全 文 ：收稿日期：２０１５－０７－１０
作者简介：苏恒海（１９８５－），男，主管药师，硕士研究生，主要从事
医院临床药学研究。
＊广西自然科学基金项目（２０１２ＧＸＮＳＦＡＡ０５３１４７），广西中药质
量标准研究重点实验室开放课题基金项目（桂中重开２０１１０５）和
广西“百人计划”项目（Ｊ１３１６８）资助。
＊＊通讯作者：周　静（１９７５－），女，博士，主要从事药理学研究，
Ｅ－ｍａｉｌ：ｇａｒｄｅｎｉａ＿ｚｈｏｕ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ。
广西科学Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　２０１５，２２（６）：６４６～６５０
网络优先数字出版时间：２０１６－０１－０６
网络优先数字出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／４５．１２０６．Ｇ３．２０１６０１０６．１０１０．０２０．ｈｔｍｌ
翠云草总生物碱对小鼠Ｓ１８０实体瘤的抑制作用＊
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｔｏｔａｌ　Ａｌｋａｌｏｉｄ　ｏｆ　Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ　ｕｎｃｉ－
ｎａｔａ（Ｄｅｓｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ　ｏｎ　Ｓ１８０Ｓｏｌｉｄ　Ｔｕｍｏｒ　ｉｎ　Ｍｉｃｅ
苏恒海１，２，孙会静１，２，李　丽１，周　静１＊＊
ＳＵ　Ｈｅｎｇ－ｈａｉ　１，２，ＳＵＮ　Ｈｕｉ－ｊｉｎｇ１，２，ＬＩ　Ｌｉ　１，ＺＨＯＵ　Ｊｉｎｇ１
（１．广西中医药大学，广西南宁　５３０２２２；２．广西壮族自治区人民医院，广西南宁　５３００２１）
（１．Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｘｉ，５３０２２２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｔｈｅ　Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｚｈｕａｎｇ　Ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ　Ｒｅｇｉｏｎ，Ｎａｎｎｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｘｉ，５３００２１，Ｃｈｉｎａ）
摘要：【目的】研究翠云草Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ　ｕｎｃｉｎａｔａ（Ｄｅｓｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ总生物碱（ＴＡＳ）对小鼠腋下Ｓ１８０实体瘤的抑制
作用及抗肿瘤机制。【方法】分析空白对照组、５－ＦＵ阳性药对照组、ＴＡＳ大和中剂量（３００ｍｇ·ｋｇ－１、１５０ｍｇ·
ｋｇ－１）组Ｓ１８０实体瘤重抑制率、ＮＦ?κＢ及ＣＯＸ－２的表达量，并观察各组切片。【结果】ＴＡＳ对Ｓ１８０实体瘤具有
抑制作用。ＴＡＳ大、中剂量（３００ｍｇ·ｋｇ－１、１５０ｍｇ·ｋｇ－１）组的瘤重、ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ－２的表达量均显著低于空
白对照组 （Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。 【结论】ＴＡＳ能明显抑制Ｓ１８０实体瘤的生长，其抗肿瘤机制可能是通过抑
制ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ－２的表达，继而抑制向肿瘤输送养份和氧气的血管的生长，从而实现抗肿瘤作用。
关键词：翠云草　总生物碱　抗肿瘤　作用机制
中图分类号：Ｒ２８５．５　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００５－９１６４（２０１５）０６－０６４６－０５
Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｏｆ　Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ　ｕｎｃｉｎａｔａ（Ｄｅｓｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ（ＴＡＳ）ｗａｓ　ｅｘ－
ｔｒａｃｔｅｄ，ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｉｔｓ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　Ｓ１８０ｓｏｌｉｄ　ｔｕｍｏｒ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
ｗｅｒｅ　ｓｔｕｄｉｅｄ．【Ｍｅｔｈｏｄｓ】Ｔｈｅ　ｗｅｉｇｈｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ａｇａｉｎｓｔ　Ｓ１８０ｓｏｌｉｄ　ｔｕｍｏｒ，ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ
ＮＦ?κＢ　ａｎｄ　ＣＯＸ－２ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，５－ＦＵ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ
ＴＡＳ　ｌａｒｇｅ　ａｎｄ　ｍｉｄｄｌｅ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐｓ（３００ｍｇ·ｋｇ－１　ａｎｄ　１５０ｍｇ·ｋｇ－１　ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ），ｃｏｍｂｉｎｅｄ
ｗｉｔｈ　ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｅｃｔｉｏｎｓ　ｆｒｏｍ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ．【Ｒｅｓｕｌｔｓ】Ａｌ　ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｗｅｉｇｈ　ａｎｄ　ｔｈｅ
ＮＦ?κＢ／ＣＯＸ－２ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＴＡＳ　ｈｉｇｈ－ａｎｄ　ｍｉｄ－ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐｓ（３００ｍｇ·ｋｇ－１　ａｎｄ　１５０
ｍｇ·ｋｇ－１）ｗｅｒｅ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｙ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ ＜０．０５ｏｒ　Ｐ ＜０．０１）．
【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ】ＴＡＳ　ｃａｎ　ｃｕｒｂ　ｏｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓ　ｔｕｍｏｒ　ｇｒｏｗｔｈ．Ｉｔｓ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｉｓ　ｐｒｏｂａｂｌｙ　ｔｏ
ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＮＦ?κＢ／ＣＯＸ－２，ｔｈｅｒｅｂｙ　ｔｏ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｌｏｏｄ　ｖｅｓｓｅｌ　ａ－
