全 文 ：收稿日期:2010-02-02;　修订日期:2010-06-26
基金项目:广西壮族自治区科学研究与技术开发计划项目(No.0630002-3;
No.0718002-2;No.0992003B-30)
作者简介:李永华(1964-),男(汉族),广西岑溪人 ,现为华中科技大学同济
医学院药学院博士研究生 ,硕士学位 ,主要从事天然药物开发研究工作.
＊通讯作者简介:阮金兰(1952-), 男(汉族),湖北当阳人 , 现任华中科技
大学同济医学院药学院教授 ,博士研究生导师 ,主要从事天然药物化学研
究工作.
广寄生和红花寄生及其寄主植物
与黄酮含量的相关性研究
李永华 1, 2, 3 , 陈士林2 ,卢　栋 1, 3 ,朱开昕3 ,赵明惠 3 ,裴河欢3 ,阮金兰 1＊
(1.华中科技大学同济医学院药学院 ,湖北 武汉 430030;　
2.中国医学科学院药用植物研究所 ,北京　100193;3.钦州市中医药研究所 ,广西 钦州　535000)
摘要:目的 考察广寄生与红花寄生及其寄主植物的总黄酮含量的关系。方法 采用分光光度法测定寄生在 4种不同寄
主植物上的广寄生与红花寄生的总黄酮含量 ,并用正交实验的方法研究比较了不同提取条件对广寄生样品总黄酮提取
率的影响。结果 广寄生茎枝的总黄酮含量为 5.24 ～ 5.56 mg/g,广寄生叶的总黄酮含量为 27.14 ～ 32.08 mg/g;红花寄
生茎枝的总黄酮含量为 3.70 ～ 5.00 mg/g,红花寄生叶的总黄酮含量为 33.87 ～ 35.00 mg/g。 正交实验结果优选的提取
条件茎枝是 A
1
B
2
C
2
D
3
, 即广寄生茎枝 0.5 g,乙醇浓度为 60%, 超声提取时间为 30min,超声提取温度为 45℃,料液比 1∶
25;叶是 A2B1C2D3 , 即广寄生叶 0.5 g, 乙醇浓度为 70%, 超声提取时间为 20 min, 超声提取温度为 45℃,料液比 1∶25。
结论 无论是广寄生还是红花寄生叶的总黄酮含量高于茎枝的总黄酮含量 , 寄生在同一寄主植物上广寄生茎枝的总黄酮
含量要比红花寄生茎枝的总黄酮含量高 ,而红花寄生叶的总黄酮含量要比广寄生叶的总黄酮含量高。优选的提取方法
稳定 、可靠 、简捷 , 提取效率高。
关键词:桑寄生;　广寄生;　红花寄生;　寄主;　总黄酮
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.11.050
中图分类号:R284.2　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2010)11-2830-02
　　桑寄生是中国传统常用中药材 , 《中国药典 》桑寄生药材为
桑寄生科钝果寄生属广寄生 Taxilluschinensis(DC.)Danser的干
燥带叶茎枝 [ 1] , 但由于桑寄生沿用历史的原因 , 目前桑寄生药材
原植物来源依然十分复杂 ,除了广寄生外 , 至少还包括有桑寄生
Taxilussutchuenensi(Lecomte)Danser、红花寄生 Scurrulaparasitica
L.、毛叶钝果寄生 Taxillusnigrans(Hance)Danser、柳叶钝果寄生
Taxilusdelavayi(VanTiegh.)Danser等 , 在药材流通与使用上都
作桑寄生使用 [ 2] 。不同寄主植物的同一种桑寄生药材化学成分
含量已见文献报道 [ 3] , 而生长于相同寄主植物的不同桑寄生药
材品种的化学成分含量及其含量的差异性研究目前尚未见报道。
本文通过对来自相同寄主植物上广寄生和红花寄生总黄酮含量
进行检测与比对分析 ,考察桑寄生品种及其寄主植物与桑寄生总
黄酮含量的关系 , 为桑寄生药材的科学使用提供理论依据。
1　仪器与材料
1.1 　仪器与试剂 岛津 UV- 265FW分光光度计;KQ-2200E
超声波清洗仪(江苏昆山超声仪器有限公司);芦丁对照品(中国
药品生物制品检定所 , 供含量测定用 ,批号为 100080- 200306);
所用试剂均为分析纯 。
1.2 　药材 桑寄生药材样品分别采自广西南宁 、钦州等地 ,经广
西中医学院邓家刚教授鉴定分别为广寄生 Taxiluschinensis
(DC.)Danser和红花寄生 ScurrulaparasiticaL.,寄主植物分别为
桑树 MorusalbaL.、板栗 CastaneamollissimaBlume、夹竹桃 Neri-
