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两头毛水提物对衰老小鼠心、肝及肾组织中MDA、GSH和SOD含量的影响



全 文 :两头毛水提物对衰老小鼠心、肝及肾组织中 MDA、GSH 和
SOD含量的影响
张书伟,张莉蓉#
郑州大学基础医学院药理学教研室 郑州 450001
#通讯作者,女,1964 年 10 月生,博士,教授,研究方向:临床药理学,E-mail:lrz@ zzu. edu. cn
关键词 两头毛水提物;抗氧化;氧自由基;小鼠
中图分类号 R284
摘要 目的:探讨两头毛水提物(IAR-Water)的抗氧化活性及抗氧化机制。方法:72 只小鼠分成 6 组,每组 12
只,分别为空白组,模型组,阳性药物维生素 E 组(200 mg /kg) ,IAR-Water 低、中和高剂量(分别相当于药材 1. 9、
3. 8和 7. 6 g /kg)组,给药同时,模型组、阳性药物维生素 E 组、IAR-Water 低、中和高剂量组小鼠每天颈背部皮下注
射 D-半乳糖 1 g /(kg·d)建立衰老小鼠模型,空白组皮下注射等体积注射用水。7 周后对小鼠心、肝和肾组织中丙
二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量进行测定。结果:各组小鼠心、肝、肾中
MDA、SOD和 GSH的含量比较,差异有统计学意义(P < 0. 05)。与模型组比较,阳性药物维生素 E组和 IAR-Water
中和高剂量组心、肝、肾组织中 MDA的含量下降,SOD和 GSH的含量升高(P < 0. 05)。结论:IAR-Water 可能通过
清除羟自由基而发挥抗氧化作用。
Effects of water extract from incarvillea arguta royle on levels of MDA,
GSH and SOD in heart,liver and kidney of mice
ZHANG Shuwei,ZHANG Lirong
Department of Pharmacology,College of Basic Medical Sciences,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001
Key words water extract from incarvillea arguta royle;antioxidative;oxygen free radicals;mouse
Abstract Aim:To study the antioxidative activity and its mechanism of the water extract from incarvillea arguta royle
(IAR). Methods:A total of 72 mice were randomly divided into six groups(12 mice in each group) :the normal group,
model group,positive medicine vitamin E group (200 mg /kg) ,IAR-Water low,medium,high dose group (equivalent drugs
1. 9,3. 8,7. 6 g /kg). At the same time of administration,the model group,positive control group and reagent mice were in-
jected D-galactose 1g /(kg·d)by SC,the normal group was injected the same volume of water. Seven weeks after adminis-
tration,the levels of malondialdehyde(MDA) ,superoxide dismutase(SOD) ,and glutathione peroxidase(GSH)in tissues of
heart,liver,and kidney were detected. Results:The levels of MDA,SOD,and GSH of 6 groups in tissues of heart,liver,and
kidney were obviously different (P < 0. 05). The levels of MDA were lower and the levels of SOD and GSH were higher in
positive medicine vitamin E group,IAR-Water medium,high dose groups than those in model group(P < 0. 05). Conclu-
sion:IAR water extract has the antioxidative activity by eliminating oxygen free radicals.
两头毛(incarvillea arguta royle,IAR)为彝医习
用药材,别名唢呐花、炮仗花或炮仗筒等。主要分布
于甘肃、四川、贵州、云南及西藏等地。来源于紫葳
科角蒿属植物毛子草的带根茎全草,具有祛风除湿,
消炎止痛和活血散淤的功效[1],主要用于治疗肝
炎、菌痢、痈肿、骨折血肿和风湿劳伤等。研究[2-4]发
现自由基具有抗氧化作用,且与许多疾病有关。作
者采用 D-半乳糖致衰老小鼠模型,应用 IAR后测定
小鼠心、肝、肾中组织丙二醛(malondialdehyde,
MDA)、超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase,
SOD)和还原型谷胱甘肽(glutathione peroxidase,
GSH)含量的变化,探讨 IAR 的水提物对衰老小鼠
的抗氧化活性及其可能的机制,为 IAR 的应用提供
实验性依据。
1 材料与方法
1. 1 试剂与仪器 MDA、GSH测定试剂盒和 SOD试
剂盒(南京建成生物工程研究所) ,D-半乳糖(上海恒
