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土壤干旱对滇楸幼苗生理特性的影响



全 文 :·园林花卉·植物 北方园艺2013(23):92~95
第一作者简介:杨自云(1982-),男,云南昆明人,本科,助理实验
师,研究方向为园林植物。E-mail:273425055@qq.com.
责任作者:李太兵(1979-),男,四川南充人,本科,工程师,研究方
向为园林植物与规划设计。E-mail:litaibing2006@126.com.
基金项目:“省部级重点学科、省高校重点实验室及校实验室共享
平台”资助项目;云南省应用基础面上资助项目(2010ZC267)。
收稿日期:2013-06-19
土壤干旱对滇楸幼苗生理特性的影响
杨 自 云1,姜 永 雷1,蔡 云 聪1,李 太 兵2
(1.西南林业大学 园林学院,云南 昆明650224;2.四川省林业调查规划院,四川 成都610081)
  摘 要:以滇楸为试材,100%田间持水量为对照,采用大棚内盆栽法,研究了干旱胁迫(70%
田间持水量)对其生理指标变化的影响,以揭示滇楸幼苗在干旱胁迫下的生理生态特性和适应
性。结果表明:叶片的相对含水量、叶绿素a含量、总叶绿素含量、叶绿素a/叶绿素b在干旱胁迫
下显著降低,而类胡萝卜素含量、叶绿素b含量无显著变化;可溶性蛋白质含量、游离脯氨酸含
量、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性显著高于对照,超氧化物歧化酶活性极显著高于对照。这
些生理指标的变化是滇楸幼苗抵御干旱胁迫的一种积极响应,在干旱胁迫条件下,植株叶片内可
溶性蛋白质含量、游离脯氨酸含量及抗氧化酶活性增加,说明滇楸能通过渗透调节系统及抗氧化
酶系统来抵御干旱胁迫。
关键词:滇楸;干旱胁迫;生理特性;抗氧化酶
中图分类号:S 792.99 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2013)23-0092-04
  滇楸(Catalpafargesi Bur.f.duclouxi)属紫葳科
梓树属落叶乔木,喜光,喜温暖湿润,适生于年平均气温
    
10~15℃、年降水量700~1 200mm的气候。
植物的生长发育常遭受生物和非生物胁迫,其中
光、干旱、盐、温度是限制植物生长最主要的胁迫因素,
干旱造成的损失最大,其损失量超过其它逆境造成损失
的总和[1]。很多被子植物对水分胁迫的生理、生态和生
化响应已相继报道,尤其是农作物、经济林木以及部分
森林建群的抗旱机理[2-5]。
该试验通过控制水分的方法对原生长状况基本相
同的2a生滇楸实生苗进行干旱处理,研究干旱胁迫对
    
Study on Blossom Biology of Wild Lilium pumilum
MA Jian-qin1,GUO Tai-jun1,CHEN Shao-peng2,ZHAO Ren-lin2
(1.Colege of Horticulture,Jilin Agricultural University,Changchun,Jilin 130118;2.Jilin Institute of Forestry Science,Jilin,Jilin 132013)
Abstract:Taking wild Lilium pumilum as test material,through the field observation and artificial polination test
method,a comprehensive system of reproductive ecology aspects on blossom biology and breeding system of wild Lilium
pumilumwere researched,to provide theoretical basis for reasonable development and utilization in exsitu conservation,
propagation cultivation,cross breeding,and so on.The results showed that L.pumilumbloom from early June to mid
June,group flowering about 15d,single flowers flowering about 5~7d,polen in the flowering stage had vitality,and
could be stored at 4℃for 40d,receptivity of stigma was the best after flowering 1~3d.Polen-ovule ratio(P/O)
between 3 051~12 857,hybrid index(OCI)was 5,breed system of L.pumilumwas outcross type.Artificial polination
and natural seed setting rate were significantly higher than self polination and geitonogamy setting rate,and artificial
diferent strains cross-polination seed setting rate was obviously higher than that of the natural seed setting rate,
indicating there existed polination restrictions,need polination media for their polination.Field observation showed that
L.pumilumhad insect visit flowers,belonged to insect polination.