ｒｏｕｎｄ　ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ，ｂｙ　ｗｈｉｃｈ　ｔｕｍｏｒ　ｇｒｏｗｔｈ　ｉｓ　ｃｕｒｂｅｄ　ｏｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ　ｕｎｃｉｎａｔａ（Ｄｅｓｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ，ｔｏｔａｌ　ａｌｋａｌｏｉｄ，ａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒ，ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
０　引言
　 　 【研 究 意 义】翠 云 草 Ｓｅｌａｇｉｎｅｌｌａ　ｕｎｃｉｎａｔａ
（Ｄｅｓｖ．）Ｓｐｒｉｎｇ为卷柏科植物翠云草的全草，于秋季
采收，去尽泥土后以鲜品或晒干入药。翠云草味微
淡、苦，性寒，具有清热解毒，利湿通络，止血生肌，化
痰止咳功效，内服用于治疗黄疸型肝炎、痢疾、高热惊
厥、胆囊炎、肾炎、肠炎、吐血、便血、风湿性关节炎；外
６４６ Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．２２Ｎｏ．６，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ　２０１５
DOI:10.13656/j.cnki.gxkx.20160106.010
用可治荨麻疹、乳痈、外伤出血及烫伤火伤［１，２］。【前
人研究进展】翠云草是最主要的卷柏科植物中药材之
一，但目前与翠云草相关的研究报道很少，仅涉及化
学成分研究［３］、有效成分提取方法与工艺技术研
究［４］、药理学研究［５］、生药学鉴定研究［６］、栽培技术和
盆景应用研究［７］等。【本研究切入点】生物碱是人类
最早从植物中提取的药用成分之一，也是卷柏科植物
的重要化学成分和重要药理活性成分［８］。对翠云草
中生物碱类化学物质的提取、分离、纯化及药理学研
究尚未见有文献报道。【拟解决的关键问题】从翠云
草中提取总生物碱，并开展抗肿瘤活性及其作用机制
研究。
１　材料与方法
１．１　材料
１．１．１　药物及试剂
　　翠云草总生物碱（ＴＡＳ）：自制；５－氟尿嘧啶（５－
ＦＵ）：上海旭东海普药业有限公司，规格：１０ｍＬ：
０．２５ｇ，批号：２０１３０３１９；小鼠 ＮＦ?κＢ的ＥＬＩＳＡ检测
试剂 盒：上 海 童 耀 生 物 科 技 有 限 公 司，批 号：
２０１３０８１４，由９６孔ＥＬＩＳＡ板、ＮＦ?κＢ标准品溶液（１８
ｎｇ／Ｌ）、标准品和试样的稀释液、生物素抗体、生物素
稀释液、生物素抗体结合物、生物素抗体结合物稀释
液、洗涤液、沉淀剂、终止液、封板膜等组成；小鼠环氧
化酶－２（ＣＯＸ－２）的ＥＬＩＳＡ检测试剂盒：上海研谨生
物科技有限公司，批号：２０１３０５２７，由９６孔 ＥＬＩＳＡ
板、ＣＯＸ－２标准品溶液（１８０Ｕ／Ｌ）、标准品稀释液、酶
标试剂、试样稀释液、显色剂Ａ液、显色剂Ｂ液、终止
液、浓缩洗涤液、封板膜等组成。
１．１．２　实验动物及细胞株
　　昆明种小鼠（ＫＭ），５～６周龄，雄性，体重１７～
２１ｇ，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，许可
证：ＳＣＸＫ （湘 ）２０１４ －０００４，质 量 合 格 证：
ＨＮＡＳＬＫＪ２０１４２３５７，动物室温度（２５±２）℃，相对湿
度（６０±２）％，可自由摄食和饮水；Ｓ１８０肉瘤细胞株，
广西壮族自治区人民医院实验中心提供。
１．１．３　仪器
　　十万分之一天平克电子天平：瑞士梅特勒 －托利
多，型 号：ＸＳ１０５ＤＵ；石 蜡 包 埋 机：徕 卡，型 号：
ＥＧ１１５０Ｈ＋Ｃ；全自动石蜡切片机：赛默飞世尔，型
号：ＨＭ３５５Ｓ。
１．２　方法
１．２．１　翠云草总生物碱（ＴＡＳ）的制备
　　翠云草于２０１３年１０月采自于广西上林县拥军
村大明山脚下，经广西中医药研究院赖茂祥研究员鉴
定为卷柏科植物翠云草的全草，采后立即晒干。将干
翠云草切碎，置ＳＳ３１６不锈钢渗漉筒中，加２．５％盐
酸水没过药面，室温浸泡过液后漉出，收集相当于药
材１２倍量的漉出液；漉出液过滤，滤液流过７３２阳离
子交换树脂（Ｈ＋型），水洗柱后用３％氢氧化钠水溶
液洗脱，收集洗脱液，调ｐＨ值为９．０，减压浓缩至相
当于生药重量的１／４（Ｖ／Ｗ）；浓缩液用２倍量９５％
