全 文 ：第 n卷 第 1 期 丹 东 肪 专 学 报
JOU田口比 OF 肠廿m 0 NG T EX TI L C EOL L EG E
V o l
.
1 1
2 0 04 年 3月 Ma r.
No
.
2 0 0 3
三角叶滨蔡子叶愈伤组织诱导及分化的研究
周晓丽 ’ 刘广平 “
( 1
, 辽东学院 师资部 , 辽宁 丹东 1180 05 ; 2 . 辽宁省经济林研究所 , 辽宁 大连 1 6 038)
摘 要 : 以经过灭菌处理的三角叶滨幕种子为材朴 , 以 毗 和 l 2/ 招招30 或巧 两个浓度组合的培养基为基本培养基 , 附加
不 同浓度的生长素和细鹅分裂素 , 对三角叶滨攀子叶含伤组织的诱导和分化进行了研究 。 获得三角叶滨攀幼苗旺盛生长的培养
基为 12/ MS 加 G15 ; 在附加不同浓度 BA 、 I从 、 I BA 、 NA 、 2 , 4 se D的 璐 培养墓上 , 筛选出诱导子叶金伤组织的最适培养基是
MS + BAZ L/ +2
,
4一 1/ L 。 把禽伤组织接种到附加不 同浓度 工从、 GA 的 MS十BAI L/ 培养基上进行分化培养 , 筛选 出愈伤姐织分化 的
理想培养基是 MS +B 1A / +L I A O . 2/ L玲 2A L/ 。
关健词 : 三角叶淇攀 ; 子叶 ; 惫伤组织 ; 分化 ; 无性系
中图分类号 : 9Q -4 3 3 文献标识码 : A 文章绷号 : 1008一2 174 (20 03 ) 04一0 02 0一 03
三角叶滨蔡 ( At r i p l e x t r i an , l ar i s ) 属于蔡科植物 ,
原产于美国东北部沿海沼泽边缘 , 外形酷似菠菜 , 维生素和
微量元素的含量都比较高 。 同时 , 它还是一种耐盐植物 , 适
合种植于海滩等含盐量高的土地上 , 它的茎叶可作为蔬菜食
用 , 能改善沿海居民的营养结构 。 种子的脂肪含量很高 , 又
可作为油料作物栽培种植 。 目前 , 在我国内地的某些沿海地
区 已有大面积种植 。 另外 , 种植三角叶滨黎还可以改善沿海
地区的土壤和植被 。 在我国人均耕地面积较少的情况下 , 种
植三角叶滨攀可 以开发利用大量的盐碱地 。 几年前南京大学
引进了三角叶滨蔡 , 并在几个沿海地区推广 、 试种 , 取得了
初步的成果 。 在大连沿海海滩引进栽培中 , 发现了附盐性
强 , 长势优良的植株 , 为了保证优良植株的种质 , 我们进行
组织培养的研究 , 以期获得优良植株的无性系 。
l 材料与方法
1
.
1 材料 : 三角叶滨蔡种子 。
1
.
2 方法 : 种子消毒 。 将种子放人 250 毫升磨口广 口瓶 ,
用自来水冲洗 20 ~ 30 耐 n , 再振荡洗涤 3一 5 次 , 然后加人
0
.
0 5%安利洗涤液振荡洗涤 2一3 次 , 再用清水洗涤 2 次 , 转
移到超净工作台上 , 倒人 50 毫升 7以的乙醇振荡灭菌 30 秒
左右 , 用无菌水清洗 1 次并倒出后 , 再用 。 . 0 叽的 Hg cl : 溶
液振荡灭菌 10 哑 n 。 接着 , 用无菌水振荡清洗 5 次后 , 倒净
无菌水 , 盖压瓶盖 , 放置 12 h , 接着 , 再倒人 0 . 0 流的
H邪1: 溶液振荡灭菌 5毗n , 用无菌水振荡洗涤 5 次 , 即可获
得无菌的种子 。 将无菌种子接种到基本培养基为 1/ 2MS 培养
基上培养 , 把获得的无菌苗子叶剪碎成块状 , 放到 MS 附加
不同浓度激素的培养基上进行培养 , 培养条件为每 日光照
12h
, 光照强度 2 00 0~3 00 0L x , 培养温度 15~2 6℃ 。
2 结果
2
.
