免费文献传递   相关文献

鹅绒藤三种单体化合物体外抗肿瘤活性的研究



全 文 :· ·
宁夏医科大学学报 第 卷 期
年 月
文章编号 一 一 一
·论著 ·
鹅绒藤三种单体化合物体外抗肿瘤活性的研究
李 洋 , , 王 琦 ,
宁夏医科大学 ,银川 宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系 ,银川 只
摘要 目的 对从鹅绒藤地上部分提取分离得到的单体化合物正三十八烷 一 、山奈酚 一 一 一
一鼠李糖昔 一 和 一 一 一 一鼠李毗喃糖基 一山奈酚一 一 一 一 一鼠李糖昔 一 进行
体外抗肿瘤活性的筛选 。方法 鹅绒藤的乙酸乙醋萃取部分分离提取的黄酮昔类 一 、烷烃类 一
和正丁醇萃取部分分离提取的黄酮昔类 一 三种单体化合物 ,分别作用于人宫颈癌细胞 、小鼠淋巴
瘤细胞 一 和人胃癌细胞 一 等细胞株 , 、 、 和 后用 一 法观察其对肿瘤细胞增殖
的影响 。结果 一 作用 细胞 和 时 ,各剂量组的 值有差异 ,在 、 、 时对 一 细
胞增殖有促进作用 ,在 时有抑制作用 尸 一 和 一 在 、 和 卜 · 一浓度下处
理 和 一 细胞 、 和 后 ,其 值均低于对照组 尸 ,且浓度越高 值越低 。
在各浓度下处理 一 细胞 、 、 和 后 ,其 值均明显低于对照组 , 一 各浓
度仅在 对 一 细胞有抑制作用 尸 。结论 鹅绒藤黄酮昔类提取物 一 和 一 具
有抑制肿瘤细胞生长的作用 。
关键词 鹅绒藤 抗肿瘤活性 单体化合物 一 法
中图分类号 文献标识码
鹅绒藤 为萝摩科鹅绒
藤属 植物 ,异名牛皮
消 ,分布于宁夏各地 ,其性寒味苦 。研究表明鹅绒
藤主含的街体皂贰和生物碱为其祛风解毒 、健胃
止痛及外用治疗寻常性疵赘的主要成分 ,此外还
含有多种蛋白质 、氨基酸 、糖及糖昔等 川 。文献
报道鹅绒藤 白色乳 汁可治 甲癣 〔」和耳乳 突状
瘤 〕,其总生物碱对某些体外培养的肿瘤细胞有
明显的抑制作用 。本文对鹅绒藤分离提取的
三种单体化合物进行体外抗肿瘤活性测试 ,以进
一步研究鹅绒藤的抗肿瘤药理作用 。
材料和方法
实验细胞株 人宫颈癌细胞 、小鼠淋
巴瘤细胞 一 、人 胃癌细胞 一 ,均由
宁夏医科大学基础医学院实验室提供 。
药物 从鹅绒藤地上部位分离提取得到确
定结构的三种单体化合物 正三十八烷 一
, 一 ,白色蜡状物 山奈酚 一
收稿 日期 一 一
基金项目 宁夏 自然科学基金
作者简介 李洋 一 ,男 ,在读硕士研究生 ,从事抗肿瘤药物的
研究 。
通信作者 王琦 ,男 ,教授 ,硕士研究生导师 ,从事抗肿瘤中草药物的
研究 。 一 ·
一。一 一鼠李糖昔 一 一 一。一
一 , 一 ,黄色结晶
一 一 一鼠李毗喃糖基 一山奈酚 一 一 一。
一鼠李糖昔 一 一 一 一
一 一 一。一 一 ,
一 ,黄色结晶 ,含量均在 以上 ,均来源
于宁夏医科大学基础医学院化学教研室 。
试剂仪器 培养基 美国赛默飞
公司 、胎牛血清 杭州四季青公司 、 胰蛋
白酶 美国赛默飞公司 、 一 试剂盒
一 , 武汉博士德公 司 、二 甲亚矾
, 公司 、酶标仪 美国伯乐公司 。
方法
细胞培养 采用 的
完全培养基在 ℃ 、 条件下培养 。
药物的制备 一 、 一 和
分别用 助溶 终浓度 ,再用含
的 培养液配成所需浓度 ,临
用配制 。
一 试验 常规细胞培养后将 、
一 等细胞调整浓度为 · 一 ,
一 细胞浓度调整为 了 · 一` ,分别接
种于 孔板 中 ,每孔 协 ,放培养箱中培养
后小心吸弃孔 内上清液 ,分别加人含不同浓
DOI :10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2013.06.008
6 期 李 洋 ,等 鹅绒藤三种单体化合物体外抗肿瘤活性的研究
度的各个单体化合物的培养液 ,使其终浓度分别 鹅绒藤各单体化合物作用不同时点对
为 、 、 、 、 林 · 一 ,每孔 林 另设 细胞生长的抑制作用 如表 所示 , 一 作用
不含细胞的空白对照组 。每组均设 个复孔 ,培 细胞 和 时 ,各剂量组 的 值有差异
养 、 、 、 后 ,每孔加 一 溶液 , , 一 和 一 在 、 和
孵育 后 ,酶标仪 处测每孔 值 ,计算 林 · 一浓度下处理细胞 、 和 后 ,
细胞生长抑制率 。细胞生长抑制率 二 一试验 其 值均低于对照组 尸 ,且浓度越高
组 值 对照组 值 。 值越低 。 一 、 一 和 一 各剂量
统计学方法 数据使用 统计学软 作用 细胞不 同时点 的 值均不同 尸
件进行分析 ,计量资料以均数 士标准差 无士, 表 ,各组间两两比较 ,除 一 作用细胞
示 ,多组间比较采用方差分析 ,尸感 为差异有 与 组比较差异无统计学意义外 ,其余组间不
统计学意义 。 同时间点均有差异 尸 。
结果
表 鹅绒藤各单体化合物作用不同时点对 细胞生长抑制率比较 无士
单体 剂量 值 抑制率
一卫


