全 文 ：2010年 3月
第 24卷　第 1期
阴 山 学 刊YINSHANACADEMICJOURNAL Mar.2010Vo1.24　 No.1
柄扁桃果肉中抑制物质活性的研究＊
安瑞 丽 ,方海 涛
(包头师范学院 生物科学与技术学院 ,内蒙古 包头 014030)
　　摘　要:本文通过对柄扁桃的果肉中存在的抑制物研究 , 以探讨柄扁桃种子休眠的原因。作者通过提取
柄扁桃果肉粗提物 ,然后用其粗提物培育小麦 ,测定小麦的发芽率和发芽指数 , 过氧化物酶的活性 , 小麦叶片
中叶绿素含量 ,以测定柄扁桃果肉提取物的活性。研究结果表明:柄扁桃的果肉含有一定的活性的抑制物。
关键词:柄扁桃;抑制物;果肉
中图分类号:Q949.751.8　文献标识码:A　文章编号:1004-1869(2010)01-0045-02
　　柄扁桃(PrunuspedunculataPall)属于蔷薇科(Rosace-
ae)李属(Prunus)落叶灌木 ,其种仁可代 “郁李仁”入药 , 有润
燥滑肠 、利尿等功能 , 并且扁桃油中含有不饱和脂肪酸及 α
-VE等多种药用成份 , 具有软化血管 、促进细胞再生 、提高
人体免疫力和抗癌 、治癌的奇特功效。由于自然因素和人为
的影响 , 柄扁桃的野生资源遭到破坏 , 致使资源濒临灭绝 , 被
列为内蒙古二级濒危保护植物 [ 1] 。至 20世纪以来 , 针对柄
扁桃相继开展的科学研究主要集中在生理学 、生态学 、组织
培养等诸方面 , 为种质保护和资源利用提供了科学依据。柄
扁桃种子成熟后 , 果实脱落进入到柄扁桃群落中 , 果肉对其
种子萌发有何影响 , 本实验对其作用进行研究 , 试图通过对
果肉作用机理的探索 ,找出与种子萌发的关系 , 并有针对性
的提高种子发芽率的可行措施 , 使柄扁桃的种群数量增大 ,
为其合理保护提供科学依据。
1　研究区概况
包头市郊区鹿沟地处包头市区北面 , 地理坐标为东经
109。 22至 111。 07 , 北纬 40。 15 至 41。 29 , 研究区属
典型的大陆性季风气候 ,冬长而寒 , 夏短而燥 ,降雨量少而集
中 , 年际变化大 ,该区域为中温型草原地带。
2　研究方法
2.1　柄扁桃果肉的抑制物粗提物的制取
称量果肉 20g加入研钵中研碎 , 加 10倍量的水置于
56℃条件下浸泡 24h过滤 , 残渣再浸泡提取 2次 , 合并 3次
滤液 , 56℃条件下浓缩成一定体积 , 定容至 100ml。 粗提物
含有试验材料的质量数为 0.2g.ml-1。
2.2　柄扁桃果肉粗提物的抑制活性的生物
测定
取柄扁桃果肉粗提物加入 60ml的培养皿中保持每皿内
的液体总量为 6ml, 不足部分补入蒸馏水 , 用小麦种子进行
生物测定 ,每皿内加入 50粒小麦种子 , 23℃黑暗中培养 24h
测定小麦的发芽率 , 然后不间断的 2h测定一次 , 结束了 , 测
定其幼根及芽的长度 , 而对照组采用蒸馏水培养小麦种子 ,
实验设 3个重复。
2.3　过氧化物酶(POD)的测定
在室温条件下 , 用柄扁桃果肉粗提物培养小麦种子
24h, 取种子用吸水纸吸干 ,称取一半质量种子抽样比例(w/
v)1:10加入预冷的磷酸缓冲液(PBS0.05mol/L, PH=7)提
取 ,冰浴研磨成匀浆 4℃条件下 , 以 5 000 r/min离心 15min,
上清液用于活性的测定 , 3次重复。
2.4　柄扁桃果肉乙醚提取液制备及纸层析
分段生物测定
粗提物用乙醚萃取 , 得到乙醚萃取液和乙醚萃取残余
液 ,再定容至 50ml, 用上行层析法进行层析 , 层析滤纸用标
准规格用毛细管沿层析纸点样 , 每张层析纸点样量相同(做
3次)用纸宽 6cm,长 18cm, 当层析纸到 15 cm时结束层析 ,
凉干滤纸 ,将层析纸按不同 RF值剪成 10段 , 每段 1.5cm,每
段对折后 , 在剪成 3cm两段 , 放入 90cm小培养皿中 , 注入
2ml蒸馏水 , 再将三个并组溶液合在一起。取健壮饱满的小
麦种子 600粒 , 分别放于 20个实验组培养皿中 , 30粒 /皿 ,将
培养皿置于 25℃恒温箱黑暗条件下培养 , 随时加水保持陪
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＊收稿日期:2008-07-20
基金项目:内蒙古自然科学基金项目(200711020513)
作者简介:安瑞丽(1960-), 女 ,内蒙古包头市人 , 助理实验师。研究方向:农学。
DOI :10.13388/j.cnki.ysajs.2010.01.018
样皿内溶液为 6ml,记录不同 RF区段的作用下 , 小麦种子的
发芽率和发芽指数。
2.5　小麦幼苗叶片中叶绿素含量测定
小麦种子在不同浓度的粗提物浸泡下萌发长出幼苗 , 取
新鲜小麦叶片 0.5g放入研钵中 , 加少量石英砂和碳酸钙粉
及 3ml95%乙醇 ,研成均浆 , 再加乙醇 10ml, 继续研磨至组织
变白。静置 5min,过滤到 25ml棕色容量瓶中 , 最后用乙醇定
容至 25ml。在波长 665nm、 649nm下测定吸光度 , 重复 3次。
数据处理:采用 SAS软件和 2003EXCEL软件。
3　结果与分析
3.1　柄扁桃外中果皮粗提物的抑制活性的
生物学测定
用柄扁桃的果肉粗提取液培育小麦 ,粗提液对小麦的根