Key words:Lilium pumilum;flowering biology;breeding system;polen viability;stigma receptivity
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北方园艺2013(23):92~95 植物·园林花卉·
滇楸幼苗生理生化的响应机制,探究滇楸植株对干旱的
抗性生理,为人工栽培滇楸的管理提供理论依据,及其
在干旱的西南地区推广应用提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验材料为2a生滇楸实生苗,选取生长一致的健
壮苗木于2012年6月底移栽到塑料盆中,以红土+珍珠
岩+腐殖土(3∶3∶2)为混合基质。试验大棚内白天温
度范围为20~30℃,夜间温度范围为9~18℃,相对湿度
为35%~80%。
1.2 试验方法
采用水分处理方法,测定土壤的最大田间持水量
(FC),用隔天称重法进行水分控制。试验设干旱处理组
(DS)为70%FC;良好水分组(即对照组,WW)为100%
FC。每组5盆,每盆1株,重复3次,共处理75d。待处
理完成后,采集每株从上到下的第3~5片完全展开的
叶作为生理生化指标的测定样品。
1.3 项目测定
叶相对含水量(RWC)=(FW-DW)/(TW-
DW)×100%,FW为鲜重,TW为饱和重(在去离子水
中浸泡24h),DW为干重(在80℃下烘48h至恒重)。
叶绿素含量测定参照Inskeep等[6]方法,称取0.1g
植物叶片,用冷的二甲基甲酰胺暗中4℃下浸提48h,于
663.8nm和646.8nm下比色。计算单位叶鲜重的叶绿
素a(Chl a)含量、叶绿素b(Chl b)含量。胡萝卜素(Car)
含量测定参考Arnon[7]的方法;可溶性蛋白质含量的测
定参照Bradford等[8]的方法;可溶性糖含量的测定参照
Renaut等[9]的方法;游离脯氨酸的测定采用Bate[10]的
方法。
抗氧化酶活性的测定:取约0.2g材料于3mL提
取缓冲溶液(50mM Na2HPO4-NaH2PO4 缓冲液,pH
7.0,含1mM EDTA,0.05%(V/V)Triton X-100,2%
(W/V)不溶性聚乙烯吡咯烷酮)中研磨成匀浆。经过
10 000r/min离心20min,取上清液进行酶活性测定。
过氧化物酶(POD)活性测定参考Lin等[11]的方法,用愈
创木酚被H2O2氧化来测定POD酶活。根据消光系数
(26.6mM-1·cm-1),计算酶活性。超氧化物岐化酶
(SOD)活性测定:参照Giannopolitis等[12]的方法,利用
SOD抑制氮蓝四唑(NBT)在光下被O2 还原的反应,在
波长560nm处,检测吸光光度值。SOD活性以每1mg
蛋白抑制NBT光化还原的50%为1个酶活性单位(U)。
过氧化氢酶(CAT):参考Aebi[13]的方法。反应液中加入
3mL 50mM磷酸缓冲液(pH 7.0),1mL 10mM H2O2
和80μL的酶液,在240nm处测定其吸光度值在2min
内每2s中变化。根据摩尔消光系数39.4mM-1·cm-1
计算酶活性。
1.4 数据分析
所有数据均利用SPSS 11.5统计分析软件进行一
元方差分析(one-way ANOVA),平均数间的多重比较采
用Ducan’s检验方法。P<0.05时差异显著。
2 结果与分析
2.1 干旱胁迫对植株叶片相对含水量的影响
叶片相对含水量是反映植物体内水分状况的重要
指标。从图1可以看出,干旱胁迫下滇楸植株的叶片相
对含水量降低极为显著,其含量与对照相比下降了
14.5%,说明滇楸幼苗叶片含水量对干旱胁迫较敏感。
图1 干旱胁迫对叶片相对含水量的影响
注:每个值代表5个重复的平均值±标准误。ns,差异不显著;*,
P<0.05;**,P<0.01;***,P<0.001(邓肯氏新复极差法)。下同。
Fig.1 Efect of drought stress on leaf relative water content
Note:Each value represents the mean±SE of five replicates.ns,not
significant;*,P<0.05;**,P<0.01;***,P<0.001(Duncan’s multiple
range test).The same below.
