全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2012，27(2)∶128 ～ 131
基金项目:产学研联合创新资金—前瞻性联合研究项目:天然产物抗抑郁症创新药物的探索性研究(项目编号:BY2010103)
作者简介:石金城(1953—) ，男，硕士，研究员，从事天然产物的新药研发。Email:sunxinghua2008918@ 126． com
遍地金不同提取物的抗抑郁作用
石金城1，孙兴华2，刘 媛1，夏 超1，林本青2，樊 明2，张桂森3，张惠云4
(1．南京工业大学 江苏省药物研究所有限公司，江苏 南京 210009;2．南京工业大学，江苏 南京 210009;3．江苏恩华药业股份
有限公司，江苏 徐州 221002;4．山东中医药大学实验动物中心，山东 济南 250355)
摘要:目的 筛选遍地金提取物的抗抑郁活性组分，并初步了解各活性组分的抗抑郁作用机制。方法 将遍地金提取物分
为 3 个不同的组分，应用 6 种抗抑郁药理模型筛选抗抑郁活性组分。结果 提取物中所有组分的中、小剂量均可显著增加大
鼠成功逃避次数，大剂量均可显著减少小鼠的游泳不动时间;水、正丁醇提取组分各个剂量均可显著减少小鼠的悬尾不动时
间。但 5 － HTP致小鼠甩头行为实验中，各组分无显著性差异;利血平及阿朴吗啡引起的体温降低试验中，各组分也无显著性
差异。结论 遍地金的水、正丁醇提取组分均有较好的抗抑郁作用，水提取组分的效果最佳，正丁醇提取组分次之。
关键词:遍地金;抗抑郁;药效学筛选
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2012)02 － 0128 － 04
Study on antidepressant activity of different extracts from Hypericum wightianum
SHI Jin － cheng1，SUN Xing － hua2，LIU Yuan1，XIA Chao1，LIN Ben － qing2，FAN Ming2，ZHANG Gui － sen3，
ZHANG Hui － yun4
(1． Nanjing University of Technology，Jiangsu Provincial Institute of Materia Medica，Nanjing，Jiangsu，210009 P． R． China;2． Nanjing
University of Technology，Nanjing，Jiangsu，210009 P． R． China;3． Jiangsu Nhwa Pharmaceutical Group Co．，Ltd．，Xuzhou，Jiangsu，
221002 P． R． China;4． Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan，Shandong，250355 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To screen the antidepressant extracts of Hypericum wightianum and preliminarily investigate its mechanism
of antidepressant．METHODS Extracts of Hypericum wightianum was divided into three different fractions，whose activity was evalua-
ted by six antidepressant pharmacological models． RESULTS The medium and small dose groups of all extracts could significantly
increase the escapable times of mice． The big dose group of all extracts could significantly shorten the immobility time of mice in swim-
ming test． Each dose group of water and n － butanol extracts could shorten the immobility time of mice in the tail suspension test． While
