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黄花补血草醇提物的抗炎作用研究



全 文 :收稿日期:2010-04-13; 修订日期:2010-12-30
基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金
(No. BRF080401)
作者简介:刘 宇(1981 -) ,男(汉族) ,安徽太和人,现任兰州畜牧与兽
药研究所助理研究员,硕士学位,主要从事有机及天然药物化学等研究工
作.
黄花补血草醇提物的抗炎作用研究
刘 宇1,蒲秀英2,张应鹏2,梁剑平1,华兰英1,王学红1,尚若峰1
(1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所,新兽药工程重点开放实验室,甘肃 兰州 730050;
2.兰州理工大学,甘肃 兰州 730050)
摘要:目的 采用不同类型的炎症动物模型评价黄花补血草提取物的抗炎作用。方法 通过二甲苯致小鼠耳肿胀实验、抗
棉球肉芽肿实验观察黄花补血草的抗炎作用。结果 黄花补血草醇提物具有明显的抑制小鼠耳肿胀作用,且对小鼠肉芽
组织增生也有明显的抑制作用。结论 黄花补血草提取物具有明显的抗炎作用。
关键词:黄花补血草; 抗炎作用
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2011. 09. 027
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)09-2116-01
黄花补血草 Limonium aureum (L.)Hill.,又称黄花矶松、金
色补血草、金匙叶草,系蓝雪科补血草属植物,多年生草本,迄今
报道的成分主要是鞣质类和黄酮类成分[1 ~ 3]。花萼可入药,能止
痛、消炎、止血及抗癌等,外用治各种炎症,内服治神经痛、月经
少、耳鸣、奶汁少、牙痛、齿槽脓肿、感冒、发烧、疮疖、痈肿等[4]。
我国黄花补血草植物资源十分丰富,民间应用广泛,但国内外对
这方面的研究报道较少。本实验对黄花补血草进行了抗炎作用
研究,以求对其有一个系统、全面的认识和了解,为深入研究并综
合开发黄花补血草的药用价值和经济价值提供科学的依据。
1 材料与仪器
1. 1 黄花补血草提取物的制备 黄花补血草,2009 - 10 采于甘
肃兰州甲子坪(全草粉碎) ,以体积分数为 95%乙醇回流提取 4
次,提取液合并后减压浓缩除去乙醇,得黄花补血草提取物浸膏。
1. 2 药物与试剂 地塞米松磷酸钠注射液(天津药业焦作有限
公司,批号:08121511) ;95%乙醇、二甲苯、无水甲醇,均为分析
纯;蒸馏水,中国农业科学院新兽药工程重点开放实验室制备。
1. 3 动物 昆明种小鼠,购自兰州大学动物实验中心,体质量 18
~ 22 g,雌雄各半。
1. 4 仪器 R -215 旋转蒸发仪(瑞士步琪有限公司) ;SHB -Ⅲ
循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司) ;石英比色皿
(金坛市正基仪器有限公司) ;U - 2001 紫外分光光度计(日本日
立) ;JA2300N电子分析天平(上海精密仪器公司)。
2 方法
2. 1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验[5] 取健康小鼠 40 只,体质量
18 ~ 22 g,雌雄各半,随机将小鼠分为两个黄花补血草醇提物组
(高剂量组为 2 g /kg、低剂量组为 1 g /kg) ,地塞米松磷酸钠注射
液对照组(0. 04 g /kg)和空白对照组(蒸馏水) ,每日同一时间给
小鼠灌胃 1 次,连续 3 d。于最后一次给药 30 min 后,在每只小
鼠右耳两面涂二甲苯 0. 05 ml 致炎,左耳不涂为正常耳,30 min
后再涂 1 次。1 h后断颈处死小鼠,沿耳廓基线剪下双耳,用直径
为 7 mm小鼠耳廓打孔器冲下右耳及左耳同一部位的圆片,在分
析天平上称重及用游标卡尺量取厚度,计算鼠耳肿胀度及抑制
率。肿胀度(%)=(右耳重量 -左耳重量)/左耳重量 × 100%,
抑制率(%)=(空白组平均肿胀度 -给药组平均肿胀度)/空白
组平均肿胀度 × 100%。
2. 2 小鼠棉球植入肉芽肿实验[6] 取 40 只小鼠,乙醚浅麻醉,
碘伏消毒两侧腋窝,在无菌条件下将灭菌棉球植入两侧腋窝皮
下。手术后随机将小鼠分为两个黄花补血草醇提取物组(高剂
量组为 4 mg /ml、低剂量组为 2 mg /ml) ,阿司匹林 150 mg /kg 组
和空白对照组,每组 5 只小鼠。除空白对照组外(灌胃给予等容
积蒸馏水) ,其余各组小鼠均于手术当天开始灌胃给药,连续 7
d,第 8 天脱颈椎处死小鼠,取出肉芽肿组织,置于烘箱中 90°C干
燥 1 h,称重,计算肉芽组织重量(用带肉芽的棉球重量,减去原
棉球重量,即为肉芽组织重量)及抑制率(%)=[1 -(给药组肉
芽组织干重 /空白组肉芽组织干重) ]× 100%。
2. 3 统计学处理 应用 SPSS10. 0 for Windows 统计分析软件进
行处理,实验数据以 珋x ± s表示,采用 t 检验作组间比较差异显著
性。
3 结果