2.2 干旱胁迫对叶片光合色素含量的影响
叶绿素是植物光合作用中一类重要的光合色素,其
含量在一定程度上能反映出植株同化物质的能力。从
表1可以看出,干旱胁迫条件下,叶片中的Chl a含量、
Chl b含量、Car含量均有下降趋势,其中只有Chl a含量
显著低于对照,Chl b含量和Car含量与对照差异不显
著。总Chl含量、Chl a/b均显著低于对照,胡萝卜素/总
叶绿素显著高于对照。说明干旱胁迫抑制了滇楸幼苗
的叶绿素的合成,导致光合作用下降。
2.3 干旱胁迫对植株可溶性渗透调节物质的影响
可溶性蛋白质通过主动积累来降低渗透势,是植物
细胞质中的重要渗透调节物质之一。由表2可知,干旱
胁迫下植株叶片可溶性蛋白质含量与对照相比增加了
17.7%,这说明在干旱胁迫下滇楸幼苗通过增加自身可
溶性蛋白质含量来抵御干旱环境的伤害。
脯氨酸具有较强的水合力,它的累积可增加植物的
抗旱或抗渗透胁迫能力。表2中脯氨酸含量均显著高
于对照处理,比对照增加了39.4%。脯氨酸对植株进行
    
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·园林花卉·植物 北方园艺2013(23):92~95
表1 干旱胁迫对叶片光合色素含量的影响
  Table 1 Efect of drought stress on photosynthetic pigments content of leaf
处理
Treatment
叶绿素a含量
Chl a content/mg·g-1
叶绿素b含量
Chl b content/mg·g-1
胡萝卜素含量
Car content/mg·g-1
总叶绿素含量
T Chl content/mg·g-1
叶绿素a/叶绿素b
Chl a/b
胡萝卜素/总叶绿素
Car/T Chl
WW(CK) 1.61±0.09  0.31±0.01  0.49±0.03  1.93±0.09  5.15±0.37  0.25±0.00
DS  1.34±0.16  0.30±0.03  0.45±0.06  1.64±1.89  4.50±0.11  0.27±0.01
P  0.025* 0.436ns  0.328ns  0.035* 0.014* 0.006*
  表2 干旱胁迫对可溶性渗透调节物质的影响
  Table 2 Efect of drought stress on soluble osmotic
adjustment substances
处理
Treatment
可溶性蛋白含量
Soluble protein
content/mg·g-1
可溶性糖含量
Soluble sugar
content/mg·g-1
脯氨酸含量
Proline content
/mg·g-1
WW(CK) 23.33±0.53  671.35±137.51  58.90±6.69
DS  27.45±2.24  594.16±41.56  82.13±14.30
P  0.012* 0.264ns  0.021*
渗透调节、维持细胞膨压、正常的生理功能、增强自身保
水、吸水能力有着很大的作用,说明在干旱胁迫下,滇楸
幼苗通过提高脯氨酸含量应对干旱环境,以维持自身生
命活动的正常进行。而干旱胁迫下植株叶片中的可溶
性糖含量则与对照差异不显著。这可能是在干旱胁迫
下植株体内的能量储存暂时没有受到较大的影响。
2.4 干旱胁迫对叶片抗氧化酶系统的影响
从表3可以看出,在干旱胁迫下抗氧化酶系统内各
指标都为上升趋势。其中SOD活性极显著高于对照。
CAT活性、POD活性显著高于对照。说明滇楸幼苗能
够通过提高以上3种酶的活性来抑制干旱胁迫活性氧
自由基的产生,这是植株对干旱胁迫的一种积极的
响应。
表3 干旱胁迫对抗氧化酶活性的影响
  Table 3 Efect of drought stress on antioxidative enzyme activities
处理
Treatment
超氧化物歧化酶活性
SOD activity/mg·g-1
过氧化氢酶活性
CAT activity/mg·g-1
过氧化物酶活性
POD activity/mg·g-1
WW  62.47±1.42  3.26±0.82  12.68±1.56
DS  75.84±0.47  9.94±3.82  18.49±3.56
P  0.000*** 0.042* 0.031*
3 讨论
植物叶片的相对含水量与植物的光合作用有着密
切的关系,较高的RWC能够很好的保持叶绿体的结构
和PSII的功能,使植物进行有效的光合作用[14]。该试
验中滇楸幼苗的叶片相对含水量在干旱胁迫下呈现下
降趋势,这与光合色素含量降低可能有一定的关系。在
干旱胁迫下滇楸幼苗的光合色素含量显著降低,这在一
定程度上会影响到滇楸幼苗的光合作用。而Chl a含
量、Chl b含量和Car含量是判断植物光合能力的3种主
要色素[15]。滇楸植物叶片中的Chl a含量、Chl b含量、
总叶绿素含量在干旱胁迫下均显著低于对照组。这与
伍泽堂[16]和林植芳等[17]的研究结果一致。试验中Chl
a/b显著低于对照处理,这与艾克拜尔等[18]的研究结果
基本一致,可能是干旱胁迫导致活性氧增加引起的。说
明在干旱胁迫下滇楸幼苗降低叶片中光合色素含量,表
现出较强的适应性。张明生等[19]对甘薯研究发现,干旱
胁迫处理幼苗的Chl a/b比对照下降幅度越大,物种抗
旱性越强。从这个角度来看,滇楸幼苗耐旱性较强。
在干旱胁迫条件下,当土壤含水量下降到一定值时
蛋白质含量会作出相应的变化。干旱胁迫下蛋白质合
成加强,可起到减少干旱胁迫所造成的胁变、分散胁迫
作用,使作物对逆境的敏感性减弱[20],该试验可溶性蛋
白质含量在干旱胁迫条件下显著高于对照,与前人研究
