全 文 ：第 2 期
收稿日期：2009－09－18
基金项目：滨州学院自然科学重点课题（BZXYLG200701）
作者简介：刘俊华（1980－），男，山东高唐人，讲师，主要从事苔藓植物研究，（电话）0543－3190096（电子信箱）liujh1980＠126．com。
苔藓植物系由水生到陆生的过渡类群，对环境
具有广泛的适应性 ［1］，遍布于世界各地，且种类繁
多，现在已知的约有 24 000 种［2］。 因苔藓植物个体
矮小、构造简单，其生态功能及经济、药用价值常被
人们所忽视。 但近些年来的研究表明，苔藓植物能
产生如萜类、黄酮类、脂肪酸等次生代谢产物及一
些生物活性物质，是潜在的天然活性产物宝库 ［3－8］。
目前，已有多种苔藓植物被证明有抑制微生物活性
的作用 ［3，9］，从苔藓植物中筛选抗菌、防腐、抗癌、防
治心血管疾病、抗凝血和降血脂等药物将具有广阔
的前景［5，8，9］。笔者选取在山东省分布较广、生物量较
大的黄牛毛藓作为试验材料，利用其水提液进行抑
菌作用研究，旨在阐明黄牛毛藓所具有的抑菌或抗
菌效果，以便为药用苔藓植物资源的筛选和利用提
供参考。
1 材料与方法
1．1 试验材料
1．1．1 植物材料 黄牛毛藓 ［Ditrichum pallidum
（Hedw）Hamp．］采自山东蒙山（海拔 850 m 处），为
林下土生或岩面薄土生。
1．1．2 细菌材料 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus
aureus）、 大肠杆菌 （Escherichia coli）、 变形杆菌
（Proteus vulgris），以上菌株均由滨州学院生物学实
验教学中心提供。
1．1．3 培养基及成分 本研究采用牛肉膏蛋白胨
培养基，分为液体和固体两种 ［10］。 液体培养基为牛
肉膏 3．0 g，蛋白胨 10．0 g，NaCl 5．0 g，水 1 000 mL，
pH 自然； 固体培养基为在每升液体培养基中加入
20．0 g 琼脂灭菌固化而成。
黄牛毛藓（Ditrichum pallidum）抑菌效果的生物测定
刘俊华，王书平
（滨州学院生命科学系，山东 滨州 256603）
摘要：为了研究苔藓植物的抑菌效果，以山东省内分布较广泛、生物量较大的黄牛毛藓（Ditrichum pal-
lidum）为试验材料，用分光光度法对黄牛毛藓水浸提液进行抑菌作用的初步研究。 结果显示，黄牛毛藓
对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌均有不同程度的抑制作用，抑制强度表现为大肠杆菌＞金黄色葡
萄球菌＞变形杆菌。 作为我国重要药用苔藓植物的一种，黄牛毛藓的抑菌效果对不同的供试细菌均表现
出一定的抑制作用，在有害生物防治和疾病的治疗方面具有一定的应用价值。
关键词：苔藓植物；抑菌作用；黄牛毛藓；生物活性成分
中图分类号：Q936 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2010）02－0361-02
Bioassay on Bacteriostasis of Bryophyte Ditrichum pallidum
LIU Jun－hua，WANG Shu－ping
（Department of Life Sciences， Binzhou University ，Binzhou 256603，Shandong，China）
Abstract：Studied the antibacterial effect of bryophyte Ditrichum pallidum with its water extract solution，which distributed
widely in Shandong province． The results indicated that Ditrichum pallidum had restrain effects on Staphylococcus aureus，
Escherichia coli and Proteus vulgris to different extents． The antibacterium intensity of Ditrichum pallidum was E． coli ＞ S．
aureus ＞ P． vulgris． The antibacterial effect was related to the variety of tested bacterial． Ditrichum pallidum had certain de-
velopment value in controlling harmful organism and curing disease．