the test of the head twitches of mice induced by 5 － HTP showed no significant difference among all fractions，and the test of the decli-
ning body temperature induced by Reserpine and Emetomorphine in mice also shows no significant difference among all extracts． CON-
CLUSION Water and n － butanol extracts of Hypericum wightianum have shown remarkable antidepressant activity，with water
extracts better than n － butanol extracts．
Key words:Hypericum wightianum;Antidepressant;Pharmacological effect test
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2012)02 － 0128 － 04
近年来，抑郁症的患病率呈逐年上升趋势。化
学合成的抗抑郁药物费用昂贵，且不良反应大，因
此，从植物药中寻找毒性低、疗效高的抗抑郁新药已
成为国内外研究的热点［1］。遍地金 Hypericum
wightianum是藤黄科金丝桃属植物，主要成分为苯
并二蒽类、黄酮及间苯三酚类等［2 － 3］。金丝桃属植
物贯叶连翘的提取物在欧美诸国临床上已广泛用于
治疗抑郁症。现对遍地金不同溶剂提取的组分进行
了抗抑郁的药效学筛选。
1 实验部分
1． 1 仪器、试药与动物
大鼠穿梭箱(自制，有两个室，各室规格为
30 cm ×20 cm ×30 cm，中间有 7 cm ×7 cm的通路，
箱底用不锈钢栅条，条间有 1 cm 的距离，两室栅条
可各自通电，一室与刺激器连通时，另一室安全)。
利血平注射液(天津金耀氨基酸有限公司，每支
1 mg·mL －1，批号:1005121) ;盐酸氟西汀胶囊(南京
白敬宇制药有限责任公司，批号:080905，每粒 25
mg) ;阿朴吗啡(美国 Sigma) ;遍地金购自云南鹤兴，
经中国药科大学的刘惠娟副教授鉴定为遍地金
Hypericum wightianum。♂Wistar大鼠(体重 200 ± 20
g)、昆明种小鼠(体重 20 ± 2 g，♀♂兼用) ［山东中
医药大学实验动物中心，许可证号为:SCXK(鲁)
20050015］。
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.02.005
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 遍地金的提取 将遍地金干燥药材粉碎，用
6 倍量的石油醚(30 ～ 60 ℃)回流 2 h，过滤，除去药
材中的油脂、蜡和树脂。药材中继续加 6 倍量的乙
酸乙酯回流提取(2 h × 2) ，过滤;药材中再继续加 6
倍量的正丁醇回流提取(2 h × 2) ，过滤;药材中继续
加 6 倍量的水回流提取(2 h × 2) ，过滤。取乙酸乙
酯、正丁醇及水提取液，分别减压浓缩，回收溶剂，得
水提取组分、正丁醇提取组分、乙酸乙酯提取组分。
1． 2． 2 对获得性无助大鼠抑郁症模型的影响 取
88 只 Wistar大鼠，随机均分为模型组、氟西汀组及
水、正丁醇、乙酸乙酯提取组分(分别设高、中、低剂
量)组，各组小鼠 ig 给药，模型组 ig 等量生理盐水，
给药剂量见表 1。第 1 天，进行不可逃避的电休克，
关闭穿梭箱的中间通路，将大鼠放入箱内，通过底部
的金属栅条接受 0． 8 mA ×15 s的足部电流刺激，每
分钟 1 次，每次 15 s，共刺激 60 次，总刺激时间为 15
min。第 2 天，各组大鼠开始 ig给药，模型组 ig 等量
NS，连续 7 d，进食进水不限。末次给药后 24 h，进
行条件回避试验。将大鼠放入穿梭箱内适应 5 s，然
后进行试验;条件刺激为铃声，非条件刺激为足部电
流刺激(0． 8 mA)。在铃声 3 s 后开始刺激，当大鼠
逃到安全室，即停止铃声和刺激。如未能逃避，则刺
激达 30 s时停止，每分钟 1 次，共进行 30 次，刺激间
隔为 27 s;如果在铃声开始的 3 s内逃到安全室即回
避成功，记录 30 次刺激内成功回避的次数(表 1)。
氟西汀组大鼠成功逃避次数与模型组比较显著增加
(P ＜ 0． 05) ;水提取组分的高、中、低剂量组大鼠成