土 ,


士 一
士 一

士 一
士 一
士 一
士 一

士 一
麟士


土 ,
土 一
士 一
士 一
士 一


漏 上
士 `
士 `



士 `
士 ”
蒯 士 ”



士 `
士 “
士 `
以刃



士 `
士 “

侧刃


士 ”
士 中
士 `


士 一
士 一
士 一
士 一



士 `
士 ”

】兀

土 `
士 加 ”
士 ”
士 `
洲】〕
︸、曰八,`亡﹄、
田植喧﹄么尸
唯珊咖
姗唯明
与正常对照组比较 , 二尸
鹅绒藤各 单体化 合物作用不 同时 点对
一 细胞生长的抑制作用 一 在 、
、 时对 一 细胞增殖有促进作用 ,在
时有抑制作用 。 一 和 一
在 、 和 林 · 一浓度下处理细胞
、 和 后 ,其 值均低于对照组 尸
,且浓度越高 值越低 。 一 、
和 一 各剂量作用 一 细胞不同时点
的 值均有差异 尸 ,各时间点之间两
两比较 ,除 一 在 林 · 一浓度下处理细
胞 与 比较差异无统计学意义外 ,其余组间
不同时间点均有差异 尸 ,见表 。
· · 宁夏医科大学学报 卷
表 鹅绒藤各单体化合物作用不同时点对 丫 一 细胞生长抑制率比较 无土、
单体 剂量 值 抑制卿
一 士 士 以只 土 士
士 一 ` 士 一 士 的
士 既 一 士 一 士 一 士
士 一 士 一 士 一 土
士 一 土 一 士 一 土


一 土 士 士 土
士 一 士 士 士
士 一 土 士 “ 士
士 一 士 ` 士 ” 士
土 一 士 中 士 ` 士
值 从
值 洲刃 洲刃
一 士 士 士 士 加
土 一 士 抖 对士 士 润礴
土 一 士 士 印
士 一 士 士 ` 土
洲 士 一 土 ” 土 ” 士 `


与正常对照组比较 , `
鹅 绒藤各 单体 化合物 作用不 同时点 对 尸 。 一 、 一 和 一 各剂量作
一 细胞生长的抑制作用 一 在各 用 一 细胞不同时点的 值均有差异
浓度下处理 一 细胞 、 、 和 后 , ,各时间点之间两两比较 ,除 一 在
其 值均明显低于对照组 尸 , 一 处理细胞 与 比较差异无统计学意义外 ,其
各浓度仅在 对 一 细胞有抑制作用 余组间不同时间点均有差异 ,见表 。
表 鹅绒藤各单体化合物作用不同时点对 一 细胞生长抑制率比较 无土、
单体 剂量 , 一一一一一一一一一一一一一一止竺燮些些竺匕一一 — — 一· 一
一 土 士 叫 , 土 士
士 一 士 土 土
士 一 士 一 士 士
加 土 一 士 , 士 一 士 一
珊 士 一 士 士 一 士 一


一 土 士 以刃士 士
士 土 土 的 麟 土
士 对 ` 士 , 士 ` 土 ”
即 士 士 阅 ” 士 弘 一 士 以 加 “
土 ` 士 ” 士 ” 科土 ”
值 ,
尸值 加 姗 姗 的
一 曰
期 李 洋 ,等 鹅绒藤三种单体化合物体外抗肿瘤活性的研究
单体 剂量 值 抑制粼早 件 、 二 , ,
· 一 鸿 乙 ,
一班
、、,沙、曰、门马`劝`且

