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不同培养基成分对两种球花报春继代培养的影响



全 文 :江西农业学报 2013,25(3) :23 ~ 25
Acta Agriculturae Jiangxi
不同培养基成分对两种球花报春继代培养的影响
张 超1,孙 莹2,赵洲洋3,龙 霞1*
收稿日期:2012 - 12 - 04
作者简介:张超(1984─) ,男,山东泰安人,工程师,硕士,研究方向:园林植物种质资源利用与创新。* 通讯作者:龙霞。
(1.山东省新泰市园林局,山东 新泰 271200;2.大连工业大学 艺术设计学院,辽宁 大连 116034;
3.山东省德州市锦绣川景区管理办公室,山东 德州 253000)
摘 要:探讨了不同培养基成分对两种球花报春继代培养的影响。结果表明:在 MS基本培养基中添加不同的激素种
类和浓度对两种报春丛生芽的诱导效果有很大的影响,滇北球花报春的最佳继代培养基为 MS + 6 - BA 0. 1 mg /L + NAA
0. 1 mg /L + KT 0. 1 mg /L,其增殖系数为 6. 60;滇海水仙花的最佳继代培养基为 MS + 6 - BA 0. 2 mg /L + NAA 0. 1 mg /L,其
增殖系数为 5. 17;在这两种培养基中植株粗壮,叶片翠绿,长势好。
关键词:培养基成分;球花报春;继代培养;增殖系数
中图分类号:S682. 15 文献标志码:A 文章编号:1001 - 8581(2013)03 - 0023 - 03
Effects of Different Medium Ingredients on Subculture of Two Primrose Varieties
ZHANG Chao1,SUN Ying2,ZHAO Zhou - yang3,LONG Xia1*
(1. Gardening Bureau of Xintai of Shandong Province,Xintai 271200,China;2. Dalian Polytechnic University School of Art
and Design,Dalian 116034,China;3. Scenic Area Management Office of Dezhou of Shandong Province,Dezhou 253000,China)
Abstract:The effects of different medium ingredients on the subculture of two primrose varieties were studied. The MS basic
medium supplemented with different kinds and concentrations of hormones had great inducement effects on the tuft buds of these two
primrose varieties. The optimum subculture medium for Primula denticulata ssp. sinodenticulata was MS + 6 - BA 0. 1 mg /L +
NAA 0. 1 mg /L + KT 0. 1 mg /L with the proliferation coefficient of 6. 60. The optimum subculture medium for Primula pseudoden-
ticulata Pax was MS + 6 - BA 0. 2 mg /L + NAA 0. 1 mg /L with the proliferation coefficient of 5. 17. Two primrose species had
