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麦蓝菜离体再生体系的建立



全 文 :2008.10试验研究
2.2生育期
从表2可知,不同移栽密度对甬优 6号的生育
期没有影响,播始历期为95 d,播种至齐穗100 d,播
种至成熟156 d。
2.3经济性状
从表 3可知,随着移栽密度的增大,有效穗随之
增加,穗型随之变小;而结实率和千粒重却变化不大。
根据田间观察与主要经济性状考查认为,移栽过稀,
表3 不同移栽密度对甬优6号主要经济性状的影响
移栽密度(万丛/hm2) 有效穗(万/hm2) 每穗总粒(粒) 每穗实粒(粒) 结实率(%) 千粒重(g) 理论产量(㎏/hm2)
11.25 123.75 433.4 405.2 93.5 23.6 11833.87
14.06 137.70 414.6 389.0 93.8 23.4 12534.28
16.07 146.10 376.4 350.6 93.1 23.4 11986.10
18.75 150.00 361.3 340.1 94.1 23.2 11835.48
会导致穗数不足,虽然穗型大,但产量不高,如移栽
密度11.25万丛/hm2的处理,穗型最大,但穗数少,最
终影响产量。
3 小结与讨论
本试验表明,在本试验的设计范围内,甬优 6号
移栽密度过大,有效穗虽然增加,但穗型变小,产量
不高;移栽密度过稀,又会导致穗数不足,穗型虽大,
产量也不高。一般移栽密度以 14.06万~16.07万丛/
hm2为宜,早移栽、肥力水平高的田块移栽密度稀些,
迟移栽、肥力水平差的田块移栽密度密些。经过近两
年的示范及大面积推广表明,试验提出的移栽密度
表现为高产稳产。
麦蓝菜(Vaccaria segetalis (Necr.) Gracke)属石竹
科草本植物。它资源丰富,主产于河北、山东、辽宁、
黑龙江等地,以河北产量最大。据本草记载,麦蓝菜
的药用部位多系根、茎、叶、花与种子并用,而目前则
用种子。其成熟种子王不留行对行血通经,催生下
乳,消肿敛疮;妇女闭经,乳汁不通,难产,血淋,痈
肿,金疮出血等有很大效用。对麦蓝菜的研究主要集
摘要:以麦蓝菜的干燥成熟种子为材料建立麦蓝菜的离体再生体系。结果表明:种子发芽培养基为
MS,麦蓝菜继代增殖最适培养基为:MS+6- BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,平均增殖系数达到 3.0,平
均苗高达3.2cm;生根最适培养基为:1/2MS+NAA0.10mg/L,生根数为4~6条,生根率达到100%。
关键词:麦蓝菜;增殖;生根
Construction ofRegeneration System in vitro ofVaccaria segetalis (Necr.) Gracke
XIAOLi-jie, WANGLi-yan, JINGRui-yong
(HeilongjiangAugust First Land Reclamation University, Daqing, 163319)
Abstract: The dry and matural seed of Vaccaria segetalis as meterials, the regeneration system of Vac-
caria segetalis was constructed. The results showed that medium of bud induced is MS, the optimal
mediumofregeneration ofVaccaria segetalis is MS+6-BA2.0 mg/L+ NAA0.2mg/L, The average coef-
ficient ofregeneration reached to3.0. the average height ofseedingget to3.2cm, the optimal mediumof
rootingis 1/2MS+NAA0.10mg/L, the count ofrootingget to4-6. the ratioofrootingreach to100%.
