全 文 ：育苗技术　Ｓｅｅｄｌｉｎｇ　Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ
３４　 ＰＲＡＣＴＩＣＡＬ　ＦＯＲＥＳＴＲＹ　ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ
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一
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年
第
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期
　
林
业
实
用
技
术
蓝果树组织培养及快速繁殖研究＊
胡　刚１　朱忠荣２　王桂萍１　胡光平２
（贵阳市林业科技推广站　贵阳　５５０００３；２．贵州大学林学院　贵阳　５５００２５）
［摘要］　 以多年生蓝果树腋芽半木质化茎段为外植体，进行
组织培养。结果表明：蓝果树茎段的外植体适宜诱导培养基为
ＷＰＭ＋ＸＴ０．２ｍｇ／Ｌ，最佳增殖培养基 ＷＰＭ＋ＺＴ０．５～１ｍｇ／Ｌ，
诱导生根培养基以１／２ＷＰＭ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ
＋活性炭０．２％为宜，生根率１００％，以松林腐殖土和苔藓基质
为培养基质移栽效果好，成苗率９０％以上。
［关键词］　蓝果树　茎段　组织培养　快速繁殖
ＤＯＩ：１０．１３４５６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｌｙｋｔ．２０１４．０８．０１１
蓝果树（Ｎｙｓｓａ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ）为蓝果树科落叶乔木，亦
称“紫树”，因其核果成熟时果皮呈深蓝色而得名。贵
州特有种，喜光，喜酸性土壤，适应性强、生长快，树干
通直，材质好，树叶稠密，叶片宽大，春季嫩叶紫红色，
秋叶变成绯红，叶色艳丽，成熟果实呈美丽的深蓝色，
是一种集观赏与实用为一体的优良树种［１－２］。蓝果树
的繁殖方法，主要有种子繁殖，种壳十分坚硬，种子出
土很不整齐，发芽率低，一般为２５％～３０％，种子繁殖
后代变异大，有些变异个体不结实或结实少。蓝果树
扦插繁殖不易成活［３］。因此，采取无性繁殖可保存种
源和变异个体。目前有关蓝果树组织培养快速繁殖技
术的系统研究报道甚少［４－５］，王春荣等对蓝果树茎段组
织培养和快速繁殖、蓝果树的离体培养和植株再生进行
了研究［６－７］，但贵州喀斯特山地蓝果树组织培养快速繁
殖技术的系统目前尚未见研究报道，因此，本文贵州
喀斯特山地蓝果树茎段为外植体，对其组织培养及快
速繁殖技术进行研究，分析快速繁殖如何缩短培育周
期，减少培育程序，增加繁殖系数，提高生根率及移栽
成苗率。为保存优良种源和变异个体进行种质保存，
以期为实现蓝果树工厂化育苗提供技术参考。
１　材料与方法
１．１　试验材料
在多年生蓝果树上剪取向阳树冠中部，采集当年生
无病虫害、生长健壮的半木质化枝条，除去叶片，留下叶
柄，切取除顶芽外的第二节以下有腋芽的茎段作外植体。
＊国家林业局种苗工程投资计划项目（发改投资［２０１０］２１６７），贵
州省科技基金项目（黔科合Ｊ字［２０１１］２１５１）。
作者简介：胡刚（１９６１—），高级工程师，从事林业种苗研究工作。
１．２　材料消毒
将外植体在自来水下用毛刷洗去表面尘土，在
饱和的洗衣粉溶液中浸泡１０ｍｉｎ不断摇晃使之清
洗干净，再用自来水冲洗１０ｍｉｎ，于净化工作台上
切成２芽２节茎段用７５％酒精消毒３０～６０ｓ，再用
０．１％ＨｇＣｌ２ 消毒５～８ｍｉｎ，无菌水冲洗５～６次，
将枝条切成带１个腋芽长１ｃｍ左右的茎段备用。