功逃避次数与模型组比较显著增加，均有显著性差
异(分别为 P ＜ 0． 01、P ＜ 0． 01、P ＜ 0． 05) ;正丁醇提
取组分的中、低剂量组大鼠成功逃避次数与模型组
比较显著增加，均有显著性差异(P ＜ 0． 05) ;乙酸乙
酯提取组分的中、低剂量组大鼠成功逃避次数与模
型组比较显著增加，均有显著性差异(P ＜ 0． 05) ;各
剂量组与氟西汀组比较，差异无显著性;各给药剂量
组间无显著性差异。提示 3 个组分的中、低剂量均
可显著增加大鼠的成功逃避次数，能较好地改善大
鼠学习无助抑郁状态。
1． 2． 3 对小鼠强迫游泳不动时间的影响 取 110
只昆明种小鼠，随机均分为模型组、氟西汀组及水、
正丁醇、乙酸乙酯提取组分(分别设高、中、低剂量)
组，各组小鼠 ig给药，模型组 ig等量生理盐水，给药
剂量见表 2。每天给药 1 次，连续 7 d，末次给药前
禁食不禁水 16 h。末次给药后 1 h，将小鼠放入玻璃
水缸中游泳(水深 10 cm、水温 23 ± 2 ℃) ，适应 2
min后，记录 4 min内游泳累积不动的时间(表 2)。
表 1 遍地金提取组分对大鼠抑郁模型的影响(珔x ± s，n =8)
Table 1 Effects of extracts of Hypericum wightianum on learned
helplessness rat model(珔x ± s，n =8)
Groups Dose /mg·kg －1 成功逃避次数
Model NS 17． 75 ± 3． 66
Fluoxetine 3． 33 22． 67 ± 2． 33＊＊
Water extracts 300 22． 75 ± 2． 87＊＊
150 22． 38 ± 4． 03*
75 23． 25 ± 2． 44＊＊
n － BuOH extracts 300 20． 25 ± 4． 89
150 21． 88 ± 3． 27*
75 21． 88 ± 2． 95*
EtOAc extracts 300 21． 75 ± 5． 95
150 21． 63 ± 2． 45*
75 21． 63 ± 3． 02*
Compared with the model group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
表 2 遍地金提取组分对小鼠强迫游泳和悬尾不动时间的影响
(珔x ± s，n =10)
Table 2 Effects of extracts of Hypericum wightianum on duration
time of immobility of mice in the forced swimming tests
and the tail suspension tests(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /mg·kg －1 游泳不动时间 / s 悬尾不动时间 / s
Model NS 61． 0 ± 19． 4 105． 0 ± 39． 2
Fluoxetine 5 40． 7 ± 20． 1* 74． 3 ± 19． 6*
Water extracts 600 26． 8 ± 20． 9＊＊ 40． 9 ± 30． 0＊＊△
300 30． 4 ± 16． 9＊＊ 61． 2 ± 32． 0*
150 43． 2 ± 46． 3 66． 5 ± 38． 3*
n － BuOH extracts 600 22． 2 ± 19． 8＊＊ 62． 0 ± 45． 3*
300 21． 5 ± 29． 8＊＊ 68． 6 ± 22． 5*
150 66． 2 ± 61． 5 61． 0 ± 42． 7*
EtOAc extracts 600 21． 2 ± 19． 0＊＊ 80． 8 ± 28． 6
300 57． 3 ± 51． 71 90． 6 ± 33． 9
150 34． 1 ± 21． 9＊＊ 78． 4 ± 30． 2
Compared with model group:* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;compared with
fluoxetine group:△P ＜ 0． 01
与模型组比较，水、正丁醇提取组分的高、中剂量组，
乙酸乙酯提取组分的高、中、低剂量组及氟西汀组均
有显著性差异(P ＜ 0. 01，P ＜ 0． 05)。与氟西汀组比
较，各给药组无显著性差异，各给药组各剂量间比较
无显著性差异。提示水、正丁醇提取组分的高、中剂
量组和乙酸乙酯提取组分的高、低剂量组，均可显著
减少小鼠游泳不动的时间，能较好地改善小鼠行为
