全 文 :有量效关系。表明扶正胶囊各剂量具有增强小鼠 NK细胞活性
的作用。结果见表 2。
表 2 各组小鼠单核-巨噬细胞碳廓清和 NK细胞活性的检测结果
x±s
组别 小鼠 /只
剂量 /
(g· kg-1)
吞噬指数
(α)
NK细胞活性 /
%
高剂量药物组 10 1 320 6.56±1.89*1 30.2±10.8*1
中剂量药物组 10 660 5.89±1.23*1 15.2±6.5*1
低剂量药物组 10 330 4.25±1.05 12.5±5.2*2
阳性对照组 10 0.3 5.56±1.52*1 24.5±12.5*1
阴性对照组 10 - 3.89±0.95 8.2±3.5
与阴性对照组比较 , *1P<0.01, *2P<0.05
4 讨论
机体的免疫功能通常由 T细胞介导的细胞免疫 、B细胞介
导的体液免疫以及 NK细胞 、单核-巨噬细胞及补体参与的非特
异性免疫反应组成。西洋参中含有多种总皂苷 , 能促进淋巴细
胞增生 、增强 NK细胞自然杀伤活性及抗肿瘤作用 、促进 B细胞
抗体生成水平 , 具有增强免疫功能 [ 3] 。枸杞子能促进小鼠 IgG、
IgA及 IgM等抗体含量 、抗体生成细胞数和抗体效价 [ 4] ,枸杞子
多糖适量给予小鼠 , 具有显著提高绵羊红细胞免疫后脾溶血空
斑数量的效应 [ 5] , 枸杞多糖能提高小鼠吞噬细胞的吞噬功能和
血清溶菌酶活性 , 增加小鼠脾淋巴细胞数和 LAK细胞活性 , 提
高实验动物和正常人淋巴细胞转化率。 老年人服用枸杞多糖
或枸杞子均可增强其细胞免疫和体液免疫。 黄芪富含黄芪皂
苷 、黄芪多糖 、异黄酮类化合物及硒元素 , 富含 21种氨基酸 , 参
与机体的多种代谢 , 具有广泛的药理价值 [ 6 , 7] ,黄芪能增加小鼠
网状内皮系统的吞噬功能 , 使其吞噬指数明显提高 , 能显著增
强肿瘤浸润淋巴细胞的体外杀伤活性 , 黄芪与人参皂苷合用对
淋巴细胞具有协同正向调节作用 [ 8] 。黄精能促进正常小鼠脾
细胞产生白细胞介素(IL)-2, 增强自然杀伤和细胞毒 T淋巴细
胞和活性 ,增强免疫功能 [ 9] 。
扶正胶囊能增加小鼠迟发型变态反应 , 可增强 ConA诱导
的小鼠脾淋巴细胞转化增殖能力 , 有增强细胞免疫功能作用;
提高小鼠的抗体生成细胞数 , 有增强体液免疫功能作用;有增
强小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能及增强小鼠 NK细胞活性的作
用。表明扶正胶囊具有增强小鼠细胞和体液免疫功能及非特
异性的作用。
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白花银背藤不同提取部位止血作用研究
陈海丰 1, 2 ,姜 燕 3 ,梁少妹 2 ,黄进强 2 ,李浩烜 2
(1.云南中医学院 ,昆明 650200;2.广州中医药大学 , 510006;3.新疆维吾尔自治区喀什地区第二人民医院 ,
844000)
[摘 要 ] 目的 研究白花银背藤 [ Argyreiaseguini(Lévl.)VaniotexLévl.]不同提取部位的止血药理作用。方法
依次以石油醚 、醋酸乙酯 、正丁醇和水为溶剂进行提取 ,采用毛细玻管法 、玻片法和剪尾法检测其止血作用。结果 白
花银背藤石油醚和水提物对小鼠凝血时间和出血时间无显著作用 ,与 0.9%氯化钠溶液比较 ,差异无显著性(P>0.05);
白花银背藤醋酸乙酯与正丁醇显著缩短小鼠凝血和出血时间 ,作用与云南白药和止血芳酸相仿 ,与 0.9%氯化钠溶液比
较 , 差异有极显著性或显著性(P<0.01或 P<0.05)。结论 白花银背藤的醋酸乙酯与正丁醇提取物均能在一定程度
上影响小鼠的出血与凝血时间。
[关键词 ] 白花银背藤;止血;药理作用;提取部位
[中图分类号 ] R914.4;R286 [文献标识码 ] A [文章编号 ] 1004-0781(2008)10-1186-02