乙醇作醇沉处理，静置７２ｈ后滤取上清液，减压回收
溶剂至稀膏；续用４倍量９５％乙醇作醇沉处理，静置
７２ｈ后滤取上清液，减压回收溶剂至稀膏，减压干燥
（温度不高于６０℃），得翠云草总生物碱，得率１．８３％
（每克干膏相当于５４．６４ｇ药材干品）。
１．２．２　荷瘤小鼠的制备［９］
　　取Ｓ１８０细胞，计数，用纯净水稀释成每毫升中含
细胞约为５×１０６个的细胞悬液。吸取０．２ｍＬ细胞
悬液接种于４０只 ＫＭ 小鼠左腋皮下，成为荷瘤小
鼠。将荷瘤小鼠随机分为４组，每组１０只，即空白对
照 组 （纯 净 水）、５ －ＦＵ 阳 性 药 对 照 组 （２５
ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）、ＴＡＳ 大、 中 剂 量 组 （３００
ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１、１５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）。所有荷瘤
小鼠在接种Ｓ１８０细胞２４ｈ后，ｉ．ｇ给药，１次·ｄ－１，
给药容积为０．２ｍＬ／１０ｇ体重，空白对照组给予等体
积纯净水，连续１４ｄ。末次给药１２ｈ后，将小鼠脱颈
处死，剥取瘤体，称重 （Ｗ），瘤重抑制率为 Ｒ ＝
（Ｗ 空白组均值 －Ｗ 药物组均值）／Ｗ 空白组均值 ×１００％。
１．２．３　ＣＯＸ－２表达量的测定
　　供试样品的制备：剥离的实体瘤称重后，逐一编
号，加入适量ＰＢＳ（ｐＨ值为７．４），用液氮迅速冷冻保
存备用（解冻后仍需在２～８℃下保存）。取出所需编
号的实体瘤，吸干体表液体，观察后切下所需部位肿
瘤组织，精密稳定，匀浆，３５００ｒ／ｍｉｎ离心２０ｍｉｎ，收
集上清，即为肿瘤组织液（供试样品）。供试样品在投
入检测时再做适当稀释。
　　ＣＯＸ－２标准曲线的绘制：酶标板上设标准品孔
１２孔，在第１，２孔中各加初始浓度为１８０Ｕ／Ｌ的标
准品原液１００μＬ，然后加标准品稀释液５０μＬ，混匀；
接着从第１，２孔中各取１００μＬ分别加到第３，４孔，
再在第３，４孔中分别加标准品稀释液５０μＬ，混匀；
然后第３，４孔中各取５０μＬ弃掉，再各取５０μＬ分别
加到第５，６孔中；依此类推，直至第９，１０孔；第１１，
１２孔中各加入浓度为０Ｕ／Ｌ（空白孔）的标准品５０
μＬ。稀释后各孔的样品量都是５０μＬ，最后形成浓度
系列为１２０Ｕ／Ｌ、８０Ｕ／Ｌ、４０Ｕ／Ｌ、２０Ｕ／Ｌ、１０Ｕ／Ｌ，
０Ｕ／Ｌ，每个浓度占２孔。测定ＯＤ 值后，以ＣＯＸ－２
表达量为横坐标（Ｘ），以ＯＤ值为纵坐标（Ｙ），绘制标
７４６广西科学　２０１５年１２月　第２２卷第６期
准曲线（Ｙ＝１２６．１８６２　Ｘ＋３．８４５７，Ｒ＝０．９９４）。
　　ＣＯＸ－２表达量的测定：用ＣＯＸ－２含测ＥＬＩＳＡ
试剂盒完成。每孔先加样品稀释液４０μＬ，然后加供
试样品液１０μＬ；用封板膜封板后置３７℃温育３０
ｍｉｎ；揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，
静置３０ｓ后弃去，如此重复５次，拍干；每孔加入酶
标试剂５０μＬ（标准品孔同样加，空白孔除外）；用封
板膜封板后置３７℃温育３０ｍｉｎ；揭掉封板膜，弃去液
体，甩干，每孔加满洗涤液，静置３０ｓ后弃去，如此重
复５次，拍干；每孔先加入显色剂Ａ　５０μＬ，再加入显
色剂Ｂ　５０μＬ，轻轻震荡混匀，３７℃避光显色１５ｍｉｎ；
每孔加终止液５０μＬ，终止反应；以空白调零，４５０ｎｍ
波长下测定各孔的吸光度 （ＯＤ 值），根据标准曲线
计算ＣＯＸ－２的表达量。最后结合稀释倍数，计算出
肿瘤组织液中ＣＯＸ－２的表达量。每一个实体瘤平行
做４复孔，取平均值。
１．２．４　ＮＦ?κＢ表达量的测定
　　供试样品的制备方法同１．２．３节。
　　ＮＦ?κＢ标准曲线的绘制：方法类似ＣＯＸ－２标准
曲线的绘制，最后形成的浓度系列为１２ｎｇ／Ｌ、６ｎｇ／
Ｌ、３ｎｇ／Ｌ、１．５ｎｇ／Ｌ、０．７５ｎｇ／Ｌ，０ｎｇ／Ｌ（空白孔），
每个浓度占２孔。测定ＯＤ 值后，以 ＮＦ?κＢ表达量
为横坐标（Ｘ），以ＯＤ值为纵坐标（Ｙ），绘制标准曲线
（Ｙ＝１３．３９８１　Ｘ＋０．１５２８，Ｒ＝０．９９１）。