绝望抑郁状态。
1． 2． 4 对小鼠悬尾不动时间的影响 取 110 只昆
明种小鼠，分组与给药同“1. 2. 3”项方法。于末次
给药后 1 h，将小鼠距尾尖 2 cm 处粘在水平木板上
(距地面高 60 cm) ，两面用板挡住小鼠视线，适应 1
min后，记录 5 min内累积不动的时间(表 2)。与模
型组比较，水、正丁醇提取组分的高、中、低剂量组均
有显著性差异(P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05)。与氟西汀组比
较，水提取组分的高剂量组有显著性差异(P ＜
0. 01) ，各给药组间无显著性差异，各给药组各剂量
921第 2 期 石金城，等。遍地金不同提取物的抗抑郁作用
间比较无显著性差异。提示水、正丁醇提取组分的
各个剂量，均可显著减少小鼠悬尾不动时间，能较好
的改善小鼠行为绝望抑郁状态，且水提取组分的高
剂量的作用优于氟西汀。
1． 2． 5 对利血平致小鼠体温下降的影响 取 110
只昆明种小鼠，分组与给药同“1. 2. 3”项方法。于
末次给药前，用电子体温计测定小鼠肛温作为正常
体温值，测体温后即刻于腹腔注射利血平注射液(5
mg·kg －1) ，注射后 1 h给药，给药 1 h 后再次测定各
组小鼠的肛温，记录给药前后体温的差值(表 3)。3
提取组分各剂量组及氟西汀组与模型组比较，对利
血平所致小鼠体温降低无显著影响。利血平引起体
温降低的主要原因在于干扰了去甲肾上腺素(NA)
的功能，提示各提取组分抗抑郁作用可能与体内去
甲肾上腺素表达无关。
1． 2． 6 对阿朴吗啡致小鼠体温下降的影响 取
110 只昆明种小鼠，分组与给药同“1. 2. 3”项方法。
于末次给药后 30 min 用电子体温计测定各组小鼠
肛温 1 次，给药后 1 h于皮下注射阿朴吗啡(16 mg·
kg －1) ，注射后 30 min 再次测定各组小鼠的肛温 1
次，记录给药前后体温的差值(表 3)。与模型组比
较，氟西汀能显著升高阿扑吗啡所致小鼠的体温降
低(P ＜ 0． 01) ，3 种提取组分各剂量组对体温降低均
无显著影响。与氟西汀组比较，水、正丁醇提取组分
的各剂量及乙酸乙酯提取组分的中剂量有显著性差
异。阿朴吗啡为多巴胺(DA)受体激动药，能直接刺
激突触后的多巴胺受体，提示各提取物抗抑郁作用
可能与体内多巴胺受体的功能无关。
表 3 遍地金提取组分对利血平致抑郁小鼠体温和阿朴吗啡致小鼠体温下降的影响(珔x ± s，n =10)
Table 3 Effects of Reserpine on body temperature and apomorphine － induced decline of body temperature of depression mice by extracts of
Hypericum wightianum(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /mg·kg －1
利血平致小鼠体温 /℃
试验前 试验后 降低值
阿朴吗啡致小鼠体温 /℃
试验前 试验后 降低值
Model NS 36． 76 ± 0． 78 35． 14 ± 1． 68 1． 67 ± 1． 18 37． 1 ± 0． 85 33． 5 ± 0． 66 3． 61 ± 0． 70
Fluoxetine 5 36． 44 ± 0． 43 35． 12 ± 1． 10 2． 33 ± 1． 31 37． 1 ± 0． 73 34． 7 ± 0． 79 2． 44 ± 0． 99*
Water extracts 600 36． 40 ± 0． 75 34． 55 ± 1． 16 2． 66 ± 1． 55 37． 6 ± 0． 80 33． 9 ± 0． 91 3． 73 ± 1． 13△
300 36． 28 ± 0． 604 35． 26 ± 1． 27 1． 47 ± 1． 64 37． 6 ± 0． 84 33． 5 ± 0． 89 4． 07 ± 0． 90△△
150 36． 40 ± 0． 48 34． 28 ± 1． 37 2． 69 ± 1． 31 37． 0 ± 0． 87 33． 6 ± 0． 71 3． 63 ± 0． 91△
n － BuOH extracts 600 36． 06 ± 0． 44 35． 06 ± 0． 97 1． 70 ± 1． 06 37． 3 ± 0． 67 33． 3 ± 0． 88 4． 02 ± 0． 77△△
300 36． 42 ± 0． 39 35． 00 ± 1． 29 2． 07 ± 0． 99 36． 8 ± 0． 59 32． 9 ± 0． 73 3． 93 ± 1． 03△△