3. 1 黄花补血草醇提物二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
3. 1. 1 黄花补血草醇提物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀重量的影响
黄花补血草醇提物的两耳重量差(g)与空白对照组比较,下降明
显(P < 0. 01,P < 0. 05) ,差异显著;与地塞米松药物对照组比较,
P > 0. 05,无显著性差异。结果见表 1。
表 1 各组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀重量的影响(珋x ± s)
组别 剂量 /g·kg - 1 鼠左右耳重量差 /g 肿胀度(%)
黄花补血草醇提物(高) 2 0. 0434 ± 0. 01302** 36. 2**
黄花补血草醇提物(低) 1 0. 0616 ± 0. 01135* 55. 4*
地塞米松 0. 04 0. 0521 ± 0. 01833* 54. 6*
空白对照 - 0. 1200 ± 0. 01732 98. 9
与空白对照组比较,* P <0. 05,**P <0. 01;n =10
3. 1. 2 黄花补血草醇提物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀厚度的影响
黄花补血草醇提物的两耳厚度差(mm)与空白对照组比较,下降
明显(P < 0. 05) ,差异显著;黄花补血草醇提物与药物对照组地
塞米松比较,P > 0. 05,无显著性差异 。见表 2。
表 2 各组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀厚度的影响(珋x ± s)
组别 剂量 m /g·kg - 1 鼠左右耳厚度差 m /g 抑制率(%)
黄花补血草醇提物(高) 2 0. 050 0 ± 0. 015 12* 63. 3*
黄花补血草醇提物(低) 1 0. 044 0 ± 0. 018 38* 44. 0*
地塞米松 0. 04 0. 050 0 ± 0. 015 12* 44. 8*
空白对照 0. 082 2 ± 0. 029 06 0
与空白对照组比较,* P <0. 05;n =10
黄花补血草组、地塞米松各组与空白对照组比较,黄花补血
草、地塞米松均能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓的肿胀程度,
且黄花补血草高剂量组作用强于黄花补血草低剂量组。结果提
示黄花补血草醇提物具有明显的抑制小鼠耳肿胀作用。
3. 2 黄花补血草醇提物对小鼠棉球肉芽肿的影响 黄花补血草
醇提物两剂量组、阿司匹林组小鼠棉球肉芽肿的重量均低于空白
对照组,且高剂量组和阿司匹林组与空白对照组相比有统计学意
义(P < 0. 05) ,而低剂量组与空白对照组比较无统计学差异(P >
0. 05)。结果见表 3。
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 9 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL. 22 NO. 9
表 3 黄花补血草醇提物对小鼠棉球肉芽肿重量的影响(珋x ± s)
组别 剂量 棉球肉芽肿重量 m /mg 肿胀抑制率(%)
黄花补血草醇提物(高)4 mg·ml - 1 11. 42 ± 2. 53* 21. 24*
黄花补血草醇提物(低)2mg·ml - 1 13. 77 ± 2. 60 5. 03
阿司匹林 150 mg·kg - 1 11. 96 ± 1. 99* 17. 5*
空白对照 蒸馏水 14. 50 ± 2. 47 -
与空白对照组比较,* P <0. 05;n =20
4 讨论
炎症是机体对各种损害的防御性反应,炎症过程中的细胞组
织损伤对机体也可造成损害,现代医药中抗炎药物的研究非常重
要。黄花补血草多生于我国西北地区的甘肃、青海以及内蒙等地
的沙漠干旱地区。据文献报道,黄花补血草能抗肝脏毒性、抗炎、
抗菌、止血等,外用治各种炎症,内服治神经痛、月经少、耳鸣、奶汁
少、牙痛、齿槽脓肿、感冒、发烧、疮疖、痈肿等。本研究采用多种炎
症模型,首次对黄花补血草醇提物的抗炎作用进行了探讨研究。
实验结果表明,黄花补血草醇提物具有明显的抑制小鼠耳肿
胀作用,且高剂量组对小鼠肉芽组织增生也有明显的抑制作用。
黄花补血草具有多种药理活性,预示其具有广阔的新药开发前
景。鉴于其独特的药理功效,选取甘肃产植物黄花补血草作为研
究对象,对抗炎作用进行了探讨研究,为黄花补血草的更深入研
究提供理论依据,进一步探讨其在药物领域的开发与应用。
参考文献:
[1] Guan Ye,Chengguang Hang. Flavonoids of Limonium aureum[J].
Chemistry of natural compounds ,2006,42(2) :232.
[2] Asen S ,Plimmer J R. 4,6,4 - Trihydroxyaurone and other fla-
vonoids from Limonium[J]. Phytochem,1972,11:2601.