　　ＮＦ?κＢ表达量的测定：用ＮＦ?κＢ含测ＥＬＩＳＡ试
剂盒完成。在各孔中加入标准品溶液或试样溶液各
１００μＬ，３７℃孵育９０ｍｉｎ；加入１００μＬ生物素化抗
体工作液，３７℃孵育６０ｍｉｎ；洗涤３次，加入１００μＬ
酶结合物工作液，３７℃孵育３０ｍｉｎ；洗涤５次，加入
９０μＬ底物溶液，３７℃孵育１５ｍｉｎ左右；加入５０μＬ
终止液后，立即在４５０ｎｍ波长处测量ＯＤ 值，根据
标准曲线计算 ＮＦ?κＢ表达量。最后结合稀释倍数，
计算出肿瘤组织液中ＮＦ?κＢ的表达量。每一个实体
瘤平行做４复孔，取平均值。
１．２．５　切片检查［１０］
　　剥离的实体瘤，用甲醛浸泡固定，经石蜡包埋切
片。切片依次经过二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ梯度脱蜡，１００％、
９５％、９０％、８０％、７０％梯度乙醇液中各５ｍｉｎ，蒸馏
水中水化３ｍｉｎ，苏木精中染色约３０ｍｉｎ，自来水冲
洗约１５ｍｉｎ，１％的盐酸乙醇液（盐酸１份＋７０％乙
醇１００份）中褪色约３０ｓ见红，颜色较浅即可，自来
水中使其恢复蓝色，蒸馏水中漂洗１次，５０％、７０％、
８０％乙醇中各５ｍｉｎ脱水，０．５％伊红乙醇液对比染
色５ｍｉｎ，９５％乙醇中洗去多余的红色，无水乙醇中５
ｍｉｎ，用吸水纸吸去多余的乙醇，二甲苯 －乙醇等量混
合液、纯二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各约５ｍｉｎ，最后中性树胶封
片，ＨＥ染色后于４００×高倍镜下观察并拍照。
１．２．６　数据处理
　　数据以珚ｘ±ｓ表示，应用ＳＰＳＳ１９．０统计软件进
行单因素方差分析，如Ｐ＜０．０５则认为有统计学显
著性差异。
２　结果与分析
２．１　对Ｓ１８０实体瘤生长的影响
　　由表１可知，与空白对照组比较，５－ＦＵ阳性药对
照组和ＴＡＳ大剂量组（３００ｍｇ·ｋｇ－１）的实体瘤重
量明显偏小（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），虽然中剂量组
（１５０ｍｇ·ｋｇ－１）也有偏小的趋势，但未显示出统计
学显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明ＴＡＳ对Ｓ１８０
肉瘤肿瘤有抑制作用。
表１　对小鼠体内实体瘤的抑制作用（珔ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓ１８０ｃｅｌｓ　ｉｎ　ｖｉｖｏ（珔ｘ±ｓ，ｎ＝
１０）
组别
Ｇｒｏｕｐ
日剂量
Ｄａｉｌｙ　ｄｏｓｅ
（ｍｇ·ｋｇ－１）
实体瘤重量
Ｗｅｉｇｈｔ　ｏｆ
ｓｏｌｉｄ　ｔｕｍｏｒ（ｇ）
瘤重抑制率
Ｔｕｍｏｒ　ｗｅｉｇｈｔ
ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
ｒａｔｅ（％）
空白对照组
Ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ ２．２３９±０．４６１ －
５－ＦＵ阳性药对照组
５－ＦＵ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｄｒｕｇ
ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ
２５　 １．５８４±０．３８０＊＊ ２９．２７
ＴＡＳ中剂量组
ＴＡＳ　ｍｉｄｄｌｅ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ １５０　 １．９３８±０．５４１　 １３．４２
ＴＡＳ大剂量组
ＴＡＳ　ｌａｒｇｅ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ ３００　 １．６８６±０．４７６
＊ ２４．６８
注：经组间ｔ检验，与空白对照组比较，＊ 在Ｐ＜０．０５水平上显著，
＊＊ 在Ｐ＜０．０１水平上显著。
Ｎｏｔｅ：＊ａｎｄ＊＊ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ａｔ　Ｐ＜０．０５ａｎｄ　Ｐ＜