1 无菌苗的获得
把经过灭菌的优 良植株种子 , 放到附加不同量的蔗糖 、
半量或全量的 MS 培养基上进行发芽培养 , 不同的培养荃对
小苗的长势有明显的影响 。 结果见表 1 。
衰 l 不同的培养落对种子发芽率及长势的形晌
培养基 } 接种致金 ! 发芽数 ! 发芽率 l
46302瓷招 30粥+G 1 5
长势
+ + 十
+ 十
23175650
/ ZMS招 30
/ 2路+G 15
注 : 科千长势最好 ; + 长势较好 ; + 长势一般 ; 一 长势不好
由表 1 可见 , 离子浓度不同的培养基对三角叶滨苹的发
芽率没有明显的影响 , 但对幼苗的长势却会产生一定的影响 ,
即离子浓度高 , 含糖童高的培养基对三角叶滨蔡小苗的生长
不利 。 这说明 1/ 2MS佑巧 是获得三角叶滨黎旺盛幼苗的理想
培养基 。
2
`
2 子叶愈伤组织的诱导
把在 韶佑 30 培养基上生长一个月的小苗子叶剪成 0 . 2 -
0
.
3伽 的小块 , 接种到附加不同浓度的 BA 、 I从 、 NA 、 2 ,
4刁的Ms 培养基上 , 有的会诱导出愈伤组织 。 结果见表 2 。
衰 2 不同徽 t 对子叶盆伤组双诱导的形响
激 素 接种块数 愈伤组织形成数 愈伤组织率 外观状况
0 c( k ) 0L 0 0
十
BA I+ I A 0
.
5 l0 0 0 十
BA I+ .2 4~ 0D
.
5 l0 l 9 4 7
.
5 十十
BA I斗NA O
.
5 压0 1 3 3 2 . 5 + +
BA I+ I BA0
.
5 l0 0 0 十
BZA 十1从 1 l0 0 0 +
BZA + 2, 4
一 0 1 l0 2 9 7 2
.
5
BZA
+ N再 Al 0L 2 4 6 0
B八3+ I AAI . 5 l0 0 O
BA3+ 2
,
4一 1. 5 l0 0 0
B人3斗NA I . 5 I0 3 1 7 7 . 5
B3A
+ I BA I
.
5 l0 2 1 6 2
.
5
注 : 培养 30 天统计数
由表 2 可见 , 无论细胞 分裂素 6书 A 的含量是 1 / L 、
2L/
, 还是 3 / L , 附加浓度为 0 . 5 / L 、 1/ L 和 1 . 5/ L 的 I从 和
工BA 都不能诱导子叶形成愈伤组织 , 而在 6一BA 与上述相同
的情况下 , 在附加 O , 5L/ 、 1L/ 和 1 . 5/ L 的 琳A 和 2 , 4-D
收稿 日期 : 20 03一 10一 12
作者简介 : 周晓丽 ( 1970 一 ) , 女 , 辽宁东港市 , 讲师 , 主要从事生物教学研究 。
DOI : 10. 14168 /j . i ssn. 1673 -4939. 2004. 01. 011
第 1期 周晓丽 刘广平 :三 角叶滨幕子叶愈伤组织诱导及分化的研究 2l
时 , 都可 以诱导形成愈伤组织 , 但 2 , 十D好于 琳 A。 诱导
的愈伤组织外观看 , 附加 NA 的培养基诱导的愈伤组织为灰
白色 , 质地较硬 , 一般认为这种愈伤组织不能分化 , 而由附
加 2 , 4一 的培养基诱导的愈伤组织较软 , 其中在附加 BA Z几 、
2
,
4刃 1L/ 的培养荃诱导的愈伤组织不仅数量多 , 而且质地
适中 , 呈淡黄色的报粒状 , 为具有分化能力的愈伤组织 。 这
说明 , 粥+B AZ / L+2 , -4 D I L/ 的培养基是诱导子叶分化的理想
培养基 。
2
.
