全 文 :仲恺农业技术学院学报 , 13(1):15~ 18 , 2000
Journal of Zhongkai Agrotechnical College
文章编号:1006-0774(2000)01-0015-04
白网纹草的茎段培养和快速繁殖
杨承勇 , 郑迎冬
(仲恺农业技术学院荫生观赏植物研究中心 ,广东 广州 510225)
摘要:以白网纹草茎段为外植体 , 在MS+BA 0.5 mg/ L +NAA 0.1 mg/ L培养基上可产生大量丛生
芽.丛生芽切割后接种到 MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上 , 30 d后增殖系数可达 5.6.
在1/ 4 MS + NAA 0.1mg/ L 培养基上生根效果最好.白网纹草试管苗移栽成活率可达 85%~
90%.
关键词:白网纹草;茎段培养;快速繁殖
中图分类号:S682.39;S603.6 文献标识码:A
白网纹草(Fittonia Verschaffeltii var.Argyroneura)是爵床科多年生草本植物 ,原产秘鲁 ,是
一种珍贵的室内观叶植物.植株矮小 ,叶脉呈白色网纹.具有耐阴湿 、喜温暖的特点 ,极易
养护 ,因而颇受人们的喜爱[ 1].目前国内引进种植数量不多 ,靠传统方法繁殖速度太慢 ,如用
组织培养方法 ,可望在短期内大量繁殖.国内关于白网纹草的组织培养只有零星报道[ 2 ,3] ,
并且研究也不深入.本文对白网纹草的茎段培养进行了比较详细的研究 ,旨在建立快速繁
殖技术 ,为白网纹草优质种苗的大规模生产提供依据.
1 材料与方法
选取健壮的白网纹草 ,除去根和叶片 ,自来水冲净 ,用体积分数为 75%的酒精浸泡 10 s ,
1 g/L升汞消毒10 min ,然后用无菌水冲洗8次 ,切成 1 cm左右的茎段 ,接种于已灭菌的培养
基上.以MS为基本培养基 ,附加不同配比的生长调节剂 ,另添加蔗糖 30 g/L 、琼脂 7 g/L ,调
pH到 5 ~ 8 ,在光照度 1 500 ~ 2 000 lx ,每天照射 10 h ,在(25±2)℃温度条件下培养.
2 结果与分析
2.1 丛生芽的诱导
将消毒后的白网纹草茎段外植体接种于添加不同生长调节剂配比的 3种培养基上.20
d左右 ,部分带茎节的外植体开始从茎节处抽出 2 ~ 4株丛芽;30 d左右 ,不带茎节的外植体
也开始从截段顶部直接长出丛生芽 ,最后也能产生 2 ~ 4株丛芽.45 d后统计未受污染的瓶
收稿日期:2000-02-10
作者简介:杨承勇(1972-),男 ,湖南临澧人 ,助教 ,硕士.
中外植体诱导产生丛生芽的情况 ,结果见表 1.在这 3种培养基中 ,以 MS+6-BA 0.5 mg/L
+NAA 0.1 mg/L培养基诱导丛生芽的效果最好.
表1 不同植物生长调节剂及其浓度对外植体诱导的影响
Table 1 Effects of the kinds and concentrations of plant growth regulators
on the induction of explants
植物生长调节剂/(mg/L)
Plant growth regulators/(mg/ L)
外植体数
Number of explants
丛生芽数
Number of buds
丛生芽数/外植体
Number of buds per explant
6-BA 2.0+NAA 0.2 21 53 2.5
6-BA 0.5+NAA 0.1 21 61 2.9
6-BA 1.0+2 , 4-D 0.5 18 23 1.3
2.2 丛生芽的增殖
将未伸长的丛生芽分株或切为 1 cm 左右的茎段 ,接种于含有不同 BA和 NAA浓度配比
的培养基上.15 d后 ,多数茎节开始有侧芽长出 , 30 d后统计未受污染的瓶中丛生芽的增殖
情况 ,结果见表 2.从表 2可见 ,以 BA 1 mg/L 的系列增殖效果较好 ,同时证明培养基中添加
少量NAA可促进丛芽的增殖.但 NAA用量过高反而会抑制丛芽的增殖.因此 ,在MS +6-
BA 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L的培养基上 ,丛生芽的增殖效果最佳 ,增殖系数为5.6.