brawny plants,green leaves and good growth vigor in the above best media.
Key words:Medium ingredients;Primrose;Subculture;Proliferation coefficient
我国拥有球花报春植物 6 种,都尚处于野生状
态[1]。其中分布于云南大理、丽江的滇北球花报春
(Primula denticulata ssp. sinodenticulata)和滇海水仙花
(Primula pseudodenticulata Pax)均属于报春花科、报春
花属、球花报春组植物,其花为蓝紫色,十分艳丽;整个
花序呈球状,观赏价值极高。为了尽快应用我国丰富
的球花报春植物资源,为报春花试管苗的商业化生产
奠定基础,笔者以这两种报春作为试验材料,在其初代
培养成功的基础上,通过改变培养基成分配比对其试
管苗进行了继代培养研究。
1 材料和方法
1. 1 材料 以云南省农业科学院花卉研究所提供的
二倍体滇北球花报春和滇海水仙花试管苗为材料。
1. 2 方法 以 MS 培养基为基本培养基,添加蔗糖和
琼脂。根据试验的需要添加不同种类及浓度的激素(6
- BA、NAA、KT 等)。用 4%的 HCl 或 4%的 NaOH 调
节培养基 pH值至 5. 8 ~ 6. 0,在 121 ℃下高压灭菌后备
用。将两种球花报春外植体生成的小芽接种到含有不
同浓度细胞分裂素和生长素组合的 MS培养基上,每个
处理接种 30 个芽。培养 40 d后,观察并统计各个处理
中芽的增殖情况,筛选出适宜的继代增殖培养基。培
养条件为光照 10 ~ 12 h /d、光强 800 ~ 1200 lx、温度 22
~ 26 ℃。
以两种球花报春继代增殖培养的丛生芽为材料,
在上述实验中筛选出的适宜增殖培养基中每升分别添
加 25、30、35 和 40 g的白砂糖,培养 30 d后观察丛生芽
的增殖生长情况。
2 结果与分析
2. 1 不同激素配比对组培苗增殖的影响 由表 1 ~表
2 可以看出:在 MS 培养基中不加任何激素,虽然也可
以分化出芽,但增殖系数较低;在 MS 培养基中只有 6
- BA而没有 NAA的条件下,也可以分化出芽,但芽的
增殖系数较低。两种球花报春均以 NAA 浓度为 0. 1
mg /L时,出芽率最高,出芽时间最短,芽的长势最好,
成芽数多且好,因此 NAA 的浓度不宜过高,NAA 浓度
以 0. 1 mg /L为最佳。KT对滇北球花报春的增殖有一
定的影响,起到加快增殖的作用,但当其浓度大于 0. 1
mg /L时,组培苗的节距较大,因此较高浓度的 KT 不适
于莲座型植株的增殖。滇海水仙花对 KT 的敏感度更
高,在含有 KT的培养基上其植株的节距明显增大,因
此 KT不宜加入到滇海水仙花的增殖培养基中。以滇
海水仙花为例,当 6 - BA 的浓度小于 0. 2 mg /L 时,芽
的增殖系数随着 6 - BA 浓度的增高而增加;当 6 - BA
的浓度大于 0. 2 mg /L时,芽的增殖系数随着 6 - BA浓
度的增高而降低;当 6 - BA的浓度较低时增殖较慢,较
高时畸形苗增多。
综合生长及分化的情况,滇北球花报春的最佳增
殖培养基为 MS + 6 - BA 0. 1 mg /L + NAA 0. 1 mg /L
+ KT 0. 1 mg /L,滇海水仙花的最佳增殖培养基为 MS
+6 - BA 0. 2 mg /L + NAA 0. 1 mg /L。在这两种培养
基中,报春植株粗壮,叶片翠绿,长势好,丛生芽增殖多
(见图 1、图 2)。
表 1 不同激素配比对滇北球花报春增殖的影响
6 - BA + NAA /(mg /L) KT /(mg /L) 接种数 /块 新芽数 /个 增殖系数 植株及新芽生长情况
0. 0 + 0. 0 0 30 66 2. 20 长势良好,丛芽增殖很少,丛芽增殖不明显,生长慢。
0. 1 + 0. 0 0 30 98 3. 27 长势良好,丛芽增殖不明显,植株纤细,生长慢。
