全 文 ：0 0 2 5年 s月第 1 2卷第 8期 中国中医药信息杂志
富硒长叶胡颓子果抗炎和免疫作用的实验研究
肖本见 , 李玉 山 , 谭志鑫
(湖北民族学院医学院 , 湖北 恩施 44 50 00 )
摘要 : 目的 :深讨富硒长叶胡颓子果实的抗炎和免疫作用 。 方法 抗炎实验采用二甲苯引起小鼠的炎性水肿
和角又菜胶引起大鼠足肿胀的方法 ; 免疫实验采用对小鼠体 内碳粒廓清功能的影响和对 2 , 4一二稍基氛苯小 鼠迟
发型超敏反应影响的方法 。 结果 富硒长叶胡颓子果实水煎液及醇提液能明显抑制小鼠耳肿胀 ; 醇提液对大 鼠足
肿胀有明显的抑制作用 ; 水煎液能增强小鼠单核 巨噬细胞的吞噬功能 ,对小鼠迟发型超敏反应有明显的抑制作用 。
结论 富硒长叶胡颓子果实有明显的抗炎和免疫调节作用 。
关键词 : 富硒长叶胡颓子 ; 抗炎作用 ; 免疫功 能 ; 实验研究
中图分类号 : ]又2 85 .5 文献标识码 : A 文章编号 : 10 5一 53 04 (20 05 )0 8 一0 02 3 一02
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胡颓子属 ( El ae a g nu s) 植物在全球约有 80 余种 , 中国植 下简称水煎液 。 富硒长叶胡颓子成熟果实醇提液 : 取胡颓
物志记载有 51 种匡 , 果实富含多糖 、 多酚类 、 鞍质 、 有机酸 、 子果实粗粉 , 乙醇回流提取 3 次 , 除去乙醇后制成 1 9 / mL 的
微量元素及维生素类等物质 , 并含有丰富的生物类黄酮 (维生 醇提取液 , 以下简称醇提液 。 水煎液和醇提液均由本院中药
素 )P , 可以增强大脑 的功能 , 具有抗癌和治癌作用 21[ 。 长时一 制剂实验室制备 。 阿司匹林为南京第二制药厂产品 ; 角叉菜
胡颓子 〔3 〕( E z a e a g n u S b o e 卜1 1 D i e 1 S ) 是其中一种 , 其成熟果 胶 (C a r r a s e e n a n )为 S i g m a 产品 : 醋酸泼尼松 (P r e d n i s o n e
实味酸 、 涩 ,含靴质 , 有涩肠止泻作用 , 可健脾胃 , 治疗脾胃虚 A c et at e) 为仙居制药公司产品 。 二甲苯为北京化学试剂厂产
弱 、 消化不良等 。 生长在湖北恩施富硒 (恩施是我国的高硒 品 ; 2 , 4一二硝基氯苯 (DNCB) 为上海试剂一厂产品 ; 印度墨汁
区 )深山从林中的长叶胡颓子 , 资源极为丰富 , 其成熟果实采 (Lnd i an )为北京西中化学试剂厂产品 ; 碳酸钠 (Na ZC0 3 ) 为成
用 HG一AAs 法检测 , 含硒量为 1 . 45 户g / g , 有很大的药用开发 都化学试剂厂产品 。
价值 。 目前未发现有关富硒长叶胡颓子果实抗炎和免疫作用 1. 3 仪器
的文献报道 , 为此 , 我们采集了富硒长叶胡颓子成熟果实进行 TG3 28A 型电子分析天平 ; 足容积测定器 (本院自装 ) : 721
抗炎和免疫作用的实验研究 。 紫外分光光度计 ; RE一 2S 型旋转蒸发器 ; 多功能提取器 ; TDL一 5
1 实验材料 型低速台式离心机 。
1
.
1 动物 2 方法与结果
sD 大鼠 30 只 , 体重 ( 13D . 0士 21 . 0) 9 ; 昆明种小鼠 13 0 2 . 1 水煎液和醉提液对二甲苯所致小 鼠耳廓肿胀的影响
只 , 体重 (20 . 0士 2 . 1) 9 , 雌雄兼用 , 华中科技大学同济医学院 昆明种小鼠 50 只 , 随机分为 5 组 。 给药组分别腹腔注射
提供 。 水煎液 5 0 、 1 00 m L/ k g及醇提液 1 00 m L / gk ; 阳性药组腹腔
1
.