白花银背藤为民间草药 , 《广西中药材标准》(第 2册)中收
[收稿日期 ] 2008-02-05
[作者简介 ] 陈海丰(1978-),男 ,江苏人 ,云南中医学院教师 ,广
州中医药大学博士研究生 , 研究方向为中药分析技术。 电话:(0)
13751747846, E-mail:chenhaifeng0701@sina.com。
载的白花银背藤来源于旋花科植物白花银背藤 Argyreiaseguinii
(Lévl.)VaniotexLévl.的干燥根和茎。白花银背藤性温 , 味微
涩 ,具有补气血 , 止咳 , 驳骨 , 止血生肌的功效 , 用于内伤出血 ,
贫血头昏 ,咳嗽 , 骨折等病症。 白花银背藤又名山牡丹 、葛藤 、
跌打王 、藤续断 、旋花藤 、白背藤等 , 在《云南中草药 》《广西药用
·1186· HeraldofMedicineVol.27 No.10October2008
植物名录》《中药大辞典》等中均有记载 ,主产于广西 、云南 [ 1] 。
白花银背藤作为一种民间的止血药 , 因功效确切 , 临床疗
效可靠 , 故市场应用前景广阔。目前白花银背藤的研究文献极
少见报道 , 有关该药材的药理等方面的现代研究也几近空白。
经过前期药效学实验研究 ,证明白花银背藤具有止血的药理作
用 , 这与其临床使用相一致。为进一步探寻其活性部位 , 根据
其所含成分的极性大小来筛选有效部位。采用系统提取法提
取 , 再进一步进行药效学研究。
1 实验材料
1.1 药品 云南白药(云南白药集团股份有限公司 , 批号:
20050902);安络血(肾上腺色腙片 , 江苏亚邦爱普森药业有限
公司 , 批号:0504035);氨甲苯酸(止血芳酸 , 徐州莱恩药业有限
公司 , 批号:0501221);白花银背藤由广西神通药业有限公司提
供并鉴定。
1.2 动物 NIH种小白鼠 140只 , 体重(20±2)g,雌雄各半 , 由
广东省医学实验动物中心提供。
1.3 器材 毛细玻管(内径 1 mm)、秒表 、滤纸 、载玻片 、大头
针 、眼科弯镊。
1.4 试剂 石油醚 、醋酸乙酯 、正丁醇(A.R.广州化学试剂厂
生产),吐温-80(天津市大茂化学试剂厂)。
1.5 药物制备 取白花银背藤 100 g, 加入 5倍量的石油醚
(60 ~ 90℃), 回流提取 ,煮沸 1.5 h, 提取 2次。合并提取液 , 回
收石油醚 , 挥干提取物中残留石油醚 , 加入适量吐温-80,待提取
物溶解 , 加水配制成 100 mL溶液 , 使 1 mL药液相当于原药材
1 g中所含该类成分 ,备用。
将石油醚提取后的白花银背藤 100 g,加入 5倍量的醋酸乙
酯 , 加热回流提取 ,煮沸 1.5 h, 提取 2次。合并提取液 , 回收醋
酸乙酯 , 挥干提取物中残留醋酸乙酯 , 加入适量吐温-80,待提取
物溶解 , 加水配制成溶液 100 mL, 使药液 1 mL相当于原药材
1 g中所含该类成分 ,备用。
将醋酸乙酯提取后的白花银背藤 100 g,加入 5倍量的正丁
醇 , 加热回流提取 ,煮沸 1.5 h, 提取 2次。合并提取液 , 回收正
丁醇 , 挥干提取物中残留正丁醇 , 加入适量吐温-80, 待提取物溶
解 , 加水配制成溶液 100mL, 使药液 1 mL相当于原药材 1 g中
所含该类成分 , 备用。
将正丁醇提取后的白花银背藤 100 g,加入 5倍量的水 ,加热
回流提取 ,煮沸 1.5 h, 提取 2次, 合并提取液 , 过滤浓缩至药液
100 mL,使药液 1mL相当于原药材 1 g中所含该类成分 ,备用。
2 方法与结果
2.1 对凝血时间的影响 参考文献 [ 2] 。取小鼠 70只 , 雌雄
各半 , 称重 、标记 , 随机分为 7组 , 分组情况和给药剂量见表 1。
NS组给予等体积 0.9%氯化钠溶液 , 其他各组给予相应的药