150 36． 38 ± 0． 75 35． 51 ± 1． 02 2． 24 ± 1． 57 37． 0 ± 0． 36 33． 6 ± 0． 62 3． 54 ± 0． 86△
EtOAc extracts 600 36． 46 ± 0． 64 34． 70 ± 1． 20 1． 93 ± 1． 37 36． 5 ± 1． 42 33． 3 ± 0． 31 3． 09 ± 0． 95
300 36． 53 ± 0． 87 35． 96 ± 0． 56 1． 84 ± 1． 72 37． 30 ± 0． 76 33． 1 ± 0． 96 4． 26 ± 0． 83△△
150 35． 70 ± 1． 02 34． 60 ± 1． 20 1． 90 ± 1． 23 36． 5 ± 0． 64 33． 5 ± 0． 87 3． 35 ± 1． 28
Compared with model group:* P ＜ 0． 01;compared with fluoxetine group:△P ＜ 0． 05，△△P ＜ 0． 01
1． 2． 7 对 5 － HTP 致小鼠甩头行为的影响［5］ 取
110 只昆明种小鼠，分组与给药同“1. 2. 3”项方法。
末次给药后 30 min，于各组小鼠的尾静脉注射 5 －
HTP(200 mg·kg －1) ，15 min 后观察，记录 5 min 内
小鼠的甩头次数(表 4)。与模型组比较，氟西汀组
对5 － HTP 致小鼠甩头行为有显著增强作用(P ＜
0. 01) ;其余各给药组均无显著影响。氟西汀为 5 －
HT再摄取抑制药，具有 5 － HT受体激活作用，可以
增强5 － HTP所导致的实验动物的行为学改变。各
用药组对该行为无显著性作用，提示各实验药物组
对 5 － HT 受体可能无作用，其抗抑郁作用可能与
5 － HT受体无关。
1． 2． 8 数据处理 试验数据以 珋x ± s 表示，采用
SPSS11. 5 统计软件进行分析，采用 t 检验比较组间
差异的显著性。
2 讨论
文中实验主要采用了获得性无助(大鼠穿梭
表 4 遍地金提取组分对 5 － HTP 致小鼠甩头行为的影响(珔x ± s，
n =10)
Table 4 Effects of extracts of Hypericum wightianum on 5 － HTP
induced head twitches of mice(珔x ± s，n =10)
Groups Dose /mg·kg －1 甩头次数 /次
Model NS 42． 9 ± 44． 0
Fluoxetine 5 96． 5 ± 31． 9*
Water extracts 600 43． 8 ± 30． 1△△
300 49． 0 ± 34． 3△△
150 51． 7 ± 48． 7△
n － BuoH extracts 600 54． 6 ± 34． 9△
300 65． 7 ± 71． 3
150 72． 2 ± 36． 2
EtOAc extracts 600 61． 9 ± 39． 7△
300 51． 7 ± 25． 8△△
150 47． 8 ± 34． 5△△
Compared with model group:* P ＜ 0． 01;compared with fluoxetine
group:△P ＜ 0． 05，△△P ＜ 0． 01
箱逃避实验及小鼠强迫游泳实验)、行为绝望(小鼠
悬尾实验)和药物引发抑郁(利血平与阿朴吗啡拮
抗小鼠体温下降模型)3 种模型对遍地金不同提取
031 华 西 药 学 杂 志 第 27 卷
华西药学杂志
W C J·P S 2012，27(2)∶131 ～ 133
组分抗抑郁作用进行初步筛选，且这些模型是目前
筛选抗抑郁药物最常用的方法［4 － 5］。行为学试验研
究表明:水、正丁醇、乙酸乙酯提取组分的中、低剂量
均可显著增加大鼠成功逃避次数，能较好地改善大
鼠学习无助抑郁状态，且作用优于氟西汀。水、正丁
醇提取组分的高、中剂量及乙酸乙酯提取组分的高、
低剂量，均可显著减少小鼠游泳不动的时间，能较好
地改善小鼠行为绝望抑郁状态，且作用优于氟西汀。
水、正丁醇提取组分的各个剂量，均可显著减少小鼠
的悬尾不动时间，能较好地改善小鼠行为绝望抑郁
状态，且作用优于氟西汀。提示水、正丁醇提取组分
均有较好的抗抑郁作用，且以水提取组分的效果
最佳。
利血平及阿朴吗啡引起体温降低试验显示:提
取组分与模型组比较无显著性差异，提示各提取组
分抗抑郁作用可能与体内去甲肾上腺素表达及多巴
胺受体的功能无关。由于小鼠体温调节能力较弱，因
此，在冬季做体温降低实验，其结果可能会因为受环
