全 文 ：866· · 中国医药工业杂志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 2007, 38(12)
胭脂花(又名段报春、胭脂报春)为报春花科报
春花属植物胭脂花Primula maximowiczii Regel的全
草，生于亚高山草甸上或山地林下、林缘及潮湿腐
殖质丰富的地方。在我国分布于东北、内蒙古、河
北、山西、陕西、甘肃、青海等地。胭脂花全草
(蒙药名：萨都克纳克福)能止痛、祛风，主治癫
痫、头痛等症[1,2]。在文献[1,2]中只有对其来源、性
状、采收加工、功能主治、用法用量的描述。有关
胭脂花化学成分和质量标准的研究，国内外尚未见
报道，笔者首次在对其化学成分的研究中发现，胭
脂花中樱草苷(primeverin，1)的含量较高，为此建
立了HPLC法，以自行提供的1作为对照品测定胭脂
花中1的含量，可为胭脂花的质量控制和评价提供
胭脂花中樱草苷的HPLC测定
曲功霖1,2，杜树山2*，孔德云1
(1. 上海医药工业研究院，上海 200040；2. 北京师范大学资源学院教育部资源药物工程研究中心，北京 100875)
摘要：建立了HPLC法测定胭脂花中樱草苷的含量。采用Diamonsil TM C18柱，流动相为甲醇- 0.025mol/L磷酸溶液(40∶
60)，检测波长254nm。樱草苷进样量在10～200ng范围内线性关系良好，平均回收率98.8％，RSD 0.37％。
关键词：胭脂花；樱草苷；高效液相色谱；测定
中图分类号：TQ460.7+2；O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：1001-8255(2007)12-0866-02
收稿日期：2007-08-23
作者简介：曲功霖(1978)，男，博士研究生，专业方向：天然药物
化学。
通讯联系人：杜树山(1970)，男，副教授，从事中药活性成分研
究、中药质量控制以及中药新药的研发。
Tel：010-62205268
E-mail：dushushan@ires.cn
Determination of Primeverin in Primula maximowiczii Regel by HPLC
QU Gong-lin1,2, DU Shu-shan2*, KONG De-yun1
(1. Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry, Shanghai 200040;
2. College of Resources Science & Technology, Beijing Normal University, Beijing 100875)
ABSTRACT: A HPLC method was established for the determination of primeverin in Primula maximowiczii Regel.
A Diamonsil C18 column was used, with methanol-0.025mol/L phosphoric acid(40∶60) as the mobile phase, at the
detection wavelength of 254nm. The calibration curve of primeverin was linear in the range of 10 - 200 ng. The average
recovery was 98.8％, with RSD of 0.37％.
Key Words: Primula maximowiczii Regel; primeverin; HPLC; determination
参考。
1 仪器与试药
HP-1100系列高效液相色谱仪(Agilent公司)。
1(纯度98％，自制，通过多种色谱方法自胭脂花全草
乙醇提取物中分离得到，1D及2D-NMR数据经与文献[3]比
较，鉴定为樱草苷。制备及结构解析过程将另文发表)；胭
脂花药材(分别于2005年6月和2007年6月采自河北省张家
口地区，经中国药品生物制品检定所戴忠博士鉴定为报春
花科报春花属植物胭脂花Primula maximowiczii Regel的全
草)。甲醇为色谱纯，磷酸及其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱 Diamonsil TM C18柱(4.6mm×250mm，
5µm)；流动相 甲醇-0.025mol/L磷酸水溶液(40∶
60)；流速 1ml/min；检测波长 254nm；进样量
5µl。
上述色谱条件下，1与相邻峰分离度大于1.5，
理论板数按1计不低于2500。典型色谱图见图1。
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1
1
A B
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
mAU
0
25
50
75
100
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
mAU
0
1
2
3
4

t/min t/min
1-1
图1 对照品(A)和供试品(B)色谱图
2.2 溶液制备
对照品溶液：精密称取经五氧化二磷减压干燥
12h的1 5mg，置100ml量瓶中，甲醇溶解并定容，
作为对照品贮备液。精密吸取2ml置10ml量瓶中，
用甲醇定容，得10µg/ml对照品溶液，冷藏保存。
供试品溶液：精密称取胭脂花干燥细粉5g，加
甲醇50ml，超声30min，过滤，滤渣加甲醇50ml超
声30min，合并滤液，减压浓缩至干，加甲醇定容
至50ml，冷藏保存。
2.3 线性试验
分别精密吸取对照品溶液1、5、10、15、
20µl进样，记录色谱图，以1进样量Q为横坐标，
峰面积A为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为
A=370.7Q + 0.3204，r=0.9999。结果表明1在10～
200ng范围内线性关系良好。
2.4 精密度、重复性与稳定性试验
精密吸取供试品溶液适量，分别测定5次，结
果得1峰面积的RSD为1.58％。
精密称取胭脂花干燥细粉适量，共5份，分别
按“2.2”项下方法制得供试品溶液，进样测定，
结果得1峰面积的RSD为1.69％。
精密吸取同一供试品溶液，分别于配置后0、
2、4、8和12h进样测定，结果得1峰面积的RSD为
2.04％，表明供试品溶液在12h内基本稳定。
2.5 加样回收率试验
精密称取已知1含量的胭脂花干燥细粉，共6
份，分别精密加入对照品溶液1.6、2、2.4µl，各2
份，按“2.2”项下方法制得供试品溶液，进样测
定，计算得平均回收率为98.8％，RSD为0.37％。
2.6 样品测定
分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，进样
测定，计算得2批胭脂花中1的含量分别为0.0213％
(2005年6月采集)和0.0203％(2007年6月采集)。
对2005年6月采集的胭脂花药材进行稳定性考
察，结果历时12、18和24月，胭脂花中1的含量分
别为0.0201％、0.0208％和0.0205％，表明含量稳
定，可作为胭脂花药材的质量评价标准。
3 讨论
3.1 提取方法的选择
预试验时分别用甲醇、乙醇对胭脂花药材进行
了超声和回流提取，考察不同溶剂和提取方法对胭
脂花中1含量的影响。结果表明超声法甲醇提取物
中1的含量高于乙醇，且干扰成分较少。后又考察
了甲醇超声提取时间和次数，结果表明提取两次，
每次超声30min，胭脂花中1基本提取完全。
3.2 流动相选择
考察了多种流动相系统，如甲醇 -磷酸水溶
液、甲醇-水、乙腈-水、甲醇-水-冰乙酸、乙腈-水
-冰乙酸等，结果表明，甲醇-0.025mol/L磷酸溶液
(40∶60)为流动相时，1出峰时间为8～10min，与
相邻峰分离完全。采用不同型号的C18色谱柱进行
试验，均能获得良好的重现性。
参考文献：
[1] 《中华本草》编委会. 中华本草[M]. 第16卷, 上海：上海
科技出版社, 1999: 120.
[2] 马毓泉. 内蒙古植物志[M]. 第5卷, 呼和浩特：内蒙古出
版社, 1980: 20.
[3] Müller A, Ganzera M, Stuppner H. Analysis of phenolic
glycosides and saponins in Primula elatior and Primula
veris(primula root) by liquid chromatography, evaporative
light scattering detection and mass spectrometry[J]. J
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