Key words： bryophyte； antibacterium； Ditrichum pallidum； bioactive component
第 49卷第 2期
2010年 2月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 49 No.2
Feb．，2010
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2010.02.020
湖 北 农 业 科 学 2010 年
1．2 试验方法
1．2．1 供试样品提取物的制备 先将采集来的苔
藓样品用自来水冲洗，再用去离子水洗净，放入培
养箱于 50℃恒温条件下烘干，用电动粉碎机将植物
体粉碎。 称取 4．0g 样品粉末，置于具橡胶塞的三角
瓶中，加去离子水至 100mL，在摇床上振荡浸取 12 h，
以 1 500 r/min 离心 10 min，收集上清液，将残渣再
用去离子水重复浸取 2 次， 合并 3 次的浸取液，置
冰箱于 4℃条件下保存，备用。
1．2．2 菌悬液的制备 取上述 3 种供试细菌菌株，
经活化后，用接种环各取菌苔少许接种至牛肉膏蛋
白胨固体培养基斜面上，在 37℃恒温培养箱中活化
20 h。 然后将活化后的菌株接一环于 5 mL 液体培
养基中，在恒温振荡器中 37℃下培养 8 h，即制成菌
悬液。
1．2．3 滤纸片法测定抑菌作用 取直径 7 mm 的灭
菌滤纸片放入浸出液中过夜，将各种待试菌悬液各
取 0．5 mL 与相应的固体培养基制成含菌平板，用
无菌镊子取含浸出液的滤纸片贴在含菌平板上，每
皿贴 5 片，每菌做 5 次重复，置于 37℃恒温培养箱
中培养 24 h 后，取出测定抑菌直径大小，比较抑菌
效果。
1．2．4 分光光度法测定抑菌效果 配制上述液体
培养基，按每管准确量取 5 mL分装于试管，121℃湿
热灭菌 30 min。 准确量取 5 mL 黄牛毛藓水浸出液
加入上述试管中，每支试管接 1种供试细菌。另取 1
支试管不接任何菌作对照。 置于 37℃恒温振荡培养
箱中培养 12 h 后， 在紫外可见分光光度计 650 nm
下比色测定，5 次重复。 另取 4 支加有 5 mL 液体培
养基的试管，各加入 5 mL 的去离子水，其中 3 支试
管分别接入 1 种供试细菌，作为含菌对照，在同样
条件下培养 12 h后，进行比色测定。
1．2．5 统计分析 试验结果中数据为 5 个平行样
的平均值，均采用 Microsoft Excel 2003 进行数据整
理，运用 SPSS 11．5 软件进行数据的统计分析。
2 结果与分析
2．1 滤纸片法测定的抑菌效果
滤纸片法试验表明，黄牛毛藓对 3 种供试细菌
有不同程度的抑制作用，对大肠杆菌、金黄色葡萄
球菌、 变形杆菌的抑菌圈直径分别为 9．48±0．78、
9．22±0．75、9．10±0．69 mm，由此可看出其抑制强度为
大肠杆菌＞金黄色葡萄球菌＞变形杆菌，但未表现出
显著差异性（P＞0．05）。
2．2 分光光度法测定的抑菌效果
黄牛毛藓对大肠杆菌等 3 种菌的抑制效应如
表 1 所示，对大肠杆菌的抑制能力较强，而对金黄
色葡萄球菌较弱， 对变形杆菌的抑制能力为最弱，
与衣艳君 ［10］的研究结果相一致。 总的来讲，黄牛毛
藓水浸提液对大肠杆菌的抑制能力明显高于对其
他两种菌的抑制效应（P＜0．05）。
3 讨论与结论
黄牛毛藓是牛毛藓科（Ditrichaceae）牛毛藓属
（Ditrichum Hampe）植物，是我国药用藓类植物中常
见的一种，习见于阔叶林下砂石质粘土上 ［11］。 该藓
全草入药，味淡、性凉，有镇惊、清热凉血及化瘀生
肌的功效，多用于治疗小儿惊风、咳血、吐血及跌打
损伤等症 ［11］，在我国民间多有使用。 本研究采用的
是将供试苔藓 50℃恒温条件下烘干后粉碎加水振
荡离心后得到水浸提液，与衣艳君等所采用的方法
有所不同， 但最后的抑菌效果表现出较高的一致
性。 无论是滤纸片法还是分光光度法，试验结果都
表明黄牛毛藓具有一定的抑菌作用，抑菌能力大小
与供试菌种有关。 为能够有效地对黄牛毛藓进行合
理开发和应用，仍需要广大科技工作者就苔藓植物
化学等领域开展更加深入的研究。
参考文献：
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物的研究［J］．中国野生植物资源，2005，24（6）：14－17．
表 1 黄牛毛藓水浸液对细菌的抑制作用
细菌
大肠杆菌
金黄色葡萄球菌
变形杆菌
含菌对照
0.322
0.288
0.130
抑菌效果
0.168
0.179
0.089
抑菌率//%
47.83*
37.85
31.54
注：*表示测定数据间差异显著（P＜0.05）。
OD650
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