境温度的影响较大而不稳定。对 5 － HTP 致小鼠甩
头行为影响的结果提示 3 提取组分抗抑郁的作用机
制可能与 5 － HT 受体激活无关。综上，各提取组分
的抗抑郁作用机制尚不清楚，需要进一步研究探明。
参考文献:
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收稿日期:2011 － 06 － 03
基金项目:青海大学医学院中青年科技项目(项目编号:2009 － ky － 08)
作者简介:扎西东主(1982—) ，男，正攻读藏医药学专业的博士学位。Email:zhadong168@ yahoo． com． cn
莪达夏提取物对人乳腺癌 MCF － 7 细胞增殖的抑制作用
扎西东主1，芦殿香2，何 满3，石三军4，索南卓玛5，俞科贤2
(1．青海大学藏医学院，青海 西宁 810016;2．青海大学医学院，青海 西宁 810016;3．华中科技大学同济医学院附属同济医院
麻醉科，湖北 武汉 430030;4．四川大学华西药学院，四川 成都 610041;5．青海省藏医院，青海 西宁 810007)
摘要:目的 研究藏药莪达夏水提物对体外培养的人乳腺癌细胞 MCF － 7 增殖的影响，并初步探讨其作用机制。方法 采用
MTT 法检测不同浓度的莪达夏水提物处理 MCF － 7 肿瘤细胞 12、24、48 h 后细胞的存活率，光镜下观察 MCF － 7 细胞形态学
的变化，用 Annexin V － FITC /PI 双染色凋亡检测试剂盒和流式细胞术分析水提物对 MCF － 7 细胞凋亡的影响。结果 莪达夏
水提物对 MCF － 7 肿瘤细胞的增殖产生抑制作用，且最高抑制率达 62%，不同浓度的水提物作用细胞后可引起肿瘤细胞出现
胞浆空泡和凋亡小体，低浓度的水提物处理细胞后，肿瘤细胞出现早期凋亡，随着药物浓度的增高，凋亡晚期的坏死细胞增
多。结论 莪达夏水提物可抑制体外培养的 MCF － 7 乳腺癌细胞的增殖，其抑制作用与诱导肿瘤细胞凋亡的机制有关。
关键词:莪达夏水提物;乳腺癌细胞;增殖抑制;凋亡
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2012)02 － 0131 － 03
The proliferative inhibition effects of the aqueous extracts of Oxytropis falcate on MCF － 7
breast cancer cells
ZHAXI Dong － zhu1，LU Dian － xiang2，HE Man3，SHI San － jun4，SUONAN Zhuo － ma5，YU Ke － xian2
(1． Tibetan Medical College，Qinghai University，Xining，Qinghai，810001 P． R． China;2． Medical College，Qinghai University，Xining，
Qinghai，810001 P． R． China;3． Department of Anesthesiology，Tongji Hospital，Huazhong University of Science and Technology，Wuhan，
Hubei，430030 P． R． China;4． West China School of Pharmacy，Sichuan Univesity，Chengdu，Sichuan，610041 P． R． China;5． Tibetan
Medical Hospital of Qinghai，Xining，Qinghai，810007 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To study the proliferative inhibition effects of the aqueous extracts of Tibet medicine Oxytropis falcate
Bunge． on MCF － 7 breast cancer cells．METHODS MTT assay was used to determine the cell viability of MCF － 7 cells treated by a
series of concentrations of aqueous extracts of Oxytropis falcate at 12，24，48 h，respectively． The morphology of MCF － 7 cells was