3 愈伤组织的分化
把由 MS十BAZ / L+2 , 4一 1几 培养基培养出的愈伤组织 ,接
种到附加不同浓度的生长素和赤霉素的 MS +B A l 的培养墓诱
导愈伤组织分化 。 结果见表 3 。
表 3 不同培养落对愈伤组级分化的影晌
激素 {接种块数 I分化数 l 分化率 !平均分化芽数 / 块
肥沃的园土 , 上面铺若一层 5山 厚河沙的花盆或木箱中 , 一
个月后成活率为 6器 。 将成活长出了新叶 的移栽苗用不同浓
度的海水浇祖 . 结果见表 5 。
衰 4 不同培葬落对不定苗生根的形晌
0
IA O
.
2凡2A
I AA.O 2招A3
1月A.0 4招AZ
IA O
.
4招A3
I BAO
.
2干CAZ
I BA0
.
2斗《宝A3
I BOA
.
+4 CAZ
I BAO
,
4招A3
刊肋 .0 2招AZ
NA O
.
2 +( ;A3
NA O
.
4祀 AZ
N从0 . 4玲 A3
2
,
4一 ()D
.
2招 AZ
2
. 弓田0 . 2招人3
2
,
4一()D
.
4招 AZ
2
,
4 一X)I
.
4玲 A3
基 本 生长 t 接种致 生根 生很率 总生很效
培养基 NA I川论 , 4一 1队 株致 俘均生根数 /株)
岭 0 0 0 0 110 0 0 0姿 2 0 0 0 」l 0 l 1 O 2 (2 )
哪 3 0 0 0 1l 0 4 4 0 7 ( 1 . 7 5 )璐 0 2 0 0 1l 0 3 30 5 ( 1 . 7 0 )
出 0 3 0 0 】L0 2 20 2 ( 1)
盗 0 0 2 0 ]l0 0 0 0
盗 0 0 3 0 Jt0 0 0 0姿 0 0 0 2 ]l0 0 0 0姿 0 0 0 3 ]l0 0 0 0
1 / 2此 0 0 0 0 ]l0 0 0 0
1/ 2婚 2 0 0 0 ]l0 9 9 0 3 1 (3 . 4)
1/ 2日S 3 0 0 0 】l0 4 4 0 6 ( 1 . 5
1 2/ 峪 0 2 0 0 ]l0 8 8 0 2 9 (3 . 2)
1/ 2昭 0 3 0 0 ]l0 2 2 0 3 ( 1 . 5)
1/ 2出 0 0 2 0 1l0 0 0 0
1/ 2璐 0 0 3 0 1l0 0 0 0
l / ZMS 0 0 0 2 ]l0 0 0
1 / 2比 0 0 0 3 ]l0 0 0
衰 5 海水浇滋对植株成活和生长的影响
水的浓度 浇准数 成活数 成活率 (x) 长 势
试管苗 试管苗 试管苗 试管苗
(种于苗) 琳子苗 ) 伽子苗) (种子苗 )
自来水 (已困劝 10 ( 1 0) 10 ( 1 0) l 0() ( 1 0 0) + (什月海水 10 ( 10) O (0) 0 (0 ) + (+)
12/ 海水 +l 2/ 自来水 10 ( 10) 8 ( 7 ) 8 0 ( 7 0) 一+( 或 科 )
2 3/ 海水 +l / 3 自来水 10 ( 10) 1 (7) 10 (7 0)
由表 3 可见 , 在含有 2, 4 se D, NA , I BA 的培养基本上不论
自身的浓度为 .0 2 / L , 还是 .0 4 / L , 在与 GA 的浓度为 2 或 3
的情况下 , 愈伤组织都不分化 , 在培养基本中的 GA 浓度为
3/ L时 , 在含有 I从 为 0 . 2几 或 0 . 4L/ 时 , 也不能诱导愈伤
组织分化 , 只有 GA 浓度为 2几 时 , 才能在含有浓度为
0
.
2/ L 或 0 . 4/ L 的 I从 培养基上分化 , 且在 工从 浓度为
0
.
2 / L时的分化率最商达 9侃 , 分化芽为个 19 . 6/ 月 。 这说
明 sM +B Al/ L十 I从 0 . 2 L/ 十以 2L/ 的培养基是诱导愈伤组织分化
的理想培养基 。
2
.
