样品液２．０　１００μＬ与
７０％乙醇２．０ｍＬ混合液吸光度Ａｊ；再测定 ＡＢＴＳ
·＋溶液２．０ｍＬ与７０％乙醇２．０ｍＬ混合液处的
吸光度Ａｃ，每组测定３次。
ＡＢＴＳ清除率＝［１－（Ａｉ－Ａｊ）／Ａｃ］×１００％
（４）
１．２．８　梓树叶片的ＦＲＡＰ铁离子还原能力　参照
铁离子还原法，加入１０μＬ样品溶液，再加入３ｍＬ
ＦＲＡＰ溶液（０．３ ｍｏｌ·Ｌ－１醋酸盐缓冲液∶１０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＴＰＴＺ溶液∶２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＦｅＣｌ３ 溶
液＝１０∶１∶１，现配现用），在３７℃水浴条件下，反
应１０ｍｉｎ，于５９３ｎｍ 处测定吸光度，平行测定３
次。
ＦＲＡＰ铁离子还原能力＝［１－（Ａｉ－Ａｊ）／Ａｏ］
×１００％ （５）
式中Ａｉ：样品提取液＋水＋ＦＲＡＰ；Ａｏ：水＋ＦＡＲＰ
溶液；Ａｊ：样品提取液＋水。
１．３　数据分析
试验数据使用ＳＰＳＳ软件进行ＡＮＯＶＡ统计分
析，采用ＳＮＫ法进行显著性检验（ｐ＜０．０５）其中酚
类物质含量与抗氧化活性的关系运用Ｐｅａｒｓｏｎ相关
性分析。每个样品测定重复３次，结果平均值±标
准差（珚ｘ±ｓ）表示。
２　结果与分析
２．１　梓树叶片内的总酚含量提取优化
５种有机溶剂分别对甘肃、湖北种源的梓树叶
片内总酚含量进行提取效果为：甲醇＞乙醇＞丙酮
＞乙酸乙酯＞石油醚。选用甲醇作为溶剂进行提取
条件下，甘肃种源获得的提取量为１０．３２ｍｇ·ｇ－１，
湖北种源为７．２５ｍｇ·ｇ－１，在５种提取溶剂下获得
的总酚含量均最高，因此，选择提取溶剂为甲醇。６
种浓度甲醇分别对甘肃、湖北种源的梓树叶片内总
酚进行提取比较，甘肃（１５．０８ｍｇ·ｇ－１）、湖北
（１１．５９ｍｇ·ｇ－１）种源的梓树叶片内总酚在６０％甲
醇的提取条件下，效果最好，测定的总酚含量均最
高。因此，以６０％甲醇提取为宜。
用６０％甲醇为提取液，分别对甘肃、湖北种源
梓树叶片内的总酚含量进行超声３０、６０ｍｉｎ和９０
ｍｉｎ的比较，结果显示：９０ｍｉｎ超声提取的甘肃
（１４．９２ｍｇ·ｇ－１）、湖北（１２．３７ｍｇ·ｇ－１）种源效果
最好，获得的总酚含量最高。因此，适宜的超声提取
时间为９０ｍｉｎ。在使用６０％的甲醇为提取液，超声
９０ｍｉｎ条件下，３个料液比（１∶５、１∶１０、１∶２０）结
果表明，１∶１０和１∶２０的比例下提取的效果好，但
是两者差异不显著，从经济的角度选择提取的料液
比为１∶１０。
在６０％甲醇、料液比１∶１０、９０ｍｉｎ超声提取
条件下，甘肃种源梓树的总酚含量（１５．２６ｍｇ·
ｇ－１）显著大于湖北种源（１２．１６ｍｇ·ｇ－１）（图１）。
２．２　６个不同种源梓树叶片的总酚含量研究
辽宁种源的梓树叶片的总酚含量（１５．３８ｍｇ·
ｇ－１）最高，其次是甘肃和河南，而湖南、湖北和贵州
种源较低。在１年生梓树叶片内的总酚含量方面，
北方种源显著高于南方种源（表１）。
２．３　６个不同种源梓树叶片的抗氧化活性研究
辽宁、甘肃、河南、湖北、湖南与贵州６个不同种
源１年生梓树叶片的还原力、羟自由基清除率、ＤＰ－
ＰＨ清除率、ＡＢＴＳ清除率和ＦＲＡＰ铁离子还原能
力测定结果（表１）显示，辽宁 （６８．７７％）和河南
（６７．６３％）种源的梓树叶片还原力较高，其次是甘
４２２ 西北林学院学报 ３０卷　
肃、贵州和湖南，而湖北种源的最低；其羟自由基清
除率以辽宁种源清除率（８４．７０％）最高，其次是河
南、甘肃和湖南，湖北和贵州种源偏低；其ＤＰＰＨ的
清除率以辽宁种源梓树叶片的 ＤＰＰＨ 清除率
（８７．４５％）最高，其次是甘肃、河南、湖南和湖北，而
贵州种源最低。
６个不同种源梓树叶的 ＡＢＴＳ清除率以辽宁
（７５．３０％）和河南（７４．９４％）种源梓树叶片的ＡＢＴＳ
清除率较高，其次是甘肃、贵州和湖南，湖北种源最
低；其ＦＲＡＰ铁离子还原能力：河南（６３．６０％）和甘
肃（６１．２０％）种源较高，其次是辽宁、贵州和湖南，而
湖北种源最低（表１）。
注：Ａ：不同溶剂提取；Ｂ：不同甲醇浓度提取；Ｃ：不同超声时间提取；Ｄ：不同料液比提取；Ｅ：最优条件下，甘肃和湖北种源总酚含量。
图１　甘肃和湖北种源梓树叶片的总酚含量提取条件优化
Ｆｉｇ．１　Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌｉｃ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｃ．ｏｖａｔｅｉｎ　Ｇａｎｓｕ　ａｎｄ　Ｈｕｂｅｉ
表１　６个不同种源梓树叶片的抗氧化活性
