全 文 ：鹅绒藤对小鼠免疫功能的影响和体外抗菌活性的研究
李　阳　佟书娟　周　娅　王　琦　赵建宁　王宁萍　黎雪如
　　目的　研究鹅绒藤对小鼠免疫功能的影响和体外抗菌活性。方法　用鹅绒藤浸膏(AECC)及其正丁醇提取物(BECC)给实
验小鼠灌胃后测定细胞免疫及体液免疫指标。用 K—B 法做了 AECC 的药敏试验。结果　(1)AECC 对小鼠免疫功能无明显影
响 , BECC 在高剂量下(3g/ kg·d-1)能增加耳反应程度指数(P <0.05)和胸腺重量(P <0.05),减少巨噬细胞吞噬率和吞噬指
数(P <0.01)。在低剂量下(1.5g/kg·d-1)只能增加耳反应程度指数(P <0.05);(2)AECC 在各种浓度下无抑菌圈。结论　
BECC 能增强小鼠细胞免疫功能 , AECC 在体外无抗菌活性。
关键词　鹅绒藤;小鼠;免疫测定
A preliminary study of the effects of cynachum chinense on immuno-function in vivo and its antibacterial activity in vitro
Li Yang , Tong Shujuan , Zhou Ya et al　(Dept of Microbiol , Ning xia Med , Coll.)
Objective　The effects of Cynanchum Chinense on immnuo-function in mice and its antibacteral activity were studied.Methods
　The main parameters of cell-mediated immunoresponse and humoral unmunoresponse were tested after AECC(Agueous ex tract of
cynanchum Chinese)and BECC(Butanol extract of cynanchum Chinese)Were given by gastrog avage to experimental mice.The bacte-
ria susceptibility to AECC were tested with K-B(Kirby-Beuer)method.Results The results showed that AECC exhibits no obvious
effects on immuno-function in mice.BECC in high dose(3g/ kg.d-1)can increase the index of auricle reaction grade(P <0.05), the
w eight of thymus(P <0.05)and decrease the rates of phagocy tosis and phagoindex of macrophage(P <0.01).In low do se(1.5g/
kg·d-1)it canonly increase the index o f auricle reaction g rade(P <0.05).There w as no ring o f showing suppressing bacteria at vari-
ous dilutions of AECC.Conclusions　BECC could increase the function o f cellular imunity of mice.》AECC possesses no antibacterial ac-
tivity in vitro
Key words　Cynanchum Chinense;Mice;Immunoassay
　　鹅绒藤(Cynanchum Chinense)是宁夏盛产的中草
药。民间用其茎叶乳法治疗疣 ,用其根祛风解毒 、健
胃止痛〔1〕 。但其作用机制不清楚。鹅绒藤的同属植
物白首鸟(Cynanchum bungei)有增强机体免疫功能 、
抗肿瘤 、抗衰老等作用〔2〕及中枢药理作用〔3〕 。考虑到
同属植物可能会有相同作用 ,即增强机体的免疫功
能 ,为了进一步开发利用鹅绒藤 ,我们初步研究了鹅
绒藤水溶性浸膏(Agueous ext ract of Cynanchum Chi-
nense , AECC)及其正丁醇提取物(Butanol ex tract of
Cynanchum Chinense ,BECC)对小鼠免疫功能的影响
及体外抗菌活性 。
1　材料和方法
1.1　材料
1.1.1　动物:昆明种小鼠 ,我院动物中心提供。雌雄
各半 ,体重 18 ～ 22g 。
1.1.2　药物:鹅绒藤水溶性浸膏(AECC)系鹅绒藤地
上部分用稀醇提取后制成的水溶性浸膏;鹅绒藤正丁
醇提取物(BECC)系鹅绒藤地上部分正丁醇提取物中
水溶性部分 ,为深棕色松散粉末 ,以上药品均由我院
化学教研室提供 。用时蒸馏水或生理盐水配制。
1.1.3　菌种:金黄色葡萄球菌 、乙型溶血性链球菌 、
作者单位:　宁夏医学院微生物教研室　750004
伤寒杆菌 、痢疾杆菌 。
1.2　方法
1.2.1　抗绵羊红细胞(SRBC)抗体效价的测定:将小
鼠随机分成四组 ,包括三组药物试验组和一组空白对
照组 。AECC 组 1g/kg·d-1(约 1/7LD50);BECC 按
3g/kg·d-1(1/5LD50)和 1.5g/kg·d-1(1/10LD50)组 ,
分别给三组试验组小鼠灌胃 ,连续 7天 。对照组用蒸
馏水灌胃 0.5m l(只·d-1)亦连续 7天 。给药第四天给
小鼠腹腔 4%SRBC1ml/只免疫 。停药第二天眼眶取
血 ,分离血清 ,用试管凝集法测小鼠血清中抗 SRBC
抗体的效价 ,求其几何均数(CMT)。
1.2.2　抗体形成细胞的测定(PFC 试验):试验组 、对