umindicumMil、梅 Prunusmume(Sieb.)Sieb.etZucc.等 ,将采集
桑寄生药材样品清洗干燥茎叶分开粉碎(60目)后备用。
2 　方法与结果
2.1 　显色方法与检测波长确定 参考有关文献采用三氯化铝
比色法进行测定 [ 4, 5] 。以一定浓度的乙醇为溶剂 , 以三氯化铝为
显色剂 ,对对照品溶液与样品溶液依法显色后 , 按紫外 -可见分
光光度法(《中国药典》 2005年版Ⅰ部附录)在 200 ～ 600nm波长
范围内扫描 ,测得对照品与样品的最大吸收波长为 408nm左右。
2.2　标准曲线的制备 精确称取 105℃干燥至恒重的芦丁对照
品 5.03 mg,置 10 ml容量瓶中 , 加少量 60%乙醇溶解后定容至刻
度。精确吸取 5 ml于 10 ml容量瓶中 , 加 60%乙醇稀释至刻度 ,
制成 0.25 mg/ml的标准液。精确吸取标准液 0, 0.1, 0.2, 0.4,
0.6, 0.8, 1.0 ml,加 60%乙醇稀释至 1.0 ml,加 0.1mol/L的三氯
化铝溶液 2 ml, 0.1 M的醋酸钠溶液 1 ml, 摇匀 , 室温放置 20
min,在波长 408 nm测吸收度。以吸收度 A对浓度 C作标准曲
线 , 回归方程为 A=0.246 6C-0.004 4, r为 0.999 8, 表明在
0.006 3 ～ 0.063 mg/ml之间呈良好的线性关系。
2.3　总黄酮提取工艺设计 采用广寄生样品进行正交实验 , 选
择乙醇浓度(A)、提取时间(B)、提取温度(C)、料液比(D)为实
验因素 。因素水平见表 1, 实验结果见表 2。
表 1　提取工艺参数设计
水平 A乙醇浓度(%) B提取时间t/min C提取温度 T/℃ D料液比
1 60 20 35 1∶15
2 70 30 45 1∶20
3 80 40 55 1∶25
通过正交实验和数据处理发现, 影响广寄生茎枝总黄酮提取
率的因素主次顺序为 A>B>C>D,最佳提取条件为 A
1
B
2
C
2
D
3
,即
乙醇浓度为 60%,超声提取时间为 30min, 超声提取温度为 45℃,
料液比 1∶25;影响广寄生叶总黄酮提取率的因素主次顺序为 A>
D>C>B,最佳提取条件为 A
2
B
1
C
2
D
3
,即乙醇浓度为 70%, 超声提
取时间为 20min, 超声提取温度为 45℃,料液比 1∶25。
2.4　稳定性实验 精确吸取样品溶液 2 ml,依法显色 20 min后
至 100 min内 , 在波长 408 nm,每隔 10 min测定一次吸收度 。结
果表明:显色后室温放置 20 ～ 100 min内 , 其吸收度稳定 , RSD为
1.89%。
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.11
2.5 　精密度实验 精确吸取样品溶液 2 ml,依法显色 20min后 ,在
波长 41nm,重复测定 6次 , RSD为 0.66%,表明仪器的精密度好。
表 2　L9(43)提取工艺条件正交试验结果
实验号 因素A B C D
总黄酮含量 C/mg· g-1
茎枝 叶
1 1 1 1 1 5.89 29.57
2 1 2 2 2 6.54 30.62
3 1 3 3 3 6.28 31.03
4 2 1 2 3 5.24 31.68
5 2 2 3 1 5.48 30.46
6 2 3 1 2 5.08 30.14
7 3 1 3 2 4.18 29.49
8 3 2 1 3 4.43 29.41
9 3 3 2 1 4.51 29.33
茎枝-K1 18.71 15.31 15.40 15.88茎枝-K
2 15.80 16.45 16.29 15.80茎枝-K3 13.12 15.87 15.94 15.95
茎枝 -R 1.86 0.38 0.30 0.05
叶 -K1 91.22 90.74 89.12 89.36叶 -K2 92.28 90.49 91.63 90.25叶 -K3 88.23 90.50 90.98 92.12叶 -R 1.35 0.08 0.84 0.92
　　表中总黄酮的测定数据为提取 3批样品的平均值
2.6　重复性实验 精确吸取 6份芦丁标准溶液各 1.0 ml, 依法显
色后 , 测定吸收度 , RSD为 1.37%, 表明本方法的重复性好。
2.7 　加样回收率实验 精确称取已知含量的样品 0.5g, 5份 ,分