表 2 不同浓度 BA 和NAA 对丛生芽增殖的影响
Table 2 Effects of different concentrations of BA and NAA on the multiplication of buds
BA
/(mg/L)
NAA
/(mg/L)
接种数
Inoculated number
总芽数
Total buds
增殖系数
Coefficient of multiplication
0.1 0 12 52 4.3
1.0 0 9 41 4.6
2.0 0 12 54 4.5
0.1 0.1 12 62 5.2
1.0 0.1 12 67 5.6
2.0 0.1 9 44 4.9
0.1 1.0 12 44 3.7
1.0 1.0 12 53 4.4
2.0 1.0 9 38 4.2
2.3 NAA浓度对丛芽生根的影响
将生长到 3 ~ 4 cm 的丛生小芽切割成单株后 ,接种到含有不同浓度 NAA的 MS培养基
上 ,15 d后观察生根情况 ,结果见表 3.试验表明 ,适量添加 NAA ,可促进白网纹草幼苗的生
根;NAA在 0.1 ~ 1.0 mg/L的浓度范围内 ,对生根的促进效果相近 ,以 0.1 mg/L略好;但NAA
用量过高 ,对生根的促进效果反而减弱 ,而且明显抑制根的伸长.
16 仲恺农业技术学院学报 第 13 卷
表 3 不同浓度 NAA对丛芽生根的影响
Table 3 Effects of different concentrations of NAA on root formation of buds
NAA
/(mg/ L)
接种数
Inoculated number
平均根数
Average number of roots
平均根长/ cm
Average length of roots/ cm
0 12 3.7 1.7
0.1 12 5.2 3.1
1.0 12 5.0 3.0
2.0 12 4.1 1.4
2.4 无机盐与糖浓度对生根的影响
将生长到 3 ~ 4 cm 的丛生小芽切割成单株后 ,接种到含有不同浓度MS 和糖的培养基
(均含 0.1 mg/L的 NAA)上 ,15 d后观察生根情况 ,结果见表 4.从表 4中可以看出 ,降低 MS
浓度不利于幼芽的长高 ,但有效地促进了根数的增加和根长的生长;相反 ,降低糖浓度不但
削弱了株高 ,而且使根数减少 ,根的生长明显减弱.综合上述多种因素 ,可以确定最有利于
白网纹草幼芽生根的培养基为 1/4 MS+6-BA 0.1 mg/L+蔗糖 30 g/L.
表 4 不同浓度无机盐和糖对丛芽生根的影响
Table 4 Effects of different concentrations of inorganic salts and sugar on root formation
MS 浓度
Concentration
of MS
糖浓度
Concentration
of sugar/(g/ L)
接种数
Inoculated
number
平均株高
Average
height/ cm
平均根数
Average number
of roots
平均根长
Average length
of roots/ cm
1 30 12 5.4 5.6 3.3
1 20 12 4.8 5.4 2.8
1 10 9 2.9 4.8 2.2
1/2 30 12 4.6 6.4 3.9
1/2 20 9 4.2 5.7 3.5
1/2 10 9 2.2 5.2 3.0
1/4 30 12 4.2 8.5 4.7
1/4 20 12 3.3 7.3 4.3
1/4 10 12 2.0 6.8 3.5
2.5 试管苗的移栽
生根苗移栽前 ,打开瓶盖 ,在室温下炼苗 2 ~ 3 d.移栽时要防止幼苗折断 ,伤根 ,清洗根
部琼脂时尤其要小心.白网纹草对移栽的基质没有特殊要求 ,我们采用灭菌的泥炭土和蛭
石的混和物.但要注意保持湿度和一定程度的通风 ,栽培的环境应保持清洁.在环境较差
的温室中常易遭霉菌侵袭 ,待发现小苗受侵染时 ,常来不及挽救.因此移栽时最好用抗菌素
如青霉素 、红霉素或杀菌农药百菌清 、多菌灵等喷雾保苗.移栽 15 d 后幼苗即可成活 ,成活
率可达85%~ 90%.