Key words: Vaccaria segetalis;Regeneration; Rooting
麦蓝菜离体再生体系的建立
肖莉杰 王丽艳 荆瑞勇
(黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院 大庆 163319)
基金项目:黑龙江八一农垦大学硕士启动基金
作者简介:肖莉杰(1977-),女,讲师,硕士研究生,主要从事植
物基因工程的研究工作。
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试验研究 2008.10
中于对其种子王不留行药效中的有效成分和中药配
伍方面的研究,有关于麦蓝菜的组织培养国内鲜有
报道。本试验探讨麦蓝菜的组培技术,为优良品种的
选育及快速繁殖奠定基础。
1 试验材料与方法
1.1试验材料
王不留行,购于安国市北方药材种子经销站。
1.2消毒方法
取饱满的王不留行放在超净工作台中灭过菌的
空三角瓶中,先用0.1%的升汞溶液消毒 10~15min,
再用75%的酒精消毒 1~2min,最后再用无菌水冲洗
5~6次,备用。
1.3培养基及试验设计
基本培养基为MS、1/2MS,并依实验目的的要求
添加不同浓度配比的激素,激素的种类为BA、NAA、
IAA。
王不留行发芽培养基:MS。
继代增殖培养基:根据在万能培养基 MS+BA1.0
mg/L+NAA0.1 mg/L中的生长情况,确定出在 MS附
加 BA1.0,2.0,3.0mg/L;NAA0.1,0.2,0.5mg/L;采用二
因素完全随机设计进行最适激素配比的筛选 (见表
1),共9个处理组合,每个处理接3株无菌苗,重复3
次。
生根培养基:在 1/2MS培养基中分别附加
0.01, .05, .10,0.20mg/LIAA。
1.4培养条件
所有培养基皆以浓度为 0.7%的卡拉胶固化,含
蔗糖均为3%,在高压灭菌前将pH值调至5.8,温度为
25±2℃。光照1500~2000lx,每日光照时数12~14h。
2 试验结果与分析
2.1王不留行发芽获得无菌苗
将王不留行接种到MS培养基中进行发芽培养,
培养5~10d内进行观察统计发芽情况。观察统计发
现,当培养10d时,发芽率达到了100%,并且无菌苗
长势良好。
2.2继代增殖培养
将种子发芽得到的无菌苗接种到表 1的处理组
合中,接种 7d左右,无菌苗切口处开始膨大长出愈
伤组织,随着愈伤组织的生长,15d左右无菌苗开始
分化,愈伤组织的生长与组培苗的分化是同步进行
的,30d时对其进行相关数据的统计分析,结果见表
1。
从表1可见,激素是诱导组培苗增殖的关键物
质,对培养的成败起着决定性的作用。其中以2.0+0.2
这一组合平均增殖系数最高达到 3.0,平均苗高达
3.2cm,其它组合虽然苗的高度有的比这一组合高,但
对于增殖培养来说增殖系数是最主要因素,因此筛
选出最适继代增殖培养基为:MS+6-BA2.0mg/L+
NAA0.2mg/L。30d继代1次,继代增殖情况(见图1)。
2.3生根培养
选择继代培养后生长健壮的试管苗,将其分成
单株,分别接种到生根培养基上培养,20d后观察并
统计结果。
从表 2可见,NAA的浓度以 0.05mg/L为最佳,
可长出 4~6条根,生根率达到 100%,从而筛选出最
适生根培养基为:1/2MS+NAA0.10mg/L。
3 结论
麦蓝菜继代增殖最适培养基为:MS+6-BA2.0mg/
L+NAA0.2mg/L,平均增殖系数达到3.0,平均苗高达
3.2cm;生根最适培养基为:1/2MS+IAA0.05mg/L,生根
数为4~6条,生根率达到100%。
参考文献:
[1]李帆,梁敬钰.王不留行的研究进展[J].海峡药学,2007,19(3):
1~4
[2]贲爱玲,蔡小宁,任源浩,等.中药王不留行的组织培养技术
初探.南京晓庄学院学报, 2006年,11(6):53~56
表1 不同激素配比对组培苗继代增殖培养的影响
BA+NAA
(mg/L)
接种数
(株)
平均增殖系数
平均苗高
(cm)
1.0+0.1 9 1.0 3.0
1.0+0.2 9 1.5 3.2
1.0+0.5 9 1.8 3.3
2.0+0.1 9 2.0 3.1
2.0+0.2 9 3.0 3.2
2.0+0.5 9 2.4 3.5
3.0+0.1 9 1.3 2.4
3.0+0.2 9 1.6 2.5
3.0+0.5 9 2.2 3.4
表2生长素对组培苗生根的影响
IAA(mg/L) 根数(条) 生根率(%)
0.01 无 0
0.05 2~3 75
0.10 4~6 100
0.20 3~5 90
图1 继代增殖情况
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