０．０１ｌｅｖｅｌ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（ｔ－ｔｅｓｔ）．
２．２　ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ?２表达量测定
　　ＮＦ?κＢ是一种多功能的细胞核转录因子，可通
过控制多种细胞因子的表达和生存基因的转录，达到
控制细胞生长、生存的作用；ＮＦ?κＢ在肿瘤细胞的生
存、发展、扩张等各个阶段都发挥重要作用［１１］，因此
ＮＦ?κＢ是一个抗肿瘤的重要靶点。ＣＯＸ－２是与ＮＦ－
κＢ信号通路相关的酶，在正常细胞中表达极低，甚至
不表达，但在缺氧状态下肿瘤细胞可促成血管高度表
达ＣＯＸ－２；ＣＯＸ－２的启动因子中有能与ＮＦ?κＢ特异
结合的基因系列，两者结合可调高ＣＯＸ－２的表达水
平［１２］。也就是说，ＮＦ?κＢ 表达增加，可通过调高
ＣＯＸ－２的表达来达到促进肿瘤血管生长，向肿瘤增
加供应养份和氧气，促进肿瘤的发展。因此ＣＯＸ－２
也是一个抗肿瘤的重要靶点。由表２显示，与空白对
照组比较，５－ＦＵ阳性药对照组没有表现出统计学显
８４６ Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．２２Ｎｏ．６，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ　２０１５
著性差异（Ｐ＞０．０５），ＴＡＳ大、中剂量组（３００ｍｇ·
ｋｇ－１，１５０ｍｇ·ｋｇ－１）的ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ－２表达量明
显偏低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），说明ＴＡＳ能很好
地抑制ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ－２表达，也就是说，ＴＡＳ可能
是通过抑制ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ－２的表达，最终抑制向肿
瘤输送养份和氧气的血管的生长，从而实现抗肿瘤的
作用。
表２　 对小鼠Ｓ１８０实体瘤组织液ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ?２表达的影
响（珔ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
Ｔａｂｌｅ　２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＮＦ?κＢ　ａｎｄ　ＣＯＸ?２　ｉｎ　ｖｉｖｏ
（珔ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
Ｇｒｏｕｐ
日剂量
Ｄａｉｌｙ　ｄｏｓｅ
（ｍｇ·ｋｇ－１）
ＮＦ?κＢ
（ｎｇ·Ｌ－１）
ＣＯＸ－２
（Ｕ·Ｌ－１）
空白对照组
Ｂｌａｎｋ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ ６．３６±１．７６　 ２９７．２２±５７．２４
５－ＦＵ阳性药对照组
５－ＦＵ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｄｒｕｇ
ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ
２５　 ５．８４±１．６１　 ２８９．３７±６０．０９
ＴＡＳ中剂量组
ＴＡＳ　ｍｉｄｄｌｅ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ １５０　 ４．３５±０．９８
＊＊ ２０３．１６±５１．７３＊＊
ＴＡＳ大剂量组
ＴＡＳ　ｌａｒｇｅ　ｄｏｓｅ　ｇｒｏｕｐ ３００　 ３．７８±１．５３
＊＊ １８２．４３±５０．４３＊＊
注：经组间ｔ检验，与空白对照组比较，＊＊ 在Ｐ＜０．０１水平上显著。
Ｎｏｔｅ：＊＊ｉｎｄｉｃａｔｅｓ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ａｔ　Ｐ＜０．０１ｌｅｖｅｌ　ｃｏｍｐａｒｅｄ
ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（ｔ－ｔｅｓｔ）．
２．３　切片检查
　　由切片可见，空白对照组的肿瘤细胞体积大，形
状不规则，胞浆增多，分布不均匀，胞核体积增大，数
量增多，形态畸形，核分裂相明显，其内容物溢出，炎
症反应明显，细胞大小相差悬殊，细胞彼此染色深浅
不一，细胞间彼此重叠，界限不清。
　　５－ＦＵ阳性药对照组和ＴＡＳ大剂量（３００ｍｇ·
ｋｇ－１）组的肿瘤细胞体积减小，胞核固缩，核染色质
变深，大核分裂相明显少于空白对照组，瘤床内散在
瘤坏死灶，瘤细胞部分消失，细胞膜破裂，内容物溢
出，炎症反应较明显，退化坏死的癌细胞周围可见细
胞碎片。
　　切片检查结果表明ＴＡＳ能明显抑制Ｓ１８０实体
瘤的生长，这与瘤重抑制率、ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ－２的表达
量结果相互印证。
３　结论
　　ＴＡＳ能明显抑制Ｓ１８０实体瘤的生长，其抗肿瘤
机制可能是通过抑制ＮＦ?κＢ和ＣＯＸ－２的表达，继而
抑制向肿瘤输送养份和氧气的血管的生长，从而实现
抗肿瘤作用。
参考文献：
［１］　谢宗万．全国中草药汇编［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，
１９７５：２０６．
Ｘｉｅ　Ｚ　Ｗ．Ｔｈｅ　Ｃｏｍｐｉｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｈｅｒｂａｌ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ
Ｈｏｕｓｅ，１９７５：２０６．
［２］　国家中医药管理局．中华本草［Ｍ］．上海：上海科学技术
出版社，１９９９：１３２．
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９４６广西科学　２０１５年１２月　第２２卷第６期
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（责任编辑：竺利波）
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《广西科学》致谢２０１４－２０１５年审稿专家
　　《广西科学》在主办单位，以及主编、编委和审稿专家的大力支持下，圆满完成了２０１５年１～６期的编辑和
出版工作。专家们在百忙中承担繁重的审稿任务，他们严谨治学的态度以及无私的奉献精神保证了《广西科
学》的学术质量。同时，编辑和投稿作者也有幸得到了审稿专家的帮助。《广西科学》编辑部在此谨向以下审稿
专家致以诚挚的敬意和谢意！并祝各位在新的一年里身体健康，万事如意！
丁兰平 丁向东 王　萌 王　勤 王　瑁 王一兵 王为东 王志萍 王青艳
王彦昌 王祥红 邓雁如 韦　宵 韦宇拓 韦志杨 冯春华 农旭华 刘小玲
刘长春 刘布鸣 刘幽燕 刘洪波 刘雄民 朱　坤 朱志斌 江　涛 祁　超
许晓东 严红革 何　斌 何铁光 何斌源 吴仁海 吴烈善 吴琴瑟 吴群英
宋金明 张乔民 张鸿雁 李东飞 李秉正 李谊纯 李陶深 李瑞杰 杨　勇
杨兵初 杨章旗 沈爱国 苏　琴 陆光涛 陆登俊 陈　波 侍茂崇 周本杰
庞　浩 易湘茜 武　波 郑媛媛 郑德凤 姜　岷 胡小波 赵进创 赵慧敏
郝林华 唐　立 唐赛春 徐尚进 莫　宁 莫竹承 贾洪飞 高劲松 高晓清
高程海 梁　和 梁世楚 阎　冰 黄日明 黄寿先 黄国强 黄庶识 温远光
童　茵 童张法 蒋承建 窦衍光 蒙健宗 赖茂祥 鲍献文 廖咏梅 管卫兵
裴道武 谭伟福 樊治平 滕建文 潘为高 潘红平 黎广钊 黎晓峰
　　注：专家名单按姓氏笔画顺序排序，截止到２０１５年１１月３０日。
《广西科学》编辑部　
２０１５年１２月３０日　
０５６ Ｇｕａｎｇｘｉ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．２２Ｎｏ．６，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ　２０１５
DOI:10.13656/j.cnki.gxkx.2015.06.004