士 似 `

士 `



, 土








土 一

﹃、,` 、﹃
士 一士 麟
植田尸通
与正常对照组比较 尸 , ” 尸
讨论
本文研究结果显示 鹅绒藤乙酸乙醋萃取部
分得到的黄酮昔类 一 对 、 一 和
一 细胞增殖有不 同程度地抑制作用 ,作
用的时间越长 ,浓度越大 ,对细胞生长的抑制作用
越强 ,在 林 · 一时的最大抑制率分别为
、 、 正丁醇萃取部分得到
的黄酮昔类 一 对 和 一 细胞的增
殖表现出较强的抑制作用 ,对 一 细胞的
增殖抑制作用较弱 ,仅在处理 对细胞有抑制
作用 。从鹅绒藤乙酸乙醋萃取部分分离纯化得到
的烷烃类 一 ,在给细胞加药 时对
表现出较强的抑制作用 ,其他时间点几乎不显示
抑制作用 ,而在 、 、 等时间点时显示出对
一 细胞的促进增殖作用 , 时各浓度对
一 细胞增殖呈抑制作用 ,分析可能是 由于
培养体系的营养物质一定 ,前三个时间段添加 了
一 实验组的 一 细胞增殖呈促进状态 ,
细胞代谢旺盛 ,消耗的营养物质较对照组的多 ,高
浓度的实验组细胞代谢更旺盛 ,消耗的营养物质
更多 ,当营养物质不足以支撑细胞增殖时 ,细胞凋
亡的也就越快越多 。
由上可知 ,药物的生物活性与其结构密切相
关 ,不同的肿瘤细胞株对同一药物的敏感性 ,以及
药物作用机理也各不相同 。有研究表明 ,存在于
多种植物中的黄酮昔类山奈酚 ,通过不同作用机
制能抑制 一 〕、 、 秘 、
〔〕和 一 〔〕等多种肿瘤细胞的生长或诱
导其凋亡 ,进一步验证了鹅绒藤提取的山奈酚
一 一 一 一鼠李糖昔和 一 一 一 一鼠李毗
喃糖基 一山奈酚 一 一 一 一 一鼠李糖昔具有
抗肿瘤活性 。烷烃类正三十八烷对 一 细胞
有增殖促进作用 ,其对肿瘤细胞的作用机理值得
深人探讨和研究 。
参考文献
【〕 徐文友 ,刘本臣 ,张华文 ,等 鹅绒藤的鉴定学研究
中国野生植物资源 , , 一
〔 〕 王淑珍 ,鹅绒藤治疗甲癣的疗效观察 〔 天津药
学 , ,
【〕 李红苹 ,鹅绒藤乳汁治疗耳乳突状瘤 例报告 〔 〕
湖南医学高等专科学校学报 , ,
「 李彩艳 ,王琦 ,王凡 鹅绒藤总生物碱体外抗肿瘤作
用的实验研究 「 宁夏医科大学学报 , ,
料 一料
〔 , , , 四
一 一
一 。 〔 〕 ,
, 一 一
〔 周瑶 ,杜标炎 ,谭宇蕙 ,等 山奈酚对大鼠肝癌细胞
叭 的增殖抑制及诱导凋亡作用仁 〕广州
中医药大学学报 , , 一
【 李障 ,杜秉娜 , 张嵘 ,等 山奈酚对人结肠癌
细胞增殖 的抑制作用 〔 沈阳药科大学学报 ,
, 一
, , , 呵

叩 一 即
, ,

杜标炎 ,周瑶 ,谭宇蕙 ,等 山奈酚对人胃癌
细胞的生长抑制及诱导凋亡作用 」肿瘤 ,
, 一
责任编辑 刘 瑛
下转第 页
期 张伟芳 ,等 清脉饮及其拆方含药血清对 一。损伤的 四 细胞的保护作用 · ·
卿 卿 , 脚 , , , 脚
, , , 脚 脚 , , , 卿 , 一 『 ,
, 脚 , 一。 叮卿
一。 , 竹
卿 , 一 叮 脚
, 一 巧卿 ,
,
, , 笔
脚 , 卿
一 叮 , 叮 一 一
脚 一
上接第 页
环竹
群 沮 , 盯
群 , 群 ,
一 一 , 一 一 一 一
一 一 一。一 一 一 一 一 一 一 一

一 , 一 一
一 ,
一 一 , , , ,


一 一 , ,
一 一 一 , ,
林 · 一 , , 习 卿
一 , , , , 一
一 , 卿
脚 , , 一 一

一 一