4 不定苗的生根
当上述由愈伤组织诱导的分化苗长到 3 个或 3 个以上叶
片时 , 转到附加不同浓度的 NA 、 I从、 2 , 4 e D、 BI A 生长
素 , 含蔗籍 15 9 的 Ms 、 1 /翎 S 培养基上进行生根培养 , 结果
见表 4a
由表 4 可见 , 在不含生长素的招 、 12/ Ms 培养基上和含
有浓度分别为 2几 、 3/ L 的 BI A 和 2 , . 4 e D 的璐 与 12/ 溺 培
养基上 , 无根苗都不生根 。 在含有 NA 、 工从 的 MS 、 1/ 2MS
的培养基上 , 无根苗可 以生根长成完整的植株 。 并且 由
琳人2 L/ 和 I从 2 L/ 培养基的生根率高和生根数 / 株也较高 。
但是 , 观察表明 : 在含有 2 L/ 的 NA 培养基上 , 生根苗基部
先形成约 0 . s cm 的愈伤组织块 , 然后由愈伤组织上发出根 ,
这种根属于非正常无效根 。 而在含有 2/ LI 从 的 12/ 璐 上诱
导的根均较正常。 这说明 1 / ZMS十工从2 是三角叶滨苹的理想
生根培养基 。 在这种培养基上培养 , 生根苗其它性状及长势
良好 。
2
.
5 生根试管苗的移栽及浇灌
把具有 2 条以上 , 生长较旺盛的生根苗移栽到下面装着
注 : 料斗 为长势好 ; + 为长势较好 ; + 为长势一般 ; 一 为长势
很弱
由表 5 可见 , 用困过的自来水浇谁 , 种子苗和试管苗都可
以正常生长 , 而用海水浇灌不能成活 , 把淡化的海水用于浇
灌 , 在淡化 13/ 的情况下 , 试管苗很难成活 , 少数成活的植
株也非常度弱 , 几近死亡 , 而种子苗却有较高的成活率 , 有
的长势也较好。 把用淡化一半的海水用作浇灌 , 种子苗和试
管苗的成活率都较高 , 长势也较好 。 这说明三角叶滨攀的试
管苗虽然有一定的耐盐性 , 但其耐受性不如种子苗 。
3 讨论
国内现在未见三角叶滨蔡组织培养的报道 。 该植物组织
培养的成功 , 不仅可以便田间优 良植株得到保存 , 又为这一
栽培植物的深人研究和该植株的工厂化育苗奠定了基础 。 同
时 , 如果需要可以在短期内为生产提供大量的无性苗 。
三角叶滨幸在离子浓度高 、 含蔗糖多的培养基上都能正
常发芽 , 说明生存环境中的渗透压对种子和发芽没有明显的
影响 。 但从其种子苗在离于浓度低的培养基上长势旺盛上
看 , 说明三角叶滨蔡的幼苗细胞液渗透压并不太高 , 这样在
低浓度的培养墓上吸收较多的水分和营养 , 保证了芽发达 。
用海水浇灌不能成活和用淡化 13/ 海水浇灌的试管苗成
活率很低的结果说明 : 虽然三角叶滨蔡是一种耐盐植物 , 但
试管苗的耐盐性较差 , 这与在试管中长期培养 , 它的抗逆
性 、 适应性差有关 。 由种子苗和试管苗在用海水浇灌却不能
成活这一结果证明 : 三角叶滨葬在盐碱地上可以生长 , 是一
种长期胁迫的适应性状 , 若使这种性状真正地成为它们生存
的必要条件 , 还铭要经过长期的自然选择或人工选择 。 而该
植物优良植株组织培养的成功 , 又为这种植物耐盐性的人工
选择和大面积海滩的利用提供了可能 。
(下转第 17 页 )
0.5L09030O
Qó03ǐ1ù6“斑U八tJOnnùO0CùnóoōU八U
第 1期 白立拜 蔡 杰 : 哀 包机曲柄摇杆机构的 电葬设计
G灿从 2 , KA , KB , cK 分别代表本文公式中的 甲 l 、 甲: 、 叭、
如 、 ( a ) 、 p 、 r ` 、 r ~ 、 凡、 凡、 长源程序及图 2 见附录 。
3 实例计算
将本文所述解析法的计算程序应用于某搪果包机的送
糖 机构设 计 。 计算 结果 见表 1 , 已 知 甲=19 0 , 中邢 5 ,
中沂中二 7: , ( a ) = 500 。
4 结论
4
.