别加入一定量的芦丁对照品 ,依法测定含量 , 计算回收率。结果
见表 3。
表 3　加样回收率实验结果
样品 样品中总黄酮含量m/mg
对照品加
入量 m/mg
总黄酮测
得量 m/mg
回收率
(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
广寄生茎枝 2.62 2.51 5.02 95.80
2.60 2.50 5.09 99.62
2.65 2.52 5.13 98.50 98.32 1.70
2.59 2.49 5.03 98.07
2.60 2.49 5.08 99.62
广寄生叶 12.40 2.50 14.81 96.40
12.45 2.48 14.89 98.39
12.38 2.49 14.74 94.78 97.04 1.51
12.51 2.51 14.95 97.61
12.39 2.52 14.86 98.02
红花寄生茎枝 2.04 2.51 4.41 93.14
2.03 2.51 4.50 98.03
2.04 2.49 4.39 96.14 95.96 2.10
2.01 2.48 4.36 93.53
2.02 2.48 4.40 95.05
红花寄生叶 17.10 2.48 19.43 93.95
17.12 2.50 19.60 99.2
17.12 2.52 19.60 98.41 96.56 2.42
17.12 2.51 19.55 96.81
17.11 2.51 19.48 94.42
2.8 　样品制备与测定 分别称取不同寄主的广寄生和红花寄
生茎枝 、叶各 0.5g, 按照茎枝 、叶的最佳提取条件进行提取 ,每个
样品提取 2次 , 每次乙醇用量为 12.5 ml,离心分离 , 合并提取液 ,
提取液用石油醚萃取 3次除去其它色素 ,用相同浓度的乙醇定容
至 25ml。精密吸取样品液 0.5 ml, 依法显色测吸收度用标准曲
线计算样品总黄酮含量 , 每个样品重复 3次试验 , 取平均值。 结
果见表 4。
表 4　同一寄主植物上的广寄生与红花寄生的总黄酮含量比较
mg· g-1
寄主植物 广寄生总黄酮含量茎枝 叶
红花寄生总黄酮含量
茎枝 叶
桑 MorusalbaL. 5.54 24.82 4.06 34.22
板栗 CastaneamolisimaBlume 5.24 27.14 3.70 33.87
梅 Prunusmume
(Sieb.)Sieb.etzucc. 5.56 27.38 3.86 34.76
夹竹桃 NeriumindicumMil 5.32 32.08 5.00 35.00
3　讨论
试验结果表明 , 4种不同寄主植物无论是广寄生还是红花寄
生其总黄酮含量均表现出一定的差异性 ,广寄生茎枝总黄酮含量
为 5.24 ～ 5.56 mg/g,叶总黄酮含量为 27.14 ～ 32.08 mg/g;红花
寄生茎枝的总黄酮含量为 3.70 ～ 5.00 mg/g,红花寄生叶的总黄
酮含量为 33.87 ～ 35.00 mg/g。总体看叶的总黄酮含量比茎枝的
总黄酮含量要高 ,其中广寄生叶的总黄酮含量比其茎枝高出 4倍
以上 , 红花寄生叶总黄酮含量比其茎枝高出 7倍以上。因此在入
药时 , 需注意药材的茎和叶一起入药 ,此点与药典中对桑寄生的
定义为 “带叶茎枝”相符。
寄生在同一寄主植物上 ,广寄生茎枝的总黄酮含量要比红花
寄生茎枝的总黄酮含量高 ,而红花寄生叶的总黄酮含量要比广寄
生叶的总黄酮含量高。
参考文献:
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2005:210.
[ 2 ] 　龚祝南 ,王铮涛 ,徐珞珊 ,等.中国桑寄生科 Loranthaceae药用植物
研究 [ J] .中国野生植物资源 , 1996, (1):11.
[ 3 ] 　李永华 ,陈士林 ,卢　栋 ,等.不同寄主植物桑寄生总黄酮含量研究
[ J] .时珍国医国药 , 2009, 20(12):3009.
[ 4 ] 　马陶陶 ,张群林 ,李　俊 ,等.三氯化铝比色法测定中药总黄酮方
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[ 5 ] 　何书美 ,刘敬兰.茶叶中总黄酮含量测定方法的研究 [ J] .分析化
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