3 讨论
植物组织培养的成功 ,除了人为提供适宜的培养基之外 ,所选用的外植体情况如何也极
17 第1 期 杨承勇等:白网纹草的茎段培养和快速繁殖
为重要.为了达到快速繁殖的目的 ,必需选择适宜的外植体.傅婉华等人采用白网纹草茎
尖作为外植体进行初代培养 ,70 d后才诱导分化出大量丛生芽[ 2].由此可见 ,采用茎尖作为
白网纹草快速繁殖的外植体诱导速度较慢 ,不太适宜于生产.我们在研究中分别采用叶片 、
茎段作为外植体进行初代培养 ,发现从叶片诱导丛生芽的效果很差.我们试验了多种含有
不同激素组合的培养基 ,最好的情况发生在 MS+BA 2 mg/L+NAA 2 mg/L+2 ,4-D 1 mg/L
的培养基上 ,70 d后才有少量叶片产生丛生芽 ,诱导率低于 10%.而采用茎段作为外植体 ,
在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L 的培养基上 , 40 d左右即可诱导产生大量的丛生
芽 ,诱导率可达 80%,完全符合快速繁殖的需要.
高水平的细胞分裂素倾向于诱导不定芽的形成 ,也使侧芽增生迅速 ,结果产生大量过于
细密的嫩茎 ,同时嫩茎的质量下降 ,不利于下一步的生根和移栽[ 1].在丛生芽增殖的试验中
观察到 ,丛生芽在MS+6-BA 0.1 mg/L +NAA 0.1 mg/L 的培养基上的增殖系数略少于在
MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的培养基上的增殖系数 ,而且生成的丛生芽要矮小一
些 ,但嫩茎的粗壮度明显要好于后者 ,在以后的生根和移栽过程中表现也比后者要好.因此
在白网纹草快速繁殖的实际生产过程中 ,增殖培养基采用 MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1
mg/L 对最后的生产得率较为有利.但在生产的某一特定阶段 ,如只要求丛生芽连续快速大
量繁殖 ,也可暂时采用MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L这一增殖系数最高的配方.但
要注意 ,在转入生根阶段之前 ,应将其先转入低 BA含量的增殖培养基中进行 1次增殖培养 ,
以提高嫩茎的质量.
参考文献:
[ 1] 谭文澄 ,戴策刚.观赏植物组织培养技术 [ M] .北京:中国林业出版社 , 1991.116~ 120 , 338~ 339.
[ 2] 傅婉华 ,李文安.白网纹草的茎尖培养和快速繁殖 [ J] .植物生理学通讯 , 1988 ,(1):46.
[ 3] 陈志红 ,李华赐 .白网纹草试管苗的诱导 [ J] .植物生理学通讯 , 1987 ,(3):37 ~ 38.
Stem culture and rapid propagation of Fittonia
Verschaffeltii var.Argyroneura
YANG Cheng-yong , ZHENG Ying-dong
(Zhongkai Agrotechnical College , Guangzhou 510225 , China)
Abstract:Tissue culture and rapid propagation with the stem of Fittonia Verschaffeltii var.Argyroneu-
ra were studied.The results showed that lots of cluster shoots were induced in the medium MS+BA 0.
5 mg/L+NAA 0.1 mg/L.30 days after transferred into the medium MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1
mg/L , the cluster shoots multiplied with the coefficient about 5.6.The rooting effects of the seedling
were the best in the medium 1/4MS+NAA 0.1mg/L.The survival rate of the test-tube plantlet was
up to 85 ~ 90 % in the transplanting.
Key words:Fittonia Verschaffeltii var .Argyroneura ;stem;rapid propagation
18 仲恺农业技术学院学报 第 13 卷