物。灌胃给药 , qd,连续 7 d。末次给药 30 min后 ,按如下方法
进行。毛细玻管法:用毛细玻管插入小鼠内眦眼球后静脉丛取
血 , 以达 5cm血柱为止。每隔 30 s折断毛细玻管一小截 , 检查
有无血凝丝出现;记录从毛细玻管采血到出现血凝丝的时间 ,
此即为凝血时间。 玻片法:用眼科弯镊迅速摘取一侧眼球 , 即
有血液流出;于载玻片两端各滴一滴血 , 血滴直径约为 5mm, 立
即用秒表计时;每隔 30s用清洁大头针自血滴边缘向里轻轻挑
动一次 ,并观察有无血丝挑起;从采血开始至挑起血丝止 , 所历
时间即为凝血时间;另一滴血供最后复验。 记录凝血时间 , 作
均数显著性测验。结果见表 1。
表 1 各组小鼠凝血时间的比较 x±s
组别 小鼠 /只
给药剂量 /
(g· kg-1)
凝血时间 /min
毛细玻管法 玻片法
氨甲苯酸组 10 0.065 1.55±0.80*1 1.14±0.82*1
石油醚组 10 5.2(按原药材比) 3.42±1.10 3.08±1.19
醋酸乙酯组 10 5.2(按原药材比) 2.20±1.07*1 1.85±1.28*2
正丁醇组 10 5.2(按原药材比) 2.60±1.06*2 2.8±1.03
水提物组 10 5.2(按原药材比) 2.95±0.81 2.95±1.05
白药组 10 0.26 2.10±0.63*1 1.65±0.52*1
NS组 10 - 3.70±1.08 3.40±1.18
与 NS组比较 , *1P<0.01, *2P<0.05
2.2 对出血时间的影响(剪尾法) 参考文献 [ 3] 。取正常体
重(20±2)g小鼠 70只 , 雌雄各半 ,称重 、标记 , 随机分为 7组 ,
分组情况和给药剂量见表 2。 NS组给予等体积 0.9%氯化钠溶
液 ,其他各组给予相应的药物。灌胃给药 , qd,连续7 d。末次给
药 30 min后 , 将小鼠驱入固定器中 ,露鼠尾于外 ,用剪刀剪去尾
尖约 3mm, 待血液自行溢出。每隔 30 s用滤纸轻轻吸取血滴 ,
以人工形成创面到出血停止所经时间为出血时间。记录出血
时间 ,作均数显著性测验。同时测量滤纸的血迹面积 , 作为出
血量 ,作均数显著性测验。结果见表 2。
表 2 各组小鼠出血时间和出血量的检测结果(剪尾法) x±s
组别 小鼠 /只
给药剂量 /
(g· kg-1)
出血时间 /
min
出血量 /
(mm2)
氨甲苯酸组 10 0.065 2.82±0.80*1 11.89±5.15*1
石油醚组 10 5.2(按原药材比) 4.71±0.95 21.79±4.99
醋酸乙酯组 10 5.2(按原药材比) 3.60±0.67*2 16.49±4.30
正丁醇组 10 5.2(按原药材比) 3.80±0.71*2 18.28±3.83*1
水提物组 10 5.2(按原药材比) 4.55±0.84*1 20.40±5.19
白药组 10 0.26 3.75±0.75*1 15.24±4.44*1
NS组 10 - 5.55±0.88 24.35±6.68
与 NS组比较 , *1P<0.01, *2P<0.05
3 讨论
本实验对白花银背藤进行系统提取 , 对不同提取物做了止
血药理学实验探索。结果显示 , 白花银背藤的醋酸乙酯提取部
分与正丁醇提取部分均能在一定程度上影响小鼠的出血与凝
血时间。其中醋酸乙酯提物对小鼠的出血时间影响较大。但
二者止血效果均不及阳性对照组 , 特别是与安络血及止血芳酸
对照 ,效果较差。而石油醚与水提部分则无显著止血作用。考
虑到其确有止血之功效 , 故认为应进一步深入研究 , 筛选出具
体活性成分 ,最终探究其止血机制。
[参考文献 ]
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·1187·医药导报 2008年 10月第 27卷第 10期