0. 1 + 0. 1 0 30 138 4. 60 长势良好,丛芽增殖较多,植株较纤细,生长较慢。
0. 1 + 0. 2 0 30 120 4. 00 长势良好,丛芽增殖较快,叶片微黄,生长较慢。
0. 1 + 0. 3 0 30 110 3. 67 长势一般,丛芽增殖较快,叶片微黄,生长较慢。
0. 2 + 0. 0 0 30 117 3. 90 长势一般,丛芽增殖慢。
0. 2 + 0. 1 0 30 114 3. 80 长势较好,丛芽增殖较多,幼苗粗壮,生长较慢。
0. 2 + 0. 2 0 30 109 3. 63 长势较好,幼苗粗壮,叶片微黄。
0. 2 + 0. 3 0 30 102 3. 40 长势较好,叶片翠绿,生长慢。
0. 3 + 0. 0 0 30 118 3. 93 长势一般,丛芽增殖慢。
0. 3 + 0. 1 0 30 137 4. 57 长势一般,丛芽增殖多且慢。
0. 3 + 0. 2 0 30 132 4. 40 长势一般,植株较粗壮,叶片翠绿,丛芽较多。
0. 3 + 0. 3 0 30 125 4. 17 长势一般,植株较粗壮,丛芽增殖较多且慢,叶微黄。
0. 1 + 0. 1 0. 1 30 198 6. 60 长势好,丛芽增殖较多且快,植株粗壮,有部分根,叶片翠绿。
0. 1 + 0. 2 0. 1 30 180 6. 00 长势好,丛芽增殖多,叶微黄,有愈伤。
0. 1 + 0. 3 0. 1 30 168 5. 60 长势好,丛芽增殖多,叶微黄,有愈伤。
0. 2 + 0. 1 0. 1 30 177 5. 90 长势良好,丛生芽较多,根多,有愈伤。
0. 2 + 0. 2 0. 1 30 164 5. 47 长势一般,丛芽较少,叶微黄。
0. 2 + 0. 3 0. 1 30 153 5. 10 长势一般,叶黄化,有愈伤。
0. 3 + 0. 1 0. 1 30 166 5. 53 长势一般,叶枯黄,有愈伤。
0. 3 + 0. 2 0. 1 30 154 5. 13 长势一般,叶黄化,畸形芽较严重,有愈伤。
0. 3 + 0. 3 0. 1 30 135 4. 50 长势差,叶较黄,畸形芽严重,有愈伤。
0. 1 + 0. 1 0. 2 30 166 5. 53 长势较弱,丛芽较少,叶微黄。
0. 1 + 0. 2 0. 2 30 156 5. 20 长势较弱,丛芽较少,叶微黄。
0. 1 + 0. 3 0. 2 30 143 4. 77 长势差,叶枯黄,有愈伤。
0. 2 + 0. 1 0. 2 30 155 5. 17 长势差,愈伤多,叶黄化,节距大,有愈伤。
0. 2 + 0. 2 0. 2 30 148 4. 93 长势较弱,丛芽较少,叶微黄,节距大。
0. 2 + 0. 3 0. 2 30 140 4. 67 长势较弱,叶黄化,节距大,有愈伤。
0. 3 + 0. 1 0. 2 30 143 4. 77 长势差,叶枯黄,节距大,有畸形芽,有愈伤。
0. 3 + 0. 2 0. 2 30 132 4. 40 长势差,叶黄化,节距大,芽畸形严重。
0. 3 + 0. 3 0. 2 30 124 4. 13 长势差,叶黄化,节距大,芽畸形严重。
图 1 滇北球花报春的丛生芽
2. 2 白砂糖的浓度对组培苗增殖的影响 由表 3、表
4 可以看出,白砂糖的浓度对两种球花报春组培苗的增
殖生长均有一定的影响。当培养基中白砂糖的浓度为
30 g /L时,增殖系数最高,且植株长势最好,丛生芽增
殖最多;当白砂糖的浓度为 35 g /L时,对根的生长有促
进作用;随着白砂糖浓度的增加,组培苗的长势减弱,
且增殖系数也降低。所以选择白砂糖浓度 30 g /L来进
行增殖培养。
3 讨论
植物生长调节物质是培养基中非常关键的物质,
用量虽少,但其在组织培养中起着重要和明显的调节
作用,是影响组培快繁的重要因素[2 - 5]。增殖培养是
植物组织培养中快速繁殖的关键,培养基中不同激素
42 江 西 农 业 学 报 25 卷