１．３　实验方法
１．３．１　初代培养　将带腋芽的茎段，接种于４种外
植体启动培养基上，每瓶接种１个外植体，每处理３０
瓶，３次重复，３０ｄ时统计平均萌发数，平均萌芽率生
长情况等。培养基中蔗糖３０ｇ／Ｌ、琼脂６ｇ／Ｌ、ｐＨ值
５．８～６．０。培养条件，培养温度（２５±１）℃，光照强度
２　０００～２　５００ｌｘ，光照１４ｈ／ｄ，以下增值培养，诱导生
根培养条件相同。
１．３．２　增殖培养　将培养４０ｄ、１ｃｍ以上新生腋芽
长，转接到以 ＷＰＭ为基本培养基，添加不同配比的生
长调节剂，每瓶接种４个，每处理１０瓶，接种４０ｄ时，
调查平均苗高，平均增殖系数，苗生长情况等。
１．３．３　生根培养　将生长健壮高２ｃｍ以上的无根
单株苗转接到以１／２ＷＰＭ基本培养基上，附加不同浓
度的不同配比的生长素和不同浓度的活性炭，进行生
根培养，每处理接种１０瓶，每瓶接６株。接种３０ｄ
后，调查平均生根率、根量、根长、生长情况等。
１．３．４　基质消毒　在塑料大棚内，将过筛１ｃｍ的田
园土、松林腐殖土装入直径１５ｃｍ×１５ｃｍ塑料营养
缽内各５０株，放在事前准备好的苗床上，用５０％多菌
灵０．１％浓度药液＋２５％辛硫磷０．１％浓度药液混
合均匀后浇灌，立即扣上塑料小拱棚消毒２４ｈ，揭开
通气２４ｄ后备用。将苔鲜浸泡在５０％多菌灵０．１％
浓度药液中１０ｈ，捞出后稍沥干水分，铺在事先准备
好的苗床上，压平、压实，苔藓厚度１０ｃｍ 左右，
备用。
１．３．５　移栽驯化　将生根苗从瓶中取出，在５０％多
菌灵０．１％浓度药液中洗净基部附着的培养基，将单
株有根苗移入消毒过的田园土，松林腐殖土营养缽
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中，每缽一株，各５０株，在准备好的苔鲜床上，按
１０ｃｍ×１０ｃｍ的株行距，将单株有根苗用镊子移栽在
苔鲜内移栽５０株。定植完后，苗床上立即扣上盖有
遮阳网的塑料膜小拱棚，温度保持在１５～２０℃，相对
湿度８０％～９０％ ，２０ｄ后逐渐揭开塑料膜，只留遮阳
网，并每周喷施１／２ＷＰＭ 培养液１次，４０ｄ后揭去遮
阳网，调查成苗数、苗高、根团形成等。
２　结果与分析
２．１　不同培养基对蓝果树芽诱导的影响
不同培养基对外植体接种成功率有不同的影
响，不同培养基上蓝果树外植体初始分化的情况如
表１。
表１　不同培养基对外植体初始分化的影响
组合号 培养基（ｍｇ／Ｌ） 萌芽数／个萌芽率／％ 生长情况
１ Ｈ ＋６ＢＡ１＋ＩＢＡ０．１　 ２１．３６　 ７１．２ 芽细　叶色绿
２ ＭＳ＋６ＢＡ１＋ＩＢＡ０．１　 ２２．９３　 ７６．４３ 芽细　叶色绿
３ ＷＰＭ＋６ＢＡ１＋ＩＢＡ０．１　２５．４２　 ８４．７３ 芽细　叶色绿
４ ＷＰＭ＋ＺＴ０．２　 ２８．１５　 ９３．８ 芽粗壮　叶色绿
从表１可看出，不同培养基对蓝果树外植体接种
成功率有显著的影响。ＷＰＭ＋ＺＴ０．２培养基比较适
合蓝果树多年生带腋芽茎段萌芽，萌芽率９３．８％，芽
生长健壮，抽梢 ３ｃｍ 左右，Ｈ ＋６ＢＡ１ ｍｇ／Ｌ＋
ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ、ＭＳ＋６ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ、
ＷＰＭ＋６ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ　３种培养基的茎
段萌芽率分别为７１．２％、７６．４３％、８４．７３％，抽梢２ｃｍ
左右。这是由于蓝果树外植体为多年生老树的半木
质化腋芽，本身树体已老年化。而以培养基 ＷＰＭ 较
适合蓝果树带腋芽茎段诱导萌芽，加ＺＴ更易诱导腋
芽伸长。
２．２　增殖培养