·537·Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences) Sep. 2011 Vol. 46 No. 5
DOI:10.13705/j.issn.1671-6825.2011.05.009
信化学有限公司,批号 2009022) ,维生素 E(浙江医药
股份有限公司新昌制药厂,批号 20100930) ,Sartorius
BP 211D型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有
限公司) ,TG16-WS高速离心机(南京赛特仪器厂产
品) ,UV-2409型紫外分光光度计(日本岛津)。
1. 2 实验药材及处理 IAR 药材购于昆明市金碧
路圣爱中医馆。取 IAR全草粉碎,过 80 目筛,用 10
倍量(大约 10 L)的蒸馏水回流提取 3 h,再加 8 倍
量(大约 8 L)的蒸馏水回流提取 3 h,重复一次,合
并 3 次滤液回收,得其水提物。临用时配制成实验
所需浓度。
1. 3 实验动物分组及给药[5] 昆明种小鼠,雄性,
体质量(20 ± 2)g,由河南省实验动物中心提供。在
21 ~ 24 ℃、相对湿度 45% ~55%的环境中适应饲养
1 周后实验,期间自由饮食和饮水。72 只小鼠按照
随机数字表分成 6 组,每组 12 只,分别为正常组、模
型组、阳性药物维生素 E 组(200 mg /kg)、IAR 水提
物(IAR-Water)低、中和高剂量组(相当于药材 1. 9、
3. 8 和 7. 6 g /kg) ,给药同时,模型组、阳性药物维生
素 E组、IAR-Water低、中和高剂量组小鼠每天颈背
部皮下注射 D-半乳糖 1 g /(kg·d)建立衰老小鼠模
型,空白组皮下注射等量注射用水,共给药 7 周。
1. 4 小鼠心、肝、肾组织中 MDA、GSH 和 SOD 的
含量测定 给药 7 周后处死小鼠,取心、肝、肾组织
进行匀浆小鼠心、肝、肾各项指标测定所用测定方法
均严格按所购 ELISA试剂盒说明书进行。
1. 5 统计学处理 采用 SPSS 13. 0 分析数据,各组
小鼠心、肝、肾组织中 MDA、GSH 和 SOD 含量的比
较采用单因素方差分析,组间两两比较采用 SNK-q
检验,检验水准 α = 0. 05。
2 结果
各组小鼠心、肝、肾组织中 MDA、GSH 和 SOD
的含量比较见表 1。
表 1 各组小鼠心、肝、肾组织中MDA、GSH和 SOD的含量(n = 12)
组别
MDA/(mol·kg - 1) GSH/(mol·kg - 1) SOD/(× 106 U·kg - 1)
心 肝 肾 心 肝 肾 心 肝 肾
空白组 1. 29 ± 0. 12 0. 57 ± 0. 14 0. 89 ± 0. 13 6. 29 ± 0. 12 12. 19 ± 0. 14 9. 89 ± 0. 13 170. 29 ± 18. 82 212. 19 ± 34. 33 189. 89 ± 29. 90
模型组 5. 87 ± 0. 47* 1. 18 ± 0. 33* 2. 19 ± 0. 32* 3. 98 ± 0. 51* 7. 98 ± 0. 23* 5. 91 ± 0. 21* 83. 45 ± 19. 01* 97. 29 ± 17. 23* 95. 91 ± 27. 09*
阳性药物维生素 E组 2. 89 ± 0. 32# 0. 82 ± 0. 08# 1. 20 ± 0. 87# 5. 89 ± 0. 86# 10. 82 ± 0. 98# 8. 20 ± 1. 87# 153. 89 ± 20. 86# 180. 82 ± 39. 98# 158. 20 ± 42. 87#
IAR-Water低剂量 5. 71 ± 1. 29 0. 99 ± 0. 21 2. 00 ± 0. 14 4. 21 ± 0. 39 7. 99 ± 0. 21 6. 08 ± 0. 59 94. 24 ± 12. 34 107. 99 ± 23. 81 116. 18 ± 31. 59
IAR -Water中剂量 3. 90 ± 0. 67# 0. 78 ± 0. 16# 1. 52 ± 0. 28# 5. 39 ± 0. 90# 9. 78 ± 1. 91# 7. 52 ± 0. 71# 115. 39 ± 23. 91# 169. 78 ± 19. 90# 147. 52 ± 32. 11#
IAR -Water高剂量 2. 78 ± 0. 91# 0. 62 ± 0. 05# 1. 03 ± 0. 59# 6. 08 ± 0. 72# 11. 62 ± 2. 05# 9. 07 ± 1. 19# 166. 08 ± 24. 72# 191. 62 ± 29. 05# 168. 47 ± 32. 39#
F 4. 320 3. 850 4. 760 4. 670 3. 970 4. 340 3. 840 4. 060 4. 280
P 0. 021 0. 034 0. 016 0. 015 0. 040 0. 031 0. 038 0. 023 0. 019
* 与空白组比较,P < 0. 05;#与模型组比较,P < 0. 05。
3 讨论
研究[6]表明,IAR 中含有生物碱、黄酮、神经酰
胺和三萜等多种化学成分。用叔丁基氢过氧化物为
氧化剂使红细胞氧化,加 IAR 提取物 AB-2 后,不仅
可使红细胞膜脂质的氧化物减少,还可保护膜蛋白
的巯基不致氧化聚合,其作用要优于维生素 E。IAR
AB-2 可防止血红蛋白的自氧化及溶血,用电子自旋
捕集法测羟自由基,结果说明 AB-2 可直接与羟自
由基反应,可能是自由基的清除剂。
该研究显示,IAR-Water 能使小鼠心、肝、肾中
的 MDA不同程度下降,提示 IAR-Water 可抗脂质过
氧化;能使小鼠心、肝及肾组织中的 SOD 和 GSH 不
同程度升高,提示 IAR-Water可清除·OH 和 H2O2。
由此可见,IAR-Water可能通过抗脂质过氧化,清除
·OH和 H2O2 自由基而发挥抗氧化作用。
参考文献
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(2011-01-13 收稿 责任编辑李沛寰)
·637· 郑州大学学报(医学版) 2011 年 9 月 第 46 卷 第 5 期