浓度配比对芽分化时间和芽增殖系数的影响起决定性
作用,适宜的激素组合可以使芽的增殖系数达到最高。
不同植物对激素的敏感度不同,对于本研究的两种球
花报春而言,6 - BA、NAA和 KT的适宜浓度都偏低,而
且 KT对滇海水仙花的增殖作用不大,导致其节距过
大。对于滇北球花报春,KT 能够起到加快增殖的作
用,并且没有发现节距增大的现象。
表 2 不同激素配比对滇海水仙花增殖的影响
6 - BA + NAA /(mg /L) KT /(mg /L) 接种数 /块 新芽数 /个 增殖系数 植株及新芽生长情况
0. 0 + 0. 0 0 30 70 2. 33 长势良好,丛芽增殖很少,丛芽增殖不明显,生长慢。
0. 1 + 0. 0 0 30 95 3. 17 长势良好,丛芽增殖不明显,植株纤细。
0. 1 + 0. 1 0 30 185 6. 17 长势良好,丛芽增殖较多,植株较纤细,生长较慢。
0. 1 + 0. 2 0 30 168 5. 60 长势良好,丛芽增殖较快,叶片微黄,生长较慢。
0. 1 + 0. 3 0 30 160 5. 33 长势一般,丛芽增殖较快,叶片微黄,生长较慢。
0. 2 + 0. 0 0 30 102 3. 40 长势一般,丛芽增殖慢。
0. 2 + 0. 1 0 30 155 5. 17 长势好,丛芽增殖多,幼苗粗壮,叶片翠绿。
0. 2 + 0. 2 0 30 146 4. 87 长势较好,幼苗粗壮,叶片微黄。
0. 2 + 0. 3 0 30 112 3. 73 长势较好,叶片微黄,生长慢,有愈伤。
0. 3 + 0. 0 0 30 88 2. 93 长势一般,丛芽增殖慢,有畸形芽,有愈伤。
0. 3 + 0. 1 0 30 144 4. 80 长势一般,丛芽增殖多且慢,有畸形芽。
0. 3 + 0. 2 0 30 123 4. 10 长势一般,植株较粗壮,叶片微黄,丛芽较多。
0. 3 + 0. 3 0 30 114 3. 80 长势一般,植株较粗壮,丛芽增殖较多且慢,叶微黄。
0. 1 + 0. 1 0. 1 30 133 4. 43 长势好,丛芽增殖较多且快,叶片翠绿,节距较大。
0. 1 + 0. 2 0. 1 30 118 3. 93 长势良好,丛芽增殖多,叶微黄,节距较大。
0. 1 + 0. 3 0. 1 30 106 3. 53 长势良好,丛芽增殖多,叶微黄,节距较大。
0. 2 + 0. 1 0. 1 30 137 4. 57 长势良好,丛生芽较多,节距较大。
0. 2 + 0. 2 0. 1 30 133 4. 43 长势一般,丛芽较多,叶微黄,有愈伤。
0. 2 + 0. 3 0. 1 30 116 3. 87 长势一般,叶黄化,节距较大,有愈伤。
0. 3 + 0. 1 0. 1 30 127 4. 23 长势一般,叶微黄,节距较大,有愈伤。
0. 3 + 0. 2 0. 1 30 121 4. 03 长势一般,叶黄化,芽畸形较严重,节距较大。
0. 3 + 0. 3 0. 1 30 113 3. 77 长势差,叶较黄,芽畸形严重,节距较大。
0. 1 + 0. 1 0. 2 30 117 3. 90 长势较弱,丛芽较少,叶微黄,节距较大。
0. 1 + 0. 2 0. 2 30 106 3. 53 长势较弱,丛芽较少,叶微黄,节距较大。
0. 1 + 0. 3 0. 2 30 99 3. 30 长势差,叶枯黄,节距较大,有愈伤。
0. 2 + 0. 1 0. 2 30 128 4. 27 长势差,叶黄化,节距大,有愈伤。
0. 2 + 0. 2 0. 2 30 121 4. 03 长势较弱,丛芽较少,叶微黄,节距大。
0. 2 + 0. 3 0. 2 30 114 3. 80 长势较弱,叶黄化,节距大,有愈伤。
0. 3 + 0. 1 0. 2 30 109 3. 63 长势差,叶微黄,节距大,有畸形芽。
0. 3 + 0. 2 0. 2 30 101 3. 37 长势差,叶黄化,节距大,芽畸形严重。