不同基本培养基对蓝果树苗增殖的影响如表２。
从表２可以看出，不同生长调节剂的配合，对增
殖方式苗高有效增殖系数不同。在ＺＴ０．５～１ｍｇ／Ｌ
时，苗高４～６ｃｍ，节间在１ｃｍ左右。因此，丛生芽还
可切割成含１～２芽的切段［１］，还可增加繁殖系数。因
为ＺＴ可以促进幼苗节间的伸长，叶片伸展成壮苗，增
表２　不同培养基对蓝果树增殖系数的影响
编号
生长调节剂
（ｍｇ／Ｌ）
增殖
方式
有效增殖
系数／个
苗高
／ｃｍ
增殖所需时间／ｄ
增殖 壮苗培育
全年增
殖代数
１ ＢＡ０．５＋ＩＢＡ０．１ 丛生芽 １．０１　 ２．６７　 ４０～５０　 ０　 ５
２ ＢＡ１＋ＩＢＡ０．１ 丛生芽 ３．１１　 １．６９　 ４０～５０　 ３０～３５　 ５
３ ＢＡ２＋ＩＢＡ０．１ 丛生芽 １．３７　 １．８３　 ４０～５０　 ３０～３５　 ５
４ ＢＡ１＋ＫＴ０．５＋ＩＢＡ０．１ 丛生芽 ２．３６　 ２．１６　 ４０～４５　 ３０～３５　 ５
５ ＢＡ１＋ＫＴ１＋ＩＢＡ０．１ 丛生芽 ３．７８　 ２．９２　 ４０～４５　 ３０～３５　 ５
６ ＢＡ２＋ＫＴ１＋ＩＢＡ０．１ 丛生芽 ２．１９　 １．５８　 ４０～４５　 ３０～３５　 ５
７ ＺＴ０．２ 切割 ３．２３　 ４．３６　 ３５～４０　 ０　 ８～９
８ ＺＴ０．５ 丛生芽切割 ４．２８　 ５．２７　 ３５～４０　 ０　 ８～９
９ ＺＴ１ 丛生芽切割 ６．１７　 ６．１３　 ３５～４０　 ０　 ８～９
１０ ＺＴ２ 丛生芽 ２．１９　 ２．３９　 ３５～４０　 ３０～３５　 ５
　　注：１．增殖方式，丛生芽：芽分化呈丛生状。切割：将小植株切割成带１～２个腋芽的切段。２．有效增殖数，能形成单生型芽易抽茎展叶的芽体／
接种数。
殖芽不需壮苗培养，可以直接诱导生根，还可以切割
成２ｃｍ高切段扦插于生根培养基，切割苗缩短培育
周期，增加繁殖系数，繁殖的后代特征具有稳定性［３］。
每年可以增殖８代左右。同时ＺＴ２ｍｇ／Ｌ时丛生芽短
而少不易分离，ＺＴ０．２ｍｇ／Ｌ芽只伸长呈单株，所以
ＺＴ低于０．５ｍｇ／Ｌ或高于２ｍｇ／Ｌ不适合增殖培养。
从表２看出６ＢＡ与ＩＢＡ配合时，丛生芽较多，但
能分离出单个芽的有效芽平均在１～３个左右，芽间
距在０．２～０．５ｃｍ，叶片小弱，用于生根还需壮苗培
养，当６ＢＡ在２ｍｇ／Ｌ以上有效芽更少，因６ＢＡ在芽
分化过多时常抑制节间伸长，有部份芽经组织学观察
表明，芽原基在愈伤组织表面先后发生，深理于愈伤
组织之中，不易分开或分开后破碎不形成单生型
芽［８］。表２表明６ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ０．１
ｍｇ／Ｌ时，有效芽增多，节间增长，因 ＫＴ也能促进幼
苗节间的伸长，少部分苗高在１．５ｃｍ左右，但需经壮
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苗培养，培养周期９０～１００ｄ全年增殖５代左右。试
验结果说明 ＷＰＭ＋ＺＴ０．５～１ｍｇ／Ｌ是蓝果树增殖
培养的适宜基本培养基 ，增殖系数４．１８～６．１７，培养
周期６０～７００Ｌ。
２．３　生根培养
表３　生长素和活性炭对蓝果树生根的影响
编号 处理（ｍｇ／Ｌ）
生根率
／％
根量
／根
根长
／ｃｍ
生长
情况
１
２
３
４
５
６
７
８
ＮＡＡ０．３
ＮＡＡ０．５
ＮＡＡ１
ＮＡＡ０．３＋ＩＡＡ０．２
ＮＡＡ０．５＋ＩＡＡ０．２
ＮＡＡ０．５＋ＩＡＡ０．２＋活性炭０．１
ＮＡＡ０．５＋ＩＡＡ０．２＋活性炭０．３
ＮＡＡ０．５＋ＩＡＡ０．２＋活性炭０．５
７０．２
８０．６
４０．３
８０．２
９０．６
９２．５
１００
５３
３．３１
５．２６
１．１５
３．７８
７．６３
７．１５
９．１７
４．１２
３．７２
４．８１
０．９１
４．１８