2 药物及试剂 注射阿司匹林 0 . 2 9 /铭 ; 对照组 ig 等量生理盐水 。 连续给
富硒长叶胡颓子成熟果实由我院中草药标本中心提 药 3 d 。 末次给药 l h 后 , 以 50 林L 二甲苯涂于小鼠右耳廓
供 。 富硒长叶胡颓子成熟果实水煎液 : 取长叶胡颓子成熟 两面致炎 , 左耳廓作为对照 , 4 h 后 , 剪下两耳 , 用直径 6 m
果实 , 用水煎煮 3 次 , 滤过 , 浓缩成 1 9 / m L 的溶液 , 即得 , 以 打孔器取耳片 , 称重 , 以两耳重量差表示炎症反应的强度 , 依
C hi ns e e Ja o u r nl o fI fi fa o r m ti o no nTC M Au g
.
20 0 5 Vo l
.
1 N 2o
.
8
下式计算抑制率闭 。 结果见表 l。
抑制率 (%卜 〔 l一 (给药组两耳片重量差 /空 白组两耳片重量差 )〕 x10 0 %
2
.
2醉提液对大鼠角叉菜胶引起足肿胀的影响 [] 5
将健康大鼠 30只随机分成 3组 。 用足容积测量器测量
大鼠右后肢跺关节以下容积 。 加 给药后 30 mi n, 将 瑞角叉
菜胶溶液 0 . 1 m L 注入右后肢脚掌皮下 , 记录致炎前后不同时
间右后肢躁关节以下容积 。 结果见表 2 。
肿胀率 (%) 二致炎前后足踌容积之差 /致炎前的足踌容积 x 10%0
抑制率%( ) 二空白组与给药组平均肿胀率之差 /空白组平均肿胀率 X 10以
表 2 醇提液对大鼠角叉菜胶引起足肿胀的影响 (班 s, n 二 10 )
表 1 水煎液和醇提液对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
(班 s , n 二 10 )
组别 耳片重量 (m
g )
左耳 右耳 两耳重量差 (m
g ) 抑制率 帆)
生理盐水组
水煎液组 (小)
水煎液组 (大 )
醇提液组
阳性药组
6
.
7 2士 0 . 4 3
6
.
5 7士 0 . 2 4
6
.
5 1士 0 . 3 8
6
.
57士 0 . 4 3
6
.
56士 0 . 4 0
9
.
0 4土 0 . 58
8
.
6 4士 0 . 3 1
8
.
3 3士 0 . 4 8
8
.
6 8土0 . 够
7
.
3 1土 0 . 4 5
2
.
3 2士 0 , 15
2
.
0 7土 0 . 0 8* *
1
.
8 2士 0 . 10* .
2
.
11士 0 . 14 .
0
.
7 5士 0 . 0 5帕
11
.
2
2 1
.
9
9
.
4
67
.
8
注 : 与生理盐水组比较 , * 尸 < 0 . 05 , * 尸0< . 01 (下同)
致炎后容积〔毗 )组别 剂量 (m L / k g ) 致炎前容积 ( m L)
醇提液组 (大)
醇提液组 (小)
生理盐水组
1
.
0 5士 0 . 18
1
.
10士 0 . 16
1
.
1 2士 0 . 18
1
.
32士 0 . 2 3帕
1
.
62士 0 . 2 3审南
2
.
08士0 . 3 3
1
.
3 9土 0 . 2 4林
1
.
8 6土 0 . 2 6 .
2
.
2 9士 0 . 3 6
2
.
2 4士0 . 38 * .
2
.
6 4士 0 . 38 *
3
.
0 9土 0 . 49
2
.
5 4士 0 . 4 3* *
3
.
0 8士 0 , 4 4
3
.
5 4士 0 . 5 6
2
.