0. 3 + 0. 3 0. 2 30 87 2. 90 长势差,叶黄化,节距大,芽畸形严重。
图 2 滇海水仙花的丛生芽
从降低生产成本的角度考虑,在本文两种球花报
春试管苗的增殖培养中以 30 g /L白砂糖为培养基碳源
是可行的,既可降低培养基的配制成本,又不影响芽的
增殖效果,有利于这两种球花报春试管苗的商业化生
产。这与沈宁东等[6]对满天星茎尖试管苗的继代培养
基研究结果一致。
表 3 不同的白砂糖浓度对滇北球花报春增殖的影响
白砂糖 /
(g /L)
接种数 /

增殖
系数
植株生长情况
25 30 4. 3 叶片较纤细,增殖芽较多。
30 30 4. 7 长势好,粗壮,增殖芽多。
35 30 3. 6 长势较好,有根且根茎粗壮。
40 30 3. 3 长势弱,有枯黄叶片,有些畸形。
表 4 不同的白砂糖浓度对滇海水仙花增殖的影响
白砂糖 /
(g /L)
接种数 /

增殖
系数
植株生长情况
25 30 4. 3 叶片纤细,增殖芽较少。
30 30 4. 7 长势好,粗壮,增殖芽多。
35 30 3. 6 长势较好,有根且根茎粗壮。
40 30 3. 3 长势弱,有枯黄叶片,有些畸形。
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523 期 张超等:不同培养基成分对两种球花报春继代培养的影响
等因素的影响。胸径较小的树种比胸径大的树种受灾
比例高,树高大的杉木受灾大于树高小的杉木,海拔高
的杉木受灾程度大于低海拔的杉木。另外,杉木林大
多数为人工纯林,且密度过大,树木为争夺阳光其高生
长较快,冠幅较小,形成高、径、冠比例失调,稍部木质
化程度低,当树冠积雪达到一定重量时树木之间由于
互相挤压易形成大面积倒伏和折梢[15]。
受灾杉木人工林的恢复重建技术主要有林地清理
和补植、密度调整和病虫害防治等,针对不同的受灾方
式,进行不同的恢复措施,都得到了一定的成效。林地
清理主要是清除林地中倒伏和折断的树木,并进行补
植补造,大力营建混交林。同时,将密度较大的林分进
行疏伐间伐,将密度调整到合理的范围内,并进行病虫
害防治,以提高森林抵抗自然灾害的能力,提高林地生
产力,改善森林的健康状况。
2011 年,对 2008 年中进行受灾调查的杉木人工林
进行森林健康评估,10 个小班中,其中 7 个样方的生态
系统健康评估指数≥11. 0,属于健康状态,这些样方树
木生长较快,生物多样性较高,杉木林的群落结构较
好,干扰程度较小,提供的服务功能较高;另外 3 个样
方处于较健康状态,与健康样方相比,这 3 个样方的杉
木林的生产力较低,结构层次不太明显,受外界干扰较
大,提供的服务功能相对较低。说明冰雪灾害后,对杉
木林进行的恢复重建技术措施是可行的。本文所使用
的 LY /T 1952 - 2011 中的森林生态系统健康评估方
法,包括生产力指标、结构指标、干扰指标和服务功能
指标 4 方面的 30 个小指标,指标体系全面,可以真实
的反映森林生态系统的健康状况。通过在大岗山的实
施,可以看出大岗山冰冻雨雪灾害后经过恢复和重建
的杉木人工林生态系统均处于健康和较健康状况,可
以认为对杉木人工林进行的恢复技术措施是可行的。
总之,本研究通过对 2008 年受冰雪灾害的杉木人
工林进行调查,分析了影响杉木人工林受灾程度的因
素,并对受灾杉木人工林实施了灾后恢复重建。2011
年,对其森林健康状况进行了评估,为杉木人工林的健
康经营提供指导。
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(责任编辑:周 军
櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗
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(责任编辑:黄荣华)
923 期 薛沛沛等:大岗山杉木人工林生态系统冰冻雨雪灾害后健康经营研究