[3] Ross S A ,Myricetin - 3 - methylether - 7 - glucoside from Limonium
sinuatum[J]. J. Nat. Pro,1984,47(5) :862.
[4] 江苏新医学院. 中药大辞典(上册) [M]. 上海:上海人民出版社,
1977:2250.
[5] 徐叔云. 药理实验方法学,第 3 版[M]. 北京:人民卫生出版社,
2002:911.
[6] 李仪奎. 中药药理实验方法学,第 2 版[M]. 上海:上海科学技术
出版社,2006:770.
收稿日期:2010-10-12; 修订日期:2011-03-30
基金项目:国家“十一五”支撑计划子项目(No. 2007BAI27B04) ;
海南省自然科学基金(No. 209002)
作者简介:田 庆(1985-) ,男(汉族) ,山西晋中人,现任海南大学在读硕
士研究生,学士学位,主要从事天然产物化学研究工作.
* 通讯作者简介:陈祎平(1958-) ,男(汉族) ,重庆人,现任海南大学材料
与化工学院教授,硕士研究生导师,学士学位,主要从事天然产物及应用
化学研究工作.
麻疯树叶石油醚提取物成分的气相色谱 -质谱分析
田 庆1,梁振益1,陈祎平1* ,王 军1,邓世明2
(1.海南大学 教育部海南优势资源化工材料应用技术重点实验室 材料与化工学院,海南 海口 570228;
2.海南大学海洋学院,海南 海口 570228)
摘要:目的 研究麻疯树叶中的低极性化学成分。方法 采用溶剂提取法、硅胶柱层析法分离得到石油醚提取物Ⅰ和Ⅱ,
并用气相色谱 -质谱联用对其化学成分进行分离、鉴定及分析。结果 从石油醚提取物Ⅰ中分离鉴定出 11 种成分,占总
提取物的 98. 00%,其主要成分为 9,12,15 -十八碳三烯酸乙酯(41. 49%)、9,12 -十八碳二烯酸乙酯(16. 22%)、十六烷
酸乙酯(14. 05%) ;从石油醚提取物Ⅱ中鉴定出 13 种成分,占总提取物 92. 40%,其主要成分为邻苯二甲酸二辛酯
(21. 63%)、5 -己基 - 2 -环戊酮(10. 66%)、正二十烷醇(10. 23%)。提取物Ⅰ和Ⅱ所鉴定成分中除十六烷酸乙酯外,其
它成分均不同。结论 该研究为麻疯树叶的综合开发利用提供了科学依据。
关键词:麻疯树叶; 提取物; 化学成分; 气相色谱 -质谱联用
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2011. 09. 028
中图分类号:R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)09-2117-02
Analysis of Petroleum Ether Extract from Jatropha curcas Leaves by GC -MS
TIAN Qing1,LIANG Zhen-yi1,CHEN Yi-ping1* ,WANG Jun1,DENG Shi-ming2
(1. Key Laboratory of Ministry of Education for Application Technology of Chemical Materials in Hainan Superior
Resources(Hainan University) ,Material & Chemical Engineering College,Haikou 570228,China;2. Ocean
College,Hainan University,Haikou 570228,China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of the leaves of Jatropha curcas L. in Hainan. Methods The petroleum
ether extract Ⅰand Ⅱ were made from the leaves of Jatropha curcas by solvent extractiom method and silica column chromatogra-
phy,and were isolated and identified by GC - MS method. Results 11 compounds were separated and identified which accounted
for 98. 00% of total extracts from the extract Ⅰ. The main chemical constituents were 9,12,15 - Octadecatrienoic acid,ethyl ester
(41. 49%) ,9 12 - Octadecadienoic acid,ethyl ester(16. 22%) ,Hexadecanoic acid,ethyl ester(14. 05%). 13 compounds were
separated and identified which accounted for 92. 40% of total extracts from the extract Ⅱ. The main chemical constituents were
Dioctyl phthalate(21. 63%) ,5 - Hexyl cyclopentanone(10. 66%) ,1 - Eicosanol(10. 23%). The chemical constituents were dif-
ferent between the extract Ⅰand Ⅱ except Hexadecanoic acid,ethyl ester. Conclusion This study provides scientific foundations
for exploitment and utilization of the leaves of Jatropha curcas.
Key words:Jatropha curcas L; Extract; Chemical components; GC - MS
麻疯树 Jatropha curcas L.属大戟科麻疯树属植物,主要生长于
热带和亚热带地区[1]。我国贵州、云南、四川、广东、海南等地均有
分布,资源丰富。麻疯树是民间常用药物且多用叶[2],因其全株有
毒,含有多种活性成分,包括抗病毒、抗 AIDS、抗肿瘤成分,具有较
高的药用开发价值[3]。近年有关麻疯树活性成分及应用的研究主
要集中于种子及籽油,但麻疯树叶低极性成分的研究鲜见报道[4]。
本文以石油醚为溶剂,采用浸渍法提取,硅胶柱层析法分离得石油
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL. 22 NO. 9 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 9 期