Ｔａｂｌｅ　１　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　Ｃ．ｏｖａｔｅ　ｏｆ　ｓｉｘ　ｐｒｏｖｅｎａｎｃｅｓ
不同种源
总酚
／（ｍｇ·ｇ－１）
还原力
／％
羟自由基
清除率／％
ＤＰＰＨ
清除率／％
ＡＢＴＳ
清除率／％
ＦＲＡＰ铁离子
还原能力／％
辽宁 １５．３８±．８７ａ ６８．７７±１．４２ａ ８４．７０±４．８８ａ ８７．４５±１．５０ａ ７５．３０±２．９４ａ ５６．４０±２．２３ｂ
甘肃 １３．９７±０．７５ｂ ６５．８０±０．６６ｃ ７６．３３±２．５６ｃ ８６．８９±０．４５ａｂ　 ６４．１０±４．９７ｂｃ　 ６１．２０±２．４３ａ
河南 １４．３６±０．９３ａｂ　 ６７．６３±１．２４ａｂ　 ８２．２９±２．４８ａｂ　 ８７．０４±０．８１ａｂ　 ７４．９４±２．０１ａ ６３．６０±２．３６ａ
湖北 １２．６２±０．６０ｃ ５５．７０±２．１７ｄ ６９．３４±２．５９ｄ ８５．６９±０．５２ｂｃ　 ５９．４６±１．３２ｃ ４３．８０±２．１０ｃ
湖南 １３．４３±０．１０ｂｃ　 ６１．８０±１．５５ｂ ７７．６７±３．４６　 ８５．９２±０．０８ａｂｃ　 ６６．５４±２．０２ｂ ５６．０３±２．７０ｂ
贵州 １２．７２±０．３１ｃ ６１．７６±０．２３ｃ ７３．１１±２．０５　 ８５．００±０．８３ｃ ６８．１６±２．４８ｂ ５６．４０±０．９２ｂ
　　６个不同种源梓树叶的抗氧化物质活性有差
异，尤其是南北地区种源间差异极其显著。辽宁、甘
肃和河南种源梓树叶片的抗氧化能力较强，而湖南、
湖北和贵州种源较低。基本可分为２类：北方地区
种源的梓树叶片抗氧化能力较强，而南方地区种源
的梓树叶片抗氧化能力较低。
３　结论与讨论
梓树叶片内含有多种生物活性物质，总酚就是
其中的一类。而酚类化合物是植物生长和发育过程
中产生的一种重要的次生代谢产物［１６－１８］，对预防心
脑血管、癌症以及衰老方面发挥着十分重要的作用。
本研究对梓树叶片的总酚提取方法进行优化，结果
显示，６０％甲醇作为提取溶剂，９０ｍｉｎ超声提取，料
液比１∶１０为最优提取条件。利用该最优提取条件
对６个不同种源梓树叶片内的总酚进行提取结果显
示，辽宁、甘肃和河南种源的１年生梓树叶片的总酚
含量高于湖南、湖北和贵州种源的总酚含量。南北
地区６个不同种源１年生梓树叶的抗氧化活性差异
极其显著，与６个不同种源梓树叶片内的总酚含量
呈正相关，这与王丹阳［７］等２种鹿蹄草抗氧化能力
的强弱与其多酚含量呈正相关的结论相一致。辽宁
和甘肃种源的梓树叶片内具有较高的总酚和抗氧化
活性，有潜力培育具有高抗氧化能力的品种。总酚
的合成和分布既受到自身遗传基因的影响［１９－２０］，也
受其生长、发育及其所处生长环境的影响［２１－２３］。我
５２２第６期 陈　龙 等：６个不同种源梓树叶片的总酚含量和抗氧化性能的比较
国北方地区的降水量、气温明显低于南方，同时前者
昼夜温差较大，利于梓树叶片抗氧化物质的富集。
另外，北方地区纬度高于南方地区，也可能是北方生
态类型的抗氧化指标显著高于南方的原因。黑大豆
种质的抗氧化性与其产地的纬度呈显著的相关
性［２４］，与本研究对梓树叶片的抗氧化性分析结果基
本一致。
对梓树优良品系的筛选要将遗传因素和生态环
境因素相结合。造成不同地区梓树抗氧化差异的内
在原因，需要进一步深入研究，尤其是寻找遗传因素
和环境因素等关键因子所造成的基因型差异和抗氧
化物质合成的差异，并通过人工模拟证实所发现的
关键因子确实能够影响梓树的抗氧化性能，为发现、
选育、栽培和生产具有更高抗氧化能力的林木提供
指导。
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櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲櫲
）
（上接第２２６页）
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ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ　ａｎｄ　ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ
ｉｎ　ｂｌａｃｋ　ｓｏｙｂｅａｎ　ａｃｃｅｓｓｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｔｉａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａ　Ｓｉｎｉｃａ，
２００６，３９（８）：１５４５－１５５２．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
８７２ 西北林学院学报 ３０卷