3 水煎液对小鼠体 内碳粒廓清功能的影响
昆明种小鼠 40 只 , 随机分成 4 组 。 给药组腹腔注射水煎
液 50 、 10 0 、 2 0 毗 / k g ; 对照组腹腔注射等体积的生理盐水 。
连续 7 d , 末次给药后 l h , 各鼠尾静脉注射印度墨水 10 mL /k g,
分别在 1、 5 im n 时在小鼠眼静脉丛处用尖嘴吸管 (预先用肝
素湿润 )吸取血液 20 卜L , 溶于 2 mL 0 . %1 aN Z0C 3 溶液中 , 在
72 1 分光光度计上于 650 n m 处测定吸光度 (A值 ) 。 采血后立
刻放血处死动物 , 摘取肝 、 脾脏 , 称其湿重 , 按公式计算廓清
指数 K 及校正指数 a 闭 。 结果见表 3 。
廓清指数 K二 ( l o g A I一 l o g AZ) / ( t Z一 t , )
吞噬指数 a :[ 体重 (/ 肝重+脾重 )」x K `月
表 3 水煎液对小鼠体内碳粒廓清功能的影响 (冠 s, 刀 = 10 )
组别 K值 a 值 肝重 /体重 脾重 /体重
生理盐水组 0 . 0 4 63士 0 0 0 86 6 . 3 3士 0 . 3 2 5 3 . 3 9土 3 . 6 7 3 . 6 7士 0 . 7 2
水煎液组 (小 ) 0 . 0 3 9 7士 0 0 0 69 5 . 9 7土 0 . 5 9 5 3 . 17士 5 . 0 4 4 . 55士 0 . 58*
水煎液组 (中 ) 0 . 0 3 68士 0 . 0 0 73* 5 . 39士 0 . 5 8林 59 . 30士 4 . 6 0右 2 . 8 9士 0 · 36 .
塑巡到已二燮结垦9些些二兰兰些兰竺进生理竺址二几兰
2
. 呜 水煎液对 2 , 4一二硝基氛苯所致小鼠迟发型超敏反应的
影响
昆明种小鼠 40 只 , 随机分成 4 组 , 给药方法同前 。 实验
日各鼠颈背部 。 c %7 DNcB 的丙酮溶液 20 林L 致敏 , 连续给
药 10 d 后 , 以同一溶液 5D “ L 涂于右耳廓两面进行攻击 , 左
耳廓作为对照 , 24 h 后 , 剪下两耳 , 用直径 6 二 打孔器取耳
片 , 称重 , 其差值作为迟发型超敏反应的强度 。
表 4 水煎液对 2 4一二硝基氧苯所致小鼠迟发型超敏反应
的影响 (肚 s, 刀 二 10 )
3 讨论
采用两种炎症模型研究富硒长叶胡颓子成熟果水煎液及
醇提液的抗炎作用 。 实验结果表明 , 其成熟果实水煎液及醇
提液对二甲苯所致小鼠耳廓炎症和角叉菜胶引起大鼠足肿胀
有明显的抑制作用 ,水煎液的作用高于醇提液 , 这可能与其中
所含有的抗炎成分不同有关。
单核巨噬系统是机体的重要防御系统 , 当颗粒状异物静
注入血液后 , 迅速为单核巨噬细胞所清除 ,其主要为定居在肝
和脾脏的巨噬细胞所吞噬 。 富硒长叶胡颓子成熟果实水煎液
能使小鼠碳粒廓清速率明显降低 , 能抑制单核巨噬细胞的吞
噬功能 , 有一定的免疫抑制作用 。
2
,
4一二硝基氯苯是一种半抗原 , 能与小鼠机体蛋白结合
成完全抗原 , 由此刺激 T 淋巴细胞增殖成致敏淋巴细胞 。 当
再次接触抗原时 , 就会出现迟发型超敏反应 。 富硒长叶胡颓
子成熟果实水煎液在一定剂量下 , 均能明显抑制 2 , 4一二硝基
氯苯引起的小鼠迟发型超敏反应 。 这可能与抑制了 T 淋巴细
胞增殖成致敏淋巴细胞有关 。
实验结果表明 , 富硒长叶胡颓子成熟果实水煎液及醇提
液有明显的抗炎和免疫抑制作用 , 其抗炎成分可能是有机酸
中咖啡酸的衍生物 , 调节免疫作用的成分可能与其果中含丰
富的生物类黄酮及含硒成分有关 。
参考文献 :
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组别 剂量 肿胀度 (m g ) 抑制率 (%)
生理盐水组
水煎液组 (小 )
水煎液组 (大 )
醋酸泼尼松组
5 0 mL / kg
10 0 功 L / k g
2 0 功 g / k g
16
.
4 8士 1 . 0 9
1 1
.
6 4士 0 . 68 * *
11
.
3 8士 0 . 74 * .
1 3 8 7士 0 . 88 * *
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29
.
4
30
.
9
社 , l卯 2 . 9 3 4 , 94 5
(收稿 日期 : 2 004一 1 1一 01 )
1 5
,
8