照组给药方法同 2.1。停药第二天颈椎脱臼处死小鼠
取脾制成 2×107/ml单胀细胞悬液 ,用抗体形成细胞
溶血分光光度计法测 OD值〔4〕 。
1.2.3　胸腺 、脾脏重量测定:实验组对照组给药方法
同 2.1 ,给药 7天后 ,摘取胸腺 ,脾脏 ,用精密扭力天平
称重。
1.2.4　血清溶菌酶活力的测定:试验组 、对照组给药
方法同 2.1 ,给药 7天后 ,眼眶取血 ,分离血清 ,用琼脂
平板法测定溶菌酶的活力〔5〕 。
1.2.5　细胞免疫功能测定:以迟发型变态反应试验
·76· 宁夏医学杂志 1998年第 20卷第 2期
(DTH)—二硝基苯皮试表示 ,给试验组和对照组小鼠
背部皮下注射 7%二硝基氯苯丙酮溶液 20μl/只致敏 。
致敏后第 6天用 2.1法给药 ,第 12天于右耳抹二硝
基氯苯30μl/只发敏 ,16小时后处死小鼠 ,沿耳廓基线
仔细剪下两耳 ,用精密扭力天平称重。右耳与左耳之
差作为反应程度指数。其大小代表细胞免疫功能的
强弱〔6〕。
1.2.6　腹腔巨噬细胞吞噬试验:试验组 、对照组给药
方法同 2.1。停药后第 2天测定巨噬细胞吞噬鸡红细
胞的吞噬百分率和吞噬指数〔7〕 。
1.2.7　抗菌活性试验:将 BECC 用无菌生理盐水溶
解 ,用 NaOH调至 pH 为 7.2 ,再用无菌生理盐水将其
配成 200mg/ml的溶液 ,递倍稀释成 10个稀释度 ,用
常规纸片法测定对金黄色葡萄球菌 、乙型溶血性链球
菌 、伤寒杆菌 、痢疾杆菌和大肠杆菌的抑菌作用。
2　结果
2.1　AECC对免疫功能的影响:AECC对小鼠抗 SR-
BC 抗体的效价 、抗体形成细胞和血清溶菌酶皆无明
显作用 。结果见表 1。
表 1　AECC 对小鼠免疫功能的影响( x±s)
组别 小鼠数 剂量(g/ kg·d-1)
SRBC抗体
GMT
抗体形成细胞
OD值 小鼠数
血清溶菌酶
(μg/ml)
AECC组 13 1 168.76±1.94 1.0119±0.0283 12 17.5±2.26
对照组 13 232.38±2.07 1.0057±0.0396 15 17.32±1.73
t检验 P >0.05 P >0.05 P >0.05
2.2　BECC 对免疫功能的影响:BECC 在高剂量下 ,
3g/kg·d-1 ,能增加耳反应程度指数(P <0.01)、胸
腺重量(P <0.05)及降低巨噬细胞吞噬率和吞噬指
数(P <0.05),对抗体效价和脾重无显著作用 。低剂
量下 1.5g/kg·d-1只能增加耳反应程度指数(P <0.
05),而对其它指标无明显影响 。结果见表 2。
表 2　BECC 对小鼠免疫功能的影响( x±s)
组别 小鼠数 剂量(g/ k·d-1)
SRBC 抗体
GMT
耳反应程度
指数(mg) 胸腺重(mg) 脾重(mg) 巨噬细胞吞噬率(%) 巨噬细胞吞噬指数
实验 1 组 13 3 6.22±2.15 19.77±14.8＊ 93.36±29.44＊ 174.77±49.30 15.1±7.7＊＊ 0.33±0.13＊＊
实验 2 组 13 1.5 71.27±2.88 18.9±11.11＊ 87±25.86 176.13±77.99 26.57±9.47 0.65±0.29
实验 3 组 12 - 104.47±1.42 8.96±6.12 70.27±24.27 173.08±50.26 31.6±15.5 0.90±0.40
　　t检验与对照组比较:＊P <0.05;＊＊ P <0.01
2.3　BECC 抑菌作用:BECC 对金黄色葡萄球菌 、乙
型溶血性链球菌 、痢疾杆菌 、伤寒杆菌和大肠杆菌皆
无抑制作用。结果见表 3。
表 3　BECC 的抑菌圈直径(mm)
　　　　　　　　　　　　药物浓度　　　　　　　　　　　　
菌名 200 100 50 25 12.5 6.25 3.125 1.56 0.78 0.39
金色葡萄球菌　　 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Z型溶血性链球菌 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
伤寒杆菌　　　　 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
痢疾杆菌　　　　 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
3　讨论
文献报道同属植物中药白首乌对正常及免疫受
抑制的动物有明显的免疫增强作用 ,既可增强体液免
疫又可增强细胞免疫功能 。白何首乌水可溶浸膏和
白何首乌提取的粗 C21甾体酯甙可使小鼠 PFC 、血球
凝集效价和皮肤 DTH 反应增强〔8〕 。白首乌 C21甾体
酯甙还可使免疫受抑小鼠 PFC 、血清中抗 SRBC 抗体
效价和皮肤 DTH 反应增加 、恢复和增加胸腺重量〔9〕 。
而本实验 BECC 高剂量能增加耳反应程度指数和胸
腺重量与其结果相一致 ,即亦能增强细胞免疫功能 ,
但对体液功能无明显影响 ,不使小鼠血清 SRBC 抗体
明显增加 ,这一点又不同于白何首鸟。这表明鹅绒藤
与白何首鸟同为一属植物 ,但在免疫功能方面有相同
点 ,亦有不同点 。至于鹅绒藤通过何种途径使细胞免
疫功能提高 ,高剂量下降低吞噬功能 ,降低巨噬细胞
吞噬率和吞噬指数 ,而低剂量下又不影响其事故噬功
能等机理有待于进一步研究。
4　参考文献
1　邢世瑞主编.宁夏中药志(下卷).银川:宁夏人民出版社 , 1991:
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9　顾立刚 ,等.白何首乌 C21甾脂甙对小鼠免疫受抑小鼠的调整
作用.中药通报 , 1986 , 11(11):50
(收稿:1997—07—23)　责编:杨自革
·77·宁夏医学杂志 1998年第 20卷第 2期