４．３７
５．３１
６．２９
３．２１
根白色
根白色
根白色
根白色
根白色
根淡红
根淡红
根淡红
实验结果表明只加 ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基比
不加ＩＡＡ 的培养基晚 ５ｄ 才开始长根，生根率
ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ比ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ＋
ＩＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ 低
１０％～２０％，根数 ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ与 ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ
＋ＩＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ比较少２．３７根。说明生长素ＩＡＡ
加入后，可促进早期根原基形成，可能是根原基的发
生阶段ＩＡＡ为基因活化剂的原因，结果证明蓝果树诱
导生根最佳培养基为１／２ＷＰＭ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋
ＩＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋活性炭０．２％，能够实现增殖、生根同时
完成，大大提高了种苗的繁殖速度［９］。
２．４　移栽驯化
组培苗移栽成活与否是组织培养的关键技术之
一，组培苗培育成功与否，基质的选择也很重要。不同
基质对蓝果树组培苗移栽成活实验统计结果如表４。
表４可以看出不同基质对蓝果树组培苗移栽成
活的影响不岂不，松林腐殖土和苔鲜为基质成苗率均
在９０％以上，且易形成根团，平均苗高、平均根量及根
长均优于田园土、揭示松林腐殖土和苔鲜基质较适宜
蓝果树组培苗移栽驯化，与冯立新等的研
表４　不同基质对组培苗移栽成活的影响
基质
成苗率
／％
平均苗高
／ｃｍ
平均根量
／根
根长
／ｃｍ
生长情况
田园土 ９４　 ４．２　 ９．１　 １１．３ 不易形成根团
松林腐殖土 ９２　 ５．３　 １５．６　 １６．２ 易形成根团叶色浓绿
苔鲜 ９６　 ４．７　 ２３．５　 ２１．６ 易形成根团，叶色绿
究结果相似。３种基质牙比较松林腐殖土通透性好，
比较肥沃，组培苗移栽后容易由异养转化为自养，生
长快。而苔鲜通透性好，保湿能力也很好，发根快，根
伸长快，很快形成根团。易适应外界环境，田园土，通
透气差，影响发根和组培苗生长。
３　结论
以茎段为外植体进行蓝果树组织培养繁殖，初生
诱导基本培养基以 ＷＰＭ＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ为宜，其比
较适合多年生蓝果树腋芽的诱导，萌芽率９３．３％。增
殖培养基以 ＷＰＭ＋ＺＴ０．５～１ｍｇ／Ｌ为最佳，增殖系
数４．１８～６．１７，苗高５．２７～６．３１ｃｍ，茎粗壮，有效芽
１００％，培养周期６０～７０ｄ。生根培养基以１／２ＷＰＭ
＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋活性炭０．２％为
宜，生根率１００％。根粗壮，移栽成活率高。移栽基质
以松林腐殖土和苔鲜为宜，适合形成根团，成苗率
９０％以上，平均苗高、平均根量及根长均优于田园土，
能加速成苗，６０ｄ后可定植到露地，培养１年生苗高
１．５ｍ左右。
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