的一致[21]。可溶性糖含量与对照差异不显著,说明滇楸
幼苗通过可溶性渗透调节物质的增加来抵抗逆境胁迫
的能力在干旱胁迫下较为明显。由于脯氨酸在植物细
胞中主要起渗透调节作用,因此随着脯氨酸含量增加,
可提高细胞溶质含量,增强其渗透调节能力。该试验结
果表明游离脯氨酸含量显著高于对照,其与崔豫川等[22]
的研究结果相似。脯氨酸含量的增加有利于植物体稳
定渗透平衡和保持叶片中的水分,对维持细胞膜的完整
性起重要作用,增加植株对干旱胁迫的抗性。
植物在受到逆境胁迫时产生的活性氧自由基,能够
对植株的细胞膜系统产生伤害。但其抗氧化系统的活
性能够被激发,使活性氧自由基被清除,进而使植物得
以保护。在抗氧化酶系统中POD、CAT和SOD是3种
关键酶,能有效清除植物体内的活性氧自由基和过氧化
物,对恢复植物体内正常代谢有重要作用[22]。因此,该
试验将滇楸幼苗3种保护酶活性的变化作为评价耐旱
性的重要指标。SOD是需氧生物细胞中普遍存在的一
种金属酶,与CAT、POD以及Car等物质协同作用,可防
御活性氧或其它过氧化物自由基对细胞膜系统的伤害,
以减轻逆境盐分胁迫对植物细胞的伤害[23]。在该试验
中,滇楸植株叶片中的SOD活性、POD活性、CAT活性
在干旱胁迫条件下都显著增加,使植株体内的活性氧得
以有效的被清除,降低干旱胁迫造成的伤害。这与李在
军等[24]的研究结果一致。为适应逆境条件,植物体内具
有清除活性氧自由基的酶保护系统。
综上所述,滇楸幼苗在干旱胁迫下,通过提高自身
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北方园艺2013(23):92~95 植物·园林花卉·
可溶性蛋白质含量、脯氨酸含量和抗氧化酶系统的活性
来抵御干旱胁迫。说明滇楸幼苗具有一定的抗旱能力,
可以在西南地区推广栽植。
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Effect of Soil Drought on Physiological Characteristics of
Catalpafargesi Bur.f.duclouxi Seedlings
YANG Zi-yun1,JIANG Yong-lei 1,CAI Yun-cong1,LI Tai-bing2
(1.Colege of Landscape Architecture,Southwest Forestry University,Kunming,Yunnan 650224;2.Sichuan Institute of Forestry,Chengdu,
Sichuan 610081)
Abstract:Taking Catalpafargesi Bur.f.duclouxi seedlings as experiment material,with welwatered(100%FC)as
CK,the efect of drought stress(70%FC)on physiological characterstics of Catalpafargesi Bur.f.duclouxi seedlings
was studied,in order to reveal the physiological and ecological characteristics and adaptability of drought stress.The
results showed that soil drought significantly decreased contents of leaf relative water,chlorophyl a(Chl a)content,total
chlorophyl(T Chl)content and Chl a/b.While the contents of chlorophyl b(Chl b)and carotenoid(Car)content
pigment were not significantly varied;the soluble proteins content,the proline content and CAT activity,as wel as the
POD activity and SOD activity were increased evidently.These results reveal that Catalpafargesi Bur.f.duclouxi
seedlings increased their drought resistance by changing their physiological properties.The drought stress promoted the
soluble proteins content,proline content and improved the antioxidative enzymes activities,which suggested the Catalpa
fargesi seedlings could resist drought stress by improving its antioxidative enzymes activities and osmotic regulation
system.
Key words:drought stress;Catalpafargesi Bur.f.duclouxi;physiological characteristics;antioxidant enzymes
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