1 本文提出的方法是可行的 , 从程序的运行结果可知 ,
当角三定范围内取值时 , 可得满足裹包操作要求的多组解 ,
这给设计者优选各杆长带来很不方便 。
4
.
2 用解析法求解裹包机执行机构— 曲柄摇杆机构的各
杆长可以提高设计精度 , 简化设计过程 。
4
.
3 设计计算程序简洁 、 实用 、 通用性强 , 当裹包操作对
作曲柄摇杆机构的运动要求变化时 , 只要改变杆长关系式
的有关参敬 , 程序作相应改动 , 即可求解 。
衰 l 设计摘 .
单位 : 画
p
a
! b
C d
图解法 20 1 69 166 180
解析法 4 3 . 2. 15 .印 260 . 9 189 . 87 180
6 1
.
1
0
16
.
32 24 6
.
98 188
.
9 1 1 80
5 1
.
8
0
17
.
59 2 17
.
17 18 7
.
02 1 80
54
.
7
。
18
.
13 20 1
.
45 18仗 1 1 1 80
57
,
6o 1.8 62 185
.
2 4 185
.
3 2 18 90
参考文献 :
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C o m P u et r D e s ign of P
a c k a ig n g E x
e c u it o n M ec h助 isI n -l 一C n 叨kI a n d R o改e r M e比a山 sm
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(及尸.t of oC 呷晓 r L`因威〕咭 加 `如 . , 及哪面咭 1 召伏万 , 口访协 )
A加 tr a ct : Th e P a p r e s e t UP s om e r e l a t i o n f o口a u t e s o f e ac h po l e ’ 5 t e n g t h o f P a e k a g i n g e x e e u t i on
me e han i s一 e r an k an d r o e k er dm e h an i胡 汕 i e h m e e t t h e e on d i t i on s g i v en an d a l s o o f cf r e e d t h e gT aP t h o f
p r o g r吻 a n d t h e 叮o gr 叨 o f e x e e l e n t d e s i gn an d e a e u l a t i o n .
K e y wo
r d s : p ac k a g i n g me e h i n e ; e x e e u t i on m e e h a n i s m ; e r an k an d r co k e r dm e h叨 i s m ; e o . Pu t e r e o . p u t i n g d e s i g n
(上接第 21 页 )
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of T 七名 u e C ul t u r e F r o m C o yt l e d o n of A衍 P l ex T d an gul a isr
ZHOU Xi
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( L L翻” do gn lan :众晓 , D皿而 gn 118 0 5 , ch 她 ; .2 L油成咭 R e s 。。 h 加谊 . of cE 。
~
凡花 st , 刀以`皿 11次刀 8 , ch 汕 )
A加 tr a d : Gen e r a l . e d i um s ar e 粥 an d l / 2犯 , a dd i n g t 贾0 k i n d s o f 叫an t i t y G15 g L/ an d 3G 0g L/ . fA t e r an t i d o t i n g
t h e s e e d s o f A t r i P l e x t r i an 幼 l ar i s ar o u s e d a s e x p l an t s , hT e i d e a l m e d i um fo r tA r i P l e x t r i an gU l ar i s h e a l t h y
g r o w t h 1 5 1 / ZMS份 159 / L ; t h e n b a s e d o n t h a t e o n d i t i on d i f f e r e n t h o h no n e e o n e e n t ar t i on o f BA 、 I BA 、 NA 、 助d Z ,
4一D a r e a dd e d t o t h e MS m e d i恤 hT e m e d i皿 t h a t s u i t fo r t h e i n du e t i on o f A t r i p l e x t r i an , l ar i s , 5 e o t 丫l e don
1 5 裕+B 2A / L+ 2 , 4一Dl / L . hT e ca l l u s 份 er e t r an s f e r r e d t o t h e m e d i um f o r d i f f e r e n t i a t i on , t h e i d e a l m e d i伽 1 5
裕+ BA I /+L 工M GA .2
K e y w o r ds
: a t r i P l e x t r i an 即l ar i s ; e o t y l e d on : e a l l u s ; d i f f e r e n t i a t i o n ; a s e xu a l s y s t e mr