和芽有明显的抑制作用 , 随着浓度的增大对根的抑制作用增
大 , 而对芽的抑制作用则不同 , 当浓度为 0.15g/ml时 , 对芽
的抑制作用最强 , 0.05-0.15g.ml-1 , 随浓度的增大抑制作
用增大 , 0.15-0.20 g.ml-1随浓度的增大抑制作用减弱。
同一浓度对根和芽的抑制作用不同 ,对根的抑制作用大于对
芽的抑制作用(如图 1)。
图 1:不同浓度柄扁桃果肉粗提物对小麦根和芽的影响
图 2:小麦种子萌发过程中过握拳化物酶(POD)含量变化
3.2　过氧化物酶活性(POD)的测定
小麦种子在果肉粗提物的浸泡下吸胀萌发 , 在萌发过程
中 ,体内的 POD酶含量发生变化 , 在 0.10 g/ml时酶的含量
最高 ,出现一个高峰期(如图 2), 说明了柄扁桃果肉中存在
抑制物。
3.3　柄扁桃果肉乙醚提取液纸层析分段生
物测定结果
柄扁桃果肉的乙醚提取液在 Rf4和 Rf9区对小麦的抑
制活性最大(图 3)。乙醚的外中果皮萃取残余液(图 4)在
Rf4区段的抑制活性最大 , 由此可知 , 柄扁桃果肉中有易于
溶于水和易于溶于乙醚的活性抑制成分 , 易溶于乙醚的活性
成分高于易溶于水的成分。通过对外中果皮乙醚提取液分
段生物测定说明了果肉中含有溶于水和溶于乙醚的抑制物 ,
而溶于乙醚的抑制物活性更大一些。
图 3:柄扁桃果肉乙醚提取液纸层析不同 Rf区段对小麦
种子发芽率的影响
图 4:柄扁桃果肉乙醚提取残余液纸层析不同 Rf区段对
小麦种子发芽率的影响
3.4　小麦叶绿素含量的测定
小麦种子在不同浓度的粗提物浸泡下萌发生长后 , 叶绿
素 a含量和叶绿素 b含量明显减少(p<0.01)(如图 9)。浓
度为 0.15g/ml时 , 对叶绿素的影响最大。结果表明 , 果肉的
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粗提物中 , 存在抑制叶绿素 a, b合成的物质。
图 5:小麦幼苗叶绿素含量测定
4　讨论
吕永兴(1980)对人参种子的研究表明 , 在人参果肉中
含有抑制物脱落酸(ABA),这些物质对发芽有抑制作用 , 致
使胚的生长和分化受阻 ,导致了人参种子发芽的缓慢性。黄
耀阁等(1998)认为果肉中的抑制物是导致西洋参种子在果
实成熟时胚仍不能完全成熟的根本原因 ,当西洋参种子完成
了形态后熟 , 往往还需通过一段时间的层积才能萌发 , 层积
作用很可能就是使抑制物含量或活性水平降低 , 提高生长促
进物与抑制物的比值以完成其生理后熟 。 Takos(2001)的实
验证明月桂果皮的存在能够促进种子的休眠。本研究发现 ,
一定浓度果肉浸提液显著降低了小麦种子的萌发和幼苗叶
绿素的合成 ,表明果肉里含有一定的萌发抑制物。种子休眠
是植物经长期演化所获得的一种对环境变化及季节性变化
的生物学适应性 ,对植物的生存具重要意义。许多温带植物
的种子需经低温处理才能萌发 ,这可避免种子成熟后立即成
为幼苗而在冬季被冻。有些沙漠植物的种子因种皮内含抑
制物而不能萌发 ,在降雨足以湿透土壤并使种皮中的抑制物
淋出时 ,种子开始萌发。柄扁桃属于中旱生植物 , 不存在生
理休眠 ,强迫休眠可能有利于其幼苗避开寒冷的冬季 , 果肉
对种子的强迫休眠起到了促进作用。
〔参考文献〕
[ 1]方海涛 ,李俊兰.蒙古高原特有早春观赏树种柄扁桃的
研究进展 [ J] .北方园艺 , 2008, 4:79-82.
[ 2]吕永兴.人参的萌发生理 [ J] .植物生理学通讯 , 1980, 17
(4):18-22 .
[ 3]黄耀阁 ,李向高等.西洋参果肉乙醚相中发芽抑制物质
的研究 [ J] .作物学报 , 1998, 24(1):92-98
[ 4 ] TakosIA.SeedDormancyin BayLaurel(Laurus
nobilisL.)[ J] .NewForest, 2001, 21:105-114.
GerminationInhibitorsinOutside-middleMesocarp
ofRareandEndangeredPrunusPedunculata
ANRui-li, FANGHai-tao
(FacultyofBiologicalScienceandTechnology, BaotouTeachersColege, Baotou014030)
Abstract:Theauthorsstudyonwaterextractofprunuspedunculataoutside-middlemesocarpinordertotest
infectionofseedgermination.CultivatingthewheatinthewaterextractsoftheOutsidemesocarp, wenotonlyhave
determinedgerminationpercentageandGIofthewheat, butalsohavedeterminedtheactivityofPOD.Theresults
showthattheOutsidemesocarpcontainesomeendogenousinhibitoractivity.
Keywords:Prunuspedunculata;inhibitor;pulp
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